目的 分析环状RNA同源结构域相互作用蛋白激酶3(circ_HIPK3)靶向miR-381-3p/锌指蛋白217(ZNF217)轴对β淀粉样蛋白(Aβ)诱导的海马神经元功能和形态的影响.方法 制备新生大鼠海马神经元,分为对照组、Aβ组、si NC1组、si HIPK3组、si HIPK3+inhibitor NC组、si HIPK3+miR-381-3p inhibitor组、si HIPK3+miR-381-3p inhibitor+si NC2组、si HIPK3+miR-381-3p inhibitor+si ZNF217组,除对照组外其余组均通过40 μmol/L Aβ1～42诱导.qRT-PCR法测定海马神经元circ_HIPK3、miR-381-3p、ZNF217 mRNA表达,透射电镜观察细胞形态,CCK-8法测定海马神经元存活率,Hochesst 33342法测定海马神经元凋亡,流式细胞仪检测海马神经元内Ca2+荧光强度,Western blot法测定海马神经元磷酸化Tau蛋白(P-Tau)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、ZNF217蛋白表达,双萤光素酶报告基因分析miR-381-3p与circ_HIPK3、ZNF217靶向关系.结果 对照组海马神经元结构正常,胞核形态正常,线粒体、内质网无病理改变;Aβ组海马神经元呈退行性改变,核形态异常,膜内陷,可见大量线粒体肿胀,胞浆内含大量脂滴空泡;与Aβ组相比,si HIPK3组海马神经元结构部分恢复;与si HIPK3组相比,si HIPK3+miR-381-3p inhibitor组海马神经元结构损伤严重;与si HIPK3+miR-381-3p inhibitor组相比,si HIPK3+miR-381-3p inhibitor+si ZNF217组海马神经元结构损伤减轻.与对照组相比,Aβ组海马神经元circ_HIPK3、ZNF217 mRNA和蛋白表达、凋亡率、Ca2+荧光强度、P-Tau、Bax、Caspase-3蛋白表达升高,miR-381-3p表达、存活率、Bcl-2蛋白表达降低(P＜0.05);与Aβ组相比,si HIPK3组海马神经元circ_HIPK3、ZNF217 mRNA和蛋白表达、凋亡率、Ca2+荧光强度、P-Tau、Bax、Caspase-3蛋白表达降低,miR-381-3p表达、存活率、Bcl-2蛋白表达升高(P＜0.05);与si HIPK3组相比,si HIPK3+miR-381-3p inhibitor组海马神经元circ_HIPK3、ZNF217 mRNA和蛋白表达、凋亡率、Ca2+荧光强度、P-Tau、Bax、Caspase-3蛋白表达升高,miR-381-3p水平、存活率、Bcl-2蛋白表达降低(P＜0.05);与si HIPK3+miR-381-3p inhibitor组相比,si HIPK3+miR-381-3p inhibitor+si ZNF217组海马神经元ZNF217 mRNA和蛋白表达水平、凋亡率、Ca2+荧光强度、P-Tau、Bax、Caspase-3蛋白表达降低,存活率、Bcl-2蛋白表达升高(P＜0.05);miR-381-3p与circ_HIPK3、ZNF217均靶向结合.结论 circ_HIPK3沉默可能通过调控miR-381-3p/ZNF217轴改善Aβ诱导的海马神经元结构功能损伤.

背景与目的 针对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的治疗和诊断仍然是医学界的难题,而探究NSCLC发生发展的分子机制是当前研究的热点.长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)NORAD在多种癌细胞中高表达,可能是促进NSCLC发生的分子靶点.探讨LncRNA NORAD通过miR-199a-3p调控锌指蛋白217(zinc finger protein 217,ZNF217)对NSCLC细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响.方法 实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测正常肺上皮细胞BEAS-2B、肺癌H460细胞和顺铂(Cisplatin,DDP)耐药细胞株H460/DDP细胞中NORAD、miR-199a-3p、ZNF217基因表达;将H460/DDP细胞分为control组、si-NC组、si-NORAD组、miR-NC组、miR-199a-3p mimic组、si-NORAD+inhibitor NC组、si-NORAD+miR-199a-3p inhibitor组.检测细胞增殖、细胞凋亡情况,各组细胞NORAD、miR-199a-3p、ZNF217基因表达,Ki-67、caspase-9、ZNF217蛋白表达量;验证miR-199a-3p与NORAD和ZNF217的关系.结果 与BEAS-2B细胞相比,H460和H460/DDP细胞中NORAD、ZNF217 mRNA表达显著升高(P<0.05),miR-199a-3p表达显著降低(P<0.05).与H460细胞相比,H460/DDP细胞中NORAD、ZNF217 mRNA表达显著升高(P<0.05),miR-199a-3p表达显著降低(P<0.05).与control组和si-NC组相比,si-NORAD组H460/DDP细胞增殖率、NORAD、ZNF217 mRNA表达、Ki-67、ZNF217蛋白表达显著降低(P<0.05),凋亡率、miR-199a-3p表达、caspase-9表达显著升高(P<0.05).与miR-NC组相比,miR-199a-3p mimic组H460/DDP细胞增殖率、NORAD、ZNF217 mRNA表达、Ki-67、ZNF217蛋白表达显著降低(P<0.05),凋亡率、miR-199a-3p、caspase-9表达显著升高(P<0.05).与si-NORAD+inhibitor NC组相比,si-NORAD+miR-199a-3p inhibitor组H460/DDP细胞增殖率、ZNF217 mRNA表达、Ki-67、ZNF217蛋白表达显著升高,凋亡率、miR-199a-3p表达、caspase-9表达显著降低(P<0.05).结论 下调NORAD表达可增强miR-199a-3p表达并抑制ZNF217表达,进而抑制H460/DDP细胞增殖,促进其凋亡,增强其DDP化疗敏感性.

