无POU结构域八聚体核苷酸结合蛋白(non-POU domain-containing octamer-binding protein,NONO),又称为p54nrb,属于高度保守的果蝇行为/人类剪接(drosophila behaviour/human splicing,DBHS)蛋白家族[1].

目的:探讨1例先天性心脏病(CHD)伴全面发育迟缓(GDD)患儿的遗传学病因。方法:选取2022年4月27日于福建省儿童医院心脏外科就诊的1例CHD伴GDD患儿为研究对象。收集患儿的临床资料，采集患儿的脐带血样及其父母的外周静脉血样，用全外显子组测序(WES)对患儿进行检测，对候选变异进行Sanger测序家系验证，并分析其致病性。结果:患儿为男性，3岁3个月，具有心脏异常及发育迟缓等表现。WES检测结果提示其 NONO基因存在c.457C>T(p.Arg153*)无义变异，Sanger测序证实其父母均未携带相同的变异。该变异已被在线人类孟德尔遗传(OMIM)、美国国家生物技术信息中心临床突变数据库(ClinVar)及人类基因突变数据库(HGMD)收录；而未被国际千人基因组计划数据库(1000 Genomes)、单核苷酸多态性数据库(dbSNP)和基因组聚合数据库(gnomAD)等正常人群数据库收录。根据美国医学遗传学与基因组学学会(ACMG)相关指南评级为致病性变异。 结论:NONO基因c.457C>T(p.Arg153*)变异可能是本研究CHD伴全面发育迟缓患儿的遗传学病因。上述发现丰富了 NONO基因c.457C>T(p.Arg153*)变异的表型谱，为患儿的临床诊断与家系遗传咨询提供了依据。

目的:探讨TFE3重排型肾细胞癌(TFE3 rRCC)的临床特征和预后影响因素。方法:回顾性分析2007年1月至2023年2月南京大学医学院附属鼓楼医院收治的85例TFE3 rRCC患者的临床资料，男39例，女46例。中位年龄32(26，45)岁。所有患者术前均行CT检查，21例(24.7%)CT影像具有"环形钙化"特征，增强扫描肿瘤强化程度低于邻近肾皮质。中位肿瘤直径4.8(3.2，6.5)cm。本组85例中，32例行保留肾单位手术(NSS)，51例行根治性肾切除术(RN)，2例因确诊时伴远处转移仅行索拉非尼治疗。43例接受辅助治疗，其中靶向治疗14例。美国癌症联合会(AJCC)分期Ⅰ/Ⅱ期56例，Ⅲ/Ⅳ期29例。10例伴静脉癌栓，14例伴淋巴结转移。85例均行常规组织学、TFE3免疫组化染色和TFE3分离探针检查，52例行RT-PCR和/或DNA测序。结合患者临床病理资料总结TFE3 rRCC诊断方法。分析手术方式对cT 1a/b期患者生存结局的影响，以及基因分型对全体患者生存结局的影响。分析疾病进展的危险因素。 结果:常规组织学检查结果显示，TFE3 rRCC组织形态上的结构特征多变，腺泡样伴砂粒体结构为相对典型的特征。85例肿瘤TFE3免疫组化染色检查均为阳性。6例TFE3分离探针检测阴性，最终经基因检测确诊，其中NONO-TFE3亚型5例，RBM10-TFE3亚型1例。52例行RT-PCR和/或DNA测序，共发现8种TFE3融合分型，分别为ASPL-TFE3 11例，PRCC-TFE3 8例，NONO-TFE3 10例，SFPQ-TFE3 15例，CLTC-TFE3 1例，LUC7L3-TFE3 2例，MED15-TFE3 4例，RBM10-TFE3 1例。生存分析结果显示，12例cT 1b期患者接受RN的无进展生存期(PFS)为35(14，109)个月，显著优于NSS组10例的33(8，61)个月( P＝0.041)；14例cT 1a期患者接受RN的PFS和总生存期(OS)分别为55(27，134)个月和71(41，134)个月，与NSS组18例的44(21，80)个月和44(18，82)个月相比差异无统计学意义( P>0.05)。ASPL-TFE3亚型患者的PFS显著低于非ASPL-TFE3亚型患者[16(5，62)个月与26(11，54)个月， P＝0.029]。单因素分析结果显示，肿瘤直径、手术方式、辅助治疗、AJCC分期、静脉癌栓、淋巴结转移与OS和PFS相关( P<0.05)。多因素Cox回归分析结果显示，AJCC分期Ⅲ/Ⅳ期( HR＝2.393，95% CI 1.418~4.039， P＝0.001)和静脉癌栓( HR＝3.543，95% CI 1.159~10.827， P＝0.026)是PFS的独立危险因素。 结论:TFE3 rRCC的CT平扫影像可出现环形钙化。TFE3免疫组化染色检查是TFE3 rRCC筛查的重要手段，TFE3分离探针检测是诊断的金标准，可行基因检测获得分型诊断。cT 1a期TFE3 rRCC可行NSS，对cT 1b期患者行NSS应慎重。ASPL-TFE3融合分型的预后更差。AJCC分期Ⅲ/Ⅳ期和静脉癌栓是TFE3 rRCC预后不良的危险因素。

