目的:探讨人腺病毒7型(human adenovirus type 7，HAdV-7)感染对于炎症小体激活的影响及作用机制。方法:采用免疫荧光检测HAdV-7对于THP-1分化的巨噬细胞的感染；应用ELISA方法检测HAdV-7感染对于IL-1β的激活；实时荧光定量PCR检测病毒感染对于NLRP3、pro-IL-1β、caspase-1等mRNA表达的影响；蛋白质免疫印迹实验(western blot，WB)检测病毒感染后细胞内NLRP3、pro-IL-1β的表达及上清中caspase-1和IL-1β蛋白表达情况。结果:免疫荧光检测显示HAdV-7可感染THP-1分化的巨噬细胞，WB显示HAdV-7感染诱导细胞内pro-IL-1β蛋白表达上调，ELISA检测表明HAdV-7感染可诱导IL-1β的分泌表达(MOI＝0.5， P＝0.0008)。使用Ac-YVDK-cmk抑制caspase-1表达后，HAdV-7感染上清中IL-1β的表达被明显抑制( P＝0.0025)；HAdV-7感染caspase-1缺陷的THP-1分化的巨噬细胞，IL-1β的表达同样被显著抑制( P＝0.0191)。荧光定量PCR检测HAdV-7感染可以诱导细胞内pro-IL-1β和NLRP3 mRNA表达上调(NLRP3： P＝0.0004；pro-IL-1β： P＝0.0007)，同时WB显示HAdV-7可以诱导细胞内pro-IL-1β和NLRP3蛋白表达上调；使用NLRP3特异性抑制剂MCC950处理细胞，可抑制HAdV-7感染的细胞上清中IL-1β的表达( P＝0.0027); HAdV-7感染NLRP3缺陷的THP-1分化的巨噬细胞，IL-1β的表达被明显抑制( P＝0.0189)。分别使用TLR2、TLR4、TLR7/9信号传导抑制剂，抑制HAdV-7感染THP-1分化的巨噬细胞，结果显示抑制TLR4信号传导，细胞上清中IL-1β的表达水平有明显下调( P＝0.0122)；使用ROS抑制剂、组织蛋白酶B抑制剂，或抑制K ＋外流，分别处理HAdV-7感染THP-1分化的巨噬细胞，结果显示抑制组织蛋白酶B( P＝0.0292)，或抑制K ＋外流时(KCl, P＝0.0022；Glibenclamide, P＝0.0275)，细胞上清中IL-1β的表达水平有明显下调。 结论:HAdV-7感染THP-1细胞激活NLRP3炎症小体，NLRP3炎症小体激活的第一信号通过Toll样受体4(TLR4)信号传导，第二信号主要通过半通道模型介导K ＋外流的和溶酶体破坏模型释放组织蛋白酶B的激活NLRP3炎症小体。

目的:应用网络药理学分析方法，从整体水平观察牛黄－靶点－角膜炎的复杂网络关系，探讨牛黄治疗角膜炎的分子作用机制。方法:首先通过DisGeNET在线数据库收集角膜炎相关的基因，构建角膜炎相关蛋白质的互作网络，然后经中药系统药理学分析(TCMSP)平台、中国科学院化学数据库查询，结合文献报道，收集牛黄中分离鉴定的组成成分，导出各成分SMILES结构式信息，利用在线软件SwissTargetPrediction预测作用靶点，进而构建牛黄活性成分－预测靶点网络图，最后将角膜炎相关蛋白质的互作网络与牛黄活性成分－预测靶点网络进行合并，得到牛黄活性成分－潜在靶点网络，系统分析牛黄治疗角膜炎的潜在作用靶点及其在信号通路中的作用，构建成分－靶点－通路网络图，分析牛黄治疗角膜炎的作用机制。结果:共搜索到39个已分离鉴定的牛黄组成成分，角膜炎相关靶点65个，牛黄治疗角膜炎的潜在靶点28个；28个潜在靶点中包含7个直接作用靶点，即肿瘤坏死因子、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1、Toll样受体9、C-X-C基序趋化因子配体8、白细胞介素(IL)6、丝裂原活化蛋白激酶8和神经营养受体酪氨酸激酶1。28个潜在靶点可被注释入12项生物过程、18项细胞组分、13个分子功能，经京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析，共纳入10条KEGG信号通路，主要涉及人巨细胞病毒感染、阿米巴病、抗叶酸耐受性、PI3K-Akt信号通路、类风湿性关节炎、凋亡、细胞因子－细胞因子受体相互作用、疟疾、非酒精性脂肪肝、IL-17信号通路。结论:牛黄可能通过抗炎、抗菌、抗病毒、免疫调节和炎症调控等作用发挥对角膜炎的辅助治疗作用。

