-
结肠癌转移相关基因1和Polo样激酶1在结直肠癌组织的表达及其临床意义
编辑人员丨1周前
目的:探讨结直肠癌组织中结肠癌转移相关基因1(MACC1)和Polo样激酶1(PLK1)表达的临床意义。方法:收集2016年4月至2021年3月大庆油田总医院资料完整的结104例结直肠癌组织标本及癌旁正常组织标本,采用免疫组织化学法检测各组织中MACC1蛋白和PLK1蛋白表达,采用 χ2检验分析评估MACC1和PLK1的表达水平与结直肠癌临床病理因素之间的关系。 结果:MACC1蛋白在结直肠癌组织中表达率为73.08%(76/104),明显高于癌旁组织中表达率15.39%(16/104),两者差异有统计学意义( χ2=70.165, P<0.01);PLK1蛋白在结直肠癌组织中表达率为57.70%(60/104),明显高于癌旁组织中表达率24.04%(25/104),两者差异有统计学意义( χ2=24.371, P<0.01)。MACC1表达水平与结直肠癌淋巴结转移、浸润深度、TNM分期明显相关( χ2=4.697、6.307、6.899, P<0.05),PLK1表达水平与结直肠癌淋巴结转移、组织学分化程度、TNM分期明显相关( χ2=5.446、5.5076、6.307, P<0.05)。 结论:MACC1蛋白和PLK1蛋白表达与结直肠癌侵袭和转移密切相关,检测上述两种指标,并与临床指标结合,将能更准确判断结直肠癌生物学行为及预后、并指导临床治疗。
...不再出现此类内容
编辑人员丨1周前
-
Plk4在脑胶质瘤中的功能及其分子机制研究
编辑人员丨1周前
目的:探讨Polo样激酶4(Plk4)在脑胶质瘤中的表达特征、生物学功能及其相关分子机制。方法:纳入癌症基因组图谱(TCGA)数据库(689例)、中国胶质瘤基因组图谱(CGGA)数据库(693例)中脑胶质瘤患者的胶质瘤样本的转录组和临床数据,纳入基因型和基因表达量关联(GTEx)数据库中正常脑组织标本的转录组数据(255例)。比较脑胶质瘤标本与正常脑组织中,以及不同病理学分级脑胶质瘤标本中Plk4 mRNA表达量的差异;采用log-rank检验法比较Plk4 mRNA低表达组与高表达组患者总生存期的差异。取人星形胶质细胞、U87、LN229、U251及A172细胞株行相关研究。采用小干扰RNA(siRNA)转染法敲低U87和LN229细胞中Plk4的表达;采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测Plk4 mRNA的表达;采用蛋白质免疫印迹法检测Plk4蛋白的表达;采用EdU实验和Transwell实验观察Plk4对胶质瘤细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。取4周龄雌性BALB/c-nu裸鼠20只,将U87细胞注射于小鼠腹部制备胶质瘤异种荷瘤模型,观察Plk4敲低组(肿瘤内注射siRNA-Plk4, n=10)与无义序列组(肿瘤内注射无序列Plk4, n=10)治疗21 d(7次)后肿瘤体积和重量的差异。取敲低Plk4的U87细胞,采用蛋白组学和磷酸化组学的关联分析方法探讨Plk4在胶质瘤中的生物学功能及其分子机制。 结果:与星形胶质细胞相比,U87、LN229、U251及A172细胞株中Plk4 mRNA的表达水平均升高;TCGA联合GTEx数据库数据分析显示,低级别胶质瘤及胶质母细胞瘤标本中Plk4 mRNA的表达量均高于正常脑组织;对CGGA数据库中标本的分析显示,Plk4 mRNA的表达量随世界卫生组织(WHO)病理学分级的升高而升高;2个数据库中Plk4 mRNA高表达组患者的总生存期均短于低表达组患者。EdU实验显示,敲低Plk4表达的U87和LN229细胞的EdU阳性率均低于其无义序列细胞。Transwell实验显示,敲低Plk4表达的U87和LN229细胞的穿胶数和迁移数均低于其无义序列细胞。体内实验结果表明,Plk4敲低组的裸鼠皮下肿瘤的生长速度明显慢于无义序列组。上述数据比较差异均有统计学意义(均 P<0.01或0.05)。在蛋白组学分析中,共鉴定到428个差异表达蛋白。在磷酸化组学分析中,共鉴定到1 180个差异表达的磷酸化肽段,对应于728个磷酸化蛋白。将蛋白组学和磷酸化组学的结果进行关联分析后发现,蛋白组学和磷酸化组学关联上2 197个蛋白,其中66个只在蛋白水平有改变,590个只在磷酸化水平有改变,25个在蛋白和磷酸化水平均有改变。对只在磷酸化水平有改变的590个蛋白进行基因本体(GO)功能注释和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析发现,590个蛋白的功能主要为细胞进程和生物学调控等,主要富集的通路是志贺菌病和神经退行性变途径等。 结论:Plk4 mRNA在脑胶质瘤中呈高表达,可能与患者的预后有关;其机制可能通过细胞进程等信号通路促进胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭有关。Plk4可能是脑胶质瘤诊断和预后的分子标志物和药物治疗潜在的靶点。
