目的:探讨消旋山莨菪碱（654-2）对X射线诱导小鼠肺上皮细胞损伤的保护作用及潜在机制。方法:利用小鼠肺泡上皮细胞MLE-12单次大剂量X线照射建立体外放射性肺损伤（RILI）模型，细胞分组为：对照组（未照射）、照射组（16 Gy照射）、处理1组（16 Gy照射+2 μmol/L 654-2）、处理2组（16 Gy照射+10μmol/L 654-2）、抑制剂组（16 Gy照射+10 μmol/L 654-2+2 μmol/L ML385）。照射后不同时间点收集细胞进行相关检测。细胞衰老相关β-半乳糖苷酶（SA-β-Gal）染色检测细胞衰老；细胞集落形成能力检测观察细胞处理后的恢复能力；蛋白质印迹法检测p21、p16、磷酸化组蛋白H2AX（γH2AX）、核因子E2相关因子2（Nrf2）、Nrf2 Ser40位点磷酸化（p-Nrf2）、p62、血红素氧合酶1（HO-1）、NAD（P）H醌脱氢酶1（NQO1）等蛋白表达；流式细胞术检测细胞凋亡及细胞内总活性氧（ROS）产生；按照相关试剂盒检测谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）；实时反转录PCR检测检测谷氨酸半胱氨酸连接酶催化亚基（GCLC）、谷氨酸半胱氨酸连接酶修饰亚基（GCLM）等mRNA表达情况。计量资料以 xˉ±s表示，两组间比较采用独立样本 t检验，多组间比较采用单因素方差分析。 结果:与照射组相比，处理1、2组细胞SA-β-Gal染色阳性细胞比例减少，细胞衰老减轻（ P均<0.001）。与照射组相比，处理2组的γH2AX蛋白表达减少（ P=0.037），细胞凋亡减少（ P=0.026），细胞增殖能力增强（ P=0.004），GSH（ P=0.002）、SOD（ P<0.001）活力提高，且ROS减少（ P=0.001）。随着654-2的作用时间延长，MLE-12细胞的总蛋白中Nrf2、p-Nrf2的表达增强，同时Nrf2下游抗氧化蛋白NQO1及HO-1的表达增强，GCLC及GCLM mRNA表达增强。当加入Nrf2小分子抑制剂ML385后，抑制剂组的SA-β-Gal染色阳性细胞数（ P=0.145）、ROS（ P=0.317）与照射组的差异无统计学意义。 结论:654-2可以激活Nrf2通路，增强细胞抗氧化能力，抑制细胞衰老，从而发挥对RILI的保护作用。

目的:观察性别决定区相关高迁移率族盒蛋白4(SOX4)对结直肠癌化疗耐药的影响，并探讨其分子机制。方法:检测化疗敏感及耐药结直肠组织和细胞株中SOX4的表达。构建稳定高表达SOX4的结直肠癌细胞系，利用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞在化疗药物作用下的细胞增殖能力，用β-半乳糖苷酶染色观察细胞衰老的变化。用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)以及蛋白质免疫印迹(Western blot)方法检测细胞衰老基因p21 mRNA以及蛋白水平，用Western blot检测p53的蛋白水平变化。在p53缺失结直肠癌细胞中，Western blot检测检测高表达SOX4后，p21蛋白水平的变化。结果:与化疗敏感结直肠癌组织相比，耐药组织中SOX4表达明显升高(敏感组3例升高，耐药组7例升高)。在细胞实验中得出一致结果(耐药组比对照组1.783±0.021， t＝13.20， P<0.05]。在结直肠癌细胞系中高表达SOX4后，加入5-Fu化疗药物，观察到细胞耐药性增加(对照组细胞活力26%，实验组分别为74%及70%)，衰老作用降低(衰老细胞比率对照组41%，实验组分别为23%和21%)。高表达SOX4后，结直肠癌细胞p21表达水平下降(实验组比对照组分别0.324±0.059， t＝4.30， P<0.05；0.297±0.037， t＝5.30， P<0.05)，而p53水平无明显变化(实验组比对照组分别为1.164±0.049， t＝0.45， P>0.05和1.067±0.067， t＝0.41， P>0.05)。当p53缺失时，高表达SOX4不能影响p21表达水平(实验组比对照组为0.983±0.108， t＝0.35， P>0.05)。 结论:化疗耐药结直肠癌SOX4表达水平升高，SOX4可能通过p53调节p21进而抑制细胞衰老，促进结直肠癌化疗耐药。