目的 探究miR-5188 在肝癌细胞中的作用及网络调控机制.方法 过表达或敲低miR-5188 表达后,检测肝癌细胞HepG2 的增殖能力.利用miRNA靶基因预测数据库miRDB获取miR-5188潜在的靶基因,使用小干扰RNA(siRNA)敲低HepG2 细胞中的上述靶基因后检测细胞增殖能力.采用实时荧光定量PCR法检测正常肝细胞LO2 和HepG2 细胞中miR-5188、pre-miR-5188 和pri-miR-5188的表达水平,并分析长链非编码RNA NEAT1(下文简称NEAT1)、NONO/PSF复合体对pri-miR-5188 的影响.结果 过表达miR-5188 后,HepG2 细胞的增殖能力增强;敲低miR-5188 表达后,HepG2 细胞的增殖能力减弱,差异均有统计学意义(P均＜0.05).敲低DIDO1 表达后,HepG2 细胞的增殖能力增强;过表达DIDO1 后,HepG2 细胞的增殖能力减弱,差异均有统计学意义(P均＜0.05).过表达miR-5188 后,HepG2 细胞中DIDO1 的表达水平降低;敲低miR-5188 表达后,HepG2 细胞中DIDO1 的表达水平升高,差异均有统计学意义(P均＜0.05).双荧光素酶报告基因实验检测结果显示,miR-5188 靶向DIDO1 mRNA的 3'非翻译区(3'-UTR).与LO2 细胞相比,HepG2 细胞中miR-5188 和pre-miR-5188 的表达水平均显著升高,而pri-miR-5188 的表达水平显著降低,差异均有统计学意义(P均＜0.05).与LO2 细胞相比,HepG2 细胞中NEAT1 的表达水平显著升高(P＜0.05),而NONO和PSF的表达水平差异均无统计学意义(P均＞0.05).敲低NEAT1、NONO或PSF表达后,HepG2 细胞中pri-miR-5188 的表达水平均显著升高(P均＜0.05).敲除NEAT1后,HepG2 细胞中pri-miR-5188的表达水平升高,NONO与PSF的相互作用减弱,并且NONO/PSF与pri-miR-5188 的结合减少.结论 HepG2 细胞中NEAT1 的表达水平升高,提高了NONO/PSF复合体对pri-miR-5188 的加工水平,增强了miR-5188/DIDO1 轴对HepG2 细胞增殖能力的正向作用.

旁粒及其组分在肿瘤发生和诸多正常的生物学功能中都扮演了重要的角色,但对于其具体的作用机制仍然缺乏了解.在人和小鼠的胚胎干细胞中,旁粒的关键结构组分长链非编码RNANjAT1_v2并不表达,只表达其短变体NEAT1_v1和3种旁粒蛋白组分——NONO、SFPQ和PSPCl,提示这些组分可能具有独立于经典旁粒结构之外的功能.蓝斐课题组依托国家基金委“细胞编程和重编程的表观遗传机制”重大研究计划,在此方向上开展了系统性的研究,并获得了进展:首次发现旁粒蛋白组分Nono和Erk相互作用,共同结合在小鼠胚胎干细胞的双价结构域基因(bivalent genes)的启动子区,并参与Mek/Erk信号途径调控靶基因的待激活状态;研究还发现,Nono缺失的mESC具有更强的自我更新能力,对于胚胎干细胞的体外培养有重要的参考价值.对本领域的最新进展以及复旦大学蓝斐课题组的相关原创性工作进行综述.

NONO(non-POU-domain-containing octamer binding protein)是一种多功能的核蛋白质,作为人类剪切蛋白家族的一员,NONO参与多种生物学事件,如基因转录调控、前体RNA剪接、DNA解螺旋和配对、缺陷RNA核滞留、DNA损伤的修复以及肿瘤发生等过程.尽管NONO参与胞内多种生物过程,但目前,针对NONO生物功能的研究仍处于初级阶段,其相关的临床研究更少.本文就NONO基因的结构及功能研究进展予以综述.

P54叫NonO是一种能够行使多种生物学功能的核蛋白,在人体多种组织和细胞系中广泛表达并具有高度的种间保守性,与多种疾病的发生、发展密切相关.近年来,P54nrb/NonO在多种肿瘤中的作用报道逐渐增多,然而其具体的肿瘤生物学作用和分子机制尚不明确.P54叫NonO在乳腺癌、前列腺癌、结直肠癌、黑色素瘤、鼻咽癌、肺癌、血液系统肿瘤等多种肿瘤中发挥重要作用.

