目的 探讨环状人网状蛋白4(CircRTN4)调节miR-582-5p/神经纤毛蛋白1(NRP1)轴对结直肠癌(CRC)细胞恶性生物学行为的影响.方法 选取2019年1月至2023年1月河南科技大学第一附属医院收治的CRC患者50例,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白质免疫印迹法分别检测患者的癌组织、癌旁组织、人正常结肠黏膜上皮细胞和CRC细胞中CircRTN4、miR-582-5p mRNA及NRP1的蛋白表达;将SW480细胞分别转染si-RTN4、miR-582-5p inhibitor及相应对照,qRT-PCR检测转染效率;通过平板克隆实验、Transwell小室和流式细胞仪等研究CircRTN4对CRC细胞的影响;蛋白质免疫印迹法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)及NRP1蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验检测miR-582-5p与RTN4和NRP1的作用;构建肺癌裸鼠模型,分析敲低RTN4对肿瘤质量、体积及移植瘤中miR-582-5p、NRP1、Ki-67蛋白表达的影响.结果 在CRC组织和细胞系中,RTN4、NRP1表达升高,miR-582-5p表达降低(P<0.05);敲低RTN4,降低SW480细胞迁移、增殖与侵袭,下调PCNA、Bcl-2、MMP-2、NRP1表达,促进miR-582-5p、Bax表达及细胞凋亡(P<0.05);miR-582-5p作为RTN4靶点,下调miR-582-5p可减弱RTN4敲低对SW480细胞恶性行为的抑制作用(P<0.05);体内实验显示,抑制RTN4可降低移植瘤质量和体积,降低Ki-67、NRP1表达水平,升高miR-582-5p表达(P<0.05).结论 在CRC组织和细胞系中,CircRTN4高表达,敲低CircRTN4可能通过调节miR-582-5p/NRP1轴抑制CRC细胞的恶性行为.

目的:构建同时表达神经纤毛蛋白质1(NRP-1)和存活素(Survivin)双基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达质粒，通过体内外实验，观察其对鼻咽癌细胞CNE-2Z生长增殖的影响。方法:构建同时表达NRP-1和Survivin双基因的质粒(Plasmid-1)，并构建单独表达NRP-1和Survivin基因质粒(分别为Plasmid-2、Plasmid-3)。转染入鼻咽癌CNE-2Z细胞株，于荧光显微镜观察质粒转染及表达情况；以噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力；定量聚合酶链反应(PCR)及免疫印迹法(Western blot)在mRNA水平和蛋白水平上检测目的基因抑制作用。建立稳定转染裸鼠移植瘤模型，体内裸鼠成瘤实验观察质粒对肿瘤的抑制效果。原位缺口末端标记法(TUNEL)法检测移植瘤细胞凋亡率。多组间比较采用单因素方差分析。结果:通过测序证实重组shRNA真核表达载体构建成功。各重组质粒表达载体成功转染CNE-2Z细胞，可见大量的癌细胞表达绿色荧光。MTT显示细胞增殖受到抑制，且双基因干扰质粒对细胞增殖的抑制作用明显强于单基因干扰质粒，差异有统计学意义(0.209±0.021比0.392±0.013、0.384±0.014， F＝354.121， P<0.05)。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)证实双基因联合沉默组和单基因沉默组均能有效抑制目的基因mRNA表达，双基因组NRP-1 mRNA(0.20±0.06)表达明显低于NRP-1单基因组(0.27±0.05)，差异有统计学意义( F＝198.437， P<0.05)；双基因组Survivin mRNA表达(0.13±0.02)明显低于Survivin单基因组(0.17±0.01)，差异有统计学意义( F＝245.647， P<0.05)。Western blot检测结果双基因组对NRP-1和Survivin蛋白的表达抑制率分别为67.41%和79.24%，与单基因组比较均有统计学意义( F＝129.354、216.411， P<0.05)。体内抑瘤实验证实，与NRP-1单基因干扰组[(0.628±0.013) cm 3]、Survivin单基因干扰组[(0.601±0.301) cm 3]比较，双基因干扰组[(0.205±0.002) cm 3]瘤体积生长明显受到抑制，差异有统计学意义( F＝49.214， P<0.05)，抑瘤率为81.71%。TUNEL实验表明双基因干扰组凋亡指数[(49.84±1.98)%]，显著高于NRP-1单基因组[(21.53±2.01)%， P<0.05]和Survivin单基因组[(19.91±2.11)%]，差异有统计学意义( F＝254.130， P<0.05)。 结论:同时表达两个不同基因的shRNA质粒载体转染鼻咽癌细胞后，可同时敲降NRP-1和survivin基因表达，与单个基因沉默比较，可以更好的促进细胞凋亡，抑制细胞生长增殖。