目的:探讨热休克转录因子1(HSF1)对人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)抗氧化和抗衰老的作用。方法:利用成簇规律间隔短回文重复序列及相关蛋白9(CRISPR/Cas9)基因编辑技术敲除人ARPE-19细胞系中 HSF1基因，构建并获得2种HSF1缺失ARPE细胞株(ARPE/Hsf1 －/－)，分别命名为H8、H9细胞株。取野生型、H8和H9细胞株，应用DHE探针染色结合流式分析技术测定细胞内活性氧簇(ROS)含量，应用流式细胞分析方法测定细胞周期；采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法测定不同培养时间点细胞活力值；采用结晶紫染色实验测定细胞相对存活率；采用β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色实验检测衰老细胞比率；采用Western blot法检测各细胞株中热休克蛋白(HSP)70、HSP27、聚集素(CLU)、p53、p21和白细胞介素(IL)-1β蛋白表达水平；采用实时荧光定量PCR法测定各细胞株中p53、p21、IL-6、IL-8、IL-1β、单核细胞趋化蛋白1(MCP1)mRNA表达水平。比较各细胞株在不同热休克处理条件下和HSP90抑制剂IPI504处理下热休克反应相关蛋白相对表达量，比较各细胞株不同浓度H 2O 2处理后相对存活率，比较各细胞株经或未经ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)处理后p21蛋白相对表达量。 结果:基因测序显示H8和H9细胞株成功携带突变基因，Western blot检测结果显示H8、H9细胞株不表达HSF1蛋白，HSF1在ARPE-19细胞中被成功敲除。与野生型细胞株相比，H8、H9细胞株中的HSP70、HSP27、CLU蛋白相对表达水平显著降低，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；各细胞株HSP90蛋白相对表达水平总体比较，差异无统计学意义( F＝0.29， P>0.05)。在不同热休克刺激和IPI504诱导下野生型细胞株中HSP70、HSP27、CLU蛋白相对表达水平显著升高，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；与野生型细胞株相比，H8和H9细胞株的HSP70、HSP27、CLU蛋白相对表达水平显著低于相应处理的野生型细胞，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。与野生型细胞株相比，H8和H9细胞株培养24、48、72和96 h的细胞活力均显著降低，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。与野生型细胞株比较，H8和H9细胞株G1期细胞百分比显著升高，细胞周期抑制因子p53、p21的mRNA和蛋白相对表达水平显著升高，差异均有统计学意义(均 P<0.05)，SA-β-gal染色阳性细胞比率显著增加，差异均有统计学意义(均 P<0.001)；衰老相关炎症因子IL-6、IL-8、IL-1β、MCP1 mRNA相对表达量显著下降，差异均有统计学意义(均 P<0.001)。H8和H9细胞株ROS含量明显高于野生型细胞株，差异均有统计学意义(均 P<0.001)；H8和H9细胞株经NAC处理后p21蛋白相对表达量较未经NAC处理明显降低，差异均有统计学意义( P<0.05)。H8和H9细胞株200、400、600、800 μmol/L H 2O 2处理条件下细胞相对存活率明显低于野生型细胞，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:敲除HSF1可下调HSP的表达，激活ROS/P53/P21通路，诱导RPE细胞衰老，并增加RPE对氧化应激刺激的敏感性。HSF1在RPE细胞中可能具有抗衰老和抗氧化调控作用。

