背景 与目的既往研究提示谷氨酰胺转胺酶2(transglutaminase 2,TGM2)是多种肿瘤的潜在治疗靶点,但其在胃癌中的作用及机制尚未明确.本研究中,我们试图揭示TGM2在胃癌中的作用和相关机制.方法 分析TGM2在胃癌细胞和组织中的表达水平,并通过一系列体内外实验分析TGM2在胃癌中的功能,包括蛋白质印迹、免疫组化、CCK8、集落形成实验、transwell实验、异种移植瘤模型和转移瘤模型.通过基因富集分析、定量PCR和蛋白质印迹筛选TGM2在胃癌中潜在的作用靶标.通过功能损益实验和挽救实验验证TGM2对STAT1的调控作用.通过免疫共沉淀、质谱分析、定量PCR和蛋白质印迹筛选STAT1互作蛋白,并阐明其调控机制.最后,通过突变TGM2和使用TGM2的酶活性调节剂(ZM39923和A23187)以明确TGM2通过何种酶活性促进胃癌恶性进展,并阐明其潜在机制.结果 研究结果表明TGM2在胃癌组织中高表达,与病理分级密切相关,其高表达预示患者不良预后.TGM2过表达/敲低能够促进/抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭.而敲低/过表达STAT1能够逆转TGM2在胃癌细胞中的作用.进一步分析提示TGM2通过抑制STAT1泛素化/降解促进胃癌恶性进展.TRIM21被鉴定为胃癌中STAT1的E3泛素连接酶.TGM2通过与GTP结合的酶活性促进TRIM21和STAT1解离.A23187能够抑制TGM2对STAT1的作用,并在体外和体内实验中逆转TGM2的促肿瘤作用.结论 本研究揭示了在胃癌中TGM2调控STAT1的作用和机制,提示TGM2可作为胃癌治疗的潜在靶点,了解TGM2与GTP结合的酶活性有助于开发靶向药物,优化现有治疗策略.

目的:探讨应用三步切除法对小阴唇-阴蒂包皮复合体进行联合缩小整形术的有效性及安全性。方法:选择2017年5月到2021年11月中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院整形美容外科收治的小阴唇及阴蒂包皮肥大患者临床资料。患者均接受三步切除法小阴唇-阴蒂包皮联合缩小整形术：(1)设计纵行梭形切口切除冗余的阴蒂外侧包皮；(2)应用黏膜瓣法切除小阴唇的肥大部分；(3)修剪小阴唇外侧面与阴蒂包皮交界处多余皮肤形成的三角瓣，并完成切口缝合。患者术后第1、7、10天门诊复查，此后进行门诊或网上随访，术后3个月通过网络发放满意度问卷调查，内容包括术后外形是否改观、术前不适是否改善、术后是否出现不适、性生活质量是否提高、患者对手术效果的总体评价，以及患者伴侣对手术效果的总体评价。结果:共纳入295例患者，年龄9~52岁，平均29岁。按照所接受的手术方式，将患者分为单侧小阴唇肥大合并单侧阴蒂包皮肥大21例(7.1%)，单侧小阴唇肥大合并双侧阴蒂包皮肥大12例(4.1%)，双侧小阴唇肥大合并单侧阴蒂包皮肥大50例(16.9%)，双侧小阴唇肥大合并双侧阴蒂包皮肥大212例(71.9%)。295例患者术后并发症发生率为3.4%(10/295)，其中血肿8例，瘢痕增生伴明显疼痛1例，血供障碍1例，进行相应处理后，所有患者术后恢复良好。共获得219份术后3个月患者满意度调查问卷，76例失访，患者总体满意率94.5%(207/219)。结论:三步切除法术前设计简单，可安全有效地进行小阴唇-阴蒂包皮复合体的联合缩小整形，手术并发症少，切口隐蔽，瘢痕轻微，患者满意度高。

TRIM(tripartite motif)家族因具有相似的N端结构又被称为RBCC家族，其成员在诸多与固有免疫相关的生物学过程中发挥重要作用。近年来的研究发现，TRIM家族参与宿主的胞内抗病毒作用，其中一些TRIM家族蛋白被认为是病毒的限制因子。最近，TRIM21作为E3泛素连接酶的抗病毒作用相继被报道，其可通过抗体依赖的细胞内抗病毒作用(antibody dependent intracellular neutralization，ADIN)及参与固有免疫通路发挥抗病毒作用，现就TRIM21的结构、表达分布、抗病毒作用及其机制的研究进展进行总结和综述。

