目的:探讨同源盒家族中的人类同源盒C6(HOXC6)基因在前列腺癌中的表达情况及其对前列腺癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响及机制.方法:应用基于基因表达水平值的交互式分析平台(GEPIA)数据库中关于HOXC6 研究的数据,对其在前列腺癌中的表达水平变化进行分析.采用GEPIA数据库分析HOXC6 表达水平与前列腺癌患者生存预后之间的关系.通过Western印迹检测HOXC6 蛋白在前列腺癌组织、正常前列腺组织及不同前列腺癌细胞株 DU-145、PC-3 以及正常人前列腺上皮细胞 RWPE-1 中的表达情况.在人前列腺癌细胞DU145、PC-3 和正常人前列腺上皮细胞RWPE-1 中,利用siRNA质粒稳定干扰HOXC6 基因表达,采用CCK8、平板克隆、划痕、Transwell侵袭实验检测HOXC6 基因对前列腺癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响.通过GEPIA数据库分析Wnt抑癌因子分泌型卷曲相关蛋白 1(SFRP1)基因与 HOXC6 的相关性,采用 Western 印迹检测 HOXC6-siRNA转染后PC-3 细胞中HOXC6、SFRP1、Wnt及β-catenin蛋白表达.结果:HOXC6 在前列腺癌组织中的表达高于正常前列腺组织(P<0.01),在前列腺癌细胞中的表达高于正常前列腺上皮细胞(P<0.01).结合生物信息学分析,HOXC6 高表达的PCa患者比低表达的生存率低(P=0.011).siRNA组HOXC6 蛋白相对表达量、吸光度值、克隆形成数、侵袭细胞数低于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05).通过GEPIA数据库发现SFRP1 高表达的前列腺癌患者预后较好,在体外实验中,前列腺癌PC-3 细胞系中,Western印迹分析Wnt及β-catenin蛋白的表达均上升,SFRP1 蛋白表达明显下降(P<0.05);与siRNA-NC、前列腺癌PC-3 相比,siRNA-HOXC6 转染组中的Wnt及β-catenin蛋白的表达均明显下降,SFRP1 蛋白表达上升(P<0.05).结论:HOXC6 在前列腺癌组织中高表达,并与前列腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭有关;HOXC6 通过抑制 SFRP1/Wnt/β-catenin信号通路从而促进前列腺癌DU145、PC-3 细胞的生长,HOXC6 有可能是临床治疗前列腺癌的潜在靶标.

目的 探究环氧合酶-2(COX-2)、前列腺素E2(PGE2)在前列腺癌组织、PC-3细胞中的表达及与PC-3细胞生物学行为的关系.方法 选取2021年1月至2023年1月在长江航运总医院进行手术切除治疗的81例前列腺癌患者作为研究对象,收集其癌组织及癌旁组织.采用免疫组织化学染色法检测组织标本COX-2、PGE2蛋白阳性表达;分析癌组织COX-2、PGE2蛋白表达与临床病理特征的关系.体外培养前列腺癌PC-3细胞和正常前列腺上皮细胞RWPE-1,将PC-3细胞随机分为PC-3组、siRNA-NC组、siRNA-COX-2 组,RWPE-1 细胞常规培养设为 RWPE-1 组.检测 PC-3、RWPE-1 细胞 COX-2 mRNA、PGE2水平和PC-3细胞活力、凋亡情况、迁移数目.结果 与癌旁组织比较,前列腺癌组织中COX-2、PGE2蛋白阳性表达率显著升高(P＜0.05);有淋巴结转移、TNM Ⅲ期、前列腺特异性抗原(PSA)≥10 ng/mL患者前列腺癌组织中COX-2、PGE2蛋白阳性比例分别高于无淋巴结转移、TNM Ⅰ～Ⅱ期、PSA＜10 ng/mL患者(P＜0.05);与RWPE-1组比较,PC-3组PC-3细胞COX-2 mRNA、PGE2水平显著升高(P＜0.05);与 PC-3 组、siRNA-NC 组比较,siRNA-COX-2 组 PC-3 细胞 COX-2 mRNA、PGE2 水平、细胞活力、迁移数目显著降低,凋亡数目显著升高(P＜0.05).结论 前列腺癌组织和PC-3细胞中COX-2、PGE2呈高表达,沉默COX-2表达可降低PGE2水平从而抑制前列腺癌PC-3细胞活力和迁移能力,促进PC-3细胞凋亡.