肠缺血再灌注(I/R)损伤是指肠缺血一定时间后再恢复血供所引起的损伤。肠组织缺血可由失血性休克、绞窄性肠梗阻和急性肠系膜缺血等引发，当肠组织再灌注后虽然血氧水平恢复，但活性氧(ROS)的大量产生，直接促进中性粒细胞浸润缺血肠组织并加重组织损伤，这是造成肠I/R损伤患者肠坏死和高死亡率的主要原因 [1]。肠I/R损伤主要有两个阶段：首先是肠组织发生缺血，此时有氧代谢障碍，ATP合成减少，而无氧代谢生成大量乳酸，细胞内电解质紊乱，线粒体功能障碍，导致细胞死亡，上皮细胞屏障功能破坏，血管通透性增加 [2,3]。由于长时间缺血，肠组织恢复血流后，富含氧气的血液进入肠组织，产生大量氧自由基、细菌易位、炎症反应，最终导致细胞死亡、组织损伤、器官衰竭 [4]。肠I/R损伤的发生会破坏肠壁的屏障功能 [5]，一旦引起肠壁屏障破坏超过其代偿能力，肠道菌群和毒素可进入血液循环，导致全身炎症反应综合征(SIRS) [6]，甚至导致多器官功能衰竭(MODS)和死亡 [7]。人体肠组织富含线粒体，它参与了能量的产生、免疫应答、细胞代谢、死亡等一系列过程。当细胞受到损伤或应激时，线粒体释放许多损伤相关的分子模式(DAMPs)，线粒体DNA(mtDNA)是其中之一 [8]。mtDNA可通过Toll样受体9(TLR9)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体和环磷酸鸟苷-腺苷酸合成酶(cGAS)-干扰素基因刺激因子(STING)信号通路激活先天免疫反应并诱导炎症，使肠道屏障功能受损，参与肠I/R损伤 [8]。本文主要综述了mtDNA释放在肠I/R损伤中的作用，为其防治提供理论参考。

SLE是一种可累及全身多个系统的慢性自身免疫病，其发病机制目前仍尚不明确。肽/组氨酸转运蛋白SLCl5A4是一种定位于溶酶体上的转运蛋白，能将组氨酸、寡肽等从溶酶体内转运至细胞质中。研究发现肽/组氨酸转运蛋白SLCl5A4参与了SLE的发生，并且与Toll样受体7/9（TLR7/9）介导的Ⅰ型干扰素信号通路有关。本文对近年来有关肽/组氨酸转运蛋白SLCl5A4在SLE中可能的作用机制进行综述，旨在为探索肽/组氨酸转运蛋白SLCl5A4在SLE中的作用提供新的思路。

目的:探讨Toll样受体(Toll-like receptor，TLR)基因多态性与福建籍非人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)相关隐球菌性脑膜炎易感性的关联。方法:纳入2016年10月至2019年4月在上海市复旦大学附属华山医院和福建省福州市联勤保障部队第九〇〇医院仓山院区住院治疗的101例福建籍非HIV相关隐球菌性脑膜炎患者为病例组，270名福建籍门诊健康体格检查者为健康对照组。提取患者基因组DNA，采用多重SNaPshot单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism，SNP)分型技术，对既往文献报道的与疾病相关但未得到充分验证的8个TLR SNP位点进行基因分型。分别比较病例组和健康对照组、无易感因素患者组和健康对照组TLR基因多态性的分布差异。统计学分析采用 χ2检验或Fisher确切概率法。 结果:除TLR1 rs5743563外，TLR1 rs5743604、TLR2 rs3804099、TLR4 rs1927907、TLR6 rs3796508、TLR6 rs5743794、TLR9 rs164637、TLR9 rs352140 7个TLR SNP检测位点的等位基因频率分布均符合哈迪-温伯格平衡。