目的:通过分析常染色体显性遗传性智力障碍35型患儿的临床及遗传学特点以提高对该病的认识。方法:报道北京儿童医院2018年7月收治的1例常染色体显性遗传性智力障碍35型患者的临床资料、遗传学特点，并进行文献复习。结果:先证者男性，1岁3个月龄，表现为发育落后，低热，患儿面容特殊（额部突出、鼻梁塌平），张口呼吸，肌张力减低。头颅磁共振成像示侧脑室增宽、透明隔间腔及Vergae腔形成、中间帆腔囊肿。基因检测结果示PPP2R5D基因位点新生突变（NM_006245：c.1258G>A，p.E420K）。检索到既往共10篇国外文献报道31例常染色体显性遗传性智力障碍35型患者，包括本例共32例。32例中临床表现为智力发育迟缓（32例；100.0%）、运动发育迟缓（26例；81.3%）、巨头畸形（26例；81.3%）、癫痫（8例；25.0%），此外有特殊面容、震颤、眼科异常、骨骼发育异常、心脏畸形等表现。PPP2R5D基因突变均为新生错义突变，常染色体显性遗传。结论:常染色体显性遗传性智力障碍35型主要临床表现为发育迟缓/智力障碍、严重的语言发育落后、巨头畸形、肌张力减低、特殊面容。PPP2R5D基因新生错义突变为本病的遗传学病因。

目的:使用全外显子组测序技术对一例发育迟缓的婴儿进行基因检测，查明该患儿致病原因。方法:应用全外显子组测序技术对其进行致病基因筛查，结合临床表型资料，锁定候选基因致病位点，利用Sanger测序技术对先证者及其家系成员完成致病变异验证。结果:发现先证者存在 PPP2R5D基因c.592G>A(p.E198K)杂合变异，该变异为已知致病变异，根据相关文献报道及患儿临床症状，诊断该患儿的致病原因为 PPP2R5D基因c.592G>A变异引起的。 结论:Jordan综合征是一种罕见的遗传疾病，应用全外显子组测序技术能够快速发现 PPP2R5D基因变异，有助于该疾病的临床诊断和辅助治疗及该家系的遗传咨询及产前诊断。

本文报道1例新生儿期起病的常染色体显性智力障碍35型（mental retardation autosomal dominant 35，MRD35）患儿的诊治过程。患儿男，生后1.5 h发病，表现为反复抽搐、肌张力低下、头围大、先天性肌性斜颈、喂养困难。动态脑电图示左中央区-颞区阵发性痫样波放电。全外显子组测序示患儿 PPP2R5D基因杂合变异c.139G>A（p.Glu47Lys），为新发变异，父母为野生型。随访至患儿1岁龄时，发育迟缓明显。MRD35临床缺乏特异性，需全外显子组测序明确诊断；且无特异性治疗，多为对症治疗，包括康复训练、语言训练、控制癫痫发作等。

目的:探讨粪便中SDC2、PPP2R5C及ADHFE1基因甲基化状态及其在结直肠癌和癌前病变筛查中的价值。方法:招募青岛大学附属青岛市中心医院2020年8月至2021年3月结直肠癌患者64例、腺瘤患者72例、增生性息肉患者33例和健康体检者59名，收集研究对象清晨粪便标本，提取基因组DNA并进行亚硫酸盐修饰处理，采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）检测SDC2、PPP2R5C及ADHFE1基因的甲基化状态；同时进行粪便隐血试验（FOBT）。以病理结果为金标准，通过受试者工作特征（ROC）曲线及曲线下面积（AUC）比较3个基因甲基化联合检测与FOBT预测结直肠癌和癌前病变的效果。采用R-Studio软件构建粪便基因甲基化联合检测与其他临床特征预测结直肠癌列线图，并行校准验证。结果:粪便SDC2、PPP2R5C和ADHFE1基因甲基化联合检测在结直肠癌+腺瘤[74.3%（101/136）比47.1%（64/136）， χ2＝23.20， P＝0.001]、结直肠癌[90.6%（58/64）比70.3%（45/64）， χ2＝8.91， P＝0.003]、腺瘤[59.7%（43/72）比26.4%（19/72）， χ2＝14.43， P＝0.002]中的阳性率均高于FOBT，在增生性息肉[21.2%（7/33）比6.1%（2/33）， χ2＝0.12， P＝0.125]、健康对照[10.2%（6/59）比8.5%（5/59）， χ2＝4.01， P＝1.000]中阳性率差异均无统计学意义。基因甲基化联合检测预测结直肠癌+腺瘤的效能优于FOBT[AUC：0.85（95% CI 0.80~0.91）比0.71（95% CI 0.64~0.78）， P<0.05]，尤其对腺瘤的预测更优于FOBT[AUC：0.82（95% CI 0.74~0.89）比0.64（95% CI 0.57~0.69）， P<0.001]。ADHFE1基因甲基化状态预测结直肠癌的灵敏度和特异度均较高（90.6%、96.6%）。在>50岁结直肠癌患者中，基因甲基化联合检测阳性率高于FOBT[90.2%（55/61）比68.9%（42/61）， P<0.05]。依据基因甲基化联合检测和各临床特征构建的预测结直肠癌列线图校准曲线显示，预测和观察到的结直肠癌诊断效能之间具有高度一致性。 结论:粪便中SDC2、PPP2R5C及ADHFE1基因甲基化水平在结直肠癌和腺瘤患者中升高，基因甲基化联合检测有望成为结直肠癌及癌前病变筛查的非侵入性检测方法。