目的:观察长链非编码RNA(lncRNA)特异性核基质结合区结合蛋白1(SATB1)-AS1在前列腺癌中的表达，并分析lncRNA SATB1-AS1与SATB1的相关性。方法:采用荧光原位杂交(FISH)方法检测前列腺癌及其癌旁组织中SATB1-AS1表达。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测4株前列腺癌细胞株(PC3、DU145、22RV1、LNCAP)和人正常前列腺上皮细胞株(RWPE1)中SATB1-AS1表达。应用TCGA数据库及整合基因组浏览器(IGV)软件比对SATB1与SATB1-AS1的相关性。结果:荧光杂交结果显示，SATB1-AS1在定位在细胞核、细胞质。RT-qPCR结果显示在前列腺癌细胞22RV1、LNCAP中SATB1-AS1表达水平明显高于DU145、PC3(4.20±1.25、42.58±8.30和0.50±0.02、1.58±0.33， F＝22.512， P<0.05)。TCGA数据库分析SATB1-AS1与SATB1呈正相关( r＝0.670， P<0.001)；IGV软件比对美国国立生物技术信息中心(NCBI)内发现SATB1启动子序列与SATB1-AS1部分序列完全重合。 结论:SATB1-AS1在前列腺中表达，且可能通过与SATB1基因启动子结合进而调控SATB1基因表达。

目的:分析lncRNA NPIPA9在前列腺癌组织中的相对表达量，通过过表达lncRNA NPIPA9检测miR-210-3p的相对表达量及对前列腺癌细胞生长和迁移的影响。方法:通过Oncomine数据库分析lncRNA NPIPA9在前列腺癌组织中的相对表达量。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测lncRNA NPIPA9在前列腺癌细胞株DU-145、PC-3、C4-2B、22Rv1、LNCaP和正常前列腺上皮细胞RWPE-1中的相对表达量。体外培养前列腺癌PC-3细胞，分为两组：NPIPA9组和对照组，NPIPA9组转染100 nmol/L lncRNA NPIPA9载体，对照组转染100 nmol/L对照载体。CCK-8法检测PC-3细胞的增殖活力。Transwell实验检测PC-3细胞的迁移能力。生物信息学技术预测lncRNA NPIPA9的潜在靶点。双荧光素酶报告基因实验确定lncRNA NPIPA9和miR-210-3p的靶向结合关系。RT-qPCR检测lncRNA NPIPA9对前列腺癌细胞中miR-210-3p相对表达量的影响。Western blotting法检测lncRNA NPIPA9对前列腺癌细胞中核因子κB(NF-κB)通路蛋白表达量的影响。计量资料以均数±标准差( ± s)表示，两组间比较采用 t检验，多组间比较采用单因素方差分析。 结果:前列腺癌组织中lncRNA NPIPA9相对表达量低于癌旁组织，差异具有统计学意义( P<0.01)。前列腺癌细胞株中lncRNA NPIPA9相对表达量均低于RWPE-1细胞，差异具有统计学意义( P<0.01)；前列腺癌PC-3细胞中lncRNA NPIPA9相对表达量最低，差异具有统计学意义( P<0.01)。与对照组相比，lncRNA NPIPA9对前列腺癌PC-3细胞活力具有抑制作用，差异具有统计学意义( P<0.05)。对照组和NPIPA9组PC-3细胞迁移数目分别为(101.70 ± 8.63)、(45.97 ± 8.83)个，lncRNA NPIPA9对PC-3细胞迁移具有抑制作用，差异具有统计学意义( P<0.01)。lncRNA NPIPA9可以直接靶向结合miR-210-3p，差异具有统计学意义( P<0.01)。对照组和NPIPA9组PC-3细胞中miR-210-3p相对表达量分别为5.32±0.79和1.11±0.56，lncRNA NPIPA9可直接下调PC-3细胞中miR-210-3p表达，差异具有统计学意义( P<0.01)。与对照组相比，lncRNA NPIPA9能够降低PC-3细胞中NF-κB通路蛋白c-Myc、MMP-9、VEGF、p65、p50表达。 结论:lncRNA NPIPA9在前列腺癌组织中表达下调，其通过靶向并负调控miR-210-3p，降低前列腺癌PC-3细胞的增殖和迁移能力。