目的:初步探究circIGF2BP3对光老化皮肤成纤维细胞自噬水平的影响。方法:取中山大学附属第三医院泌尿外科6例儿童包皮环切术后包皮组织，分离培养成纤维细胞，以每日10 J/cm 2长波紫外线（UVA）连续照射14 d，建立UVA诱导的光老化成纤维细胞模型（UVA处理组），未经处理的正常成纤维细胞作为对照组，β半乳糖苷酶染色、Western印迹法检测P21蛋白表达，CCK8法检测细胞活力验证建模是否成功。Western印迹法检测光老化成纤维细胞中自噬相关蛋白P62、LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ表达，qRT-PCR验证光老化与正常成纤维细胞间circIGF2BP3表达差异，并对其进行生物学注释。将原代成纤维细胞分为4组：空载组、UVA +空载组，circIGF2BP3过表达组、UVA+ circIGF2BP3过表达组，Western印迹法检测各组细胞中自噬相关蛋白表达水平。两独立样本均数的比较采用 t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD- t检验。 结果:UVA处理组β半乳糖苷酶染色阳性率（61.33% ± 5.78%）、P21蛋白表达（1.25 ± 0.03）均显著高于对照组（6.37% ± 0.32%、1.00 ± 0.05， t = 9.49、4.26， P < 0.01、< 0.05），而细胞活力（74.33% ± 3.48%）显著低于对照组（100%， t = 7.38， P < 0.01）。UVA处理组P62蛋白表达及LC3-Ⅱ/Ⅰ比值均显著高于对照组（均 P < 0.05）。光老化成纤维细胞中circIGF2BP3的相对表达量为0.72 ± 0.04，显著低于对照组（1.00 ± 0.03）， t = 5.46， P < 0.01。circIGF2BP3过表达组P62蛋白表达（0.60 ± 0.01）及LC3-Ⅱ/Ⅰ比值（0.71 ± 0.01）均显著低于空载组（1.00 ± 0.02、1.00 ± 0.01； t = 16.25、2.75， P < 0.01、 P < 0.05）；UVA + circIGF2BP3过表达组P62蛋白表达（1.05 ± 0.02）及LC3-Ⅱ/Ⅰ比值（2.04 ± 0.05）亦均显著低于UVA +空载组（1.31 ± 0.02、2.72 ± 0.14； t = 10.49、6.47，均 P < 0.01）。 结论:circIGF2BP3可调控UVA诱导的光老化皮肤成纤维细胞自噬水平，为防治光老化提供了新的潜在治疗靶点。

目的:研究二甲双胍对长波紫外线（UVA）所致人永生化角质形成细胞系（HaCaT）光老化的影响及机制。方法:采用细胞计数（CCK8）法测定不同浓度（0 ~ 100 mmol/L）二甲双胍对HaCaT细胞活力的影响，选择10 mmol/L二甲双胍进行后续实验。将培养的HaCaT细胞分为空白对照组、二甲双胍组、UVA照射组和二甲双胍+ UVA组（用含10 mmol/L二甲双胍的培养基处理24 h后采用UVA照射细胞），其中UVA每天以10 J/cm 2照射1次，连续照射3 d。共处理4 d后收集细胞，β半乳糖苷酶法测定各组衰老细胞比例，2，7-二氯二氢荧光素二乙酸酯法测定胞内活性氧（ROS）水平，彗星实验测定DNA损伤水平。另将培养的HaCaT细胞分为空白对照组、二甲双胍组、1.25 μmol/L多索吗啡（dorsomorphin）+二甲双胍组、2.5 μmol/L dorsomorphin +二甲双胍组，其中后两组分别采用1.25、2.5 μmol/L dorsomorphin处理细胞2 h后再用10 mmol/L二甲双胍处理24 h，Western印迹法检测核转录因子E2相关因子2（Nrf2）的细胞定位及磷酸化水平。使用小干扰RNA（siRNA）法将siRNA-Nrf2转染至HaCaT细胞以敲低Nrf2表达（siRNA-Nrf2组），对2.5 μmol/L dorsomorphin处理的HaCaT细胞以及Nrf2敲低的HaCaT细胞进行二甲双胍孵育和UVA照射（dorsomorphin +二甲双胍+ UVA组、siRNA-Nrf2 +二甲双胍+ UVA组），进一步分析各组衰老细胞比例。统计分析采用单因素方差分析及两因素方差分析，组间两两比较采用LSD- t检验。 结果:不同浓度二甲双胍处理24 h可不同程度地影响HaCaT细胞活力（ F = 5 206.31， P < 0.001），其中10 ~ 20 mmol/L二甲双胍组细胞相对存活率与对照组（0 mmol/L二甲双胍组）相比差异无统计学意义（均 P > 0.05），而25 ~ 100 mmol/L二甲双胍组细胞相对存活率显著低于对照组（均 P < 0.05）。UVA照射后HaCaT细胞发生明显皱缩且变狭长，细胞间隙增大，UVA照射组细胞相对存活率（76.13% ± 1.03%）显著低于空白对照组（100.00% ± 1.24%，LSD- t = 14.86， P < 0.001），而二甲双胍+ UVA组细胞存活率（106.69% ± 2.45%）显著高于UVA照射组（LSD- t = 11.55， P < 0.001）。