目的 探讨蛋白磷酸酶2调节亚基B'γ(protein phosphatase 2 regulatory subunit B'gamma,PPP2R5C)对多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞增殖、凋亡和药物敏感性的影响.方法 利用qRT-PCR和Western blot检测PPP2R5C在人MM细胞系(MM1S、RPMI-8226细胞系)和正常外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)中的表达水平.在MM1S细胞中分别转染PPP2R5C干扰siRNA(si-PPP2R5C组)及其阴性对照-siRNA(si-CTRL组)、PPP2R5C过表达质粒(OE-PPP2R5C组)及其阴性对照(OE-CTRL组),利用CCK-8法检测各组细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况.用不同浓度硼替佐米(bortezomib,BTZ)处理si-PPP2R5C组和si-CTRL组细胞24 h后,采用CCK-8法检测细胞活力并计算半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50).用1 nmol/L的BTZ干预si-PPP2R5C组和si-CTRL组细胞24 h后,采用qRT-PCR和Western blot检测各组细胞中BCL-2和BAX的表达水平,Caspase 3/7活性检测试剂盒检测Caspase 3/7活性,流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 相较于PBMC细胞,MM1S、RPMI-8226细胞在mRNA和蛋白水平上均高表达PPP2R5C(均P＜0.001).与si-CTRL组相比,si-PPP2R5C组在培养48 h、72 h后细胞增殖活力均受到抑制(均P＜0.001),凋亡率明显增加(5.97％vs 14.39％,P＜0.001).与OE-CTRL组相比,OE-PPP2R5C组在培养48 h、72 h后细胞增殖活力均增强(均P＜0.01).si-PPP2R5C组BTZ的IC50值相比si-CTRL组显著下降(3.40 nmol/L vs 10.37 nmol/L,P＜0.001).si-PPP2R5C+BTZ组相比于Control组和si-CTRL+BTZ组,BCL-2的mRNA和蛋白水平均下降,而BAX的mRNA及蛋白水平、Caspase3/7活性和细胞凋亡率则增加(均P＜0.05).结论 PPP2R5C在MM细胞系中显著高表达,敲低PPP2R5C表达后可抑制MM细胞增殖并促进凋亡,以及增强BTZ的药物敏感性.

目的 分析湖北省武汉市新型结直肠癌筛查项目的成本效益,为结直肠癌筛查工作的科学决策提供参考依据.方法 收集武汉市2021年10月20日-2022年12月31日新型结直肠癌筛查项目101 217名筛查对象的筛查结果,通过现场调查和文献资料测算武汉市结直肠癌的疾病经济负担,估算武汉市结直肠癌筛查工作的成本和效益,并对筛查对象的肠镜依从性进行敏感性分析.结果 武汉市新型结直肠癌筛查项目共完成101 217人的无创肠癌基因检测,检出阳性病变4483例,初筛阳性率为4.43％;初筛阳性完成肠镜检查者3 200例,肠镜依从率为71.38％,其中检出肠镜异常者2345例,肠镜异常检出率为73.28％;武汉市新型结直肠癌筛查项目的总成本为3 480.43万元,总效益为29 758.28万元,净效益为26 277.85万元,本筛查项目的成本效益比为1∶8.55;敏感性分析结果显示,如果提高肠镜检查依从性至80％、90％和100％,结直肠癌筛查的成本效益比可分别升高至1∶9.15、1∶9.78和1∶10.36.结论 武汉市新型结直肠癌筛查项目具有较高的成本效益,提高肠镜依从性可以使该筛查项目具有更好的经济效益.

