目的:探讨砷及其主要代谢产物对人肺腺癌细胞系A549细胞凋亡及促凋亡基因 Bad和 Bik表达的影响。 方法:于2020年10月，复苏培养A549细胞，利用细胞计数试剂CCK-8检测细胞活力，确定亚砷酸钠（NaAsO 2）染毒A549细胞的浓度和时间。研究分为NaAsO 2染毒组和代谢产物染毒组：NaAsO 2染毒组染毒剂量为0（对照组）、20、40、60 μmol/L；代谢产物染毒组包括60 μmol/L一甲基胂酸（MMA）染毒组、60 μmol/L二甲基胂酸（DMA）染毒组。采用Hoechst33342/碘化丙啶双染法（Ho/PI）观察细胞凋亡情况，采用实时荧光定量聚合酶链式反应法（qRT-PCR）检测染毒后细胞Bad和Bik mRNA表达水平，采用蛋白免疫印迹法（Western blotting）检测Bad蛋白、磷酸化Bad（P-Bad-S112）蛋白、Bik蛋白、裂解Bik蛋白及下游蛋白多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP1）和细胞色素C（Cyt-C）的相对表达情况，采用分光光度法检测半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）3、6、8、9的活性变化。 结果:与对照组比较，20、40、60 μmol/L NaAsO 2染毒组凋亡细胞占比明显增加，差异均有统计学意义（ P<0.01）。与对照组比较，2.0、4.0、6.0 μmol/LNaASO 2染毒组Bad mRNA表达水平、Bik mRNA表达水平升高，Bad蛋白、磷酸化Bad蛋白、Bik蛋白、裂解Bik蛋白、PARP1蛋白、Cyt-C蛋白相对表达量均升高，差异均有统计学意义（ P<0.05），Caspase 3、6、8、9活性明显上调，差异均有统计学意义（ P<0.05）。与对照组比较，DMA染毒组Bad mRNA表达水平为1.439±0.173，差异有统计学意义（ P=0.024），Bik mRNA表达水平差异无统计学意义（ P=0.788）；MMA染毒组Bad和Bik mRNA表达水平差异无统计学意义（ P=0.085、0.063）。与对照组比较，MMA染毒组Bad、Bik、PARP1、Cyt-C蛋白相对表达量（0.696±0.023、0.707±0.014、0.907±0.031、1.032±0.016）差异无统计学意义（ P=0.469、0.669、0.859、0.771）；DMA染毒组Bad、Bik、PARP1、Cyt-C蛋白相对表达量（0.698±0.030、0.705±0.022、0.908±0.015、1.029±0.010）差异均无统计学意义（ P=0.479、0.636、0.803、0.984）。 结论:NaAsO 2可通过引起Bad和Bik蛋白过表达，启动磷酸化Bad的负反馈调节以及Bik的降解，激活下游蛋白PARP1、Cyt-C和Caspase途径，介导A549细胞凋亡。

目的:探讨饮水型地方性砷中毒（简称饮水型砷中毒）病区人群砷代谢模式及影响因素。方法:2004年12月，采用整群抽样方法，选取内蒙古自治区巴彦淖尔市饮水型砷中毒病区内砷中毒人群（砷中毒组）与健康人群（对照组）作为调查对象，对其进行问卷调查。采用高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法检测调查对象家中饮用水砷含量，尿砷及其代谢产物[三价砷（As Ⅲ）、无机砷（iAs）、一甲基胂酸（五价，MMA V）、二甲基胂酸（五价，DMA V）、总砷（tAs）、无机砷百分比（iAs%）、一甲基胂酸百分比（MMA%）、二甲基胂酸百分比（DMA%）、一甲基化率（PMI）、二甲基化率（SMI）]水平；采用原子荧光光度计检测指甲砷和指甲硒水平。采用多元线性回归分析砷代谢模式的影响因素。 结果:共纳入调查对象536人，其中砷中毒组155人、对照组381人，水砷含量范围为0.0 ~ 825.7 μg/L。与对照组比较，砷中毒组性别、文化程度、氟斑牙患病分布情况，差异均无统计学意义（均 P > 0.05）；而年龄、婚姻状况、吸烟、饮酒、水砷含量分布情况，差异均有统计学意义（均 P < 0.05）。与对照组比较，砷中毒组尿As Ⅲ、iAs、MMA V、DMA V、tAs、MMA%、MMA/DMA和指甲砷水平均较高（均 P < 0.05），尿DMA%、SMI和指甲硒水平均较低（均 P < 0.05），而尿iAs%和PMI水平差异均无统计学意义（均 P > 0.05）。性别、文化程度、水井深度、水砷含量、总井数和指甲砷水平是尿As Ⅲ水平的影响因素（β = - 19.82、- 23.83、0.61、0.21、7.26、2.98，均 P < 0.05）；年龄、水井深度、水砷含量和指甲砷水平是尿tAs水平的影响因素（β = 3.18、3.25、1.31、15.59，均 P < 0.05）；性别、文化程度、水井深度、水砷含量、总井数和指甲砷水平是尿iAs水平的影响因素（β = - 20.47、- 25.90、0.64、0.25、7.87、3.11，均 P < 0.05）；年龄、性别、文化程度、水砷含量和指甲砷水平是尿MMA V水平的影响因素（β = 0.52、- 17.07、- 21.84、0.22、2.77，均 P < 0.05）；年龄、水井深度、水砷含量和指甲砷水平是尿DMA V水平的影响因素（β = 2.35、2.47、0.85、9.22，均 P < 0.05）。 结论:与健康人群比较，饮水型砷中毒人群砷代谢模式存在差异，年龄、性别、文化程度、水井深度、水砷含量、总井数以及指甲砷水平可能是不同砷代谢模式的影响因素。

