跨膜蛋白(TMEM)是一类膜蛋白，又称整合膜蛋白，包含至少一个跨膜片段。其与恶性肿瘤的增殖、侵袭和转移密切相关，TMEM48、TMEM45A/B、TMEM14A、TMEM158和TMEM206起促瘤作用，TMEM25和TMEM7起抑瘤作用，TMEM16A、TMEM17、TMEM97、TMEM88和TMEM176在不同肿瘤中起异质性作用，这些TMEM或可作为潜在的预后指标和新的治疗靶点。

目的:探究跨膜蛋白（TMEM97蛋白）对神经母细胞瘤（neuroblastoma，NB）转移的影响及潜在作用机制。方法:从GEO和TARGET数据库中下载NB的基因测序数据，分析TMEM97与预后的关联性。免疫组织化学检测患儿NB组织和对照组织中TMEM97的蛋白表达。共表达基因富集分析预测TMEM97生物学作用，并在NB细胞株SH-SY5Y中干扰或过表达TMEM97，Transwell和细胞划痕实验检测细胞迁移和侵袭的变化，Western blot检测转移相关蛋白表达水平。分析预测TMEM97与 MYCN扩增的关联性并结合荧光素酶实验检测N-myc对TMEM97转录的影响。 结果:TMEM97 mRNA在高危型NB中的表达量显著高于低危型，并与NB患儿总生存率、无病生存率呈负相关。TMEM97蛋白表达水平在NB组织中显著高于对照组织。TMEM97主要与细胞黏附相关，可显著促进NB细胞的侵袭和迁移能力，伴随有LMO1、GPC2、Syntenin-1和MMP9转移相关蛋白的显著上调。在 MYCN扩增组织中TMEM97 mRNA表达显著高于无扩增组织，并且N-myc可以直接靶向结合启动子促进TMEM97转录，干扰TMEM97的表达可显著抑制N-myc对侵袭和迁移的促进作用。 结论:TMEM97是一个不良预后因素，受转录因子N-myc直接激活转录并介导NB细胞侵袭和迁移的发生。

在药理学界,σ2受体(σ2R)早在30多年前就被描述过,但其分子特征仍模糊不清,直到最近才被确认为跨膜蛋白97(TMEM97).经研究证明σ2R/TMEM97 配体可减轻小鼠神经病理性疼痛模型的机械超敏反应,其最大抗痛作用的时间为给药后24 h.该研究试图通过解决 2 个关键问题来了解其抗神经病理性疼痛效应:σ2R/TMEM97 化合物是否通过受体选择性地发挥作用,以及它们对痛觉神经元的下游机制是什么?该研究使用了一种Tmem97全身基因敲除小鼠,发现σ2R/TMEM97 结合化合物FEM-1689,需要该基因才能在小鼠神经损伤模型中产生抗痛作用.利用小鼠背根神经节原代神经元证明,FEM-1689 能抑制整合应激反应(ISR),并通过 σ2R/TMEM97 特异性作用促进神经元生长.随后,该研究扩展了其临床转化价值,证明 FEM-1689可降低人类感觉神经元中的整合应激反应(ISR)和 p-eIF2α水平,并可减轻甲基乙二醛对 ISR的致病作用.同时,研究还证明了σ2R/TMEM97 在人类痛觉感受器和卫星胶质细胞中均有表达.这些结果证实了σ2R/TMEM97有希望成为治疗神经病理性疼痛的靶点.