2019新型冠状病毒(2019 novel coronavirus，2019-nCoV)的主要靶器官是肺，严重者发生急性呼吸窘迫综合征而危及生命。2019-nCoV的人类病毒受体主要为血管紧张素转换酶2(ACE2)，其他已报道的受体还有CD147蛋白、酪氨酸蛋白激酶受体UFO、神经纤毛蛋白1、肾损伤因子1等。2019-nCoV可通过与ACE2结合，下调ACE2表达，导致血管紧张素水平增高，通过下游信号引起肺损伤。2019-nCoV还可引起炎症因子风暴、凝血功能紊乱、触发肺上皮细胞凋亡等机制导致肺损伤。儿童感染2019-nCoV后临床症状较轻，系由于儿童的固有免疫应答优势而适应性免疫应答水平低下所致。防治肺损伤的根本措施在于抑制2019-nCoV病毒的增殖和复制，但目前尚没有找到抗病毒的特效药物。重组人可溶性ACE2蛋白、针对S蛋白的中和抗体、抑制血管紧张素2、拮抗炎症因子、干细胞输注等措施可能有助于减轻肺损伤。

目的:探讨调节性T细胞（Treg）的分化对放射性肺损伤的影响及其作用机制。方法:建立Treg抑制小鼠模型，按随机数字表法将C57BL/6小鼠分成4组：空白对照组、单纯照射组、照射+免疫球蛋白G（IgG）组和照射+CD25组，每组12只，除空白对照组外其余3组小鼠给予单次20 Gy X射线全胸照射，照射+IgG组和照射+CD25组小鼠每周腹腔注射IgG抗体和CD25抗体。分别于照射后第4周和第8周各处死小鼠6只，采用流式细胞术检测小鼠肺组织内CD25 +Foxp3 +Treg（Foxp3：叉头样转录因子3）的百分比以鉴定模型是否建立成功；采用Western blot法检测单纯照射组小鼠肺组织内神经纤毛蛋白1（NRP1）的表达；采用免疫荧光法检测每组小鼠肺组织内CD25 +NRP1 +Treg的百分比；拍照并观察每组小鼠皮肤的损伤情况，采用苏木精-伊红染色法检测小鼠肺组织的病理学改变；采用酶联免疫吸附测定法检测每组小鼠肺组织内转化生长因子β1（TGF-β1）、白细胞介素（IL）-17A、干扰素γ（IFN-γ）、IL-2和IL-4的水平变化。两组间比较采用独立样本 t检验。 结果:流式细胞术检测结果显示，照射后第4周和第8周，单纯照射组小鼠肺组织内CD25 +Foxp3 +Treg百分比[（1.73±0.04）%、（2.13±0.15）%]均较空白对照组[（1.14±0.02）%、（1.70±0.06）%]明显升高，差异均有统计学意义（ t=-26.680、-4.545， P=0.000、0.010），抑制Treg后，第4周和第8周时照射+CD25组小鼠肺组织内CD25 +Foxp3 +Treg百分比[（0.72±0.14）%、（0.27±0.02）%]均较单纯照射组明显降低，差异均有统计学意义（ t=5.296、37.538，均 P=0.000）。Western blot结果显示，照射后第4周和第8周，单纯照射组小鼠肺组织内NRP1蛋白表达水平均较空白对照组升高，差异均有统计学意义（ t=-7.341、-9.127，均 P=0.000）。免疫荧光法检测结果显示，照射后第4周和第8周，单纯照射组小鼠肺组织内CD25 +NRP1 +Treg的百分比均较空白对照组升高，而照射+CD25组CD25 +NRP1 +Treg百分比均较单纯照射组降低，且差异均有统计学意义（ t=8.926、14.457， P=0.001、0.000）。观察小鼠皮肤损伤程度后发现，照射后第4周和第8周，单纯照射组小鼠皮肤损伤严重，而照射+CD25组小鼠照射后第4周时皮肤基本完好，第8周时出现脱毛脱皮。病理学结果显示，照射后第4周和第8周，与空白对照组相比，单纯照射组小鼠的肺组织结构破坏，肺泡壁增厚，细胞外基质增多，而照射+CD25组小鼠的肺组织结构完整，肺泡壁纤细。酶联免疫吸附测定结果显示，与空白对照组相比，照射后第4周，单纯照射组小鼠肺组织内IL-17A和IL-4的水平均升高，差异均有统计学意义（ t=-8.492、-15.796， P=0.001、0.000），照射后第8周，TGF-β1和IL-17A水平升高，差异均有统计学意义（ t=-11.072、-7.167， P=0.000、0.002），IL-2水平在第4周和第8周时均降低，IFN-γ水平在第4周时升高，差异有统计学意义（ t=-27.393， P=0.000），第8周时下降；与单纯照射组相比，照射+CD25组小鼠TGF-β1和IL-17A水平在第4周和第8周时均降低（ t=6.037、4.524、5.496、4.772，均 P=0.000），IFN-γ水平升高（ t=-7.006、-12.565， P=0.002、0.000），差异均有统计学意义，而IL-2和IL-4水平在第4周时均降低，第8周时均明显升高，差异均有统计学意义（ t=2.866、-9.090、8.833、-7.191，均 P=0.000）。 结论:放射性肺损伤小鼠的肺组织中出现Treg分化，并增强分泌TGF-β1促炎因子，同时干扰辅助T细胞（Th1、Th2型）细胞因子的平衡来促进放射性肺损伤的发生。