三基序蛋白21(tripartite -motif protein 21，TRIM21)是一种存在于细胞胞质内的泛素连接酶，也是一类胞内抗体受体或者感应器，成为抵御病毒入侵的固有免疫防线。对于在细胞外已经逃逸了中和抗体作用，并被非中和抗体吸附而通过细胞膜侵入细胞内的病毒，TRIM21可以通过与病毒-抗体复合物中的抗体Fc段结合，发挥阻止病毒复制和诱导细胞免疫的抗病毒作用。TRIM21的降解病毒颗粒与激活免疫信号的双重效应功能，受自身的泛素化和磷酸化的严格调控。此外，TRIM21还能够与补体系统协同发挥作用。文章对TRIM21细胞内抗病毒和激活免疫功能的机制，病毒载体介导的基因治疗、抗体工程和TRIM-AWAY技术进行综述。

患者，男，71岁，2021年6月因"刺激性咳嗽1个月"住院治疗。因入院血常规显示"白细胞增高、贫血、血小板减少"而转入血液科。查体：贫血貌，全身未见皮疹、瘀点，浅表淋巴结不大，双肺呼吸音稍粗，心律齐、无杂音，腹软，肝脾肋缘下未触及。血常规：WBC 22.63×10 9/L，HGB 97 g/L，PLT 28×10 9/L，中性粒细胞11.61×10 9/L，淋巴细胞1.58×10 9/L，单核细胞6×10 9/L，嗜酸性粒细胞1.59×10 9/L；肝肾功能、血电解质、心肌酶正常，肿瘤标志物正常，ANA、dsDNA、ENA、ANCA阴性，血清IgE阴性。腹部B超：肝脾不大。胸部CT：两下肺散在微小结节。骨髓象：有核细胞增生明显活跃，粒系占72.5%，各阶段细胞均可见，早幼粒细胞比值增高，部分粒细胞可见核浆发育不平衡、内外浆、空泡，可见少数巨幼变、巨多分叶及假P-H畸形细胞，嗜酸性粒细胞占30%，易见幼稚嗜酸性粒细胞，嗜碱性粒细胞可见；红系占16.5%，以中晚幼红细胞为主，可见核固缩、胞浆量少，偶见花瓣核、嗜碱性点彩幼红细胞，成熟红细胞大小不等；全片巨核细胞14个，其中裸巨核3个，颗粒巨核11个，巨核细胞形态未见明显异常，淋巴细胞占1.5%；单核细胞占9%。血片：嗜酸性粒细胞可见，嗜碱性粒细胞占比增高，单核细胞占比明显增高，形态未见明显异常。分类100个白细胞可见有核红细胞4个。诊断意见：考虑为慢性粒-单核细胞白血病伴嗜酸性粒细胞增多。骨髓流式细胞术检测：单核细胞占有核细胞的18%（以成熟单核细胞为主），中性粒细胞占有核细胞的53.5%（部分细胞存在发育异常），嗜酸性粒细胞占有核细胞的13%，淋巴细胞占有核细胞的6%（亚群分布大致正常）；骨髓细胞染色体核型：46,XY,N[15]；骨髓病理：骨髓造血组织增生不均一，增生区粒系中晚幼以上阶段细胞比例增高，红系增生减低，巨核细胞偏少，单核细胞散在易见；FISH检测FGFR1分离探针可见信号分离，阳性率为87%。髓系血液病34种高频基因突变筛查：U2AF1NM_006758.2chr21:44524456c.101C>Tp.Ser34Phe：49.6%。BCR-ABL（p190、210、230）均阴性。JAK2V617F、MPL、CALR基因阴性。TCR、IgH基因阴性。FIP1L1/PDGFRα、ETV6-PDGFRβ、PCM1/JAK2阴性。全外显子基因测序检出TRIM24/FGFR1融合基因阳性（该融合由TRIM24基因9号外显子和FGFR1基因10号外显子重组形成），TRIM24/FGFR1和FGFR1/TRIM24融合基因阳性。U2AF1基因上检测到错义突变。结合患者临床表现和实验室检查结果诊断为"伴TRIM24/FGFR1和FGFR1/TRIM24融合基因阳性8p11骨髓增殖综合征"，于2021年6月开始予以阿扎胞苷联合维奈克拉诱导化疗，化疗第21天复查骨髓象：粒系占27.5%，以成熟粒细胞为主，红系占9.5%，巨核细胞少见，原始细胞占2.5%。骨髓流式细胞术：原始细胞占有核细胞的0.1%，单核细胞占有核细胞的1.5%（表型成熟），粒细胞占有核细胞的27.9%（未见明显发育异常）。骨髓涂片和流式细胞术检查提示获得完全缓解（CR）。随访至2021年8月病情稳定，未复发。

