目的:探讨在乳腺癌细胞中高表达的N-乙酰转移酶10(NAT10)引起对铂类抗肿瘤药的耐药效应，并揭示其潜在机制。方法:实验分为野生型组(MCF-7野生型细胞未经任何处理)、NAT10过表达组(h-NAT10质粒转染至MCF-7细胞)和NAT10敲低组(sh-NAT10质粒转染至MCF-7细胞)。采用Transwell实验检测各组细胞的侵袭能力，采用免疫共沉淀实验检测NAT10与多聚ADP核糖转移酶1(PARP1)的相互作用，并检测过表达或敲低NAT10的表达对PARP1乙酰化水平和半衰期的影响，通过免疫组化染色和免疫沉淀实验检测乙酰化的PARP1招募相关DNA损伤修复相关蛋白的情况，采用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:Transwell实验显示，NAT10过表达组细胞侵袭数为(483.00±46.90)个，NAT10敲低组细胞侵袭数为(469.00±40.50)个，与MCF-7野生型细胞[(445.00±35.50)个]比较，差异均无统计学意义(均 P>0.05)。在10 μmol/L奥沙利铂作用下，NAT10过表达组细胞侵袭数为(502.00±45.60)个，NAT10敲低组细胞侵袭数为(105.00±20.50)个，与野生型细胞[(219.00±31.50)个]比较，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。在10 μmol/L奥沙利铂作用下，与野生型细胞比较，NAT10过表达可以增强PARP1与NAT10的结合，而使用NAT10抑制剂Remodelin则抑制了二者的相互结合。高表达NAT10诱导PARP1乙酰化后，PARP1与X射线修复交叉互补蛋白1(XRCC1)的结合增加，敲低NAT10的表达后，降低了PARP1和XRCC1的结合。高表达NAT10增强了PARP1与DNA连接酶3(LIG3)的结合，而敲低NAT10的表达则会降低PARP1与LIG3的结合。在10 μmol/L奥沙利铂处理后的细胞中，NAT10过表达细胞中γH2AX表达水平为0.38±0.02, NAT10敲低细胞中γH2AX表达水平为1.36±0.15，与野生型细胞(1.00±0.00)比较，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。在10 μmol/L奥沙利铂处理后的细胞中，NAT10过表达组细胞凋亡率为(6.54±0.68)%，NAT10敲低组细胞凋亡率为(12.98±2.54)%，与野生型细胞[(9.67±0.37)%]比较，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:NAT10高表达增强了NAT10与PARP1的结合，并促进PARP1的乙酰化，进而延长了PARP1的半衰期，从而增强PARP1招募DNA损伤修复相关蛋白到损伤位点，促进DNA损伤修复，最终使乳腺癌细胞存活。

目的:探讨X射线修复交叉互补1（XRCC1）Arg399Gln基因多态性对进展期胃癌D 2根治术后SOX方案（奥沙利铂130 mg/m 2静脉滴注第1天，替吉奥40 mg/m 2口服2次/d ，第1~14天，每21 d重复）化疗的不良反应及预后的预测价值。 方法:回顾性分析2015年1月至2018年4月在衢州市人民医院胃肠外科收治的62例进展期胃癌D 2根治术后实施SOX方案辅助化疗患者的临床资料。收集术后病理标本行XRCC1 Arg399Gln多态性基因分型检测，分析XRCC1 Arg399Gln多态性与胃癌术后患者的临床病理特征、化疗不良反应发生的关系，并比较不同基因亚型的无病生存期（DFS）及总生存期（OS），Cox回归分析筛选预后危险因素。 结果:62例胃癌患者中XRCC1 Arg399Gln基因亚型分布分别为G/G型35例（56.45%），G/A型21例（33.87%）及A/A型6例（9.68%），XRCC1 Arg399Gln基因亚型分布符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律（ P = 0.295）。后续的分析将G/A型和A/A型合并，G/G型和G/A+A/A型患者的临床资料分布均衡，不同基因亚型与SOX方案辅助化疗的各项不良反应无相关性。XRCC1 Arg399Gln位点G/G基因型与G/A+A/A基因型的中位DFS分别为45个月（95% CI 41.73~48.28）和38个月（95% CI 35.71~40.29），差异有统计学意义（ P = 0.047）；单因素Cox回归分析显示XRCC1 Arg399Gln多态性（ RR = 2.178，95% CI 1.078~4.402， P = 0.030）是进展期胃癌术后行SOX方案化疗患者肿瘤复发的危险因素；多因素Cox回归及校正分析显示，XRCC1 Arg399Gln多态性（ RR = 2.581，95% CI 1.242~5.363， P = 0.011）是进展期胃癌术后实施SOX方案化疗患者肿瘤复发的独立危险因素。XRCC1 Arg399Gln位点G/G基因型与G/A+A/A基因型的中位OS分别为60个月（95% CI 57.81~62.19）和55个月（95% CI 49.62~60.38），差异无统计学意义（ P = 0.202）；单因素Cox回归分析显示XRCC1 Arg399Gln多态性（ RR = 1.702，95% CI 0.744~3.896， P = 0.208）不是进展期胃癌术后实施SOX方案化疗患者死亡的危险因素。 结论:XRCC1 Arg399Gln基因多态性与进展期胃癌术后SOX方案化疗的不良反应无相关性，但XRCC1 Arg399Gln G/G型与进展期胃癌术后SOX方案化疗患者预后密切相关，且对DFS有较好的预测价值。