目的 研究诱导性ppp2r1a基因全身敲除对成年小鼠的主要生理功能影响并探讨相关机制.方法 将ppp2r1aflox/flox小鼠和CAGG-CreER小鼠杂交繁殖,获得20只CAGG-CreER ppp2r1aflox/flox小鼠,设立为纯合子组,并同时选取同窝野生型小鼠20只,采用单纯随机法,将纯合子、野生型小鼠分别分为4组,共8组,每组5只,腹腔注射他莫昔芬0、2、4、6 d,建立ppp2r1a基因诱导性敲除小鼠模型.采用Western blot法检测主要脏器中PP2A Aα(由ppp2r1a基因编码)的敲除效率,并观察小鼠体重、脏器病理改变以及外周血细胞计数和血生化,采用Real-time PCR法检测肝脏糖脂代谢相关基因的表达改变.结果 他莫昔芬注射6 d后,小鼠心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和脑的PP2A Aα敲除效率分别约为35%、12%、15%、60%、69%和72%.他莫昔芬注射6 d后,纯合子小鼠体重[(17.42±1.76)g]低于野生型小鼠[(21.69±1.82)g](P<0.05).纯合子小鼠活动减少,腹部和肾周脂肪少,存活不超过7 d.第6天后,纯合子小鼠脾脏的脏器系数[(0.36±0.05)%]低于野生型小鼠[(0.59±0.10)%](P<0.05),组织病理HE染色显示脾脏萎缩明显,有核细胞明显减少.Tunel染色发现脾脏中淋巴细胞凋亡增多.纯合子小鼠血浆中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)水平[(153.68±62.80)U/L和(193.2±44.28)U/L]均高于野生型小鼠[(41.02±12.91)U/L和(69.40±9.55)U/L](P值均<0.05),提示ppp2r1a敲除导致肝损伤.纯合子血糖水平[(4.20±1.99)mmol/L]低于野生型[(8.88±0.65)mmol/L](P<0.05),而总胆固醇、HDL-C和β-羟基丁酸(β-HB)水平[(3.12±0.39)、(1.53±0.38)和(2.49±0.89)mmol/L]均高于野生型小鼠[(1.69± 0.92)、(0.78±0.50)和(0.45±0.30)mmol/L](P值均<0.05),表明ppp2r1a敲除会扰乱葡萄糖和胆固醇代谢.此外,纯合子小鼠白细胞计数(WBC)和淋巴细胞计数[(1.88±0.89)×109/L和(0.92±0.37)×109/L]低于野生型小鼠[(3.91±0.80)×109/L和(2.74±0.52)×109/L](P值均<0.05).纯合子小鼠肝脏中糖异生基因葡萄糖-6-磷酸酶(G6P)和磷酸烯醇丙酮酸羧化酶的mRNA相对表达水平[(0.46±0.11)和(0.72±0.07)]均低于野生型小鼠[(1.02±0.07)和(1.02±0.06)](P值均<0.05).结论 全器官ppp2r1a基因对成年小鼠的存活是必不可少的,且ppp2r1a基因可能通过调控肝脏葡萄糖和胆固醇代谢发挥重要作用.