Background::Hepatocellular carcinoma (HCC) is one of the most common malignant tumors in the world. The ubiquitin-specific peptidase 25 (USP25) protein has been reported to participate in the development of several cancers. However, few studies have reported its association with HCC. In this study, we aimed to investigate the function and mechanism of USP25 in the progression of HCC.Methods::We analyzed USP25 protein expression in HCC based on The Cancer Genome Atlas (TCGA) and International Cancer Genome Consortium (ICGC) database cohorts. Then, we constructed USP25-overexpressing and USP25-knockdown HepG2, MHCC97H, and L-O2 cells. We detected the biological function of USP25 by performing a series of assays, such as Cell Counting Kit-8 (CCK-8), colony formation, transwell, and wound healing assays. Western blotting and quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) analyses were performed to detect the interaction between USP25 and the Wnt/β-catenin signaling pathway. The relationship between USP25 and tripartite motif-containing 21 (TRIM21) was assessed through mass spectrometry and co-immunoprecipitation (Co-IP) analysis. Finally, we constructed a mouse liver cancer model with the USP25 gene deletion to verify in vivo role of USP25. Results::USP25 was highly expressed in HCC tissue and HCC cell lines. Importantly, high expression of USP25 in tissues was closely related to a poor prognosis. USP25 knockdown markedly reduced the proliferation, migration, and invasion of HepG2 and MHCC97H cells, whereas USP25 overexpression led to the opposite effects. In addition, we demonstrated that USP25 interacts with TRIM21 to regulate the expression of proteins related to epithelial-mesenchymal transition (EMT; E-cadherin, N-cadherin, and Snail) and the Wnt/β-catenin pathway (β-catenin, Adenomatous polyposis coli, Axin2 and Glycogen synthase kinase 3 beta) and those of their downstream proteins (C-myc and Cyclin D1). Finally, we verified that knocking out USP25 inhibited tumor growth and distant metastasis in vivo. Conclusions::In summary, our data showed that USP25 was overexpressed in HCC. USP25 promoted the proliferation, migration, invasion, and EMT of HCC cells by interacting with TRIM21 to activate the β-catenin signaling pathway.