目的:探讨双头框蛋白N2(FOXN2)在前列腺癌(PCa)组织中的表达以及对PCa细胞生物学的影响。方法:选取宜宾市第二人民医院50例接受手术治疗的PCa患者的标本及癌旁组织，通过RT-qPCR实验和Western blot实验分别检测PCa组织和癌旁组织中的FOXN2 mRNA及蛋白的表达水平，并分析PCa组织中FOXN2与患者临床病理特征的相关性。通过RT-qPCR实验检测正常前列腺细胞RWPE-1、PCa细胞PC-3、DU145、LNCaP中FOXN2 mRNA的表达水平。选取PC-3细胞为研究对象，分为FOXN2过表达组、空载体对照组以及对照组，分别通过MTT实验、流式细胞实验、Transwell实验以及Western blot实验检测各组细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭情况以及相关蛋白Bax、CyclinD1、MMP-2的表达量。结果:结果与癌旁组织相比，FOXN2的mRNA和蛋白表达水平显著降低( P<0.05)，与TCGA数据库中结果一致。FOXN2低表达与PCa患者淋巴转移、TNM分期以及Gleason评分有关( P＝0.003、0.005、0.002)。与人正常前列腺细胞RWPE-1相比，FOXN2在PCa细胞PC-3、DU145、LNCaP中均呈现低表达( P<0.05)，其中PC-3细胞中表达量最低。与对照组和空载体对照组相比，FOXN2过表达组的PC-3细胞在作用24 、48 、72 h后增殖能力显著下降( F＝290.400、57.735、113.014， P<0.05)，CyclinD1蛋白表达水平显著下降( P<0.05)；PC-3细胞的凋亡率显著升高( P<0.05)，Bax蛋白表达水平显著升高( P<0.05)；PC-3细胞的迁移和侵袭能力显著下降( P<0.05)，MMP-2蛋白表达水平显著下降( P<0.05)。 结论:FOXN2在PCa组织及细胞中低表达，过表达FOXN2可抑制PCa细胞的增殖、迁移和侵袭，并促进细胞凋亡。

目的:通过生物信息学及机器学算法筛选及分析前列腺癌的关键表达基因，探究诊断前列腺癌的生物标志物及与前列腺癌免疫细胞浸润的相关性。方法:使用生物信息学方法从基因表达谱(GEO)数据库中下载3个前列腺癌组织信使RNA(mRNA)芯片数据集：其中GSE46602和GSE69334作为训练集，GSE32571作为验证集。对数据集GSE46602及数据集GSE69223两个数据集进行合并分析后获得差异表达基因(DEGs)，京都基因与基因组百科全书(KEGG)、基因本体论(GO)、疾病富集分析(DO)与基因富集分析(GSEA)用于功能富集分析。Lasso回归筛选特征基因11个，支持向量机(SVM)筛选特征基因2个，取交集为两个特征基因丝氨酸蛋白酶(HPN)、角蛋白23(KRT23)，将两个基因在数据集GSE32571中进行验证，同时通过实时荧光定量聚合酶链反应在前列腺癌相关细胞系中进行验证，最后进一步分析了两个特征基因与免疫细胞浸润相关联系，两组间使用Student’s t检验评估统计学意义。 结果:通过对GEO数据库3个前列腺癌数据集使用R语言及机器学习等方法进行分析，总共发现35个DEGs和两个核心基因，其中20个为下调基因，15个为上调基因。通过GO、KEGG、DO及GSEA通路分析发现这些基因富集在表皮细胞分化、角质形成等功能中，以细胞外基质受体相互作用及雌激素受体通路等信号上。