Neuropilins (NRP1 and NRP2) are multifunctional receptor proteins that are involved in nerve, blood vessel, and tumor development. NRP1 was first found to be expressed in neurons, but subsequent studies have demonstrated its surface expression in cells from the endothelium and lymph nodes. NRP1 has been demonstrated to be involved in the occurrence and development of a variety of cancers. NRP1 interacts with various cytokines, such as vascular endothelial growth factor family and its receptor and transforming growth factor β1 and its receptor, to affect tumor angiogenesis, tumor proliferation, and migration. In addition, NRP1 + regulatory T cells (Tregs) play an inhibitory role in tumor immunity. High numbers of NRP1 + Tregs were associated with cancer prognosis. Targeting NRP1 has shown promise, and antagonists against NRP1 have had therapeutic efficacy in preliminary clinical studies. NRP1 treatment modalities using nanomaterials, targeted drugs, oncolytic viruses, and radio-chemotherapy have gradually been developed. Hence, we reviewed the use of NRP1 in the context of tumorigenesis, progression, and treatment.

目的:探讨神经纤毛蛋白-1（NRP-1）在调节性T细胞（Treg）上的表达与其配体信号素3A（Sema3A）、转化生长因子β 1（TGF-β 1）以及1型辅助T细胞（Th 1）和2型辅助T细胞（Th 2）之间平衡的关系。 方法:纳入2014年3月至2015年5月就诊的62例ITP患者（新诊断ITP 33例、慢性ITP 29例），以同期30名健康体检者作为正常对照组。流式细胞术检测Treg细胞NRP-1表达，酶联免疫吸附法（ELISA）检测血浆Sema3A、TGF-β 1、IFN-γ和IL-4水平，实时聚合酶链式反应（RT-PCR）检测外周血NRP-1、Sema3A、TGF-β 1 mRNA表达水平。分别采用单因素方差和独立样本 t检验进行三组间和两组间比较，用Spearman相关系数评估NRP-1、Sema3A、TGF-β 1 mRNA表达的相关性。 结果:与慢性ITP组和正常对照组比较，新诊断ITP组Treg细胞NRP-1表达降低[分别为（0.15±0.03）%、（0.33±0.15）%、（0.46±0.06）%， P<0.01]，血浆Sema3A水平升高[分别为（8.10±1.32）μg/L、（7.41±1.30）μg/L、（2.88±0.82）μg/L， P<0.01]，血浆TGF-β 1水平降低[分别为（16.50±3.36）μg/L、（35.17±10.26）μg/L、（41.00±10.02）μg/L， P<0.01]，血浆IFN-γ水平升高[分别为（17.21±2.80）ng/L、（10.23±1.59）ng/L、（8.18±3.27）ng/L， P<0.01]，Th 1/Th 2（IFN-γ/IL-4）比值升高（分别为1.29±0.30、0.72±0.16、0.61±0.27， P<0.01）。新诊断ITP、慢性ITP组NRP-1、Sema3A mRNA的表达均低于正常对照组（ P<0.01）。新诊断ITP组NRP-1 mRNA表达与Sema3A、TGF-β 1 mRNA表达均呈正相关。 结论:NRP-1可能参与ITP的发病机制。

