目的:分析儿童EB病毒(EBV)阳性弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的临床病理特点、治疗及预后，以提高儿科医师对本病认识。方法:收集2016年1月至2019年12月在北京儿童医院初诊并规律治疗的6例EBV阳性DLBCL患儿资料，包括基本信息(性别、年龄、首发症状、病程)，病理结果[免疫组织化学、EBV编码的核糖核酸(EBER)、潜伏膜蛋白(LMP)、 C- MYC基因]，免疫功能，血EBV指标及治疗方案、预后。 结果:男4例，女2例，平均年龄6.67岁，病初尿酸266.2 μmol/L，乳酸脱氢酶水平346.5 U/L，1例存在免疫缺陷病。化疗前免疫功能检测提示4例患儿辅助性T淋巴细胞比例下降，体液免疫功能均正常。6例患儿EBV抗体均无近期感染依据；3例EBV-DNA增高。Ⅲ期2例，Ⅳ期4例，巨大瘤灶者1例，B症状者2例，结外侵犯者6例，中枢侵犯者4例，骨髓侵犯者1例。治疗分组：B组2例，C组4例。3例死亡，3例至今存活。6例患儿病理形态均为单型性，免疫组织化学：1.患儿均表达CD 19、CD 20、CD 79a，5例表达CD 30。2.患儿均经免疫荧光原位杂交方法检测 C- MYC基因，未见MYC、Bcl-2及Bcl-6的断裂及扩增。3.EBV：患儿均表达EBER及LMP-1。 结论:EBV阳性DLBCL病理改变与成人相似，非生发中心来源更多见，就诊时结外侵犯、中枢侵犯较常见。本病伴中枢侵犯的患儿预后极差，疾病复发、进展多出现在治疗中或停药早期，目前尚无有效、可行的治疗方案，建议晚期患者在强化疗结束后尽快行异基因造血干细胞移植以提高生存率。

目的:制备一种靶向LMP1抗原的嵌合抗原受体T细胞（CAR-T细胞），研究其对EB病毒（EBV）阳性淋巴瘤的免疫治疗作用。方法:应用分子克隆技术构建二代LMP1 CAR表达质粒，通过慢病毒包装体系包装病毒后感染人T细胞，获得LMP1 CAR-T细胞，体外实验验证LMP1 CAR-T细胞对感染EBV后的LMP1阳性淋巴瘤细胞的特异性细胞毒性作用。结果:①LMP1蛋白表达于EBV阳性的淋巴瘤细胞表面；②成功构建了二代LMP1 CAR慢病毒载体，感染人T细胞，获取LMP1 CAR-T细胞，感染效率大于80%；③LMP1 CAR-T细胞可特异性杀伤LMP1阳性淋巴瘤细胞，当效靶比按4∶1共培养48 h后，LMP1 CAR-T细胞对Raji细胞的杀伤作用增强，对Ramos细胞无明显杀伤作用；④与LMP1阳性淋巴瘤细胞按1∶1共培养5 h后，LMP1 CAR-T细胞处理组CD107a + T细胞比例显著高于Vector-T细胞组[（13.25±2.94）%对（1.55±0.05）%， t＝3.972， P＝0.017]，脱颗粒效果增强；⑤与LMP1阳性淋巴瘤细胞共培养后，LMP1 CAR-T细胞组CD69 +、CD25 + T细胞比例显高于Vector-T细胞组[（7.40±0.41）%对（3.48±0.47）%， t＝6.268， P＝0.003；（73.00±4.73）%对（57.67±2.60）%， t＝2.842， P＝0.047]，活化效应增强。⑥与LMP1阳性淋巴瘤细胞共培养后，LMP1 CAR-T细胞组细胞因子分泌增强，高于Vector-T细胞组[IFN-γ：（703±73）ng/L对（422±87）ng/L， t＝2.478， P＝0.068；TNF-α：（215±35）ng/L对（125±2）ng/L， t＝2.536， P＝0.064]。 结论:该研究证实EBV阳性淋巴瘤细胞表面可特异表达LMP1蛋白，成功构建了LMP1 CAR慢病毒载体并感染人T细胞，成功获得LMP1 CAR-T细胞。体外实验证实：与LMP1阳性淋巴瘤细胞共培养后，LMP1 CAR-T细胞脱颗粒效果增强，活化效应增强，高效分泌细胞因子，可特异杀伤LMP1阳性淋巴瘤细胞，具有潜在的临床应用前景。