目的 观察不同浓度薏苡附子败酱散对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的类风湿关节炎成纤维细胞(MH7A)增殖、凋亡及炎症反应的影响,探究其作用机制.方法 2022年2―8月,大鼠用不同浓度薏苡附子败酱散及蒸馏水灌胃制备含药血清;20 μg/L的TNF-α处理的MH7A细胞记为TNF-α组,TNF-α+含药血清处理的MH7A细胞记为薏苡附子败酱散低浓度组、薏苡附子败酱散中浓度组、薏苡附子败酱散高浓度组,正常培养的MH7A细胞标记为对照组.细胞计数试剂盒(CCK8)、流式细胞术、酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞的存活、凋亡及白细胞介素(IL)-1β、干扰素(IFN)-γ;蛋白质印迹法(WB)检测基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-9、抗三结构域蛋白21(TRIM21)、Toll 样受体4(TLR4)、t-核因子(NF)-κB p65、磷酸化(p)-NF-κB p65、p-NF-κB抑制因子(IκB)-α和t-IκB-α蛋白表达.pcDNA 3.1组(转染空载体)、pcDNA+TRIM21组(转染pcDNA 3.1+TRIM21)、薏苡附子败酱散中浓度+si-con组(转染si-con+4.70 g/kg含药血清)、薏苡附子败酱散中浓度+si-TRIM21组(转染si-TRIM21+4.70 g/kg含药血清).结果 与对照组相比,TNF-α组细胞存活率(105.07±1.90比185.67±3.06)、TRIM21(0.56±0.02比0.68±0.04)、MMP-3(0.18±0.00比0.63±0.02)、MMP-9(0.39±0.01比0.82±0.01)、TLR4(0.25±0.02比0.68±0.07)、p-NF-κB p65(0.24±0.01比0.68±0.06)、p-IκB-α(0.22±0.01比0.55±0.04)蛋白表达和IL-1β(31.65±0.66比101.93±0.60)、IFN-γ(8.53±0.16比63.76±1.35)含量均显著升高,凋亡率(6.54±0.06比1.17±0.08)均显著降低;与TNF-α组相比,薏苡附子败酱散低浓度组(185.67±3.06比153.77±3.09;0.68±0.04 比 0.37±0.02;0.63±0.02 比 0.47±0.02;0.82±0.01 比 0.73±0.01;103.2±0.7 比 92.93±0.85;66.3±1.45 比54.47±1.46;0.68±0.07比0.53±0.05;0.68±0.06比0.53±0.06;0.55±0.04比0.47±0.01;1.84±0.07比6.67±0.28)、薏苡附子败酱散中浓度组(185.67±3.06比136.23±1.57;0.68±0.04比0.57±0.02;0.63±0.02比0.37±0.02;0.82±0.01比0.57±0.00;103.2±0.7比86.4±0.75;66.3±1.45比38.1±0.92;0.68±0.07比0.43±0.07;0.68±0.06比0.59±0.01;0.55±0.04比0.40±0.03;1.84±0.07比9.59±0.29)、薏苡附子败酱散高浓度组(185.67±3.06比143.47±1.50;0.68±0.04比0.47±0.02;0.63±0.02比0.41±0.05;0.82±0.01比0.62±0.00;103.2±0.7比89.63±0.42;66.3±1.45比40.17±0.90;0.68±0.07比0.51±0.06;0.68±0.06比0.69±0.07;0.55±0.04比0.41±0.02;1.84±0.07比8.89±0.08)细胞存活率、TRIM21、MMP-3、MMP-9蛋白和IL-1β、IFN-γ含量及TLR4、p-NF-κB p65、p-IκB-α蛋白表达均显著降低,凋亡率均显著升高(P<0.05);与pcDNA组相比,pcDNA+TRIM21组细胞TRIM21蛋白表达(0.24±0.03比0.51±0.04)、细胞凋亡率(1.61±0.11 比 12.43±0.61)均显著升高,MMP-3(0.64±0.02 比 0.41±0.04)、MMP-9(0.82±0.03 比 0.45±0.02)、IL-1β(110.63±0.55比 90.93±0.60)、IFN-γ(64.5±0.82比 48.1±1.25)及细胞存活率(179.03±0.74比 120.07±0.60)均显著降低;敲减TRIM21显著抑制薏苡附子败酱散中浓度对损伤细胞的治疗作用且显著升高TLR4(0.45±0.06比0.61±0.02)、p-NF-κB p65(0.49±0.02比0.56±0.02)、p-IκB-α(0.38±0.01比0.62±0.01)的蛋白表达.结论 薏苡附子败酱散增强TNF-α诱导的MH7A细胞的生存能力,其作用机制与上调TRIM21抑制TLR4-NF-κB信号通路活性有关.

目的 探讨TRIM21和TRIM8在神经胶质瘤U251细胞中的相互作用机制及其生物学效应.方法 在U251细胞中分别过表达和敲低TRIM21或TRIM8,通过蛋白质印迹和RT-PCR法检测两者的蛋白和mRNA表达水平.利用免疫荧光实验分析TRIM21和TRIM8的亚细胞定位.通过免疫共沉淀实验验证TRIM21和TRIM8之间的相互作用.应用胞内泛素化实验检测TRIM21和TRIM8的泛素化修饰.蛋白酶体抑制剂MG-132用于抑制蛋白酶体活性.利用流式细胞术检测U251细胞凋亡.结果 在U251细胞中,TRIM21负向调控TRIM8蛋白水平,反之,TRIM8也可以负向调控TRIM21蛋白水平,并且都能抑制细胞凋亡.机制研究显示,U251细胞中TRIM21和TRIM8之间存在相互结合,两者相互调控是通过催化泛素化介导的泛素-蛋白酶体依赖性降解途径实现的.结论 U251细胞中TRIM21与TRIM8可以通过泛素化修饰促进泛素-蛋白酶体依赖性的蛋白质降解相互负向调控,提示体内细胞正常生长分化需要TRIM21-TRIM8之间蛋白质水平的相对稳态,也即可能存在E3泛素连接酶蛋白稳态,稳态失衡可能与肿瘤的发生发展密切相关.

