目的:探讨N-乙酰半乳糖氨基转移酶7(GALNT7)对前列腺癌细胞迁移、侵袭和增殖的作用及分子机制。方法:选取2019年1月至2022年1月在天津市第五中心医院和延边大学附属医院泌尿外科行前列腺手术的30例前列腺癌患者的癌组织为研究对象，采用免疫组织化学染色、蛋白质免疫印迹(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测前列腺癌组织GALNT7的表达水平。通过细胞计数试剂盒(CCK-8)法、5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)掺入实验、划痕实验检测细胞迁移、侵袭和增殖能力；采用VVA凝集素pull-down实验和Western blot检测GALNT7对表皮生长因子受体(EGFR)磷酸化、O-GlcNAc糖基化修饰的影响，及EGFR/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的表达水平。组间差异采用配对 t检验或方差分析(ANOVA)。 结果:前列腺癌组织中GALNT7蛋白和RNA表达水平(7.86±1.64、9.49±2.34)明显高于癌旁组织(0.98±0.25、0.99±0.33)，差异有统计学意义( t＝13.080、11.390， P<0.05)。CCK-8法检测结果显示Ad-GALNT7组细胞增殖能力显著高于Ad-GFP组(1.14±0.35比0.76±0.19， t＝8.287， P<0.05)。Ad-GALNT7组BrdU阳性比例明显高于Ad-GFP组(42.36±5.19比14.68±3.12， t＝6.091， P<0.05)。划痕实验证明Ad-GALNT7组前列腺癌细胞的迁移侵袭能力明显高于Ad-GFP组(84.80±3.96比58.34±2.19， t＝11.860， P<0.05)。Western blot结果显示，si-GALNT7组EGFR磷酸化显著低于si-GFP组(1.03±0.26比2.68±0.57， t＝3.693， P<0.05)。VVA凝集素pull-down实验，发现si-GALNT7组EGFR O-GlcNAc糖基化修饰水平显著低于si-GFP组(0.55±0.13比1.00±0.27， t＝4.570， P<0.05)。 结论:GALNT7在前列腺癌中表达显著增加，并通过O-GlcNAc糖基化修饰EGFR，激活EGFR/PI3K/Akt信号通路，促进前列腺癌细胞的迁移、侵袭和增殖。

目的:探讨A307亚型的血清学特征和分子机制。方法:采用标准血型血清学方法鉴定先证者及其家系成员ABO血型，应用聚合酶链反应-序列特异性引物检测ABO血型、 ABO基因第1到第7外显子直接测序分析及构建3D分子模型，就变异对α-1，3-N-乙酰半乳糖胺基转移酶(α-1，3-N-Acetylgalactosaminyltransferase，GTA)稳定性改变ΔΔG的影响进行预测。 结果:先证者及其弟弟、女儿血清学表现为Aend表型， ABO基因型均为A307/O02。 ABO基因第7外显子c.467C>T和c.745C>T变异，导致GTA的氨基酸发生p.P156L和p.R249W氨基酸替换。分子建模与分析提示p.R249W变异改变了蛋白局部氨基酸间的氢键数目，从而改变氨基酸间的作用力，而热动力学改变ΔΔG值降低表明蛋白质稳定性下降。 结论:该例A307亚型表现出Aend亚型的血清学特征，p.R249W变异可能降低GTA结构稳定性导致A307亚型的形成。

目的:研究1例ABO血型A亚型B先证者的分子遗传学背景，探讨氨基酸变异影响糖基转移酶(GT)活性的分子机制。方法:选取2020年7月2日于郑州大学第一附属医院就诊的1例先证者作为研究对象。采用卡式法和试管法对先证者及其家系成员进行ABO血型的血清学鉴定。采用PCR-序列特异性引物扩增(PCR-SSP)及 ABO基因扩增技术对先证者的 ABO基因进行血型分子生物学鉴定。构建3D分子同源模型，对α-(1→3)-D-N-乙酰半乳糖胺基转移酶(GTA)的稳定性进行预测。 结果:先证者及其部分亲属(母亲和2个弟弟)红细胞与抗-A呈现弱凝集，与抗-B呈现强凝集，血清与Ac凝集达1～2＋，与Bc不凝集，血清学定为AwB亚型，家系分析提示其异常基因遗传自母亲。PCR-SSP检测结果显示先证者为A223B型， ABO基因测序分析显示其存在c.297A>G、c.467C>T、c.526C>G、c.657C>T、c.703G>A、c.796C>A、c.803G>C、c.930G>A杂合变异和c.1055insA插入变异，推测其基因型为 ABO* A223/ ABO* B.01，与 ABO* A1.01相比存在c.467C>T和c.1055insA变异，与 ABO* A1.02相比存在c.1055insA变异。同源建模结果显示A223型GT的C末端明显延长，且局部氨基酸及氢键网络均有改变。 结论:上述研究结果揭示了A223B亚型的分子遗传学机制，先证者存在的c.1055insA变异可能影响了GT的酶活性，最终导致A抗原减弱。