病例组与健康对照组比较发现，TLR2 rs3804099位点的T/T基因型[52.5%(53/101)比40.4%(109/270)，比值比(odds ratio, OR)＝1.63, χ2＝4.378， P＝0.036]和TLR6 rs5743794位点的G/G基因型[44.6%(45/101)比32.2%(87/270)， OR＝1.69, χ2＝4.877， P＝0.027]为隐球菌性脑膜炎的风险基因型；而TLR6 rs3796508的G/G基因型[83.2%(84/101)比92.6%(250/270)， OR＝0.40, χ2＝7.271， P＝0.007]和TLR9 rs164637的C/C基因型[96.0%(97/101)比100.0%(270/270)，Fisher确切概率法， P＝0.005]为隐球菌性脑膜炎的保护性因素。101例患者中有70例无易感因素。无易感因素患者组与健康对照组比较发现，TLR6 rs5743794位点的G/G基因型[52.9%(37/70)比32.2%(87/270)， OR＝2.36, χ2＝10.216， P＝0.001]为隐球菌性脑膜炎的风险基因型，TLR6 rs3796508的G/G基因型[81.4%(57/70)比92.6%(250/270)， OR＝0.35, χ2＝7.906， P＝0.005]和TLR9 rs164637的C/C基因型[97.1%(68/70)比100.0%(270/270)，Fisher确切概率法， P＝0.042]为隐球菌性脑膜炎的保护性因素。 结论:TLR基因多态性与福建籍非HIV相关隐球菌性脑膜炎的易感性密切关联，提示TLR在隐球菌性脑膜炎的发病过程中可能起到重要作用。

目的:探讨Toll样受体(TLR)7、TLR9及髓样分化因子88(MyD88)在白癜风患者皮损及健康对照皮肤的表达差异及其意义。方法:2016年6月至2018年6月，收集广州市皮肤病防治所白癜风患者24例，男12例，女12例，年龄5～65(28.75 ± 13.12)岁，病程14 d至20年。用免疫组织化学方法分别检测24例白癜风患者皮损、20例健康对照皮肤中TLR7、TLR9及MyD88表达。结果:白癜风患者皮损中TLR7、MyD88表达水平高于健康对照组，与健康对照组相比，差异有统计学意义( P<0.05)。TLR9表达高于健康对照组，但与健康对照组比较差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:TLR7、TLR9及MyD88在白癜风患者皮损表达均上调，提示白癜风的发生可能与TLR7、TLR9异常表达有关。

目的:探究外周血可溶性糖基化终末产物受体（sRAGE）、内毒素、Toll样受体（TLR）在重症急性胰腺炎（SAP）合并腹腔感染患者中的变化，并明确其与病情的关系。方法:回顾性分析上海市浦东新区人民医院2017年1月至2020年12月105例SAP患者的临床资料。其中，合并腹腔感染28例（感染组），有类似腹腔感染症状但未确诊腹腔感染77例（未感染组）。记录入院时急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ（APACHE Ⅱ）。患者出现疑似腹腔感染症状和体征时，采用酶联免疫吸附法检测血清sRAGE、内毒素、TLR4、TLR9水平。血清sRAGE、内毒素、TLR-4和TLR-9水平与APACHE Ⅱ相关性采用Pearson分析；影响SAP患者发生腹腔感染的危险因素采用多因素Logistic回归分析；绘制受试者工作特征（ROC）曲线，评估血清sRAGE、内毒素、TLR-4和TLR-9对SAP患者发生腹腔感染的诊断效能；绘制Kaplan-Meier生存曲线，比较采用log-rank检验。