探讨舒芬太尼联合miR-410-3p调控膀胱癌细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的分子机制。体外培养人膀胱癌细胞RT4，分别加入不同剂量的舒芬太尼处理细胞，分别将anti-miR-NC、anti-miR-410-3p转染至RT4细胞，分别将anti-miR-NC、anti-miR-410-3p转染至RT4细胞后加入舒芬太尼处理。研究发现舒芬太尼可通过上调miR-410-3p的表达从而减弱膀胱癌细胞增殖、迁移及侵袭能力，诱导细胞凋亡。

目的:探讨miRNA-372-3p（miR-372-3p）在胃癌组织及细胞中的表达及其对RAB22A表达的调控，并探讨其对胃癌细胞生物学功能的影响。方法:使用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测山西省肿瘤医院2018年12月至2019年12月70例胃癌确诊患者癌组织和癌旁组织中miR-372-3p的表达水平。在胃癌MGC-803和SGC-7901细胞中转染miR-372-3p抑制剂，并以miR-372-3p NC（空载体）作为对照；分别使用克隆形成实验、CCK-8法和流式细胞术检测细胞克隆形成能力、细胞增殖能力和凋亡水平。采用双荧光素酶报告基因实验检测MGC-803细胞miR-372-3p和RAB22A表达的相关性。以miRNA-21（miR-21）作为阴性对照，采用蛋白质印迹法检测MGC-803、SGC-7901细胞RAB22A蛋白的表达。结果:RT-PCR结果显示，与癌旁组织比较，胃癌组织中miR-372-3p相对表达量上调，差异具有统计学意义（0.51±0.37比0.77±0.48， t=1.98， P=0.005）。不同肿瘤长径和病理分级的胃癌组织中miR-372-3p表达水平差异均有统计学意义（均 P<0.05）。体外实验表明，低表达miR-372-3p能抑制MGC-803细胞和SGC-7901细胞克隆的形成[（211±4）个比（410±5）个， t=2.78， P=0.001；（244±8）个比（423±7）个， t=2.76， P=0.001]，降低MGC-803和SGC-7901细胞增殖活性（MGC-803细胞48 h吸光度值0.39±0.06比0.57±0.03， t=3.18， P=0.01；MGC-803细胞72 h吸光度值0.50±0.05比0.81±0.06， t=2.78， P<0.01；SGC-7901细胞72 h吸光度值：0.50±0.09比0.79±0.09， t=2.77， P=0.01），提高MGC-803细胞早期凋亡率[（25.19±0.26）%比（20.02±0.04）%， t=4.30， P<0.05]。双荧光素酶报告基因实验发现，同miR-372-3p NC与RAB22A野生型基因共转染相比，miR-372-3p抑制剂与RAB22A野生型基因共转染后，MGC-803细胞荧光素酶活性下降，差异有统计学意义（1.00±0.04比0.53±0.06， t=3.18， P=0.01）；蛋白质印迹法结果显示，敲低miR-372-3p能抑制MGC-803、SGC-7901细胞RAB22A蛋白表达。 结论:胃癌组织miR-372-3p表达上调，miR-372-3p可能促进RAB22A的表达并调控胃癌的发生发展，可作为潜在的治疗靶标。

目的:应用生物信息学的方法研究β-微管蛋白亚型TUBB3在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其分子调控机制。方法:通过GEO数据集(GEO profile)、转录因子和miRNA调控关系数据库(TransmiR)、综合型的miRNA靶基因数据库(miRWalk)、转录因子结合位点搜索(ConSite)等，研究TUBB3上游转录因子、共表达基因及与其有相互作用的miRNA等，阐明NSCLC中TUBB3表达的分子调控机制及其可能的作用。结果:TUBB3的启动子存在Snail、n-MYC等多个与NSCLC相关的转录因子结合位点。其在转录后水平受到miR-200家族、miR-342-3p、miR-410等miRNA的调控，这些miRNA与NSCLC的增殖与侵袭有关。TUBB3与HDGF、GMPS、MRPL9、PMAIP1和SLBP有共表达行为，受转录因子Snail共同调控。其中SLBP、PMAIP1及转录因子Snail与细胞周期和细胞凋亡存在一定的联系。结论:NSCLC中TUBB3的表达受到多个层面的调控，其可能参与了细胞周期和凋亡，同时与NSCLC细胞增殖与侵袭存在一定的联系。