通过套索算法(LASSO)及SVM筛选出的特征基因与数据集GSE32571进行检验，发现HPN、KRT23是前列腺癌的2个诊断生物标志物，在前列腺腺癌细胞系中mRNA水平进行验证符合生物信息分析结果，HPN在Du145、PC3、Vcap、Lncap、C4-2、22RV1组相对表达量(1.10±0.29、0.46±0.12、3.02±0.79、1.58±0.09，0.39±0.02，0.41±0.07)指标高于RWPE1组(0.09±0.01)，差异有统计学意义( t＝6.000、5.030、6.400、27.980、15.600、6.870， P<0.05)，KRT23在Du145、PC3、Vcap、Lncap、C4-2、22RV1组相对表达量(0.42±0.01、0.15±0.03、0.15±0.02、0.15±0.03、0.62±0.09、0.04±0.01)指标低于RWPE1组(1.01±0.19)，差异有统计学意义( t＝5.210、7.600、7.620、7.580、3.120、8.630， P<0.05)，且HPN、KRT23与免疫细胞相关，HPN与T细胞CD8、静息肥大细胞、静息树突状细胞呈负相关，与巨噬细胞M0呈正相关；KRT23与巨噬细胞M0呈负相关，与静息树突状细胞、静息肥大细胞呈正相关。 结论:HPN、KRT23可以作为前列腺癌的诊断性生物标志物，且HPN、KRT23与滤泡辅助性T细胞及调节性T细胞等免疫细胞相关。

目的:探讨长链非编码RNA 565686(lncRNA-565686)对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法:收集武汉大学人民医院2017年1月至2020年1月行前列腺癌根治术的33例前列腺癌组织和同期行经尿道前列腺电切术的45例良性前列腺增生组织标本，采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测lncRNA-565686在前列腺组织和前列腺癌细胞的相对表达水平。在前列腺癌细胞(PC-3)中转染lncRNA-565686短发卡RNA，分别将未转染短发卡RNA、转染空载体和转染短发卡RNA细胞分为未转染组、空载体转染组和转染组。分别采用细胞克隆增殖实验检测细胞增殖能力；采用细胞迁移和侵袭实验(Transwell实验)检测细胞迁移和侵袭能力；采用双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA-565686与微小RNA-195(miR-195)的靶向调控关系。组间比较采用 t检验。 结果:前列腺癌组织中lncRNA-565686的相对表达水平高于良性前列腺增生组织，差异有统计学意义(2.51±0.19比0.99±0.13， t＝39.826， P<0.05)；前列腺癌淋巴结细胞(LNCaP)、PC-3细胞中lncRNA-565686表达水平高于人正常前列腺上皮细胞(RWPE-1)细胞，差异有统计学意义(2.36±0.04和3.58±0.06比0.99±0.06， t＝40.257、68.757， P<0.05)；干扰lncRNA-565686表达后，转染组细胞增殖、迁移和侵袭能力均低于未转染组和空载体转染组。双荧光素酶报告基因实验证实lncRNA-565686与miR-195之间的直接调控关系。 结论:lncRNA-565686在前列腺癌中高表达，下调lncRNA-565686的表达可明显抑制前列腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力，其机制可能与直接负向调控miR-195的表达相关。

目的:探讨双氢睾酮(DHT)浓度波动对前列腺上皮细胞(RWPE-2细胞系)中错配修复基因MutL同源物(MLH1)表达的影响及其机制。方法:将RWPE-2细胞分为空白组，恒定组(DHT浓度为1、10 nmol/L)以及波动组(DHT浓度为1、10 nmol/L，每24 h波动1次)，以不同浓度的DHT干预不同的时间(0、24、48、72 h)，观察细胞的形态、生长状态及细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖能力；应用蛋白质印迹法(Western blot)、实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测雄激素受体(AR)信号通路靶基因[前列腺特异抗原(PSA)、FK506结合蛋白(FKBP5)]、苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路靶基因[细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)]和MLH1基因表达的改变；免疫荧光法检测基因分布位置的变化。