目的:分析吉林和山西省高水砷暴露地区人群尿砷代谢产物，探讨不同人群砷代谢模式和可能的影响因素。方法:2018年10月至2019年8月，采用整群抽样方法，以山西省吕梁市和吉林省白城市部分乡（镇）的饮水砷含量超标村（水砷≥0.05 mg/L）为调查采样点，选择饮用当地集中式供水和小井水的35岁以上常住居民作为砷暴露组，以临近饮食居住习惯相同、经济条件相近的低砷水源地区人群为对照组，开展流行病学调查和一般健康状况检查。采集两组人群尿样，用液相色谱-原子荧光光谱仪（LC-AFS）技术分离和检测4种形态砷化合物，包括三价无机砷（iAs Ⅲ）、五价无机砷（iAs Ⅴ）、一甲基胂酸（MMA）、二甲基胂酸（DMA）。计算总砷（tAs）、无机砷百分比（iAs%）、MMA百分比（MMA%）、DMA百分比（DMA%）、甲基化率（PMI）和二甲基化率（SMI）。采用多元线性回归分析砷代谢的影响因素。 结果:共调查1 415名村民，其中砷暴露组1 256人，对照组159人；对照组与砷暴露组年龄、性别比例、职业分布情况比较，差异均无统计学意义（ P均> 0.05），而吸烟、饮酒、体质指数（BMI）和受教育程度分布情况比较，差异均有统计学意义（ P均< 0.05）。对照组和砷暴露组尿tAs、iAs%、MMA%、DMA%、PMI和SMI中位数（ M）分别为12.86 μg/L、15.03、5.23、76.35、84.97、93.68和69.68 μg/L、10.24、8.37、79.31、89.76、90.65，砷暴露组尿tAs、DMA%和PMI水平均高于对照组，而iAs%和SMI均低于对照组（ U=- 13.87、- 4.30、- 6.64、- 6.64、- 1.99， P均< 0.05）。对人群尿砷代谢影响因素分析发现，年龄和BMI是iAs%的影响因素（ β=- 0.08、- 0.08， P均< 0.05）；性别、饮酒、BMI和受教育程度是MMA%的影响因素（ β=- 0.11、- 0.09、- 0.07、0.08， P均< 0.05）；年龄、性别、BMI和受教育程度是DMA%的影响因素（ β= 0.06、0.09、0.10、- 0.09， P均< 0.05）；年龄和BMI是PMI的影响因素（ β=0.08、0.08， P均< 0.05）；性别、饮酒、BMI和受教育程度是SMI的影响因素（ β=0.09、0.08、0.08、- 0.09， P均< 0.05）。 结论:不同砷暴露人群尿砷代谢模式存在差异，年龄、性别、吸烟、饮酒、BMI以及受教育程度可能是不同砷代谢模式的影响因素。