...不再出现此类内容
编辑人员丨1周前
-
Polo样激酶1和鼠双微体基因2在胃癌组织的表达及其临床意义
编辑人员丨1周前
目的:探讨Polo样激酶1(PLK1)以及鼠双微体基因2(MDM2)在胃癌组织的表达及其与临床病理因素之间的关系。方法:选取长治医学院附属和济医院和长治市人民医院2017年4月至2021年3月病理确诊的99例胃癌组织和癌旁组织,应用免疫组织化学方法检测组织中PLK1蛋白以及MDM2蛋白表达水平,采用 χ2检验并结合临床资料分析PLK1蛋白和MDM2蛋白与胃癌临床病理特征之间的关系。 结果:胃癌组织PLK1蛋白表达率为79.80%(79/99)、对应癌旁组织PLK1蛋白表达率为12.12%(12/99),两者差异有统计学意义( χ2=91.283, P<0.01),胃癌组织MDM2蛋白表达率为66.67%(66/99)、对应癌旁组织MDM2蛋白表达率为26.26%(26/99),两者差异有统计学意义( χ2=32.486, P<0.01)。PLK1表达水平与胃癌TNM分期、淋巴结转移明显相关( χ2=5.602、6.550, P<0.05);MDM2表达水平与胃癌TNM分期、组织学分化程度、淋巴结转移明显相关( χ2=5.263、9.949、4.583, P<0.05)。 结论:PLK1蛋白和MDM2蛋白过度表达可能促进胃癌恶性增殖及转移,联合检测上述两项指标有助于判断胃癌恶性程度、转移潜能和预后。
...不再出现此类内容
编辑人员丨1周前
-
Polo样激酶4抑制剂Centrinone通过调控PI3K/AKT通路影响胃癌细胞增殖和凋亡
编辑人员丨2023/12/30
目的:探讨Polo样激酶4(PLK4)抑制剂Centrinone对胃癌细胞的增殖、迁移、凋亡的影响并进一步研究其抗肿瘤机制.方法:在TCGA数据库中分析PLK4基因在胃癌及癌旁组织的表达及对预后的影响;在人类蛋白组数据库中分析PLK4在胃癌组织中的定位;利用不同浓度(0、1、2、5 μmol/L)的Centrinone处理不同胃癌细胞系,再通过CCK8法检测细胞生长情况;用transwell小室检测Centrinone对AGS细胞迁移能力的影响;用流式细胞术检测AGS细胞凋亡的情况;通过Western blot检测凋亡相关蛋白聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶(PARP)、半胱天冬酶-3(Caspase-3)、BCL-2、BAX等的变化.结果:通过TCGA数据库分析发现PLK4在胃癌中的表达量显著高于癌旁组织(P<0.05),且与胃癌预后相关(P=0.001).细胞生长实验显示Centrinone对AGS、BGC和SGC均有显著的生长抑制作用,其中AGS最敏感(IC50=1.386 μmol/L).细胞迁移实验提示Centrinone浓度越大,胃癌细胞迁移的数量越少(P<0.05).流式细胞术实验结果显示Centrinone浓度越大,细胞凋亡比例越高(P<0.05).Western blot结果显示Centrinone浓度越大,凋亡相关蛋白PARP和Caspase-3的裂解体表达量增多越明显(P<0.05),BCL-2蛋白表达量减少越明显(P<0.05),而BAX的蛋白表达量变化不明显(P>0.05),同时检测发现PI3K和AKT的磷酸化蛋白表达量显著减少(P<0.05).结论:PLK4抑制剂Centrinone可以显著抑制胃癌细胞增殖和迁移,并诱导细胞凋亡,可能通过抑制BCL-2表达及对PI3K/AKT信号通路调控发挥作用.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2023/12/30
-
Nanog和PLK4蛋白表达在卵巢上皮癌中的临床意义
编辑人员丨2023/8/6