应用Graph Pad 7.0统计软件分析，组间差异采用 t检验分析。 结果:恒定组与波动组中RWPE-2细胞形态学变化与DHT作用具有浓度(1～10 nmol/L)依赖性；CCK-8结果提示，72 h后，与空白组(6.904±0.143)比较，恒定组(7.073±0.103)、(8.508±0.187)与波动组(8.662±0.327)、(9.239±0.167)相对吸光度( A)值均增加，提示DHT干预增强细胞增殖，呈时间浓度依赖性(1～10 nmol/L)，差异有统计学意义( t＝6.805、4.922、10.6， P<0.01)；Western blot结果提示，与空白组比较，波动组与恒定组中各靶基因的mRNA及蛋白表达水平均上调，波动组较恒定组中上述基因表达进一步上调，波动组FKBP5基因较恒定组表达下调，差异有统计学意义( t＝5.488、15.730、7.976、3.695、3.952、2.830， P<0.05)；免疫荧光结果显示，与空白组比较，波动组和恒定组中各靶基因核内分布增多，且波动组上述基因分布差异更显著。 结论:DHT能上调RWPE-2细胞中错配修复基因MLH1的表达，而DHT波动会使这种趋势增加，通过AR和Akt信号通路介导的细胞增殖是其可能机制之一。

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)同源盒D基因簇反义生长相关长非编码RNA(HAGLR)对前列腺癌DU145细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及其机制。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测人前列腺癌DU145细胞和正常前列腺上皮RWPE-1细胞中HAGLR的表达水平。将体外培养的DU145细胞分为对照组(未转染)、siNC组(转染阴性对照)和siHAGLR组(转染靶向HAGLR的小干扰RNA)，采用实时荧光定量PCR检测各组细胞中HAGLR和微小RNA(miR)-6516-5p的表达水平，噻唑蓝(MTT)法、Transwell小室实验和流式细胞仪检测各组细胞增殖、侵袭和凋亡。采用双荧光素酶报告基因实验检测HAGLR和miR-6516-5p的靶向结合关系。将miR-6516-5p抑制剂(anti-miR-6516-5p)、miRNA抑制剂阴性对照(anti-miR-NC)分别与HAGLR-siRNA共转染后观察下调miR-6516-5p表达对HAGLR低表达的DU145细胞增殖、侵袭和凋亡的影响。多组间比较使用单因素方差分析和LSD- t检验，两组间比较采用独立样本 t检验。 结果:DU145细胞中HAGLR的表达水平(4.38±1.15比1.00±0.06， t＝8.727， P<0.05)明显高于RWPE-1细胞，差异有统计学意义。siNC组细胞吸光度值(1.01±0.08比0.98±0.06， t＝0.900， P>0.05)、穿膜细胞数[(119.75±8.86)个比(124.56±11.35)个， t＝1.002， P>0.05]和细胞凋亡率[(6.62±1.06)%比(6.85±1.12)%， t＝0.447， P>0.05]与对照组比较差异均无统计学意义。siHAGLR组细胞吸光度值(0.73±0.05比0.98±0.06，1.01±0.08， t对照＝9.603， tsiNC＝8.904， P<0.05)、穿膜细胞数[(55.64±4.28)个比(124.56±11.35)个，(119.75±8.86)个， t对照＝17.043， tsiNC＝19.543， P<0.05)]明显低于对照组、siNC组，而细胞凋亡率[(19.92±3.25)%比(6.85±1.12)%，(6.62±1.06)%， t对照＝11.406； tsiNC＝11.672， P<0.05]均明显高于对照组、siNC组，差异均有统计学意义。