目的 筛选及验证浸润性肺腺癌组织上调表达基因,寻找肺腺癌诊断和预后评估的新型分子标记物.方法 收集经手术病理证实的浸润性肺腺癌患者6例,制作癌组织及相应癌旁组织基因表达谱芯片,进一步通过Gene ontology、Pathway分析、标记物预测分析和基因网络关系分析方法对芯片数据进行处理,结合The Lung Cancer数据库检索与肺癌发生相关的mRNA信息,筛选出浸润性肺腺癌组织上调表达基因.另收集经手术病理证实的浸润性肺腺癌患者97例,抽提癌组织及相应癌旁组织RNA,逆转录,设计芯片筛选出的上调表达目的基因引物,实时荧光定量PCR技术(qPCR)扩增目的基因,以PUM1为内参基因,获得各样本组织△Ct值,与癌旁组织对比,分析103例癌组织目的基因表达情况.结果基因芯片数据结合数据库,初步筛选出浸润性肺腺癌组织14个上调表达基因,分别为SPINK1、ITGA11、TOX3、SPP1、MCM 10、MMP12、COL11A1、SIX1、FOXA1 、CLIC6、TMEM45B、GDF15、CEACAM1、ESR1.qPCR验证结果表明,与相应癌旁组织相比,SPINK1 mRNA、TOX3 mRNA、MMP12 mRNA、CLIC6 mRNA、TMEM45B mRNA在浸润性肺腺癌组织上调表达,差异均有统计学意义(P＜0.05或0.01),而ITGA11 mRNA、SPP1 mRNA、MCM10 mRNA、COL11A1mRNA、SIX1 mRNA、FOXA1 mRNA、GDF15 mRNA、CEACAM1 mRNA、ESR1 mRNA在肺腺癌组织表达未见上调,差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论本研究成功筛选及验证SPINK1、TOX3、MMP12、CLIC6、TMEM45B mRNA水平在浸润性肺腺癌组织上调表达,提示可作为肺腺癌诊断和预后评估的新型分子标记物.

目的 观察钙离子通道抑制剂地尔硫卓对肝癌MHCC97H、7402细胞增殖和运动侵袭能力的作用,探讨其相应机制.方法 采用不同浓度地尔硫卓(0、25、50、100、200、400μmol/L)干预肝癌MHCC97H、7402细胞不同时间(12、24、48 h)后,用MTT法测定地尔硫卓对肝癌细胞增殖的影响,体外细胞划痕实验检测处理后肝癌细胞运动侵袭能力;通过RT-P CR和免疫细胞化学检测地尔硫卓对肝癌细胞中TMEM16A mRNA和蛋白表达水平的影响.结果 地尔硫卓能够有效抑制肝癌MHCC97H、7402细胞的增殖和运动侵袭能力,且具有一定的时间和浓度依赖性特点(P<0.05).其中,100μmol/L浓度的地尔硫卓作用24 h对MHCC97H肝癌细胞抑制较明显,TMEM16A mRNA和蛋白表达减少(P<0.05),而50μmol/L浓度的地尔硫卓作用48 h对7402肝癌细胞抑制较明显,TMEM16A mRNA和蛋白表达减少(P<0.05).结论 地尔硫卓能一过性抑制MHCC97H、7402肝癌细胞侵袭,这种作用可能与其通过调节钙离子通道TMEM16A的mRNA和蛋白表达而发挥肿瘤抑制作用有关.

目的 应用比较蛋白质组学研究与大肝癌根治术后复发相关的蛋白质分子标志物.方法 利用同位素标记相对和绝对定量技术(iTRAQ)结合二维液相色谱-串联质谱技术(2DLC-MS/MS)分析6个月内复发组(R≤6m组,n=9)、6～12个月复发组(R6-12m组,n=9)、2年内未复发组(R＞24m,n=6)组肝癌标本,筛选不同复发时间的肝癌组织差异表达蛋白.通过荧光定量聚合酶链反应法(FQ-PCR)和Western blot对验证组患者(新鲜冰冻标本,n=30)进行差异蛋白验证;同时对验证的蛋白进行免疫组织化学分析(肝癌石蜡切片标本,n =201)并将结果与临床病理资料进行Cox回归分析.结果 筛选出10个随复发时间不同而变化较大的差异蛋白质,其中5个上调:钙结合蛋白A9(S100A9)、髓过氧化物酶(MPO)、载脂蛋白A4(APOA4)、跨膜蛋白97(TMEM97)、人核受体hblf(NR5A2);5个下调:脱氢酶/还原酶2(DHRS2)、三四氨基酸重复结构域4(TTC4)、染色质重构因子(CHD2)、4-羟苯丙酮酸双氧酶(HPD)、亚甲胺转移酶-环化脱氨酶(FTCD).FQ-PCR和Western blot验证结果显示,TMEM97在组织中的表达与质谱结果一致.免疫组织化学及Cox分析显示,TMEM97高表达、术前高血清甲胎蛋白(AFP)、肿瘤多发、肿瘤直径较大、有肉眼癌栓、有微血管癌栓、包膜不完整、术中输血为术后复发的独立危险因素.结论 大肝癌术后复发与多蛋白相关,TMEM97可能作为大肝癌根治术后复发相关的预警蛋白.