目的 探讨circ_0003926在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的作用机制及临床意义.方法 收集2022-05-01-2023-01-30在华北理工大学附属医院就诊的60例ESCC患者及同时期体检的年龄相仿、性别相同的60名健康者血浆标本.荧光原位杂交实验检测circ_0003926和miR-139-3p在ESCC组织芯片表达水平,并分析其临床相关性.采用San-ger测序和背靠背实验以及核糖核酸外切酶(Rnase R)实验验证circ_0003926环状结构和稳定性.采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测circ_0003926和miR-139-3p在ESCC细胞系和血浆中表达水平.应用细胞计数试剂盒8(CCK8)法、克隆形成实验、Trans well侵袭迁移实验和划痕实验及流式细胞术分别检测circ_0003926和miR-139-3p对ESCC细胞增殖、克隆、侵袭、迁移和凋亡的影响,双荧光素酶报告基因实验和qRT-PCR验证circ_0003926与下游miR-NAs结合.裸鼠皮下移植瘤实验检测circ_0003926对移植瘤生长的影响.结果 Sanger测序、背靠背和Rnase R实验验证了 circ_0003926的环状结构.荧光原位杂交结果显示,circ_0003926在癌及癌旁组织中表达水平分别为18.00±5.10 和 11.80±4.22(t=8.792,P＜0.001);miR-139-3p 的表达水平分别为 18.26±2.81 和 26.23±2.97(t=17.713,P＜0.001).circ_0003926高表达与临床分期(x2=5.312,P=0.021)有关联,与生存率也有关联(x2=9.501,P=0.002);miR-139-3p表达水平与淋巴结转移(x2=4.114,P=0.043)和病理分级(x2=4.267,P=0.039)有关联.qRT-PCR结果显示,在ESCC患者血浆和健康者血浆中,circ_0003926的表达水平分别为3.54±2.15和1.03±0.05(t=6.993,P＜0.001);miR-139-3p 的表达水平分别为 0.36±0.17 和 1.03±0.03(t=27.001,P＜0.001).与正常细胞系HEEC相比,circ_0003926在ESCC细胞系中的表达水平升高(F=281.577,P＜0.001),而miR-139-3p表达水平下降(F=87.034,P＜0.001).敲低circ_0003926后,KYSE-150和KYSE-410细胞的增殖、迁移和侵袭能力下降,凋亡水平升高(均P＜0.05).抑制miR-139-3p的表达可以逆转抑制circ_0003926表达后对细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的作用(均P＜0.05).裸鼠皮下移植瘤实验结果显示,si-circ_0003926组的肿瘤体积和体质量小于si-NC组,10 d～28 d差异均有统计学意义,均P＜0.001,及si-circ_0003926+antagomiR-NC组的肿瘤体积和体质量小于si-circ_0003926+an-tagomiR-139-3p组,10 d～28 d差异均有统计学意义,P＜0.001.结论 circ_0003926在ESCC组织、血浆和细胞中均高表达,通过miR-139-3p调控ESCC的进展,有可能成为ESCC诊断、治疗和预后的一种新的生物标志物.

目的 探究血清miR-410-3p和白细胞介素(IL)-6在脓毒症患者中的表达及其诊断价值.方法 选取2020年8月至2022年8月期间上海市浦东新区人民医院收治的脓毒症患者125例作为研究组,同期选择上海市浦东新区人民医院102例收治的非脓毒症患者作为对照组.实时定量荧光聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测各组研究对象血清miR-410-3p表达水平.采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组研究对象血清IL-6水平.Pearson法分析脓毒症患者血清中miR-410-3p与IL-6的相关性.多因素Logistic回归分析影响脓毒症的因素.受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-410-3p与IL-6水平对脓毒症的诊断价值.结果 与对照组相比,研究组脓毒症患者的血清miR-410-3p水平显著降低(t=8.26,P＜0.001),血清IL-6水平显著升高(t=8.73,P＜0.001).脓毒症患者的血清miR-410-3p和IL-6水平呈负相关(r=-0.63,P＜0.001).多因素Logistic回归分析的结果显示,IL-6是脓毒症发生的危险因素(P＜0.05),miR-410-3p是脓毒症发生的保护因素(P＜0.05).血清miR-410-3p、IL-6水平诊断脓毒症的曲线下面积(AUC)分别为0.770、0.846,二者联合诊断脓毒症的AUC为0.853,优于血清miR-410-3p水平单独诊断(Z=2.27,P=0.023),而与IL-6水平单独诊断差异无统计学意义(Z=0.32,P=0.747).结论 脓毒症患者血清的IL-6水平升高,miR-410-3p表达水平降低,两者联合对脓毒症具有较高的诊断价值.