目的 探讨Nanog和PLK4蛋白表达在卵巢上皮癌发生发展中的作用和意义.方法 采用免疫组化SP法检测40例卵巢上皮癌组织及40例卵巢良性肿瘤组织中Nanog和PLK4的表达,研究Nanog和PLK4与卵巢上皮癌临床病理特征之间的关系.结果 卵巢上皮癌组织中Nanog和PLK4蛋白的表达阳性率明显高于卵巢良性肿瘤组织(χ2=33.885,39.596,P<0.01),IGO 分期Ⅲ ~Ⅳ期者 Nanog 和 PLK4阳性表达率明显高于Ⅰ ~Ⅱ期者(χ2=8.286、4.322,P<0.05),病理低分化程度者 Nanog和 PLK4阳性表达率高于中高分化者(χ2=4.268、4.268,P<0.05),有淋巴结转移者Nanog和PLK4蛋白阳性表达率高于无淋巴结转移者(χ2=10.667、6.000,P<0.05).结论Nanog和PLK4的表达与卵巢上皮癌的病理分级、有无淋巴结转移以及FIGO分期有关,两者可能在卵巢组织的恶性转变和细胞分化中发挥者重要的作用.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2023/8/6
-
磁小体介导的纳米复合物磁小体/Polo样蛋白激酶1基因的干扰质粒/柔红霉素的制备及表征检测
编辑人员丨2023/8/6
目的 将热激启动子(pHSP)调控的Polo样蛋白激酶1(shPLK1)以及柔红霉素(DOX)耦联于载体磁小体(BMs)上,制备复合物磁小体/PLK1基因/柔红霉素(BMs/pHSP-shPLK1/DOX)的干扰质粒并检测其表征.方法 改变趋磁细菌培养液中成分优化趋磁细菌AMB-1的培养条件;分离纯化磁小体,在电镜下观察磁小体的形态;利用聚乙烯亚胺(PEI)将质粒pHSP-shPLK1和DOX耦联至BMs构建复合物BMs/pHSP-shPLK1/DOX,检测复合物的粒径及电荷;观察在交变磁场(AMF)中复合物的产热效应及DOX的释放率;细胞免疫荧光检测复合物处理后U20S细胞中绿色荧光蛋白(GFP)的表达.结果 趋磁细菌AMB-1的最佳生长条件为:以20 μmol/L FeSO4为铁源,以800 mg/L NaNO3为氮源,以200 mg/L的琥珀酸为碳源;电镜显示磁小体大小均匀,分散度好;复合物BMs/pHSP-shPLK1/DOX的粒径为(129.5±9.7) nm,Zeta电位为(-11.7±2.9)mV;在AMF下,复合物可在3 min之内升温至42℃,并维持30 min,该条件下,在24 h及48 h,50%胎牛血清(FBS)组上清液中DOX含量均明显高于磷酸盐缓冲液(PBS)组(t24 h=6.887,P24 h=0.020;t48 h=17.145,P48 h =0.000),50% FBS中DOX的释放率可达到54%;复合物处理后的细胞可见明显的GFP蛋白表达 .结论 成功制备BMs介导的复合物BMs/pHSP-shPLK1/DOX.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2023/8/6
-
Polo样激酶1(PLK1)的敲低及其对宫颈癌HeLa细胞生长的抑制作用
编辑人员丨2023/8/6
目的 研究敲低Polo样激酶1(PLK1)后对宫颈癌HeLa细胞生长的作用.方法 流式细胞术评测LAH4-L1载体对小干扰绿色荧光蛋白基因(siGFP)的递送效率;反转录PCR检测PLK1 mRNA水平,Western blot法检测PLK1蛋白水平;敲低PLK1水平后,采用CCK-8法检测HeLa细胞活性和生长抑制情况.结果 LAH4-L1-siPLK1纳米复合物可下调HeLa细胞PLK1约70%,并降低PLK1蛋白的表达,敲低PLK1后,可明显抑制HeLa细胞增殖.另外,LAH4-L1载体的基因递送效率能够稳定维持在较高水平.结论 敲低HeLa细胞PLK1抑制癌细胞生长,LAH4-L1是一个较好的基因递送载体.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2023/8/6
-
PLK4在结直肠癌中的表达及临床意义
编辑人员丨2023/8/6
背景与目的:Polo样蛋白激酶4(Polo-like kinases 4,PLK4)主要参与调控中心体的复制进程,过表达PLK4能够诱导肿瘤细胞中心体扩大、染色体不稳定及肿瘤侵袭性增强.该研究旨在探讨PLK4在人结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中的表达及临床意义.方法:收集19例CRC组织及对应癌旁组织的新鲜标本,129例CRC组织及癌旁组织的石蜡标本.应用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测19例CRC组织及对应癌旁组织中PLK4 mRNA的表达;采用免疫组织化学法检测129例CRC患者手术切除石蜡标本的PLK4蛋白的水平,分析PLK4表达与CRC临床病理指标之间的相关性及与预后的相关性.