目的 利用生物信息学分析ZNF217 在低级别胶质瘤(LGG)中表达的临床意义.方法 通过GEPIA、HPA、UALCAN、CGGA、TIMER2.0、cBioPortal和LinkedOmics等数据库对低级别胶质瘤患者ZNF217 的差异表达、临床病理特征、预后价值、免疫细胞浸润、基因突变和启动子甲基化水平进行分析.结果 LGG 组织中 ZNF217 mRNA和蛋白表达水平较正常组织上调(P<0.05),ZNF217 mRNA表达水平与患者的肿瘤分级、免疫细胞浸润及相关标志物呈正相关(P<0.05),与患者总生存期和无病生存期呈负相关(P<0.05).ZNF217 发生基因突变和启动子低甲基化(P<0.05),进而导致LGG患者预后不良(P<0.05).结论 ZNF217 在 LGG中表达上调,其高表达与LGG患者预后不良有关,ZNF217 可能成为LGG预后生物标志物和潜在的治疗靶点.

目的 检测锌指蛋白217(ZNF217)在非小细胞细胞癌中的表达,探讨其与非小细胞肺癌患者临床病理特征的关系,并分析其与非小细胞肺癌患者生存及预后的关系.方法 利用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测非小细胞肺癌组织及对应癌旁组织中ZNF217的表达水平,并利用统计学软件分析ZNF217的临床相关性.结果 ZNF217在非小细胞肺癌组织中的表达水平高于癌旁组织.非小细胞肺癌组织中ZNF217的表达水平与非小细胞肺癌患者TNM分期及淋巴结转移情况呈正相关,与其他临床病理特征无相关.Kaplan-Meier生存曲线结果发现ZNF217表达与患者术后5年总体生存率及无进展生存率均呈负相关.Cox风险比例模型结果发现ZNF217可作为判断非小细胞肺癌预后独立的预测指标.结论 ZNF217在非小细胞肺癌组织中表达升高,并可作为判断非小细胞肺癌患者生存及预后的指标.

目的:探讨锌指蛋白217(ZNF217)在胰腺癌组织中的表达,分析其与胰腺癌患者临床特征的关系.方法:收集61例胰腺癌患者术后切除的胰腺癌组织及癌旁组织标本,各61例;采用免疫组化法检测组织标本中ZNF217蛋白表达,分析ZNF217蛋白表达与胰腺癌患者临床病理特征(性别、年龄、瘤体直径、TNM分期、组织学分级及淋巴结转移)的关系.结果:免疫组织化学染色结果显示,胰腺癌组织ZNF217蛋白阳性着色强度大于癌旁组织,阳性细胞比例高于癌旁组织,胰腺癌组织ZNF217蛋白阳性率及免疫组织化学评分显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(P＜0.01);分析发现,胰腺癌男性与女性患者、年龄＜50岁与年龄≥50岁患者、组织学分级G1～G2级与G3级患者间ZNF217蛋白阳性表达率比较,差异无统计学意义(P＞0.05);而瘤体直径≥2 cm、TNM分期Ⅲ～Ⅳ期及淋巴结转移患者ZNF217蛋白阳性表达率分别显著高于瘤体直径＜2 cm、TNM分期Ⅰ～Ⅱ期及无淋巴结转移患者,差异有统计学意义(P＜0.05、或P＜0.01).结论:胰腺癌组织ZNF217蛋白阳性表达率显著高于癌旁组织,且ZNF217蛋白阳性表达与瘤体直径增大、高TNM分期及淋巴结转移有关.

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织锌指基因217(ZNF217)蛋白表达变化及其与患者临床病理特征和预后的关系.方法 选择NSCLC组织及其配对的癌旁正常组织各85例份,采用免疫组化法检测ZNF217蛋白表达.分析ZNF217蛋白表达与NSCLC患者临床病理特征和预后的关系.结果 NSCLC组织与癌旁正常组织ZNF217蛋白阳性表达率分别为55.3％(47/85)、25.9％(22/85),二者比较P<0.01.ZNF217蛋白表达与肿瘤T分期、N分期、TNM分期有关(P均<0.05),而与性别、年龄、吸烟史、ECOG评分、病理类型、手术方式无关(P均>0.05).ZNF217蛋白阳性表达者总生存期明显低于ZNF217蛋白阴性表达者(χ2=7.770,P<0.01).结论NSCLC组织ZNF217蛋白表达明显升高,其表达变化与肿瘤进展和患者预后不良有关.