目的:探究miR-410-3p在银屑病中的表达及其对角质形成细胞增殖和凋亡的影响及机制.方法:收集12例寻常型银屑病患者和12例健康志愿者空腹静脉血,qRT-PCR检测血清miR-410-3p表达.将常规培养的人角质形成细胞HaCaT分为:对照组、IL-22组、miR-NC组和miR-410-3p组.后3组使用100 ng/ml IL-22刺激24 h,体外建立银屑病模型.miR-NC组和miR-410-3p组加入IL-22前48 h分别转染miR-NC和miR-410-3p,对照组不进行任何处理.CCK-8分析细胞活力,BrdU检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,qRT-PCR检测miR-410-3p和YAP1 mRNA表达,Western blot分析YAP1蛋白表达.Starbase软件和双荧光素酶报告基因分析miR-410-3p和YAP1的靶向关系.转染miR-410-3p的HaCaT银屑病细胞模型中同时过表达YAP1,检测细胞活力和凋亡.结果:miR-410-3p在银屑病患者血清中的表达显著低于健康志愿者(P<0.05).与对照组相比,IL-22组miR-410-3p表达降低,YAP1 mRNA和蛋白表达增加,细胞活力增强,BrdU阳性细胞增多,凋亡率降低(均P<0.05);与IL-22组相比,miR-410-3p组miR-410-3p表达增加,YAP1 mRNA和蛋白表达减少,细胞活力减弱,BrdU阳性细胞减少,凋亡率升高(均P<0.05).此外,本实验证实miR-410-3p与YAP1存在靶向结合关系,过表达YAP1可逆转miR-410-3p对IL-22诱导的HaCaT细胞增殖和凋亡的影响.结论:miR-410-3p在银屑病患者中表达减少,上调其表达可通过靶向YAP1抑制IL-22诱导的角质形成细胞增殖,促进细胞凋亡.

目的 探究类风湿关节炎(RA)患者血清miR-410-3p的表达及其与膝关节软组织病变的关系.方法 选取我院收治的RA患者89例,根据28个关节疾病活动度评分(DAS28)将其分为活动组(42例)、缓解组(47例);另选取同期体检健康志愿者52例为健康组.RT-PCR法检测血清miR-410-3p的表达水平;超声检查膝关节软组织病变情况;采用Pearson法分析血清miR-410-3p表达与膝关节软组织病变的关系.结果 活动组和缓解组患者血清miR-410-3p表达水平均低于健康组(P<0.05),活动组患者血清miR-410-3p表达水平低于缓解组(P<0.05).活动组和缓解组患者股骨内、外侧踝软骨厚度均小于健康组(P<0.05),且活动组患者上述指标小于缓解组(P<0.05);活动组和缓解组患者髌上囊液体深度、滑膜厚度大于健康组(P<0.05),且活动组患者髌上囊液体深度、滑膜厚度大于缓解组(P<0.05).RA患者血清miR-410-3p水平与髌上囊液体深度和滑膜厚度呈正相关(P<0.05),与股骨内、外侧踝软骨厚度呈负相关(P<0.05).结论 RA患者血清miR-410-3p表达水平降低,且与膝关节软组织病变密切相关,检测血清miR-410-3p水平变化可为评估膝关节软组织病变提供参考.

