目的:优化射血分数保留型心力衰竭(heart failure with preserved ejection fraction,HFpEF)大鼠模型构建方法,为研究HFpEF提供实验模型.方法:10周龄,Zucker糖尿病脂肪/自发性高血压心力衰竭肥胖(obese zucker diabetic fatty/spontaneously hypertensive heart failure F1 hybrid,ZSF1-obese)大鼠和ZSF1瘦型(ZSF1-lean)大鼠分为三组,分别为实验组[(ZSF1-obese大鼠,饮水中给予一氧化氮合酶抑制剂(inhibition of constitutive nitric oxide synthase,L-NAME),n=6]、经典模型组(ZSF1-obese大鼠,普通水,n=3)、空白对照组(ZSF1-lean大鼠,普通水,n=4).三组均以普通饲料饲养.实验组给药10周后采集三组的血压、葡萄糖耐量、心脏超声、心脏磁共振成像、生化指标数据.结果:实验组在给药10周后收缩压和舒张压分别达到(155.0±6.6)mmHg(1mmHg=0.133kPa)和(119.4±10.9)mmHg,比起经典模型组明显升高(分别为P=0.0001和P-0.0143),达到高血压标准,而经典模型组和对照组均没有达到高血压标准.心脏超声结果显示三者均呈现射血分数保留(均P＞0.05),实验组和经典模型组有相似的舒张功能障碍、心肌肥厚和糖耐量受损(P＞0.05).生化指标也显示实验组和经典模型组存在相似的脂肪肝、肾功能减退.结论:与传统的ZSF1大鼠直接作为HFpEF模型相比,联合L-NAME的ZSF1大鼠作为HFpEF模型能更全面呈现HFpEF的疾病特征,包括高血压,舒张功能障碍、糖耐量受损等表型.

目的 探讨维生素D(VD)对自发性糖尿病大鼠肠道菌群的影响.方法 自发性肥胖型2型糖尿病(ZDF)大鼠随机分为正常对照(Con)组、VD对照(VD)组、模型(T2DM)组和VD干预(VD+T2DM)组.检测各组大鼠空腹血糖情况和口服糖耐量水平.采用16S rDNA测序技术检测大鼠肠道菌群变化,进行OTU分析(韦恩图)、α 多样性分析(chao1、observed species、PD whole tree、shannon 和 simpson)、β 多样性分析(主坐标分析(PCoA))、菌群结构及菌群物种差异性分析(线性判别分析及影响因子(LEfSe)分析).结果 VD干预显著改善了 T2DM大鼠的空腹血糖水平和胰岛素抵抗情况(P＜0.05).α多样性结果表明T2DM组和VD+T2DM组的chao1、observed species、PD whole tree、shannon 和 simpson 指数无显著差异(P＞0.05);β 多样性分析结果显示,与T2DM组相比,VD+T2DM组与Con组的物种相似度更高.各组大鼠肠道菌群的优势菌具有显著差异;相较于T2DM 组,VD+T2DM 组的 Bacteroidetes 丰度下降、Firmicutes 和 Clostridium XIVa 丰度增加.结论 VD 可改善 T2DM大鼠的空腹血糖升高和胰岛素抵抗情况;VD可改善T2DM大鼠的肠道菌群结构,降低Bacteroidetes丰度,升高Firmicutes 和 Clostridium XIVa 丰度.