结果:感染组血清sRAGE、内毒素、TLR-4和TLR-9明显高于未感染组[（822.16 ± 104.51）ng/L比（728.09 ± 96.47） ng/L、（62.59 ± 20.11） ng/L比（41.62 ± 13.64） ng/L、（45.17 ± 8.54） μg/L比（37.34 ± 6.22） μg/L、（26.35 ± 6.73） μg/L比（20.02 ± 5.49） μg/L]，差异有统计学意义（ P<0.01）。Pearson相关性分析结果显示，SAP患者血清sRAGE、内毒素、TLR-4和TLR-9与APACHE Ⅱ呈正相关（ r = 0.632、0.556、0.521、0.631， P<0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示，合并脏器功能损伤、休克、低氧血症及血清sRAGE、内毒素、TLR-4和TLR-9是SAP患者发生腹腔感染的独立危险因素（ P<0.05）。ROC曲线分析结果显示，血清sRAGE、内毒素、TLR-4和TLR-9联合诊断SAP患者发生腹腔感染的曲线下面积最大，为0.910（95% CI 0.838~0.957， P<0.01），灵敏度为82.14%，特异度为87.01%。以ROC曲线分析的血清sRAGE、内毒素、TLR-4和TLR-9截断值（分别为764.58 ng/L、58.01 ng/L、40.24 μg/L和22.61 μg/L）为界将28例SAP合并腹腔感染患者分为高水平患者（分别为21、14、23和22例）和低水平患者（分别为7、14、5和6例）；Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示，血清sRAGE、内毒素、TLR-4和TLR-9高水平患者28 d生存率明显低于低水平患者（61.90%比71.43%、50.00%比78.57%、60.87%比80.00%和59.09%比83.33%），差异有统计学意义（ P<0.05）。 结论:血清sRAGE、内毒素、TLR-4和TLR-9在SAP合并腹腔感染中联合诊断价值较高，且均与病情程度相关，对生存状况有明显影响。

目的:采用尿酸钠诱导实验性大鼠急性痛风性关节炎模型，观察大鼠的炎性反应及对踝关节Toll样受体相关蛋白表达和双氯芬酸钠的干预作用。方法:雄性无特定病原体级Wistar大鼠30只，随机数字表法将大鼠分为空白对照组（0.9%氯化钠注射液组）10只、模型组10只、双氯芬酸钠缓释片药物组（双氯芬酸钠片组，1.35 mg/kg体质量）10只。将尿酸钠晶体充分研磨后，加入适量0.9%氯化钠注射液和吐温-80（9∶1）制成混悬液进行造模，空白对照组大鼠同样位置注射0.9%氯化钠注射液。于造模后开始灌胃给药，0.9%氯化钠注射液组和模型组给予等容积纯净水，每天1次，共7 d，采用足趾容积装置测定大鼠（造模后4、8、24、48、72 h）的关节肿胀度，麻醉后腹主动脉取血测定大鼠肾功能、IL-1β、IL-6和TNF-α含量，采用蛋白质免疫印迹法和免疫组织化学法测定大鼠踝关节Toll样受体4（TLR4）、髓样分化因子88（MyD88）、NF-κBp65的蛋白表达。多组比较采用单因素方差分析，2组间比较采用LSD- t法，不同时间段的比较采用重复测量的方差分析法。 结果:造模后的大鼠右踝关节出现不同程度的红肿、行走迟缓、反应迟钝等症状。光学镜下观察，模型组大鼠踝关节滑膜细胞增生，局部可见细胞变性坏死和炎性细胞浸润。和0.9%氯化钠注射液组IL-1β、IL-6和TNF-α[（24.6±2.6）pg/ml，（132±20）pg/ml和（72±6）pg/ml]比较，模型组[（28.4±4.3）pg/ml，（173±26）pg/ml和（81±5）pg/ml]升高（ t=2.601， P<0.05； t=3.375， P<0.01； t=1.392， P>0.05）；和模型组比较，双氯芬酸钠片组大鼠炎症因子含量显著降低[（24.6±3.3）pg/ml，（151±21）pg/ml，（61±16）pg/ml]差异均有统计学意义（ t=2.296， P<0.05； t=2.909， P<0.05； t=2.352， P<0.05）。