氮素是影响玉米生长发育、产量和籽粒品质形成所必需的营养元素.为挖掘早期发育的玉米胚乳响应低氮胁迫的关键基因,揭示玉米胚乳抵御低氮胁迫的生理响应及分子机制,本研究在低氮和足氮处理下,对授粉后第6天的自交系B73玉米胚乳进行氨基酸含量、氨基酸衍生物含量分析和转录组测序.生理测定表明,低氮胁迫下,玉米胚乳中10种氨基酸或氨基酸衍生物含量升高,其中苏氨酸、β-氨基异丁酸、组氨酸、β-丙氨酸、赖氨酸含量升高程度最大,其升高范围介于71.1％～153.1％;而其余21种氨基酸或氨基酸衍生物含量降低,其中鸟氨酸、胱氨酸、天冬酰胺、苯丙氨酸、α-氨基丁酸含量下降程度最大,其下降程度范围介于51.6％～65.8％.转录组测序结果表明,与足氮处理相比,低氮胁迫下玉米胚乳中鉴定到3185个显著上调和2612个显著下调的差异表达基因.进一步检测到参与氮代谢途径和氰基氨基酸代谢途径的差异表达基因分别为12和9个,AP2/ERF-ERF、bZIP、WRKY差异表达转录因子家族成员分别为20、10和21个.这些候选基因可能是玉米胚乳抵御低氮胁迫响应的重要基因资源,其为玉米胚乳应答低氮胁迫的分子机制及耐低氮玉米新品种培育奠定基础.

首先以对氨基苯乙酸和水杨醛类化合物为原料,通过Perkin缩合反应,再经盐酸酸化合成了3个3-芳基香豆素类化合物4a ～ 4c;再与取代苯甲酰氯6a～ 6h通过酰胺化反应合成得到了10个3-(4'-苯甲酰基氨基-苯基)香豆素类化合物7a ～ 7j.所有目标化合物的结构均经过1H NMR,13C NMR,ESI-MS进行了确证.通过测定α-葡萄糖苷酶抑制活性和晚期糖基化终产物(AGEs)形成抑制活性评价了目标化合物的体外降血糖活性.结果 表明化合物7f(ICs0=10.84±0.36 μmol/L)表现出较好的α-葡萄糖苷酶的抑制活性;化合物7g(IC50=5.01±0.55 μmol/L)对AGEs形成抑制活性远高于阳性药氨基胍盐酸盐(AG,IC50=290.31±7.32 μmol/L),这些结果为抗糖尿病药物的进一步研究提供了理论基础.

目的 探索脓毒症大鼠血清特征性生物标志物.方法 采用盲肠结扎穿孔术(Cecal Ligation and Puncture,CLP)复制脓毒症大鼠模型,将大鼠分为5组:A组(假手术组)、B组、C组、D组、E组,每组10只,分别于术后0 h采集A组、术后6 h采集B组、术后12 h采集C组、术后24 h采集D组、术后48 h采集E组大鼠心脏血2 mL,静置、离心后收集血清.采用基于液相色谱-质谱的代谢组学方法分析脓毒症大鼠血清代谢物的变化情况.结果 差异离子聚类分析图显示,术后6 h开始(甚至更早),即B组大鼠血清便可发现差异离子.到24 h,即D组大鼠与A组血清中差异离子最明显、强度最大.主成分分析(PCA)和偏最小二乘-判别分析(PLS-DA)发现,A组和其余各组大鼠的代谢物均有差异,且以D组差异代谢物变化最为显著.通过代谢通路分析,D组与A组间有12个特征性差异代谢物,包括D-葡萄糖胺6-磷酸,D-葡萄糖胺磷酸,α-D-葡萄糖胺1-磷酸,D-葡萄糖胺1-磷酸,D-半乳糖胺6-磷酸,胆红素,(3Z)-植物色素,15,16-二氢胆绿素,15,16-二氢胆绿素IXα,15,16-二氢胆绿素ixa,顺式-(Homo)3-乌头酸,2,3-Bis-O-(香叶酰香叶酰)-sn-丙三氧基-1-磷酸-L-丝氨酸.而D-氨基葡萄糖及其含磷衍生物中,D-葡萄糖胺6-磷酸、D-葡萄糖胺磷酸盐、 α-D-葡萄糖胺1-磷酸盐、D-葡萄糖胺1-磷酸盐、D-半乳糖胺6-磷酸含量均明显下降.结论 用基于代谢组学的液相色谱-质谱法能检测出脓毒症大鼠差异离子变化趋势;血清中D-氨基葡糖及其含磷衍生物可作为脓毒症大鼠特征性生物标志物.

目的 设计合成新的含α-氨基酰胺结构的化合物,为开发治疗神经病理性疼痛药物提供先导化合物.方法 以拉芬酰胺(ralfinamide)为先导化合物,将A环部分替换成苯并杂环结构2,3-二氢苯并呋喃或2,3-二氢苯并[b][1,4]二呕恶英,得新化合物5a～5f.通过福尔马林舔足实验和体外模片钳实验,评价各化合物的体内外生物活性.结果 在体内福尔马林模型上,化合物5e的镇痛活性优于阳性药拉芬酰胺(P<0.05),活性提高达60％以上;体外模片钳实验结果显示,除5d外,其他化合物对钠离子通道Nav1.7的抑制活性明显低于阳性药拉芬酰胺(P<0.05或P<0.01).结论 通过对拉芬酰胺A环结构进行优化,得到了镇痛活性比拉芬酰胺更好的新化合物.本研究结果可为相关研究提供有益参考.