目的 探讨参苓白术散对于2型糖尿病Zucker大鼠甜味觉受体相关蛋白的影响.方法 SPF级5周龄的瘦型对照Lean Zucker(LZ)雄性大鼠4只作为对照组,将自发型2型糖尿病肥胖Zucker(Zucker Diabetic Fatty,ZDF)大鼠雄性大鼠16只,随机分为模型组,低、中、高剂量参苓白术散治疗组.低、中、高剂量参苓白术散治疗组分别给予生药浓度为6、12、24 g·kg-1·d-1.对照组和模型组每日予同中药给药剂量超纯水灌胃,连续灌胃给药28d.定期测量大鼠的体质量、摄食量、随机血糖,实验末期进行口服葡萄糖耐量试验(Oral glucose tolerance test,OGTT).运用蛋白质印迹(Western blot,WB)技术检测舌组织、空肠组织及回肠组织样本检测葡萄糖转运蛋白-2(Glucose transporter 2,GLUT2)以及甜味觉受体1型成员2和3(Taste receptor 2 and 3,T1R2、T1 R3)、α-gustducin的蛋白表达.结果 2型糖尿病模型组Zucker大鼠的体质量增长、随机血糖值、食物摄入量水平明显高于瘦型对照组,葡萄糖耐量显著低于瘦型对照组.经治疗后,参苓白术散3个剂量组均能不同程度降低2型糖尿病Zucker大鼠的血糖、体质量增长及食物摄入量,并改善2型糖尿病Zucker大鼠葡萄糖耐量.干预4周后,参苓白术散3个剂量组均可以使2型糖尿病Zucker大鼠舌、回肠、空肠的GLUT2、T1R2、T1R3、α-gustducin蛋白表达水平不同程度恢复.结论 参苓白术散剂量依赖性地降低2型糖尿病Zucker大鼠血糖,其作用可能与调控舌和肠道甜味感知和葡萄糖代谢有关.

目的:观察经皮耳迷走神经电刺激(taVNS)对Zucker糖尿病肥胖(ZDF)大鼠血浆褪黑素(MLT)含量及肝脏、骨骼肌、胰腺胰岛素受体表达的影响,探讨taVNS的降糖机制.方法:30只ZDF雄性大鼠随机分为模型组、经皮耳迷走神经电刺激组(taVNS组)、假taVNS组,每组10只,另以10只同种系雄性Zucker瘦型大鼠作为空白对照组.ZDF大鼠采用高脂饲料喂养诱导2型糖尿病大鼠模型.taVNS组使用HANS-100A型电针仪刺激大鼠双侧耳甲腔,假taVNS组刺激部位与taVNS组相同,但不通电.以上干预均每日1次,30 min/次,连续6周.每周测量1次各组大鼠空腹血糖(FBG);ELISA法检测大鼠血浆MLT含量;Western blot法检测大鼠肝脏、骨骼肌、胰腺组织中胰岛素受体表达水平.结果:与空白对照组比较,模型组大鼠FBG升高(P＜0.01),血浆MLT含量降低(P＜0.01),胰腺组织中胰岛素受体表达水平降低(P＜0.01).与模型组比较,taVNS组大鼠FBG降低(P＜0.05,P＜0.01),血浆MLT含量升高(P＜0.01),肝脏、骨骼肌、胰腺组织中胰岛素受体表达水平均升高(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001).与taVNS组比较,假taVNS组大鼠FBG升高(P＜0.05,P＜0.01),血浆MLT含量降低(P＜0.01),骨骼肌和胰腺组织中胰岛素受体表达水平均降低(P＜0.01,P＜0.001).结论:taVNS可能是通过调节MLT含量,改善胰岛素抵抗,最终实现其降糖效应.

目的 探讨穴位埋线对缺血再灌注损伤高脂血症合并2型糖尿病(ZDF)大鼠心肌保护作用的机制,为临床治疗提供理论依据.方法 2015年1月-2016年5月选取ZDF大鼠24只,随机分为对照组、缺血再灌注组、缺血预处理组和穴位埋线组,每组6只.适应性饲养1周后第7天,对照组直接开胸取材,其余3组均结扎冠状动脉左前降支,建立缺血再灌注损伤模型.缺血再灌注组缺血30 min,再灌注60 min;缺血预处理组缺血5 min、再灌注5 min,重复3次,之后操作同缺血再灌注组;穴位埋线组在适应性饲养1周后第1天,“内关”“膻中”“心俞”穴进行穴位埋线,之后操作同缺血再灌注组.采用透射电镜观察各组ZDF大鼠心肌组织超微结构及自噬水平,Westernblotting法检测心肌内质网应激相关蛋白葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)、自噬相关蛋白Beclin-1水平,酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)水平.结果 透射电镜下对照组线粒体和心肌细胞形态结构正常,未见明显自噬体;缺血再灌注组线粒体和心肌细胞肿胀明显,细胞膜破裂、内容物泄漏,仅见空泡或空腔及少量自噬泡;缺血预处理组、穴位埋线组与缺血再灌注组相比,心肌细胞超微结构损伤较轻,且自噬泡数量明显增多;缺血再灌注组心肌细胞超微结构破坏最为严重,且未见明显自噬泡.缺血再灌注组、缺血预处理组、穴位埋线组GRP78、Beclin-1、MPO、MDA水平高于对照组(P＜0.05);缺血预处理组、穴位埋线组GRP78、Beclin-1水平高于缺血再灌注组,但MPO、MDA水平低于缺血再灌注组(P＜0.05).结论 穴位埋线可能通过促进GRP78、Beclin-1水平升高,进而起到对再灌注损伤心肌的保护作用.