目的:探讨Ⅲ-Ⅳa期鼻咽癌EB病毒潜伏膜蛋白（LMP）1、LMP2特异性T细胞免疫反应及临床意义，为鼻咽癌免疫治疗提供思路和依据。方法:收集新疆医科大学附属肿瘤医院2018年2月至2020年10月初治的59例鼻咽癌患者，应用LMP抗原刺激外周血单核细胞，胞内细胞因子染色及流式细胞术研究CD4 +T细胞、CD8 +T细胞白细胞介素（IL）-2、IL-13、干扰素γ（IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）4种细胞因子的表达，并结合临床资料分析。 结果:鼻咽癌患者外周血T细胞对LMP1、LMP2反应阳性率存在差异。T 3-T 4期鼻咽癌患者LMP1特异性CD4 +T细胞阳性率明显高于T 1-T 2期患者（51.0%∶10.0%， P=0.042），LMP1和LMP2、CD4 +T细胞和CD8 +T细胞间部分细胞因子表达也存在差异。生存分析显示，2、3年OS率为91.5%、88.2%，2、3年PFS率为83.3%、75.3%；单因素分析提示吸烟史、男性、LMP1刺激CD4 +T细胞IL-13阳性表达是疾病的进展的危险因素（ P=0.026、0.045、0.006）；多因素分析显示LMP1刺激CD4 +T细胞IL-13阳性表达与吸烟史是局部晚期鼻咽癌患者PFS的独立危险因素（ P=0.017、0.019）。 结论:LMP在鼻咽癌患者外周血中产生特异性T细胞免疫反应，不同T细胞亚群表达存在差异。LMP1、LMP2特异性T细胞免疫反应与原发肿瘤大小、转移淋巴结体积有关。LMP1刺激CD4 +T细胞IL-13阳性表达和吸烟史影响疾病的进展。

目的:探讨心房黏液瘤伴纤维素相关弥漫性大B细胞淋巴瘤的临床病理学特征、治疗及预后情况。方法:收集广东省人民医院2006—2019年诊断的6例心房黏液瘤伴纤维素相关弥漫性大B细胞淋巴瘤的临床病理信息，分析其组织学形态、免疫表型、分子特征、治疗及预后情况。结果:患者年龄46~78岁，平均年龄59岁，男女各3例，均因为左心房黏液瘤就诊。病理检查偶然发现在黏液瘤周边可见大的异型淋巴样细胞弥散分布，可见核分裂象及凋亡细胞，少数坏死。免疫表型为B细胞性（CD20 +，CD79α +）、高增殖指数（Ki-67阳性指数>85%）和潜伏Ⅲ型（LMP1、EBNA2、EBER均阳性）的EB病毒感染模式。肿物均行外科手术完整切除，且未做术后化疗。经随访5~120个月，所有患者情况良好，未见复发或转移。 结论:心房黏液瘤伴纤维素相关弥漫性大B细胞淋巴瘤是一种特殊类型的慢性炎性病变相关弥漫性大B细胞淋巴瘤，表现为惰性的临床病程。手术完整切除肿物，术后密切随访，暂不行化疗以免过度治疗。