目的:探讨神经纤毛蛋白1(NRP-1)和血管内皮生长因子(VEGF)在多形性胶质母细胞瘤(GBM)复发和耐药性中的机制。方法:体外培养人源性GBM1A和GBM22细胞株，通过感染慢病毒shRNA的方式沉默VEGF或NRP-1。根据感染慢病毒shRNA的种类，将两种细胞株分别分为shCont组(感染无义序列shRNA)、shNRP-1组(感染NRP-1慢病毒shRNA)及shVEGF组(感染VEGF慢病毒shRNA)。采用实时荧光定量聚合酶联链式反应(qRT-PCR)和蛋白质免疫印迹法检测肿瘤细胞株在沉默NRP-1或VEGF基因后干细胞标志物[包括：性别决定区Y盒2(Sox2)、表皮生长因子受体(EGFR)、N-钙黏附素(N-cadherin)、CD133、细胞间质上皮转换因子(c-Met)]的基因和蛋白表达情况。采用细胞划痕实验、Transwell小室测定法、神经球形成实验及MTT法检测肿瘤细胞的迁移能力、侵袭能力、神经球形成能力及细胞代谢活性。采用细胞生长抑制实验检测肿瘤细胞株在沉默VEGF或NRP-1后对替莫唑胺(TMZ)、紫杉醇(PTX)和卡博替尼(XL-184)的敏感性。向GBM1A和GBM22细胞株中的shCont组和shNRP-1组分别加入10 μg重组VEGF，分为shCont组、shCont+VEGF组、shNRP-1组、shNRP-1+VEGF组，判断NRP-1与VEGF之间的相互作用。结果:GBM1A细胞株中，shVEGF组和shNRP-1组Sox2、EGFR、N-cadherin，CD133及c-Met的mRNA含量均较shCont组下降(均 P<0.05)。GBM1A细胞株中，shNRP-1组和shVEGF组EGFR、CD133、N-Cadherin的蛋白质相对表达量、24 h和48 h时的细胞划痕愈合率及发生细胞迁移的比例均较shCont组低(均 P<0.05)，但shNRP-1组和shVEGF组间的差异均无统计学意义(均 P>0.05)；GBM22细胞株得到相似的结果。在GBM1A细胞株和GBM22细胞株中，3组细胞活力的差异均无统计学意义(均 P>0.05)。根据绘制的剂量-生长曲线，GBM1A细胞株中，shNRP-1组和shVEGF组TMZ、PTX、XL-184的半抑制浓度(IC 50)均低于shCont组(均 P<0.05)；在GBM22细胞株得到相似的结果(均 P<0.05)。GBM1A细胞株中，shCont组和shCont+VEGF组形成神经球的数量均高于shNRP-1组和shNRP-1+VEGF组(均 P<0.05)，其中shCont+VEGF组高于shCont组( P<0.05)，而shNRP-1组和shNRP-1+VEGF组间的差异无统计学意义( P>0.05)；GBM22细胞株得到相似的结果。 结论:沉默VEGF或NRP-1基因在不影响GBM本身活力的情况下可有效抑制其干细胞性，降低其迁移能力及侵袭力，并恢复其对化疗药物的敏感性；VEGF介导的细胞迁移可能依赖NRP-1发挥作用。