此外，UVA照射组衰老细胞比例（45.14% ± 4.98%）、胞内ROS水平（144.61% ± 4.91%）、细胞核尾部DNA百分比（75.33% ± 1.77%）均显著高于空白对照组（23.84% ± 1.89%、55.49% ± 1.57%、1.88% ± 0.29%，均 P < 0.001），而二甲双胍+ UVA组衰老细胞比例（24.26% ± 1.34%）、胞内ROS水平（58.62% ± 2.17%）、细胞核尾部DNA百分比（15.83% ± 1.23%）均显著低于UVA照射组（均 P < 0.001）。Western印迹结果显示，10 mmol/L二甲双胍组细胞质中Nrf2表达低于空白对照组，细胞核中磷酸化Nrf2表达高于空白对照组，二甲双胍可有效诱导Nrf2的磷酸化，并诱导其核转位；经dorsomorphin预处理后，1.25、2.5 μmol/L dorsomorphin均能明显降低10 mmol/L二甲双胍诱导的AMPKα和Nrf2磷酸化水平。dorsomorphin +二甲双胍+ UVA组、siRNA-Nrf2 +二甲双胍+ UVA组衰老细胞比例分别为67.84% ± 2.74%和65.94% ± 1.33%，均显著高于二甲双胍+ UVA组（37.76% ± 1.64%， t值分别为14.45、13.34，均 P < 0.001）。 结论:二甲双胍可能通过激活AMPK/Nrf2信号通路，清除ROS和减少DNA损伤，从而抑制UVA诱导的HaCaT细胞光老化。

目的:探讨集落刺激因子1受体（colony-stimulating factor 1 receptor，CSF-1R）抑制剂培西达替尼（pexidartinib，PLX3397）对脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）刺激下的骨髓来源巨噬细胞（bone marrow-derived macrophages，BMDM）衰老的调节作用。方法:从10只6~8周龄雄性C57BL/6小鼠（贵州医科大学实验动物中心获取）的股骨和胫骨分离、培养BMDM，将BMDM分为空白对照组、LPS组（1 μg/ml LPS处理24 h）和低、中、高浓度PLX3397预处理组（分别给予100、500和1 000 nmol/L PLX3397处理4 h后，再以1 μg/ml LPS处理24 h），采用细胞计数（cell counting kit-8，CCK-8）试剂盒检测细胞活力；通过衰老相关β-半乳糖苷酶（senescence-associated-β-galactosidase，SA-β-gal）染色检测细胞衰老；蛋白质印迹法检测细胞周期依赖性激酶抑制因子p16、p21和CSF-1R的蛋白表达；细胞免疫荧光法检测p16、p21在细胞内的表达；实时定量PCR（real-time fluorescence quantitative PCR，RT-qPCR）检测衰老相关分泌表型（senescence-associated secretory phenotype，SASP）因子包括白细胞介素（interleukin，IL）、趋化因子1/10（chemokine-1/10，CXCL-1/10）、基质金属蛋白酶8（matrix metalloproteinase-8，MMP-8）、转化生长因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）的mRNA表达。结果:中、高浓度PLX3397预处理组SA-β-gal染色阳性细胞率［分别为（39.33±4.93）%、（36.33 ±3.06）%］均较LPS组［（52.00±3.00）%］显著下调（ P=0.020， P=0.005）；低、中、高浓度PLX3397预处理组CSF-1R的蛋白表达（分别为0.74±0.18、0.61±0.07、0.54±0.06）均较LPS组（1.16±0.08）显著下调（ P=0.013， P=0.002， P<0.001）；低、中、高浓度PLX3397预处理组CSF-1R的mRNA表达（分别为1.04±0.06、0.90±0.05、1.18±0.08）均较LPS组（2.90±0.25）显著下调（ P<0.001）；低、中、高浓度PLX3397预处理组p16平均荧光强度（分别为49.76±3.65、48.21±1.72、47.99±1.26）均显著低于LPS组（66.88±5.85）（ P=0.001， P<0.001， P<0.001）；中、高浓度PLX3397预处理组p21平均荧光强度（分别为34.43±3.62、30.13±0.86）均较LPS组（46.82±5.33）显著下调（ P=0.043， P=0.007）；低、中、高浓度PLX3397预处理组p16蛋白表达（分别为0.56 ±0.04、0.55 ±0.04、0.35 ±0.19）均较LPS组（0.98±0.10）显著下调（ P=0.003， P=0.002， P<0.001）。