目的:分析年龄≤60岁上尿路尿路上皮癌(UTUC)患者的胚系致病性突变，探讨胚系致病性突变携带者的临床病理特征。方法:回顾性分析复旦大学附属肿瘤医院2008年9月至2023年2月接受胚系基因检测的124例年龄≤60岁UTUC患者的临床资料。男86例，女38例；年龄55.0(49.8，58.0)岁；原发肿瘤位于肾盂81例(65.3%)，位于输尿管34例(27.4%)，二者兼有9例(7.3%)。低级别UTUC 13例(10.5%)，原位癌8例(6.5%)。12例(9.7%)有膀胱癌病史，12例(9.7%)有其他恶性肿瘤病史。取患者外周血标本，行全基因组外显子测序或靶向测序寻找UTUC相关的胚系突变。按照美国医学遗传学与基因组学/美国分子病理学协会(ACMG/AMP) 2015版指南，对胚系基因检测数据进行解读，分析胚系致病性突变率，并探究胚系致病性突变携带者的临床病理特征。进一步与东亚健康人群的胚系致病性突变率比较，分析与UTUC致病风险相关的胚系突变。结果:本研究124例中，28例(22.6%)共检测到31个胚系致病性突变。有胚系致病性突变患者与无胚系致病性突变患者的年龄[54.0(47.0，58.0)岁与56.0(50.8，58.0)岁]、性别(男/女：21/7岁与65/31岁)、有膀胱癌病史(0与12/96)、T分期(T 3~4期：12/28与41/96)、组织学高级别比例(26/28与85/96)的差异均无统计学意义( P>0.05)。31个胚系致病性突变位于22个基因上，分别为BRCA2(4例，12.9%)、MSH2(3例，9.7%)、RAD54L(2例，6.5%)、BRCA1(2例，6.5%)、BRIP1(2例，6.5%)、NOTCH3(2例，6.5%)、XRCC2(1例，3.2%)、VEGFA(1例，3.2%)、TBX3(1例，3.2%)、RET(1例，3.2%)、PRKN(1例，3.2%)、PALB2(1例，3.2%)、NTRK1(1例，3.2%)、NCOA3(1例，3.2%)、MSH6(1例，3.2%)、LRP1B(1例，3.2%)、KMT2D(1例，3.2%)、KMT2A(1例，3.2%)、FANCA(1例，3.2%)、BARD1(1例，3.2%)、ARID1A(1例，3.2%)和AR(1例，3.2%)基因。对124例患者的胚系致病性突变率与东亚健康人群的胚系致病性突变率进行比较，结果显示BRCA2 ( OR＝11.9, 95% CI 3.8 ~37.7, P<0.001)、MSH2( OR＝11.9, 95% CI 3.2~44.5, P<0.001)、RAD54L( OR＝14.2, 95% CI 2.7~73.8， P＝0.002)和BRCA1 ( OR＝11.8, 95% CI 2.4~59.1， P＝0.003)基因的胚系致病性突变可显著增加UTUC的发病风险。 结论:本研究年龄≤60岁UTUC患者的胚系致病性突变率为22.6%，携带BRCA2、MSH2、RAD54L或BRCA1基因的胚系致病性突变可显著增加UTUC的发病风险。