目的 明确PPP2R2C蛋白在不同发育阶段的小鼠睾丸中的表达与定位,探讨染料木黄酮(GEN)对新生小鼠睾丸组织PPP2R2C、细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)和波形蛋白(Vimentin)表达的影响.方法 选用出生后1、6、10、15、20、30、60 d的雄性小鼠,采用免疫荧光技术观察PPP2R2C蛋白在各发育阶段小鼠睾丸中的细胞定位和表达;用2～3日龄雄性小鼠,取睾丸组织随机分为5组,即DMSO溶剂对照组和4个GEN剂量组(终浓度6.25、12.5、25、50μmol/L).旋转通气法体外培养72 h,HE染色观察睾丸组织病理改变,Real-time PCR测定蛋白PPP2R2C、CDK2和Vimentin mRNA表达.结果 免疫荧光结果发现PPP2R2C蛋白在小鼠睾丸间质细胞和其他细胞胞浆内表达;HE染色显示,各GEN剂量组均出现睾丸组织病理改变;Real-time PCR检测显示,6.25 μmol/L GEN组PPP2R2C mRNA表达高于对照组(P=0.021),各剂量组CDK2 mRNA表达呈下降趋势(P＞0.05),GEN各剂量组Vimentin mRNA表达略有降低,但是差异无统计学意义(P＞0.05).结论 本研究首次发现PPP2R2C蛋白在小鼠睾丸组织中表达,其可能参与了小鼠睾丸发育、细胞分裂和精子发生过程.GEN可能通过调节体外培养小鼠睾丸PPP2R2C、CDK2和Vimentin基因的表达,影响睾丸发育和精子发生过程.

目的 探讨PPP2R5C小干扰RNA的安全性.方法 利用原子力显微镜观察转染PPP2R5C小干扰RNA 72 h K562细胞株干扰组、空转组及阴性对照组间微观形态学变化;利用荧光实时定量PCR检测K562细胞株组、健康人骨髓单个核细胞组、转染PPP2R5C-siRNA的健康人骨髓单个核细胞组及空转的健康人骨髓单个核细胞组的PPP2R5C基因表达量;利用甲基纤维素半固体培养方法分析PPP2R5C小干扰RNA作用后, 对转染组(siRNA)及空转组(MOCK)的健康人骨髓单个核细胞体外分化及增殖能力的影响.结果转染PPP2R5C小干扰RNA 72 h K562细胞株各组间在细胞高度和半径上的差异无统计学意义(P＞ 0.05); 3例健康人骨髓单个核细胞中的PPP2R5C基因表达明显低于K562, 差异有统计学意义(P ＜0.05);转染前后骨髓单个核细胞中PPP2R5C基因表达量无明显变化.PPP2R5C-siRNA转染、种板后14 d, 健康人骨髓单个核细胞体外BFU-E、CFU-GM、CFU-Meg的形成与MOCK对照组比较差异无统计学意义(P=0.723、0.826、0.448).结论 PPP2R5C小干扰RNA对健康人骨髓单个核细胞的体外增殖和分化无显著影响, 初步说明其安全性.

目的 研究染料木黄酮(genistein,GEN)对青春期前雄性大鼠生殖系统影响的机制.方法 选用30只初断乳(21日龄)SPF级雄性SD大鼠,随机分为对照组(Con组)、GEN低剂量组(G1组)、GEN高剂量组(G2组),每组10只.根据大鼠体质量,分别以5mL/kg玉米油、150 mg/kg和300 mg/kg用玉米油溶解的GEN灌胃6周,隔天称取体质量1次.6周后处死大鼠,解剖睾丸、附睾、前列腺组织,计算脏器系数;观察睾丸组织病理结构变化;计数精子数量并计算精子畸形率;放射免疫法检测血清中睾酮和雌二醇的质量浓度;免疫荧光技术检测睾丸组织中蛋白磷酸酶2调节亚基2C(PPP2R2C)蛋白的表达定位;分别采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测大鼠睾丸组织中PPP2R2C和细胞周期依赖性蛋白激酶(CDK2)的mRNA和蛋白表达水平;免疫共沉淀法检测睾丸组织中蛋白磷酸酶2A(PP2A)活性.结果 各组大鼠体质量、精子数量、血清雌二醇、PP2A酶活性差异均无统计学意义(P＞0.05);G2组睾丸组织的病理结构紊乱;G1和G2组的精子畸形率高于Con组(P＜0.05);G2组的血清睾酮质量浓度低于Con组(P＜0.05);G2组PPP2R2C和CDK2的mRNA水平高于Con组(P＜0.05),但蛋白水平低于Con组(P＜0.05);PPP2R2C蛋白在各组睾丸组织中均有表达.结论 青春期前长期暴露高剂量(300 mg/kg)GEN会对雄性大鼠成年后的生殖功能造成不良影响.由于在PP2A酶活性没有改变的情况下,磷酸化CDK2(p-CDK2)蛋白的表达量出现下降,PPP2R2C-PP2A-CDK2磷酸化路径可否影响大鼠的生殖系统仍需进一步研究.