双荧光素酶报告基因实验证实miR-6516-5p可与HAGLR靶向结合降低细胞的荧光素酶活性(0.32±0.02比1.00±0.06， t＝32.255， P<0.05)，差异有统计学意义。siHAGLR+ anti-miR-6516-5p组细胞吸光度值(0.87±0.06比0.65±0.05， t＝8.450， P<0.05)、穿膜细胞数[(93.73±6.18)个比(54.05±3.83)个， t＝16.373， P<0.05]显著高于siHAGLR+anti-miR-NC组，细胞凋亡率[(9.32±1.15)%比(19.85±2.28)%， t＝0.575， P<0.05]显著低于siHAGLR+anti-miR-NC组，差异均有统计学意义。 结论:HAGLR低表达可通过靶向调控miR-6516-5p抑制前列腺癌DU145细胞增殖和侵袭并促进其凋亡。

目的:研究下调长链非编码RNA(lncRNA) THUMPD3-AS1靶向miR-185对前列腺癌细胞C4-2迁移、侵袭的影响。方法:采用qRT-PCR方法分析前列腺癌细胞22RV1、DU-145、LNcap、C4-2和正常前列腺细胞RWPE-2中THUMPD3-AS1的表达变化。将前列腺癌细胞C4-2分成对照组、si-NC组(转染siRNA对照剂)、si-THUMPD3-AS1组(转染THUMPD3-AS1 siRNA)、si-THUMPD3-AS1+Anti-miR-NC组(共转染抑制物对照剂、THUMPD3-AS1 siRNA)、si-THUMPD3-AS1+Anti-miR-185组(共转染miR-185抑制物、THUMPD3-AS1 siRNA)，采用噻唑蓝(MTT)方法分析细胞的增殖活性，采用Transwell小室检测细胞的迁移和侵袭能力，采用Western blot检测上皮性钙黏附素(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白的表达变化。采用生物信息学软件预测THUMPD3-AS1的靶基因，采用荧光素酶报告系统鉴定二者的靶向关系。结果:与正常前列腺细胞RWPE-2比较，前列腺癌细胞22RV1、DU-145、LNcap、C4-2中的THUMPD3-AS1表达水平明显升高(均P<0.05)；与前列腺癌细胞22RV1、DU-145、LNcap比较，前列腺癌细胞C4-2中的THUMPD3-AS1表达水平明显升高(均 P<0.05)。与对照组、si-NC组比较，si-THUMPD3-AS1组的前列腺癌细胞C4-2细胞增殖活性降低，细胞迁移数目、细胞侵袭数目也明显减少，vimentin、MMP-2、MMP-9蛋白表达减少，E-cadherin蛋白表达增多，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。与si-THUMPD3-AS1+Anti-miR-NC组比较，si-THUMPD3-AS1+Anti-miR-185组的前列腺癌细胞C4-2细胞增殖活性明显升高，细胞迁移数目、细胞侵袭数目增多，vimentin、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平升高，E-cadherin蛋白表达水平降低，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。与模拟物对照剂、WT共转染相比，miR-185模拟物、WT共转染后的前列腺癌细胞C4-2的荧光素酶活性降低( P<0.001)。THUMPD3-AS1和miR-185互为靶向关系。与对照组、si-NC组比较，si-THUMPD3-AS1组前列腺癌细胞C4-2中miR-185表达水平明显升高( P<0.001)。 结论:下调lncRNA THUMPD3-AS1可靶向miR-185抑制前列腺癌细胞C4-2的迁移、侵袭。