目的:探讨X射线修复交叉互补1（XRCC1）基因多态性对接受奥沙利铂为基础辅助化疗的Ⅲ期结直肠癌患者预后及安全性的影响。方法:回顾性分析2012年3月至2019年12月郑州大学第一附属医院胃肠外科218例R0切除术后接受奥沙利铂为基础辅助化疗的Ⅲ期结直肠癌患者的临床资料。其中男125例，女93例，年龄18~78岁。留取患者的外周血及外周血单核细胞（PBMC）分别用来进行XRCC1多态性基因分型及XRCC1基因的mRNA表达分析。通过Kaplan-Meier生存分析方法分析基因型和预后的相关性，通过χ2检验分析方法探讨基因型和不良反应的相关性。结果:218例结直肠癌患者的中位随访时间为4.9（0.3~7.3）年，中位无疾病生存期（DFS）为4.4年，中位总生存期（OS）为5.5年。XRCC1基因rs1799782位点的分布频率为：GG基因型占62.4%（136/218），GA型占33.0%（72/218），AA型占4.6%（10/218），最小等位基因频率为0.21，3种基因型分布频率符合哈迪温伯格平衡（ P=0.905）。后续的分析将GA和AA型患者合并，GG基因型和GA/AA基因型患者的DFS［ M（95% CI）］分别为5.2（4.5~5.9）年和3.8（3.2~4.4）年，差异有统计学意义（χ2=6.943， P=0.008）。两种基因型患者的OS［ M（95% CI）］分别为6.0（5.3~6.7）年和4.5（3.9~5.1）年，差异有统计学意义（χ2=5.538， P=0.010）。GA/AA基因型患者的PBMC中XRCC1基因mRNA的表达水平为3.8±0.6，高于GG型患者的2.8±0.7，差异有统计学意义（ t=6.140， P<0.001）。 结论:XRCC1基因rs1799782位点可能通过介导XRCC1基因mRNA的表达，从而影响接受奥沙利铂为基础辅助化疗的结直肠癌患者的预后。

目的:探讨局部进展期直肠癌X射线修复交叉互补基因1 (XRCC1 rs25487)多态性与新辅助放化疗相关性。方法:使用前瞻性队列研究，纳入于2018年8月至2019年7月在贵州省肿瘤医院腹部肿瘤科就诊的55例局部进展期直肠癌患者，对患者进行新辅助同步放化疗，于同步放化疗前采血并进行DNA测序确定XRCC1 rs25487基因型。采用调整混杂因素的logistic回归分析研究肿瘤新辅助放化疗后T分期、N分期降期情况与患者XRCC1 rs25487基因多态性的关系并分层分析探究各基因型与中性粒细胞淋巴细胞比值(NLR)等临床特征的交互作用。结果:各基因型频率均符合Hardy-Weinberg平衡。调整混杂因素以后，相较于AA基因型患者，GG型患者新辅助放化疗后T降期率减低( OR＝0.1， P<0.05)。而GA型患者新辅助放化疗后无论是T降期率还是N降期率，与AA基因型患者差异均无统计学意义( P>0.05)。并且AA/GA基因型与NLR存在交互作用而影响放疗后T降期率。 结论:XRCC1 rs25487基因多态性与局部进展期直肠癌患者新辅助放化疗的疗效相关，且与NLR值有交互作用，可能成为新辅助放化疗疗效的预测因子。