目的 研究锌指蛋白217 (zinc finger protein 217,ZNF217) 在肝细胞癌 (hepatocellular carcinoma,HCC) 中的表达及对肝癌细胞侵袭能力的影响.方法 采用免疫组化染色检测50对肝癌及癌旁组织中ZNF217的表达水平.分析不同ZNF217表达水平的肝癌患者临床特征的差异.使用ZNF217特异性siRNA沉默肝癌MHCC97-H细胞内ZNF217的表达后,通过Transwell侵袭小室模型检测下调ZNF217对MHCC97-H侵袭能力的影响,蛋白质免疫印迹检测细胞内上皮间质化转变 (epithelial-mesenchymal transition,EMT) 标志物E-cadherin及Vimentin蛋白的表达变化.结果ZNF217蛋白在肝癌组织中的表达水平显著升高 (P=0.007);高表达ZNF217的肝癌患者TNM分期更晚 (Ⅲ+Ⅳ期,P=0.022).siRNA下调MHCC97-H细胞内ZNF217的表达后降低了侵袭细胞的数目 (P=0.024),上调了细胞内E-cadherin蛋白的表达 (P=0.039) 而抑制了Vimentin蛋白的表达 (P=0.011).结论 肝癌中高表达的ZNF217可能通过诱导肿瘤细胞发生EMT现象而促进肿瘤侵袭.

目的 探讨锌指蛋白217(ZNF217)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与患者预后的关系.方法 选择2012年1月至2013年10月重庆三峡中心医院收治的120例NSCLC患者.采用免疫组织化学方法检测ZNF217在NSCLC组织及癌旁组织中的表达,分析ZNF217的表达与患者临床病理特征的相关性;采用Kaplan-Meier法及Cox回归模型多因素分析法,探讨影响NSCLC根治术预后的因素.结果 ZNF217主要表达于肿瘤细胞核内,肿瘤组织的ZNF217阳性率高于癌旁组织[52.5％(63/120)比20.1％(25/120);χ2=25.909,P<0.05].随着肿瘤T分期(χ2=7.333,P=0.026)、N分期(χ2=7.782,P=0.020)、TNM分期(χ2=11.557,P=0.003)的升高,ZNF217阳性率增高.ZNF217阳性患者术后总生存(P=0.007)及无进展生存(P=0.004)较阴性患者差.Cox多因素分析显示,ZNF217是影响NSCLC预后的独立危险因素.结论 ZNF217是影响NSCLC预后的独立危险因素,可能成为NSCLC精准治疗的潜在靶点.

目的 研究锌指蛋白(ZNF)217在非小细胞肺癌细胞中的表达及其对细胞增殖活性及克隆形成能力的影响.方法 以Real-time PCR和Western印迹检测ZNF217在非小细胞肺癌细胞和正常人肺上皮细胞中的表达变化.短发夹RNA(shRNA)-ZNF217慢病毒干扰载体感染非小细胞肺癌细胞,Real-time PCR和Western印迹检测干扰效果.MTT检测细胞增殖变化,细胞克隆实验检测细胞克隆能力变化,流式细胞术检测细胞周期和凋亡变化,Western印迹检测细胞中p21、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白水平.结果 非小细胞肺癌细胞中ZNF217表达水平明显高于正常人肺上皮细胞(P<0.05).shRNA-ZNF217慢病毒干扰载体可以成功下调非小细胞肺癌细胞中ZNF217的表达水平.沉默ZNF217后的非小细胞肺癌细胞的增殖能力降低,细胞克隆能力也降低,细胞G1期比例升高,细胞凋亡率也升高,细胞中p21蛋白水平升高,Cy-clin D1蛋白水平下降,Bax蛋白水平也升高.结论 ZNF217在非小细胞肺癌细胞中高表达,沉默其表达可以抑制非小细胞肺癌细胞增殖和克隆形成能力,阻碍细胞G1期向S期进展,诱导细胞凋亡.

目的 检测膀胱癌组织中ZNF217蛋白的表达并与患者临床特征进行比较分析,明确其临床意义.方法 回顾性分析123例接受膀胱癌切除手术治疗的膀胱癌患者临床病理资料.应用免疫组化方法检测膀胱癌肿瘤组织及对应癌旁组织中ZNF217蛋白的表达水平,分析其与患者临床特征的相关性.结果 ZNF217蛋白在膀胱癌肿瘤组织中呈高表达,高表达率为67.4％,而在癌旁组织中低表达.通过与临床特征对比,ZNF217的表达水平与肿瘤T分期和肿瘤复发具有显著相关性(均P<0.05),而与患者的年龄、性别、肿瘤分化、淋巴结转移无关(均P>0.05).生存分析结果显示,膀胱癌组织中ZNF217高表达的患者其总生存时间和无进展生存时间明显短于低表达者(均P<0.05).结论 膀胱癌组织中ZNF217呈高表达,其表达水平与肿瘤的分期、肿瘤复发和不良预后相关,提示其可作为膀胱癌的潜在治疗靶点.