目的:探究铀(Uranium, U)暴露诱导人肾近端小管上皮HK-2细胞溶酶体膜通透化(LMP)致细胞死亡的作用及机制。方法:以100、300、600 μmol/L铀染毒HK-2细胞24 h，分别采用DCFH-DA荧光探针法和MitoSOX荧光探针法检测不同浓度铀染毒的HK-2细胞内氧自由基(reactive oxygen species，ROS)和线粒体超氧化物的生成。将HK-2细胞分为：空白对照组、单纯N -乙酰半胱氨酸(NAC)或CA-074 Me组、单纯铀染毒组和铀联合NAC或CA-074 Me组，采用双色免疫荧光法检测HK-2细胞内半乳凝素-1(Galectin-1)与溶酶体相关膜蛋白-1(LAMP-1)共定位情况以检测溶酶体膜通透化(lysosomal membrane permeability, LMP)程度，或检测Cathepsin B与LAMP-1非共定位情况以反映溶酶体内Cathepsin B的释放情况，钙黄绿素(Calcein-AM)-碘化丙啶(PI)双染色法检测HK-2细胞死亡情况，单色免疫荧光法检测HK-2细胞内Cleaved-caspase-3表达以检测细胞凋亡情况。结果:100、300、600 μmol/L铀染毒HK-2细胞24 h诱导细胞内ROS或线粒体超氧化物生成与0 μmol/L铀对照组比较明显增加，分别为1.1~2.5倍或4.0~28倍( tROS＝17.98、11.84、11.75， P< 0.05； t线粒体超氧化物＝6.14、16.02、13.06， P< 0.05),且随铀浓度增加而显著增加( tROS＝10.10、10.37、5.59， P< 0.05； t线粒体超氧化物＝21.50、15.16、5.93， P< 0.05)。与空白对照组相比，600 μmol/L铀染毒24 h使HK-2细胞中Galectin-1和LAMP-1共定位率及Cathepsin B和LAMP-1非共定位率显著增加，分别为5.4~6.7倍或1.5~2.1倍( tGalectin-1＝15.85、12.70， P< 0.05； tCathepsin B＝5.95、6.69， P< 0.05)，而给予NAC处理则能抑制其增加( tGalectin-1＝4.74， P<0.05； tCathepsin B＝4.51， P< 0.05)；而且，600 μmol/L铀染毒24 h使HK-2细胞死亡率及Cleaved-caspase-3表达水平较空白对照组显著增加，分别为28~47倍或2.4~6.0倍( tPI＝30.40、10.34， P<0.05； tCleaved-caspase-3＝18.49、9.52， P<0.05)，而给予CA-074 Me处理则能显著降低铀暴露HK-2细胞的死亡率及Cleaved-caspase-3表达水平( tPI＝6.76， P<0.05； tCleaved-caspase-3＝13.47， P<0.05)。 结论:铀暴露诱导HK-2细胞内ROS爆发导致LMP，致使溶酶体内Cathepsin B泄露至胞质中进而触发溶酶体依赖性细胞死亡和线粒体途径的细胞凋亡。

目的:了解南昌市活禽市场中禽流感病毒的分布状况，为评估新型禽流感病毒(avian influenza virus, AIV)的潜在公共卫生威胁及其预防控制提供科学依据。方法:采用整群随机抽样的方法抽取南昌市10个县/区47家活禽市场作为监测场所。采用Real time RT-PCR对采集的活禽和环境标本进行AIV核酸检测。使用Excel 2016、SPSS 24.0和Prism Version 7 (GraphPad)软件进行统计学分析。结果:2014—2017年共采集活禽拭子和市场环境标本9 248份，AIV核酸阳性标本1 525份，总体阳性率为16.49%。H7、H9是活禽市场的主要流行亚型，H9亚型阳性率最高(17.44%)。清洗禽类污水(21.46%)和禽咽拭子(20.46%)的阳性率显著高于其他类型标本。鸡(22.80%)和鸭(13.95%)的阳性率在所有家禽中排前2位。红谷滩新区(25.52%)、安义县(24.31%)、新建区(22.35%)的阳性率高于其他县区，不同县/区AIV亚型构成不同。结论:南昌市活禽市场中H7、H9等多种亚型AIV共存循环，应采取持续的主动监测和综合控制措施以降低人群潜在的感染风险。