结果:RTFQ-PCR显示,PLK4 mRNA表达在CRC组织中明显高于癌旁组织(P<0.01),免疫组织化学结果显示,PLK4蛋白阳性信号定位于细胞质及部分细胞核.PLK4蛋白在129例CRC组织中低表达62例,高表达67例,PLK4蛋白在CRC组织中的表达显著高于癌旁组织(P<0.01),PLK4蛋白水平与CRC分化程度(P=0.001?1)、N分期(P<0.000?1)、M分期(P=0.035?8)和TNM分期(P<0.000?1)呈正相关.Kaplan-Meier生存曲线显示,PLK4低表达组中位生存时间为27个月,高表达组中位生存时间为12个月,组间总生存率(overall survival,OS)差异有统计学意义,PLK4高表达组OS明显低于PLK4低表达组(P<0.000 1).多因素COX比例风险模型分析显示,PLK4高表达不是CRC的独立预后因素(P=0.176).结论:PLK4在CRC组织中高表达,并且与CRC组织分化差、淋巴结转移、远处转移及TNM分期相关;PLK4高表达提示CRC预后差,但不是独立预后因素.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2023/8/6
-
Polo样激酶4在肝细胞癌中的表达与临床病理因素和预后的关系
编辑人员丨2023/8/6
Polo样激酶(Polo-like kinase,PLK)在细胞周期进程和DNA损伤反应中有重要作用.PLK4最初在果蝇中被发现,是一种高度保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,其结构与PLK家族其他成员不同,主要参与调控中心体的复制和细胞周期进程[1],过表达PLK4能诱导肿瘤细胞中心体扩大、染色体不稳定和肿瘤侵袭性增强[2-3].本研究旨在明确PLK4 mRNA和蛋白质在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma)中的表达及其与肝细胞癌患者临床病理指标、预后的关系.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2023/8/6
-
术前新辅助化疗对宫颈癌患者手术切除病灶内恶性分子表达的影响
编辑人员丨2023/8/6
目的 研究术前新辅助化疗对宫颈癌患者手术切除病灶内恶性分子表达的影响.方法 选择2015年3月—2017年6月期间在南方医科大学附属小榄医院妇产科诊断为Ⅰb2和Ⅱa2期宫颈癌患者118例,随机数字表法分为2组各59例,试验组接受新辅助化疗联合手术切除,对照组直接接受手术切除治疗.取手术切除的宫颈癌组织,测定促增殖分子[Ki-67、人细胞周期相关激酶(CCRK)、细胞周期蛋白B1(CyclinB1)、细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)、Polo样激酶1(Plk1)、生成素(Survivin)]、抑癌基因[多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1(LRIG1)、p16基因、真核起始因子4E3(eIF4E3)、N-myc下游调节基因4(NDRG4)、Ras相关结构域因子2A(RASSF2A)、增强子结合蛋白1(Ebp1)]及侵袭基因[β-连环蛋白(β-catenin)、基质金属蛋白酶-8(MMP-8)、解聚素—金属蛋白酶19(ADAM19)、金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP1)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)]的表达量.结果 试验组患者的宫颈癌病灶内促增殖分子Ki-67、CCRK、CyclinB1、CDK1、Plk1、Survivin和促侵袭基因β-catenin、MMP8、ADAM19的mRNA表达量显著低于对照组(t=22.019、26.009、15.096、21.991、26.727、14.592、14.309、21.111、18.154,P=0.000),抑癌基因LRIG1、p16、eIF4E3、NDRG4、RASSF2A、Ebp1和侵袭基因TIMP1、E-cadherin的mRNA表达量显著高于对照组(t=19.018、18.706、16.997、20.411、25.332、20.446、22.476、20.289,P=0.000).结论 术前新辅助化疗能够抑制宫颈癌病灶内促增殖分子及促侵袭基因的表达,促进抑癌基因及侵袭抑制基因的表达.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2023/8/6