目的 诱导ZDF大鼠建立2型糖尿病动物模型,探索最佳成模时间及方法,并观察解毒通络调肝方的干预作用.方法 88只9周龄雄性ZDF大鼠以Purina#5008饲养,10只9周龄雄性Zucker Lean(ZL)鼠,以维持饲料饲养,以随机血糖≥11.1 mmol/L作为2型糖尿病成模标准,第13周将已成模ZDF大鼠分为模型组,盐酸二甲双胍(西药)组(0.5 g·kg-1·d-1),解毒通络调肝方大剂量组(5 g·kg-1·d-1)、中剂量组(3 g·kg-1·d-1)、小剂量组(1 g·kg-1·d-1);ZL大鼠作为正常组.连续4 w药物灌胃,第17周处死大鼠,检测血糖(GLU)、糖化血红蛋白(HbA1c)、糖化血清蛋白(GSP)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)等指标.结果 9周龄雄性ZDF大鼠以Purina#5008诱导,第11周成模率达82.95％,死亡率为3.4％,为理想的2型糖尿病动物模型.药物干预后发现,与正常组比较,模型组、西药组、解毒通络调肝方大、中、小剂量组GLU、GSP、TC、TG、HDL-C显著升高(P<0.01);与模型组比较,西药组与解毒通络调肝方大剂量组GLU均下降(P<0.05);西药组与解毒通络调肝方中剂量组GSP水平下降(P<0.05).西药组、解毒通络调肝方大、中、小剂量组TG、TC、HDL-C下降明显(P<0.01,P<0.05).结论 9周龄ZDF大鼠以Purina#5008饲养诱导11 w,可以成功制备2型糖尿病动物模型,具模型稳定性及持续性较好,成模率高,死亡率低;其动物模型通过解毒通络调肝方干预可降低血糖、调节血脂,从而控制2型糖尿病发生发展.

目的:观察葛根芩连汤(GegenQinlian Decoction,GQD)对自发肥胖型2型糖尿病(T2DM)ZDF大鼠血清中游离脂肪酸(FFA)、胰腺组织中核因子(NF)-κB、胰岛素受体底物2(IRS2)的影响.方法:8只雄性ZDF(fa/+)大鼠设为正常对照组,成模的雄性ZDF(fa/fa)大鼠24只随机分为模型组、二甲双胍组和葛根芩连汤组.二甲双胍组、葛根芩连汤组分别予二甲双胍0.3 g·kg-1 ·d-1、葛根芩连汤13.8g·kg-1·d-1,正常对照组和模型组给予同体积的0.9％ NaCl溶液灌胃,均连续灌胃8周.每2周测大鼠体质量、空腹血糖(fasting blood-glucose,FBG);给药8周后取材,全自动生化法检测FFA,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测大鼠空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)含量,计算胰岛素抵抗指数(insulin resistance index,IRI)、胰岛素敏感指数(insulin sensitivity index,ISI),免疫印迹(Western blot,WB)法检测NF-κB、IRS2的表达.结果:与正常对照组比较,模型组大鼠体质量、FBG、FFA、FINS、IRI均显著升高,ISI明显降低(P＜0.01);胰腺组织中NF-κB蛋白相对表达量升高,IRS2的蛋白相对表达量下降(P ＜0.05,P＜0.01).与模型组比较,葛根芩连汤组大鼠体质量、FBG、FFA、FINS、IRI均明显降低,ISI明显升高(P＜0.05,P＜0.01);胰腺组织中NF-κB蛋白相对表达量明显降低,IRS2蛋白相对表达量明显升高(P＜0.01).结论:葛根芩连汤可有效改善胰岛素抵抗、提高组织对胰岛素的敏感性,其作用机制可能与相关低度炎症反应中的细胞因子有关.