目的 基于在中国南方开展的一项病例对照研究,分析不同样本来源的Epstein-Barr病毒(EBV)高危亚型与鼻咽癌发生风险的关系,并评估其在鼻咽癌诊断中的价值.方法 于2020-2021年在广东省招募150例新诊断鼻咽癌患者(鼻咽癌组)和150名非鼻咽癌健康人群(对照组),病例分别来自中山大学肿瘤防治中心鼻咽科及广东省四会癌症中心鼻咽癌高发区筛查队列.采用酶联免疫吸附试验检测EBV衣壳抗原IgA抗体(VCA-IgA)和EBV潜伏感染时表达的核抗原1 IgA抗体(EBNA1-IgA),并计算EBV抗体评分.同时采用多重PCR法,对鼻咽刷子和唾液中 EBV 高危亚型(BALF2_162476T＞C、BALF2_163364C＞T、BALF2_162215C＞A、RPMS1_155391G＞A、LMP1_WT＞del)检测,分析其与鼻咽癌发生风险的关系,比较EBV抗体评分及不同标本来源BALF2对鼻咽癌的诊断效果,进一步将二者联合并评估其对鼻咽癌鉴别诊断的效能.结果 鼻咽癌组晚期(Ⅲ、Ⅳ期)占90.67％(136/150),早期(Ⅰ、Ⅱ期)占9.33％(14/150).鼻咽癌组中EBV抗体评分为高危占80％,高于对照组的2％,差异有统计学意义(x2=227.024,P＜0.001).鼻咽癌组鼻咽刷子中 5 种高危亚型(BALF2_162476T＞C、BALF2_163364C＞T、BALF2_162215C＞A、RPMS1_155391G＞A、LMP1_WT＞del)阳性率均高于对照组,差异均有统计学意义(x2=18.766、21.054、59.883、26.124、20.402,P均＜0.001);其中鼻咽癌组、对照组中LMP1_WT＞del阳性率最高分别为93.84％、71.08％;所有亚型检出率在早晚期患者之间差异均无统计学意义(P均＞0.05).鼻咽癌组唾液来源BALF2_162476T＞C、BALF2_163364C＞T、BALF2_162215C＞A、RPMS1_155391G＞A 阳性率均高于对照组,差异均有统计学意义(x2=8.063、8.633、8.033、14.909,P均＜0.05);其中晚期患者 BALF2_162215C＞A检出率高于早期(85.59％vs.55.56％),差异有统计学意义(P=0.041);其余高危亚型检出率在早晚期患者之间差异均无统计学意义(P均＞0.05).鼻咽刷子来源BALF2_162215C＞A 与鼻咽癌风险关系最强(OR=13.36,95％CI:6.70～28.27,P＜0.001).将 BALF2(162215-162476-163364)单倍体的变异进行组合,以3个低风险变异BALF2(A-T-C)作为参考时发现,鼻咽癌组鼻咽刷子样本来源中携带3个高危亚型的EBV变异检出率较高(76.71％),且与鼻咽癌的风险显著相关(C-C-T:OR=17.23,95％CI:8.33～37.94,P＜0.001);单倍型 BALF2(C-C-C)和 BALF2(C-T-C)与鼻咽癌风险的OR逐渐递减(C-C-C:OR=10.34,95％CI:3.32～37.18,P＜0.001;C-T-C:OR=4.31,95％CI:1.23～15.65,P=0.022);唾液样本来源中仅有 BALF2(C-C-T)与鼻咽癌的风险显著相关(OR=2.93,95％CI:1.57～5.58,P=0.001).鼻咽刷子来源EBV BALF2单倍体对鼻咽癌诊断的敏感性和特异性分别为88.67％和76.67％,将其与EBV抗体评分联合可将标志物的特异性提升至95.33％,同时保持敏感性85.33％.结论 不同标本来源的EBV高危亚型与鼻咽癌发生关系密切,结合EBV抗体评分和鼻咽刷子中的BALF2单倍体对鼻咽癌筛查有潜在价值.