目的 探讨成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)、三结构域蛋白家族成员21(TRIM21)在分化型甲状腺癌组织中的表达及临床意义.方法 收集我院2018年5月至2020年1月期间住院手术的120例分化型甲状癌患者术中甲状腺癌组织标本及癌旁组织标本,同时整理其TNM分期、淋巴结转移等临床资料.采用免疫组织化学法检测FGFR3、TRIM21的表达;Spearman法分析分化型甲状腺癌组织FGFR3和TRIM21表达的相关性;分化型甲状腺癌组织FGFR3和TRIM21表达与患者预后的关系采用Kaplan-Meier法分析;多因素Cox回归分析分化型甲状腺癌患者预后的影响因素.结果 与癌旁组织相比,分化型甲状腺癌组织中FGFR3、TRIM21蛋白的高表达率明显较高(P<0.05).FGFR3和TRIM21蛋白的表达与TNM分期、淋巴结转移相关(P<0.05).Spearman相关性分析显示,分化型甲状腺癌组织FGFR3和TRIM21表达具有正相关性(P<0.05).分化型甲状腺癌组织FGFR3和TRIM21高表达患者3年生存率低于FGFR3和TRIM21低表达患者(P<0.05).多因素Cox回归分析,结果显示FGFR3、TRIM21、TNM分期、淋巴结转移是分化型甲状腺癌患者死亡的影响因素(P<0.05).结论 分化型甲状腺癌组织FGFR3、TRIM21表达与TNM分期、淋巴结转移等临床病理特征及预后有密切联系,检测其表达水平对判断患者预后生存情况具有重要价值.

目的:探讨合并抗TRIM21/Ro52抗体的抗信号识别颗粒(signal recognition particle,SRP)抗体阳性免疫介导的坏死性肌病(immune-mediated necrotizing myopathy,IMNM)患者的临床特征.方法:回顾收集2010年至2021年华中科技大学同济医学院附属同济医院收治的抗SRP抗体阳性IMNM患者(57例)的临床资料.将患者按血清肌炎相关性抗体(myositis-associated autoantibody,MAA)抗TRIM21/Ro52抗体分为抗TRIM21/Ro52抗体阳性组(以下简称抗体阳性组)和抗TRIM21/Ro52抗体阴性组(以下简称抗体阴性组),对2组患者的临床特点、实验室检查、转归预后进行对比分析.结果:本研究抗TRIM21/Ro52抗体阳性(抗体阳性组)患者为23例,抗体阴性患者(抗体阴性组)为34例.抗体阳性组的间质性肺病(interstitial lung disease,ILD)发生比例高于抗体阴性组(21.7%比2.9%,P= 0.034),抗体阳性组的抗核抗体(antinuclear antibodies,ANA)高滴度表达(滴度≥1∶1000)比例(69.5%比 32.3%,P= 0.008)、血清中性粒细胞计数(8.18×10?/L比3.93×10?/L;P=0.034)和白细胞计数(11.685×10?/L比6.98×10?/L,P= 0.044)显著高于抗体阴性组,且上述4项指标均与抗TRIM21/Ro52抗体表达具有一定正相关(r值分别为0.312、0.351、0.290、0.274,P值分别为0.019、0.008、0.035、0.043).57例抗SRP(+)IMNM患者在接受了83(62～96)个月的随访,51例(89.4%)患者接受了糖皮质激素治疗(或)联合免疫抑制剂治疗,其中22例(95.6%,22/23)抗TRIM21/Ro52抗体阳性患者接受免疫治疗后病情得到好转,1例(4.3%,1/23)患者失访;29例(85.3%,29/34)抗TRIM21/Ro52抗体阴性而接受免疫治疗的患者中,24例(70.6%,24/34)患者病情得到好转,其余5例(14.7%,5/34)患者临床症状未得到显著改善,1例(2.9%)患者失访.结论:抗TRIM21/Ro52抗体阳性的抗SRP抗体阳性IMNM患者更易合并ILD,血清炎性指标水平显著升高,更容易出现高滴度ANA表达.抗TRIM21/Ro52抗体IMNM患者对激素联合免疫抑制剂治疗反应良好.