和0.9%氯化钠注射液组比较，免疫组织化学法和蛋白质免疫印迹法检测的模型组踝关节NF-κBp65、MyD88、TLR4的蛋白表达显著增加；与模型组比较，双氯芬酸钠片组显著抑制踝关节组织的NF-κBp65、MyD88、TLR4蛋白表达；3组间差异均有统计学意义（免疫组织法： F=33.553， P<0.01； F=98.293， P<0.01； F=10.410， P<0.01；蛋白质印迹法： F=11.423， P<0.01； F=8.123， P<0.01； F=3.575， P<0.05）。 结论:由尿酸钠晶体引起的急性痛风关节炎模型大鼠炎性因子水平升高，踝关节组织的TLR4，MyD88/NF-κBp65蛋白表达增强，影响Toll样受体信号传导途径，双氯芬酸钠缓释片具有一定抑制和缓解作用。

目的:探讨脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）预适应对脑缺血再灌注大鼠的保护作用。方法:120只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、LPS小剂量组（0.05 mg/kg）、LPS中等剂量组（0.15 mg/kg）和LPS大剂量组（0.45 mg/kg）。通过腹腔注射LPS进行预适应，1次/d，连续7 d，最后一次注射后24 h采用线栓法构建左侧大脑中动脉闭塞模型，缺血1.5 h后再灌注。在再灌注后24 h时，通过神经行为学评价神经功能缺损，通过三苯基氯化四氮唑染色测定脑梗死体积，通过酶联免疫吸附法检测血清促炎性细胞因子白细胞介素（interleukin, IL）-1、IL-6以及肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor, TNF）-α水平，通过蛋白质印迹分析检测缺血脑组织Toll样受体4（Toll-like receptor 4, TLR4）以及基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase, MMP）-2和MMP-9表达。结果:与假手术组比较，模型组血脑屏障通透性增加，血清IL-1β、IL-6和TNF-α上调，缺血脑组织TLR4、MMP-2和MMP-9蛋白表达上调。与模型组比较，各LPS干预组神经功能损伤显著减轻，脑梗死体积显著缩小，血脑屏障通透性显著下降，血清IL-1β、IL-6和TNF-α下调，缺血脑组织TLR4、MMP-2和MMP-9蛋白表达下调，以中等剂量组和大剂量组更为明显。结论:LPS预适应能够诱导机体形成缺血耐受，抑制TLR4-MMP-2/MMP-9信号通路激活，减轻血脑屏障结构破坏和炎症，从而对脑缺血再灌注大鼠发挥神经保护作用。

目的 观察不同浓度薏苡附子败酱散对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的类风湿关节炎成纤维细胞(MH7A)增殖、凋亡及炎症反应的影响,探究其作用机制.方法 2022年2―8月,大鼠用不同浓度薏苡附子败酱散及蒸馏水灌胃制备含药血清;20 μg/L的TNF-α处理的MH7A细胞记为TNF-α组,TNF-α+含药血清处理的MH7A细胞记为薏苡附子败酱散低浓度组、薏苡附子败酱散中浓度组、薏苡附子败酱散高浓度组,正常培养的MH7A细胞标记为对照组.细胞计数试剂盒(CCK8)、流式细胞术、酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞的存活、凋亡及白细胞介素(IL)-1β、干扰素(IFN)-γ;蛋白质印迹法(WB)检测基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-9、抗三结构域蛋白21(TRIM21)、Toll 样受体4(TLR4)、t-核因子(NF)-κB p65、磷酸化(p)-NF-κB p65、p-NF-κB抑制因子(IκB)-α和t-IκB-α蛋白表达.pcDNA 3.1组(转染空载体)、pcDNA+TRIM21组(转染pcDNA 3.1+TRIM21)、薏苡附子败酱散中浓度+si-con组(转染si-con+4.70 g/kg含药血清)、薏苡附子败酱散中浓度+si-TRIM21组(转染si-TRIM21+4.70 g/kg含药血清).