目的 观察下调跨膜蛋白97(TMEM97)对卵巢癌细胞SKOV3增殖和凋亡的影响,并探讨其相关机制.方法 将卵巢癌细胞SKOV3分为转染组(si-TMEM97组)、阴性对照组(siNC组)和空白对照组(Control组).采用实时荧光定量PCR(qPCR)及Western blot法分别在mRNA和蛋白表达水平评估转染siRNA-TMEM97后TMEM97的沉默效果;分别在转染后采用CCK-8法、PI染色法、Annexin V-FITC/PI染色法和流式细胞术检测下调TMEM97对细胞的增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响,并检测B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白质(Bax)及P38丝裂原活化蛋白激酶(P38 MAPK)通路相关蛋白(P38/MAPK、p-P38/MAPK)的表达变化.结果 si-TMEM97组细胞的增殖能力相比Control组和siNC组降低,而早期凋亡率增高(均P<0.01).si-TMEM97组细胞Bcl-2的蛋白相对表达量较Control组和siNC组降低,而Bax、p-P38/MAPK的蛋白相对表达量较Control组和siNC组增高(均P<0.05).结论 下调TMEM97的表达使卵巢癌细胞SKOV3增殖减少,凋亡增加,这可能与调节凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax表达及P38/MAPK信号通路的激活有关.

目的 探究肝硬化食管胃底静脉曲张破裂出血(EGVB)患者外周血单个核细胞中跨膜蛋白16A(TMEM16A)的表达水平及意义.方法 选择2016年2月至2019年12月在廊坊市第四人民医院就诊的206例EGVB患者作为研究对象.采用密度梯度离心法获取外周血中单个核细胞.采用蛋白质印迹法检测单个核细胞中TMEM 16A的表达水平,并分析其与EGVB患者预后的关系.结果 206例EGVB患者中97例(47.09％)预后不良.预后良好组TMEM16A的表达水平高于预后不良组,差异有统计学意义(P<0.05).多因素logistic回归分析结果显示,Child-Pugh分级、MELD评分和白细胞计数是EGVB患者预后的独立危险因素(P<0.05),而白蛋白、血钠和TMEM16A是独立保护因素(P<0.05).限制性立方样条分析结果表明TMEM16A与EGVB患者预后有关(P<0.05),且呈非线性关系(非线性检验P<0.05).与TMEM16A=0.57比较,TMEM16A<0.57时预后不良风险较高,TMEM16A>0.57时预后不良风险较低.结论 EGVB患者外周血单个核细胞中TMEM16A表达水平低提示其预后不良风险较高,检测其表达水平有助于评估患者预后情况.

目的 探讨跨膜蛋白97(TMEM97)表达与肝癌患者术后复发的关系.方法 将100例肝癌患者按照术后肿瘤是否复发分为复发组(n=37)和未复发组(n=63),检测肿瘤组织中TMEM97的表达情况,分析TMEM97与肝癌术后复发的关系.结果 复发组患者TMEM97表达水平高于未复发组患者,差异有统计学意义(P﹤0.05).Spearman相关性分析显示,TMEM97表达与肝癌术后复发呈正相关(P﹤0.05).受试者工作特征(ROC)曲线显示,TMEM97表达预测肝癌术后复发的曲线下面积为0.808(95％CI:0.717～0.898),最佳截断值为1.770,灵敏度为0.676,特异度为0.841.多因素分析显示,低分化、TNM分期为Ⅲ期、TMEM97表达≥1.770均是肝癌术后复发的危险因素(P﹤0.05).分化程度、TNM分期、TMEM97表达情况联合检测预测肝癌术后复发的灵敏度高于各指标单独检测,而特异度和准确度也较高,均在0.800以上.结论 TMEM97在肝癌患者肿瘤组织中呈高表达,其表达水平越高术后复发风险也越高,是肝癌患者术后复发的危险因素.