目的 探讨威灵仙总皂苷通过调控微小RNA(miRNA)-410-3p对胶质瘤细胞生物学活性的影响以及对第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphatase and tensin homolog deleted on chromo-some ten/protein kinase B/mammalian target of rapamycin,PTEN/Akt/mTOR)信号通路的调节作用.方法 用不同浓度威灵仙总皂苷处理U87细胞后,用CCK-8法检测细胞存活率.将对数生长期U87细胞随机分为对照组、NC组(转染miR-410-3p NC)、inhibitor 组(转染 miR-410-3p inhibitor)以及 inhibitor 联合威灵仙总皂苷组(转染 miR-410-3p inhibitor 24 h 后,40 μmol·L-1 威灵仙总皂苷处理),依次检测miR-410-3p表达水平、细胞存活率、细胞迁移和侵袭力,miR-410-3p与PTEN的靶向关系和PTEN、p-Akt、Akt、p-mTOR以及mTOR蛋白的相对表达量.结果 细胞存活率随威灵仙总皂苷浓度的升高而降低(P＜0.05);与NC组比较,inhibitor组划痕愈合率、侵袭细胞数量、p-Akt和p-mTOR蛋白的相对表达量升高,miR-410-3p表达水平以及PTEN蛋白的相对表达量降低(P＜0.05);与inhibitor组比较,inhibitor联合威灵仙总皂苷组细胞存活率、划痕愈合率、侵袭细胞数量、p-Akt和p-mTOR蛋白相对表达量降低,miR-410-3p表达水平以及PTEN蛋白相对表达量升高(P＜0.05).结论 威灵仙总皂苷可抑制胶质瘤细胞的恶性生物学行为,其可能是通过上调miR-410-3p表达,进而调控PTEN/Akt/mTOR信号通路发挥作用.

目的 观察miR-410-3p对前列腺癌细胞PC-3和DU-145增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 转染miR-NC(对照组)或转染miR-410-3p(实验组)至前列腺癌细胞株PC-3和DU-145;细胞计数试剂盒(CCK-8法)和克隆形成实验检测miR-410-3p对前列腺癌细胞增殖的影响;流式细胞术检测miR-410-3p对细胞凋亡的影响.microRNA.org靶基因预测软件预测miR-410-3p的靶基因;荧光实时定量聚合酶链反应(fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qPCR)和免疫印迹法(Western blot)检测血管内皮细胞生长因子C(vascular endothelial growth factor,VEGFC)在mRNA水平和蛋白水平的变化.免疫印迹法检测p-Raf-1和p-ERK1/2蛋白表达.结果 转染miR-410-3p后,细胞的增殖能力明显降低(P＜0.05),细胞形成的克隆数明显减少(P＜0.05),细胞凋亡明显增加(P＜0.01).VEGFC在mRNA水平和蛋白水平的表达明显下降(P＜0.01),p-Raf-1和p-ERK1/2蛋白表达明显降低.结论 miR-410-3p可抑制前列腺癌细胞的增殖和促进前列腺癌细胞的凋亡,其可能作用机制为干扰VEGFC基因的表达,为前列腺癌的分子靶向治疗提供新的思路.

[目的]检测miR-410与HMGB1在多发性骨髓瘤中的表达水平及其对细胞增殖与侵袭能力的影响,探讨miR-410在多发性骨髓瘤致病中的作用.[方法]实时荧光定量PCR检测多发性骨髓瘤骨髓及细胞中miR-410的表达水平;蛋白质印迹用于分析HMGB1蛋白表达水平;CCK8实验和Boyden侵袭小室实验分别用于检测细胞增殖活性及侵袭能力;双荧光素酶报告实验用于检测miR-410与HMGB1之间的相互作用;通过重组质粒构建及细胞转染调节相关基因在细胞内的表达;通过建立裸鼠异位移植瘤模型,在体验证miR-410对肿瘤生长的影响.[结果] MiR-410在多发性骨髓瘤骨髓及细胞中表达均下调(P＜0.01),而HMGB1表达均上调(P＜0.01).MiR-410抑制多发性骨髓瘤细胞的增殖和侵袭(P＜0.01).MiR-410通过与HMGB1的3'UTR作用,负向调控HMGB1的表达.MiR-410通过下调HMGB1抑制多发性骨髓瘤细胞增殖和侵袭(P＜0.05).MiR-410抑制多发性骨髓瘤移植瘤小鼠肿瘤生长(P＜0.05).[结论]MiR-410通过负向调控HMGB1表达,抑制多发性骨髓瘤细胞增殖和侵袭,从而抑制肿瘤发生发展.