低、中、高浓度PLX3397预处理组p21蛋白表达（分别为0.69±0.20、0.42±0.08、0.26±0.14）均较于LPS组（1.16 ±0.24）显著降低（ P=0.032， P=0.002， P<0.001）。RT-qPCR结果显示，与LPS组相比，PLX3397预处理组IL-6、IL-1β、CXCL-1、CXCL-10、MMP-8的表达均显著降低（ P<0.001），TGF-β mRNA表达水平显著升高（ P<0.001）。 结论:LPS可通过激活BMDM表面CSF-1R诱发细胞衰老，分泌SASP因子，加重局部炎症反应；CSF-1R抑制剂PLX3397可减弱LPS关联的CSF-1R激活，抑制LPS诱导的BMDM衰老。

目的 探索不同年龄组小鼠骨来源的间充质干细胞(bone derived mesenchymal stem cells,BMSCs)衰老相关的生物学特性及骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)诱导成骨分化能力的改变.方法 将8只C57BL/6J小鼠分为青年组(4周龄,体质量约为10～15 g,n=4)和老年组(12月龄,体质量约为20 g～25 g,n=4),每组雌雄各半.分别从2组小鼠的整骨中提取间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs),通过流式细胞术鉴定2组BMSCs的表面标志物,通过β-半乳糖苷酶染色比较2组BMSCs的衰老程度,通过MTT和EdU掺入实验比较2组BMSCs的增殖及自我更新能力.通过Western blot分析2组BMSCs中周期蛋白CyclinD1、P21的表达情况.采用ALP染色和茜素红S染色及RT-qPCR评估2组BMSCs的体外成骨分化能力,使用RNA-seq分析比较2组BMSCs经BMP2诱导后的差异基因表达,并用流式分析验证测序结果.结果 流式细胞术分析结果显示,分离培养的小鼠BMSCs符合间充质干细胞判定标准.β-半乳糖苷酶染色结果显示,老年组BMSCs的衰老水平显著高于青年组(P＜0.05).而MTT和EdU掺入实验结果表明,老年组BMSCs的细胞活力和增殖能力显著低于青年组(P＜0.05).Western blot结果显示,与青年组比较,老年组BMSCs的细胞周期蛋白CyclinD1表达水平较低,而细胞周期阻抑因子P21蛋白表达水平显著增高(P＜0.05).ALP染色和茜素红S染色及RT-qPCR检测结果显示,BMP2诱导后青年组BMSCs的成骨分化能力显著高于老年组(P＜0.05).RNA-seq 结果显示,BMP2 诱导后,整合素 αV 重组蛋白(cluster of differentiation 51,CD51)在青年组和老年组中的表达趋势相反.而流式细胞术分析结果显示,青年组CD51+细胞在CD45-细胞中占比明显高于老年组(P＜0.01).结论 老年组BMSCs中CD51+细胞在CD45-细胞中占比下降与CD51+细胞对BMP2的成骨诱导响应性下降密切相关.

目的 探讨皮肤光老化的关键基因和相关通路,为阐明皮肤光老化的分子机制提供科学依据.方法 UVB照射构建原代人角质形成细胞光老化模型,采用RNA-seq筛选差异表达基因,进行GO和KEGG富集分析.选取部分差异基因进行qRT-PCR验证.结果 UVB照射可引起原代人角质形成细胞形态变化,细胞活力下降,衰老相关β-半乳糖苷酶阳性细胞率增加.RNA-Seq转录组学分析共发现1 468个差异表达基因(DEGs),其中681个上调基因,787个下调基因.GO富集分析到差异表达基因参与炎症、氧化损伤、角化等生物学过程.KEGG富集筛选到16条与光老化有关的通路包括细胞外基质(ECM)-受体相互作用、p53信号通路等.多种胶原蛋白以及氧化损伤和炎症相关基因都发生了改变.结论 UVB照射能诱导原代人角质形成细胞衰老,同时诱发细胞的转录组学发生显著变化,差异基因涉及多个信号转导通路,为深入探讨皮肤光老化提供了新的方向.