目的:研究通过mTORC1通路EB病毒LMP1诱导弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞母细胞化的可能机制.方法:采用Western blot法分析EBV+及EBV-DLBCL细胞株LMP1蛋白、CD38的表达及p70S6K磷酸化情况.构建过表达LMP1稳转株及RNAi沉默LMP1基因,用RT-qPCR验证基因表达,并利用Western blot法检测各组细胞LMP1蛋白、CD38的表达量及较EBV-p70S6K磷酸化水平.结果:相较于EBV-DLBCL细胞,LMP1蛋白在EBV+DLBCL细胞上表达(P=0.0008),EBV+DLBCL细胞p70S6K磷酸化水平更高(P=0.0072)及CD38的表达量更高(P=0.0091).与空载组对比,LMP10E组的LMP1蛋白表达及CD38表达量均增高(P=0.0353;P＜0.0001),且p70S6K磷酸化水平增高(P=0.0065);并验证了LMP1 mRNA表达(P＜0.0001).较si-NC组,LMP1KO组不表达LMP1蛋白(P=0.0129),且p70S6K磷酸化消失(P=0.0228);同时,CD38表达量减少,但无显著性差异(P=0.2377).结论:LMP1通过活化mTORC1通路促进DLBCL细胞浆母细胞化.

目的 探讨经典型霍奇金淋巴瘤(classic Hodgkin lymphoma,CHL)中 CXCR5的表达及意义.方法 采用免疫组化En-Vision两步法检测33例CHL中CXCR5的表达,分析CXCR5在CHL四种亚型中的表达情况及临床病理诊断意义;同时收集10例ALK阳性间变性大细胞淋巴瘤(anaplastic large cell lymphoma,ALCL)和10例ALK阴性ALCL作为对照组,对比分析CXCR5的表达情况.结果 33例CHL中,31例CXCR5阳性(93.94％):其中结节硬化型15例(15/16,93.75％)、混合细胞型12例(12/13,92.31％)、淋巴细胞丰富型2例,淋巴细胞消减型2例.CHL中CXCR5的表达情况分别为:33例CD30阳性和PAX5弱阳性中31例阳性(93.94％);14例CD15阴性中12例阳性(85.71％);26例CD20阴性中24例阳性(92.31％);6例LMP1阴性中5例阳性;11例EBER阴性中10例阳性(90.91％).对照组20例ALCL中,肿瘤细胞CXCR5均阴性.结论 CHL中CXCR5阳性率较高,当肿瘤细胞中CD15、LMP1和CD20阴性,或EBER阴性时,CXCR5仍有较高的阳性率,有助于CHL的诊断.尤其是组织形态学和免疫表型不典型的CHL病例,可借助免疫组化标记CXCR5与ALCL鉴别.

目的 探讨鼻咽癌合并EB病毒感染外周血潜伏膜蛋白1(LMP-1)、p53、Ki67表达水平与疾病进展的相关性.方法 选择2019年1月-2022年3月在西南医科大学附属医院肿瘤科确诊为鼻咽癌患者120例为研究对象,其中合并EB病毒感染患者85例纳入感染组,35例未感染患者纳入对照组,检测患者外周血LMP-1、p53、Ki67表达水平及其与鼻咽癌患者合并EB病毒感染临床特征的关系.结果 感染组患者LMP-1、p53和Ki67阳性表达率均高于对照组(P＜0.05);LMP-1、p53和Ki67阳性表达与性别、年龄、T分期、病理类型、临床分期、淋巴结转移无相关性,与N分期具有相关性(P＜0.05),且N分期越高,阳性表达率越高(P＜0.05),远处转移患者阳性表达率高于未远处转移患者(P＜0.05).结论 鼻咽癌合并EB病毒感染患者外周血LMP-1、p53、Ki67阳性表达率升高,并与临床N分期、淋巴结远处转移具有相关性.