结果 与对照组相比,TNF-α组细胞存活率(105.07±1.90比185.67±3.06)、TRIM21(0.56±0.02比0.68±0.04)、MMP-3(0.18±0.00比0.63±0.02)、MMP-9(0.39±0.01比0.82±0.01)、TLR4(0.25±0.02比0.68±0.07)、p-NF-κB p65(0.24±0.01比0.68±0.06)、p-IκB-α(0.22±0.01比0.55±0.04)蛋白表达和IL-1β(31.65±0.66比101.93±0.60)、IFN-γ(8.53±0.16比63.76±1.35)含量均显著升高,凋亡率(6.54±0.06比1.17±0.08)均显著降低;与TNF-α组相比,薏苡附子败酱散低浓度组(185.67±3.06比153.77±3.09;0.68±0.04 比 0.37±0.02;0.63±0.02 比 0.47±0.02;0.82±0.01 比 0.73±0.01;103.2±0.7 比 92.93±0.85;66.3±1.45 比54.47±1.46;0.68±0.07比0.53±0.05;0.68±0.06比0.53±0.06;0.55±0.04比0.47±0.01;1.84±0.07比6.67±0.28)、薏苡附子败酱散中浓度组(185.67±3.06比136.23±1.57;0.68±0.04比0.57±0.02;0.63±0.02比0.37±0.02;0.82±0.01比0.57±0.00;103.2±0.7比86.4±0.75;66.3±1.45比38.1±0.92;0.68±0.07比0.43±0.07;0.68±0.06比0.59±0.01;0.55±0.04比0.40±0.03;1.84±0.07比9.59±0.29)、薏苡附子败酱散高浓度组(185.67±3.06比143.47±1.50;0.68±0.04比0.47±0.02;0.63±0.02比0.41±0.05;0.82±0.01比0.62±0.00;103.2±0.7比89.63±0.42;66.3±1.45比40.17±0.90;0.68±0.07比0.51±0.06;0.68±0.06比0.69±0.07;0.55±0.04比0.41±0.02;1.84±0.07比8.89±0.08)细胞存活率、TRIM21、MMP-3、MMP-9蛋白和IL-1β、IFN-γ含量及TLR4、p-NF-κB p65、p-IκB-α蛋白表达均显著降低,凋亡率均显著升高(P<0.05);与pcDNA组相比,pcDNA+TRIM21组细胞TRIM21蛋白表达(0.24±0.03比0.51±0.04)、细胞凋亡率(1.61±0.11 比 12.43±0.61)均显著升高,MMP-3(0.64±0.02 比 0.41±0.04)、MMP-9(0.82±0.03 比 0.45±0.02)、IL-1β(110.63±0.55比 90.93±0.60)、IFN-γ(64.5±0.82比 48.1±1.25)及细胞存活率(179.03±0.74比 120.07±0.60)均显著降低;敲减TRIM21显著抑制薏苡附子败酱散中浓度对损伤细胞的治疗作用且显著升高TLR4(0.45±0.06比0.61±0.02)、p-NF-κB p65(0.49±0.02比0.56±0.02)、p-IκB-α(0.38±0.01比0.62±0.01)的蛋白表达.结论 薏苡附子败酱散增强TNF-α诱导的MH7A细胞的生存能力,其作用机制与上调TRIM21抑制TLR4-NF-κB信号通路活性有关.