目的:明确经典Wnt通路在食管癌细胞放射抵抗中的作用，探讨经典Wnt通路介导食管癌细胞放射抵抗的机制，为临床上增强食管癌放射敏感性提供重要的分子靶点。方法:应用克隆形成实验检测人食管癌细胞EC9706、ECA109、KYSE70、KYSE150的放射敏感性。通过蛋白质印迹和RT-PCR检测照射后经典Wnt通路的活化情况。通过添加经典Wnt通路激活剂(AZD2858)和抑制剂(XAV-939)综合评价经典Wnt通路对食管癌细胞放射敏感性的影响。通过细胞免疫荧光技术检测照射后细胞DNA双链断裂(DSB)的产生、修复和DNA双链断裂修复蛋白焦点的形成。结果:4种食管癌细胞的放射敏感性由高到低分别为EC9706、ECA109、KYSE70、KYSE150细胞。KYSE150细胞照射后细胞核内β联蛋白增加，c-Myc基因转录上调(均 P<0.05)；而EC9706细胞照射后细胞核内β联蛋白、c-Myc基因转录与照射前相近(均 P>0.05)。EC9706细胞经AZD2858处理后放射抗性增加( P<0.05)，而KYSE150细胞经XAV-939处理后放射抗性降低( P<0.05)。AZD2858使EC9706细胞DNA双链断裂修复加快( P<0.05)，而XAV-939使KYSE150细胞DNA双链断裂修复减慢( P<0.05)；XAV-939通过抑制同源重组修复相关蛋白(BRCA1和RAD51)，而不是非同源末端连接修复相关蛋白(Ku80和XRCC4)降低DNA双链断裂修复能力。 结论:经典Wnt通路通过调控照射后DNA双链断裂的同源重组修复参与对食管癌细胞放射敏感性的调控，抑制经典Wnt通路可以克服食管癌细胞的放射抵抗，增强放射对食管癌细胞的杀伤作用。

Objective:This study aimed to establish a neural cell injury model in vitro by stimulating PC12 cells with lipopolysaccharide(LPS)and to examine the effects of astragaloside Ⅳ on key targets using high-throughput sequence technology and bioinformatics analyses.Methods:PC12 cells in the logarithmic growth phase were treated with LPS at final concentrations of 0.25,0.5,0.75,1,and 1.25 mg/mL for 24 h.Cell morphology was evaluated,and cell survival rates were calculated.A neurocyte inflammatory model was established with LPS treatment,which reached a 50％cell survival rate.PC12 cells were treated with 0.01,0.1,1,10,or 100 μmol/L astragaloside Ⅳ for 24 h.The concentration of astragaloside Ⅳ that did not affect the cell survival rate was selected as the treatment group for subsequent experiments.NOS activity was detected by colorimetry;the expression levels of ERCC2,XRCC4,XRCC2,TNF-α,IL-1β,TLR4,NOS and COX-2 mRNA and protein were detected by RT-qPCR and Western blotting.The differentially expressed genes(DEGs)between the groups were screened using a second-generation sequence(fold change＞2,P＜0.05)with the following KEGG enrichment analysis,RT-qPCR and Western blotting were used to detect the mRNA and protein expression of DEGs related to the IL-17 pathway in different groups of PC12 cells.Results:The viability of PC12 cells was not altered by treatment with 0.01,0.1,or 1 μmol/L astragaloside Ⅳ for 24 h(P＞0.05).However,after treatment with 0.5,0.75,1,or 1.25 mg/mL LPS for 24 h,the viability steadily decreased(P＜0.01).The mRNA and protein expression levels of ERCC2,XRCC4,XRCC2,TNF-α,IL-1β,TLR4,NOS,and COX-2 were significantly increased after PC12 cells were treated with 1 mg/mL LPS for 24 h(P＜0.01);however,these changes were reversed when PC12 cells were pretreated with 0.01,0.1,or 1 μmol/L astragaloside Ⅳ in PC12 cells and then treated with 1 mg/mL LPS for 24 h(P＜0.05).Second-generation sequencing revealed that 1026 genes were upregulated,while 1287 genes were downregulated.The DEGs were associated with autophagy,TNF-α,interleukin-17,MAPK,P53,Toll-like receptor,and NOD-like receptor signaling pathways.Furthermore,PC12 cells treated with a 1 mg/mL LPS for 24 h exhibited increased mRNA and protein expression of CCL2,CCL11,CCL7,MMP3,and MMP10,which arc associated with the IL-17 pathway.RT-qPCR and Western blotting analyses confirmed that the DEGs listed above corresponded to the sequence assay results.Conclusion:LPS can damage PC12 cells and cause inflammatory reactions in nerve cells and DNA damage.astragaloside Ⅳ plays an anti-inflammatory and DNA damage protective role and inhibits the IL-17 signaling pathway to exert a neuroprotective effect in vitro.