目的 探讨维生素D(VD)缺乏对自发性糖尿病大鼠发病的影响.方法 雄性5~6周龄Zucker对照鼠及模型鼠(ZDF)按照体重随机分为4组,即正常对照组(ZL)、VD缺乏对照组(ZL+VD.Def)、模型组(ZDF)及VD缺乏模型组(ZDF+VD.Def).各组大鼠喂养至12周龄,喂养过程中监测体重、进食量、饮水量、尿量、尿糖、血糖,并于11周龄进行口服糖耐量试验;采用HE染色观察大鼠胰岛形态结构的改变.结果 VD缺乏模型组大鼠体重明显高于模型组;饮水量及尿量增加的出现均早于模型组;VD缺乏模型组大鼠血糖升高明显早于模型组,并且各个阶段VD缺乏模型组血糖均显著高于模型组,12周龄时约为模型组的2.0倍;较模型组,VD缺乏模型组大鼠糖耐量受损、胰岛细胞损伤更为严重.结论 VD缺乏加快并加重ZDF大鼠糖尿病发病,VD缺乏是肥胖型T 2DM发病的关键因素.

目的:通过自发性2型糖尿病大鼠观察糖尿病状态下大鼠的心脏结构和功能变化,同时探讨糖尿病心肌病的发病机制.方法:用Zucker糖尿病肥胖(Zucker diabetic fatty,ZDF)大鼠建立糖尿病模型,Zucker lean (ZL)大鼠为对照组.利用超声多普勒法检测ZDF大鼠心脏结构和功能的改变;麦胚凝集素染色计算单个心脏细胞面积;Western blot检测心肌细胞肥大标志物 β-肌球蛋白重链(β-myosin heavy chain,β-MHC)和心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP),以及晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)、L型钙通道蛋白α1C亚基(L-type calcium channel α1C subunit,CaV1.2)和钙库操纵性钙通道相关功能蛋白Orai1的表达水平.结果:与ZL大鼠相比,ZDF大鼠的血糖和体重明显增加,左心室壁增厚,心脏舒张功能明显减弱,收缩功能轻度增强;ZDF大鼠左室心肌细胞表面积明显增大,心肌细胞肥大相关蛋白β-MHC和ANP的表达水平也明显增加;ZDF大鼠心肌组织中的RAGE和Orai1蛋白表达增高,CaV1.2蛋白表达下降(P<0.05).结论:2型糖尿病大鼠心肌细胞肥大,心室肥厚,心功能代偿性增强,其机制可能与RAGE表达增强和钙调控异常有关.

目的 观察袖状胃切除术(sleeve gastrectomy,SG)对肥胖大鼠(Zucker大鼠)脂肪组织激素敏感性脂肪酶(hormone sensitive lipase,HSL)及肉碱脂酰转移酶-1(carnitine acyl transferase-1,CAT-1)表达的影响,探讨其减重机制.方法 30只10周龄雄性Zucker大鼠按随机数字表法随机分为手术组、假手术组、饮食配对组,每组10只.术后6周处死大鼠,取腹膜后脂肪组织,应用RT-PCR及Western blot技术检测各组HSL和CAT-1基因mRNA及蛋白表达水平.结果 手术组术后6周体重较其他2组明显降低,分别((250.0±5.8)、(370.0±10.0)及(310.0±9.6)g(P＜0.05),HSL和UCP-1基因mRNA及蛋白表达均明显升高(P＜0.05).结论 SG能使肥胖大鼠脂肪组织脂解作用关键基因HSL和CAT-1的表达增强,促进脂肪水解,增加能量消耗,是其减重的重要机制之一.