背景 心脏衰老是老年人心血管疾病患病率升高的主要原因之一,了解心肌衰老的发病机制以及发现老年心血管疾病的新治疗靶点至关重要.目的 探讨黑色素瘤缺乏因子2(absent in melanoma 2,AIM2)在小鼠心肌衰老模型中的作用.方法 通过生物信息学分析AIM2在年轻小鼠与老龄小鼠心室中具体的表达差异.在动物水平上,将雄性BALB/C小鼠按照年龄分为年轻组(2月龄)和老龄组(14月龄),分别检测两组小鼠心肌中AIM2、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC)、半胱天冬酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1,Caspase-1)在蛋白和 mRNA水平上的变化.在细胞水平上,首先应用不同浓度的D-gal(0 g/L、10 g/L、20 g/L、50 g/L)处理H9C2心肌细胞制备细胞衰老模型,采用CCK-8法检测细胞活力,以确定复制心肌细胞衰老的D-gal浓度;应用选定浓度的D-gal处理H9C2细胞,将细胞分为对照组和衰老组,采用β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老程度,利用Western blot、免疫荧光和RT-qPCR等方法检测心肌细胞中AIM2、ASC、Caspase-1在蛋白和mRNA水平的变化.结果 生物信息学结果显示老龄小鼠心室肌中AIM2表达水平较年轻组升高.动物实验中,老龄组小鼠心室中AIM2、ASC、Caspase-1的蛋白和mRNA水平均较年轻组升高(P＜0.05).细胞研究中,使用CCK-8法测定细胞活力,结合细胞状态采用20 g/L的D-gal处理H9C2建立细胞衰老模型,衰老组AIM2、ASC、Caspase-1在蛋白和mRNA水平均较对照组升高(P＜0.05).结论 生物信息学、在体与离体实验结果显示,在心肌衰老过程中AIM2在蛋白和mRNA水平均升高,AIM2在心肌衰老的发生和发展中可能发挥了一定作用,为心肌衰老发生机制研究提供了新思路.

目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯[(-)-epigallocatechin-3-gallate,EGCG]对延缓多柔比星(doxorubicin,Dox)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)衰老的作用及机制.方法 2023年4～12月于解放军总医院第二医学中心老年医学研究所体外培养HUVEC,分为对照组、Dox(2 μmol/L)组、Dox+EGCG(50 μmol/L)组、Dox+EGCG+ML385(Nrf2特异性抑制剂,2.5 μmol/L)组,采用β-半乳糖苷酶(β-gal)染色检测细胞衰老,活性氧(reactive oxygen species,ROS)染色检测细胞内ROS含量,超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒及丙二醛(MDA)含量检测试剂盒检测SOD活力和MDA含量,CCK-8实验检测细胞活力以及Western blot检测细胞内衰老相关蛋白(P21和P53)、核因子e2相关因子2(nuclear factor-E2-related factor 2,Nrf2)、血红素加氧酶 1(heme oxygenase 1,HO-1)蛋白水平.结果 浓度(10,30,50)μmol/L的 EGCG处理HUVEC 48 h不影响细胞活力,而浓度(70,100,300)μmol/L 的 EGCG预处理后细胞活力下降,因此选择50 μmol/L作为后续使用浓度.与对照组比较,Dox组β-gal阳性率和ROS水平显著增加(P＜0.05),P21和P53蛋白表达增高(P＜0.05),加入EGCG后β-gal阳性率以及ROS水平明显降低(P＜0.05),SOD活性提高(P＜0.05),MDA含量下降(P＜0.05),同时P21和P53蛋白表达量降低(P＜0.05),Nrf2和HO-1显著增加(P＜0.05).ML385组可逆转EGCG的细胞抗衰老效应,表现为Nrf2和HO-1表达量降低(P＜0.05),而P21和P53蛋白表达量增加(P＜0.05).结论 EGCG可能通过激活Nrf2/HO-1通路延缓Dox诱导的HUVEC衰老效应.