[目的]通过构建硫代乙酰胺(TAA)诱导的大鼠急性肝性脑病模型,研究黄芩素衍生物二磺酸基黄芩素(DB)对急性肝性脑病模型大鼠的保护作用.[方法]选]择Wistar大鼠为研究对象,将其随机分为对照组、模型组、DB低、中、高剂量(6.25、25、100 mg/kg)组和阳性药(乳果糖,6 g/kg)组.各组大鼠灌胃给予相应剂量药物,对照组与模型组给予等量生理盐水.实验过程中通过Morris水迷宫实验检测大鼠行为学变化.DB干预7 d后处死大鼠,收集结肠内容物、肝脏及脑组织.通过快速血氨测定仪检测大鼠血氨含量;采用pH计法测定结肠内容物pH;通过全自动生化仪检测血清中天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBiL)的浓度;通过苏木精-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)水平,前额叶皮质中γ-氨基丁酸(GABA)和谷氨酸(Glu)含量;通过免疫印迹法检测前额叶皮质中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)和磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)的蛋白表达.[结果]与模型组相比,DB低、中、高剂量组可降低肝性脑病大鼠死亡率;提高大鼠学习记忆能力;改善大鼠肝组织病理学损伤和纤维化;DB中、高剂量组可显著降低血氨和结肠内容物pH(P<0.01);显著降低大鼠血清ALT、AST、ALP、TBiL、TNF-α、IL-6水平(P<0.05或P<0.01);显著降低前额叶皮质中GABA含量(P<0.01),升高前额叶皮质中Glu的含量.DB中剂量组可显著抑制前额叶皮质中PI3K、p-AKT蛋白表达(P<0.01).[结论]DB能够改善TAA诱导的急性肝性脑病大鼠的学习记忆能力和肝功能,降低体内氨水平,抑制炎症因子表达,调节前额叶皮质中神经递质(GABA和Glu)水平,其作用机制可能与调控PI3K/AKT信号通路有关.

目的 探讨薯蓣皂苷通过法尼酯衍生物X受体(FXR)/AMP活化蛋白激酶(AMPK)信号通路对硫代乙酰胺(TAA)诱导急性肝损伤模型大鼠的保护作用.方法 将60只雄性大鼠均分为正常对照组(A组),模型组(B组),薯蓣皂苷低剂量组(C1组)、中剂量组(C2组)、高剂量组(C3组)和阳性对照组(D组),各10只.C1组、C2组、C3组大鼠分别灌胃薯蓣皂苷25,50,100 mg/kg,D组大鼠灌胃水飞蓟素200 mg/kg,A组和B组大鼠灌胃生理盐水每100 g体质量0.1 mL,每天1次,连续7 d.末次灌胃2 h后,B组、C1组、C2组、C3组、D组大鼠腹腔注射TAA 100 mg/kg构建急性肝损伤模型,A组注射等量生理盐水.禁食不禁饮,24 h后麻醉大鼠,心脏取血,采用自动生物分析仪测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)的水平,采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)6、IL-10的水平,以及肝脏组织匀浆中谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)的含量,采用蛋白免疫印迹法测定肝组织中FXR、AMPK、核因子E2相关因子2(Nrf2)、核转录因子κB(NF-κB)的蛋白表达水平.结果 与A组比较,B组、C1组、C2组、C3组、D组大鼠ALT,AST,TNF-α,IL-6,MDA水平及NF-κB蛋白表达水平均显著升高,IL-10,GSH,SOD水平,以及FXR,AMPK,Nrf2蛋白表达水平均显著降低(P<0.05);与B组比较,C1组、C2组、C3组、D组大鼠ALT,AST,TNF-α,IL-6,MDA水平及NF-κB蛋白表达水平均显著降低,IL-10,GSH,SOD水平,以及FXR,AMPK,Nrf2蛋白表达水平均显著升高,且C1组、C2组、C3组呈剂量依赖性(P<0.05);D组和C3组各指标比较无显著差异(P>0.05).结论 薯蓣皂苷对TAA诱导的急性肝损伤模型大鼠具有保护作用,其作用机制可能与激活FXR/AMPK信号通路有关.

目的 设计合成双荧光素修饰的6A,6D-双脱氧-α-环糊精.方法 从α-环糊精出发,经过苄基化保护得到过苄基化-α-环糊精(1),特定温度下利用DIBAL-H对过苄基化-α-环糊精进行选择性脱保护,得到中间体2,中间体2经磺酰化、叠氮化后将6A,6D位点上伯醇转化为叠氮,再经氢化铝锂还原为伯胺.再在钯碳/氢气条件脱除苄基保护,获得6A,6D-双脱氧-6A,6D-二氨基-α-环糊精(6).碱性条件下,中间体6与两倍当量的异硫氰基荧光素发生亲核加成反应,得到6A,6D-双脱氧-6A,6D-双荧光素-α-环糊精(7).结果 6个中间体和1个目标产物的结构经过核磁共振氢谱和质谱确证.结论 成功设计合成双荧光素修饰的6A,6D-双脱氧-α-环糊精(7),并且获得新的环糊精衍生物6A,6D-氧-对甲苯磺酰基-2A-F,3A-F,6B,6c,6E,6F-十六氧苄基-α-环糊精(3).