Chemotherapy resistance plays a pivotal role in the prognosis and therapeutic failure of patients with colorectal cancer(CRC).Cisplatin(DDP)-resistant cells exhibit an inherent ability to evade the toxic chemotherapeutic drug effects which are characterized by the activation of slow-cycle programs and DNA repair.Among the elements that lead to DDP resistance,O6-methylguanine(O6-MG)-DNA-meth-yltransferase(MGMT),a DNA-repair enzyme,performs a quintessential role.In this study,we clarify the significant involvement of MGMT in conferring DDP resistance in CRC,elucidating the underlying mechanism of the regulatory actions of MGMT.A notable upregulation of MGMT in DDP-resistant cancer cells was found in our study,and MGMT repression amplifies the sensitivity of these cells to DDP treatment in vitro and in vivo.Conversely,in cancer cells,MGMT overexpression abolishes their sensi-tivity to DDP treatment.Mechanistically,the interaction between MGMT and cyclin dependent kinase 1(CDK1)inducing slow-cycling cells is attainted via the promotion of ubiquitination degradation of CDK1.Meanwhile,to achieve nonhomologous end joining,MGMT interacts with XRCC6 to resist chemotherapy drugs.Our transcriptome data from samples of 88 patients with CRC suggest that MGMT expression is co-related with the Wnt signaling pathway activation,and several Wnt inhibitors can repress drug-resistant cells.In summary,our results point out that MGMT is a potential therapeutic target and predictive marker of chemoresistance in CRC.

目的:探讨 X 线修复交叉互补基因 1(X-ray repair cross-complementing group 1,XRCC1)rs25487基因多态性与进展期胃癌奥沙利铂联合卡培他滨(XELOX方案)化疗的疗效及疾病进展时间的关系.方法:本研究为回顾性研究,入组110例进展期胃癌患者,均接受XELOX方案化疗,通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法的方法检测XRCC1 rs25487基因分型,分析患者临床病理特点及XRCC1 rs25487基因分型与患者化疗客观有效率(objective response rate,ORR)及疾病进展时间(progression-free survival,PFS)的关系.结果:110例进展期胃癌患者中,携带XRCC1 rs25487GG基因型、AG基因型、AA基因型分别为49例(44.5％)、52例(47.3％)、9例(8.2％),GG基因型患者ORR高于AG/AA基因型患者(53.1％vs 37.7％),但差异未达到统计学意义(x2=2.594,P=0.107).GG基因型患者比AG/AA基因型患者PFS更长[6.3个月(95％CI:5.7～6.9)vs 5.0个月(95％CI:4.4～5.6),P=0.049].患者临床病理特征均与化疗疗效无关,但肿瘤分化程度及TNM分期与PFS有关(P均＜0.05).Cox回归显示,肿瘤分化程度、TNM分期及XRCC1 rs25487是影响PFS的独立因素.结论:XRCC1 rs25487基因型与进展期胃癌患者XELOX方案化疗疗效密切相关,测定XRCC1 rs25487基因型可以为进展期胃癌的个体化治疗提供参考.

目的 研究甲状腺癌EB病毒感染与X射线交错互补修复基因1(XRCC1)、干扰素基因刺激蛋白1(STING1)、白细胞介素-10(IL-10)基因多态性及病理类型的关联.方法 选取2021年3月-2023年3月青岛大学附属青岛市海慈医院(青岛市中医医院)收治的甲状腺癌患者130例为恶性组,同期收治的138例甲状腺腺瘤患者为良性组,比较两组及不同病理类型甲状腺癌患者EB病毒感染率、XRCC1、STING1、IL-10基因多态性,比较不同EB病毒感染状态甲状腺癌患者XRCC1、STING1、IL-10基因多态性.结果 恶性组EB病毒感染率、XRCC1基因型AA、GA及XRCC1、IL-10等位基因A占比高于良性组,XRCC1基因型GG占比低于良性组(P＜0.05);乳头状癌组、滤泡状癌组EB病毒感染率高于髓样癌组、未分化癌组(P＜0.05);乳头状癌组、未分化癌组XRCC1等位基因G高于滤泡状癌组、髓样癌组(P＜0.05).感染组STING1等位基因C高于非感染组(P＜0.05);感染组IL-10基因型CC占比高于非感染组,基因型CA占比低于非感染组(P＜0.05).结论 甲状腺癌和甲状腺腺瘤患者EB病毒感染率、XRCC1基因多态性分布具有明显差异,且EB病毒感染可能与甲状腺癌患者病理类型有关,同时IL-10基因多态性可能与甲状腺癌患者EB病毒易感性有关.