目的:检测miR-4698在肝癌组织及细胞系中的相对表达，分析其对肝癌细胞增殖和迁移的影响及分子作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测肝癌组织和肝癌细胞系中miR-4698的相对表达。在表达最低的肝癌细胞系中，采用脂质体转染法分别转染miR-4698模拟物和对照模拟物，命名为实验组和对照组。qRT-PCR检测转染效率。细胞计数试剂盒(CCK-8)和Transwell迁移实验分别检测过表达miR-4698对肝癌细胞增殖和迁移能力的影响。采用生物信息学和双荧光素酶报告基因实验预测并验证miR-4698与靶基因的结合。qRT-PCR和Western blot分别检测靶基因在mRNA水平和蛋白水平的相对表达。结果:与癌旁组织相比，miR-4698在肝癌组织的表达明显降低( P<0.01)。与正常肝细胞系相比，miR-4698在肝癌细胞系的表达明显降低( P<0.05)，在Huh7细胞的表达最低( P<0.01)。转染后，与对照组相比，实验组Huh7细胞中miR-4698的表达明显增加( P<0.01)。过表达miR-4698可抑制肝癌Huh7细胞的增殖能力( P<0.05)和迁移能力( P<0.05)。生物信息学显示miR-4698的靶基因是多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶4(GALNT4)，双荧光素酶报告基因证实miR-4698可互补结合GALNT4( P<0.01)。qRT-PCR结果显示，过表达miR-4698可抑制GALNT4基因的表达( P<0.01)。Western blot实验显示，miR-4698过表达后，Huh7细胞中GALNT4蛋白表达降低，细胞增殖相关蛋白Cyclin B和CDK1表达降低，细胞转移相关蛋白N-cadherin和ZEB-2表达降低。 结论:miR-4698在肝癌组织和细胞系中表达明显下降，过表达miR-4698可通过抑制GALNT4基因的表达，降低肝癌Huh7细胞的增殖和迁移能力。

目的:分析2例罕见血清学放散型Ael亚型的基因测序结果。方法:选取2019年6月和2020年9月分别因"子宫腺肌瘤"和"胃炎"就诊的2例女性患者作为研究对象。采用常规盐水试管凝集法和吸收放散试验鉴定Ael亚型，用Sanger法对 ABO基因进行测序，用PyMOL软件构建蛋白预测结构模型，预测变异对于α-1，3-N-乙酰半乳糖氨基转移酶(GTA)结构稳定性的影响。 结果:2例患者血清学检测均为Ael亚型。例1测序结果为 ABO* O.01.02/ ABO* O.01.02，即存在p.Thr88Profs*31变异。例2测序结果为 ABO* Ael.06/ ABO* O.01.02，发现第7外显子存在c.425C>T(p.Met142Thr)、c.467C>T(p.Pro156Leu)变异，蛋白预测模型提示p.Met142Thr替换可能影响GTA蛋白与水分子的结合，同时改变GTA局部的氢键网络，导致酶活性下降，p.Pro156Leu替换对GTA的结构稳定性无明显影响。 结论:Ael亚型分子结构可能存在多样性的特点。例1基因型为261G缺失的 O02/ O02，例2基因型为 Ael 06/ O02。

目的:探讨N-乙酰氨基半乳糖转移酶6(GALNT6)对人乳腺癌细胞MCF-7增殖和迁移的影响.方法:靶向针对GALNT6的shRNA质粒转染乳腺癌细胞MCF-7,通过CCK8实验、平板克隆实验、细胞周期实验和划痕实验,观察GALNT6干扰后对乳腺癌细胞增殖、迁移等生物学功能的影响;利用Western blot法检测增殖和迁移相关蛋白因子PCNA、cyclinD1和MUC1的蛋白水平变化.结果:成功构建稳定转染的低表细胞株,通过实验发现下调GALNT6的表达能显著抑制乳腺癌细胞MCF-7的增殖和迁移能力,同时PCNA、cyclinD1和MUC1的蛋白表达均下降.结论:GALNT6抑制乳腺癌细胞MCF-7的增殖和迁移,为乳腺癌提供潜在的治疗靶点.