目的:探讨神经纤毛以及类似透拉蛋白2(NETO2)对胆囊癌细胞增殖、迁移、周期和凋亡的影响及分子机制。方法:通过实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)和免疫印迹法分别检测胆囊癌细胞系GBC-SD、ZJU-0430、NOZ中NETO2的mRNA及蛋白表达水平，利用质粒转染法构建NETO2过表达及敲减的稳转细胞株。通过细胞计数法(CCK-8)、克隆形成实验、细胞迁移实验、流式细胞术和免疫印迹法检测NETO2对胆囊癌细胞增殖、克隆形成能力、迁移、周期进程、凋亡和上皮间质转化(EMT)的影响，以及磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B (PI3K/Akt)信号通路的变化。结果:成功构建NETO2基因过表达的胆囊癌GBC-SD及ZJU-0430细胞，NETO2基因敲减的NOZ细胞。在ZJU-0430、GBC-SD细胞过表达NETO2后，胆囊癌细胞的增殖及迁移能力提高；可促进细胞从G0/G1期向S期进展，并抑制细胞凋亡；细胞克隆数分别由(78.5±9.2)、(217.0±6.4)增加为(213.5±10.3)、(296.3±9.3)( t＝10.98、6.51， P＝0.008、0.023)；迁移细胞数分别由(100倍视野)(198.6±8.4)个、(233.3±11.0)个增加为(382.7±12.4)个、(379.0±7.3)个( t＝16.98、16.85，均 P<0.001)；细胞总凋亡率由(29.7±0.9)%、(35.6±1.1)%降低为(19.2±0.5)%、(29.1±0.4)%( t＝9.74、9.05，均 P<0.001)；EMT相关蛋白如N-钙粘蛋白、波形蛋白、锌指转录因子Snail、Slug表达上调，而E-钙粘蛋白表达下调；PI3K/Akt通路磷酸化蛋白p-PI3K及p-Akt表达上调，上述变化差异均具有统计学意义(均 P<0.05)。而敲减NETO2表达则导致相反的变化。 结论:NETO2通过调控PI3K/Akt信号通路影响EMT进程，从而促进胆囊癌细胞的增殖和迁移，促进癌细胞周期进程并抑制癌细胞凋亡。

目的 运用CiteSpace分析神经纤毛蛋白-1(NRP1)的研究现状、热点和趋势.方法 检索中国知网、万方数据知识服务平台、维普网及Web of Science核心合集数据库从建库至 2022 年 9 月NRP1 的相关文献,利用CiteSpace对年份、作者、机构及关键词进行可视化分析.结果 共纳入中文文献 536篇和英文文献 2444 篇,年发文量呈现波动上升趋势.中文文献发文量最多的作者是颜江华和韩正祥,英文作者是Ruhrberg,Christiana.厦门大学和哈佛大学分别是中英文文献发文量最多的机构.胃癌、血管生成、乳腺癌是中文研究热点,表达、受体、内皮生长因子是英文研究热点.结论 NRP1的研究仍处于发展阶段,研究热点和趋势是机制和临床研究.团队间应加强合作,使研究更为系统.

目的 探讨神经纤毛及唾样蛋白2(NETO2)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的临床意义,及其敲低对OSCC细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 使用基因表达谱交互分析(GEPIA)分析OSCC患者的癌组织和非癌组织中NETO2表达,并分析NETO2表达与OSCC患者总生存率的相关性.于2020年11月至2022年1月从广西科技大学第二附属医院获得124份癌标本及配对正常组织(距肿瘤边缘5 cm).通过蛋白质印迹法分析NETO2表达.在体外实验中,实验1将HSC-4细胞分为NETO2敲低(sh1、sh2)组和相应对照(NC)组;实验2将HSC-4细胞分为NETO2敲低(sh1、sh1+EGF)组和相应对照(NC)组.使用CCK-8、克隆形成和Transwell分析研究NETO2敲低对HSC-4细胞增殖、侵袭和迁移的影响.此外,在NETO2敲低的HSC-4细胞中加入ERK激动剂(EGF)进行拯救实验.结果 NETO2在OSCC组织中的表达异常高,并且NETO2高表达OSCC患者的预后较差.与NC组相比,sh1组和sh2组的细胞活力、集落形成能力、迁移和侵袭细胞数均显著降低(P＜0.05).基因本体论(GO)的基因集富集分析(GSEA)揭示了 OSCC细胞中NETO2的敲低导致ERK信号通路基因表达的显著变化.与sh1组相比,sh1+EGF组增加了 NETO2敲低细胞中ERK的表达(P＜0.05).此外,sh1+EGF组的NETO2敲低OSCC细胞的生长、集落形成能力、迁移和侵袭均显著高于sh1组(P＜0.05).结论 OSCC组织中高水平的NETO2表达与患者的不良预后相关.NETO2是一种重要的癌蛋白,可能激活ERK信号通路以促进OSCC细胞的增殖、侵袭和转移.