患者男,28岁.体检发现右肾包快,于2016年12月24日就诊.彩超示:右肾实性包块;MRI示:右肾可见一直径约43 mm的混杂长T1等长T2信号影,其内信号欠均匀,见短T1短T2信号,病变边界清晰;DWI呈混杂稍高信号,反相位信号降低;病变增强后呈轻中度强化,病变内见片状未明显强化信号影.诊断:考虑血管平滑肌脂肪瘤,临床行肿物切除术送病理检查.

目的:探讨LM P1、COX-2与鼻咽癌恶性生物学行为的相关性.方法:选取本院收治的鼻咽癌患者86例,取鼻咽癌组织及癌旁组织标本,采用western-blot法测定其中LMP1、COX-2蛋白表达量,采用荧光定量PCR法测定其中增殖、侵袭基因mRNA的表达量,进一步采用Pearson检验评估鼻咽癌组织中LM P1、COX-2蛋白表达量与增殖、侵袭基因表达量的相关关系.结果:鼻咽癌组织中LM P1、COX-2蛋白的表达量均显著高于癌旁组织;增殖基因c-Myc、Dub3、Sam68 mRNA的表达量高于癌旁组织;侵袭基因NONO、Glypican-3、DEPDC1、TRIM27 mRNA的表达量高于癌旁组织,PKIP mRNA的表达量低于癌旁组织(P<00.5).鼻咽癌组织中LMP1、COX-2蛋白表达量与增殖、侵袭基因mRNA的表达量直接相关.结论:鼻咽癌组织中存在LM P1、COX-2蛋白高表达,且具体表达量与肿瘤恶性生物学行为直接相关.

目的 探讨Xp11.2易位/TFE3融合基因相关性肾细胞癌中2种罕见基因亚型的临床病理学特征、免疫表型、荧光原位杂交(FISH)的特征性表现及预后.方法 对2009年至2016年南京军区南京总医院收集的10例NONO?TFE3肾细胞癌和4例RBM10?TFE3肾细胞癌,分别进行光镜观察、免疫组织化学EnVision法、FISH检测、逆转录?聚合酶链反应(RT?PCR)及随访.结果 NONO?TFE3肾细胞癌由比例不等的"分泌期子宫内膜样腺体"和片状的上皮样细胞混合组成,与透明细胞乳头状肾细胞癌有形态学交叉.RBM10?TFE3肾细胞癌中大多数出现双相结构,即上皮样细胞构成的腺管状和/或乳头状结构与小细胞区域形成的"假菊形团样"结构混合存在,另可见胞质空泡化、核沟和沙砾体等特点.免疫组织化学结果显示,NONO?TFE3肾细胞癌均中等至强阳性表达TFE3、CD10、肾细胞癌标志物(RCC)和PAX8,CK7、Cathepsin K、Melan A、HMB45、Ksp?cadherin、波形蛋白和CD117均阴性.RBM10?TFE3肾细胞癌强阳性表达TFE3、Cathepsin K、CD10、Ksp?cadherin、P504s、RCC、PAX8和波形蛋白,广谱细胞角蛋白(CKpan)和Melan A所有病例中均灶性阳性,TFEB、HMB45和CK7阴性,Ki?67阳性指数约3％～8％(平均约5％),且不同的组织学区域内免疫组织化学表达情况有所不同:PAX8、P504s、Ksp?cadherin在上皮样细胞区域表达,而在小细胞区域几乎不表达;上皮样细胞区域内Ki?67阳性指数高于小细胞区域.在分子方面,NONO?TFE3肾细胞癌中有6例扩增出融合基因产物,5例为NONO基因的第7号外显子和TFE3基因的第6号外显子融合,1例NONO基因的第9号外显子和TFE3基因的第5号外显子融合;4例RBM10?TFE3肾细胞癌均扩增出融合基因,融合位点为RBM10基因的第5号外显子和TFE3基因的第17号外显子.在FISH检测中,10例NONO?TFE3肾细胞癌均表现为距离固定且间隔较小的分离信号,约等于2个信号宽度;4例RBM10?TFE3肾细胞癌均显示<1个信号宽度的异常信号(融合或者微小分离信号),均可视为阴性结果.共7例NONO?TFE3和4例RBM10?TFE3肾细胞癌获得随访资料,所有患者至今均无病生存.结论NONO?TFE3肾细胞癌和RBM10?TFE3肾细胞癌为2种罕见基因亚型,肿瘤均具有特殊的形态学特征和良好的临床预后,TFE3免疫组织化学阳性表达,但由于利用TFE3分离探针进行FISH检测时表现出模棱两可或假阴性结果,容易造成漏诊或误诊,应值得注意,PCR检测或二代测序可明确基因型.