目的:以一个血型Ax亚型家系为研究对象,探讨我国人群血型中产生Ax亚型的潜在分子机制.方法:采用血清学方法鉴定该家系成员的ABO血型,测定血浆α-1,3-N-乙酰半乳糖胺基转移酶活性,行DNA直接测序和克隆后测序分析ABO基因序列,并构建3D分子模型,就发现的突变对α-1,3-N-乙酰半乳糖胺基转移酶稳定性改变(△△G)的影响进行预测.结果:血清学鉴定和DNA测序分析显示,先证者的血型为AxB亚型,其2个女儿分别为A型和AB型,其ABO基因型分别为AW.38/B.01、A1.02B.01、A1.02/AW.38.先证者和其A型女儿的第7外显子均存在c.426G＞C杂合突变,导致α-1,3-N-乙酰半乳糖胺基转移酶的氨基酸发生p.M142I改变.分子模建分析提示,该基因突变改变了蛋白局部氨基酸间氢键的数目,从而导致氨基酸间作用力发生改变,而动力学改变,△AG值升高表明其蛋白稳定性降低.结论:α-1,3-N-乙酰半乳糖胺基转移酶p.M 142I突变可能通过降低了酶的稳定性导致Ax表现型,而其深入机制有待体外实验进一步研究.

目的 研究ABO血型新等位基因Ax28的分子机制.方法 应用单克隆抗体检测样本的红细胞ABO血型抗原,标准A、B、O红细胞检测血清中ABO抗体.PCR技术扩增ABO基因7个外显子及其邻近内含子序列后测序,对第5～7外显子扩增产物进行克隆后测序.结果 先证者红细胞有弱A抗原,同时血清中存在抗A和抗B抗体.直接测序分析发现第6外显子第261位杂合缺失,第7外显子在467C>T、830T>C杂合突变.克隆测序得到两个等位基因O01和Ax28.与A102序列相比,Ax28第830位T>C突变,导致第277位缬氨酸变成丙氨酸.结论 N乙酰氨基半乳糖基转移酶基因第830位T>C突变可能引起酶活性减弱,进而导致产生Ax28变异型.

目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-129通过N-乙酰氨基半乳糖基转移酶1(GALNT1)/转化生长因子-β1 (TGF-β1)信号转导通路影响慢传输型便秘(STC)发生的机制.方法 共纳入46例患者28例为重度结肠STC患者,18例为非STC患者).采用免疫组织化学技术检测结肠组织中Cajal间质细胞(ICC)的形态及数量,Western blot检测结肠组织中GALNT1/TGF-β1信号通路的表达/活化水平.结果 免疫组织化学结果显示,STC病变结肠各个区域c-Kit标记的ICC细胞数较对照组显著减少(22.17±3.28比28.69±3.53,P＜0.05),并且分布异常.同时Westernblot结果显示STC组c-Kit蛋白、Smad6/7较正常组显著下降(c-Kit:0.462±0.099比0.783±0.178,P＜0.01);(Smad6/7:0.626±0.058,比0.799±0.035,P＜0.01);TGF-β1在两组差异无统计学意义(0.476±0.028比0.511±0.044,P＞0.05).结论 STC病变结肠中ICC细胞可能发生细胞转分化,从而使病变结肠中ICC分布和功能异常.其分子机制明显是miR-129负调控GALNT1/TGF-β1信号转导通路,并与Smad6/7抑制作用下降相关.

目的 对1例罕见Ax亚型的个体进行分子遗传学分析,探讨α-1,3-N-乙酰半乳糖胺转移酶基因突变对A抗原表达的影响.方法 采用聚合酶链反应扩增血型血清学鉴定为Ax血型的样本ABO基因第6、7外显子序列,对PCR产物直接进行测序,发现杂合序列后进一步采用单倍体特异性引物进行序列测定.结果 先证者红细胞含有弱A抗原,同时血清中含有抗-A和抗-B.直接测序分析发现ABO基因序列的261delG和389 C/T杂合.单倍型序列分析得到两个等位基因Ax22和O01.Ax22基因序列与A101基因比对在第389位碱基为T＞C突变,导致多肽链发生L130P氨基酸替换.结论 α-1,3半乳糖基转移酶基因389T＞C突变导致A抗原表达减弱.