目的 探讨职业砷暴露人群六个线粒体基因DNA损伤情况,并分析线粒体DNA损伤与尿砷及其代谢的关系.方法 于2017-2018年,选择云南某高污染砒霜厂78名工人为砷暴露组,选择附近村庄无砷接触史的24名居民为对照组,采用氢化物发生-原子吸收分光光度法测定人群尿中不同形态砷含量,采用实时荧光定量PCR方法检测人群外周血中ND1、ATP6、ATP8、COX1、COX2、COX3等六个线粒体基因DNA损伤水平.结果 砷暴露组尿中无机砷、一甲基胂酸、二甲基胂酸及总砷含量均显著高于对照组(P＜0.05),一甲基胂酸和二甲基胂酸百分比显著高于对照组(P＜0.05),二甲基化指数显著低于对照组(P＜0.05).砷暴露组六个线粒体基因DNA损伤水平显著高于对照组(P＜0.05).六个线粒体基因DNA损伤水平与尿中无机砷、一甲基胂酸、二甲基胂酸、一甲基胂酸百分比呈正相关(P＜0.05),与二甲基胂酸百分比呈负相关(P＜0.05).高二甲基化指数组的六个线粒体基因DNA损伤水平显著低于低二甲基化指数组(P＜0.05).结论 职业砷暴露导致人群线粒体DNA损伤,线粒体DNA损伤与砷在机体内甲基化代谢能力有关.

目的 探索砒霜厂职业砷暴露工人EGFR、PTEN、Kras、PIK3CA 4 个基因DNA损伤与尿砷及其代谢的关系.方法 选取云南某砒霜厂 78 名一线职业砷暴露工人为暴露组和 24 名无砷职业暴露史人群为对照组.通过实时荧光定量PCR(Q-PCR)的方法检测外周血淋巴细胞中EGFR、PTEN、Kras、PIK3CA 4 个基因DNA损伤,检测所有工人尿中无机砷、一甲基胂酸、二甲基胂酸的含量并计算百分比.结果 职业砷暴露组人群 4 个基因的DNA损伤以及平均损伤高于对照组(P<0.05).4 个基因的平均损伤与尿中的无机砷、一甲基胂酸、二甲基胂酸、一甲基胂酸百分比呈正相关,与二甲基胂酸百分比呈负相关(P<0.05).结论 砷暴露导致人群重要基因损伤、4 个基因平均损伤具有作为损伤评估标志物的潜力.

目的 探讨经口染毒雄黄、亚砷酸钠后,小鼠体内砷代谢及氧化应激指标的变化,为评价雄黄的毒性提供实验数据.方法 清洁级雌性昆明小鼠随机分为对照组(0.5％羧甲基纤维素钠)、0.5 g/kg雄黄组和0.1 g/kg亚砷酸钠组,各组均灌胃染毒3d,用氢化物发生-超低温捕集-原子吸收分光光度法分别测定尿液和肝组织中无机砷(iAs)、一甲基胂(MMA)和二甲基胂(DMA).用试剂盒法测定全血中GSH和肝脏T-AOC水平.结果 雄黄组小鼠尿液和肝脏中各形态砷和总砷含量高于对照组,但低于亚砷酸钠组;一甲基化率(FMR)和二甲基化率(SMR)高于亚砷酸钠组,差异均有统计学意义(P＜0.05).雄黄组全血GSH和肝脏T-AOC水平均高于亚砷酸钠组(P＜0.05),其全血GSH和肝脏T-AOC水平与对照组相比差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 与亚砷酸钠相比,雄黄中的砷在小鼠体内代谢较慢,对氧化应激指标影响较小.

目的 探讨给与谷胱甘肽(GSH)及其拮抗剂——丁硫氨酸亚砜胺(BSO)对慢性砷暴露小鼠体内砷代谢及氧化应激的影响.方法 将SPF级雌性昆明小鼠随机分为对照组(蒸馏水)、单纯染砷组(50 m//L亚砷酸钠)、GSH干预组(50 mg/L亚砷酸钠+400 mg/kg GSH)和BSO(50 mg/L亚砷酸钠+600mg/kg BSO)干预组,除对照组小鼠饮用蒸馏水外,其余各组均饮用含50 mg/L亚砷酸钠的水溶液连续染毒30周,然后给予400 mg/kg GSH或600 mg/kg BSO,用蒸馏水配制GSH和BSO水溶液,每天两次腹腔注射,连续2d,用氢化物发生-超低温捕集-原子吸收分光光度法测定尿液各形态砷水平,用DTNB及试剂盒法分别测定全血及肝脏中GSH和总抗氧化能力(T-AOC)水平.结果 GSH干预组小鼠尿中二甲基胂(DMA)、DMA含量构成比、二甲基化率(SMR)及总砷含量高于单纯染砷组(P＜0.05),而BSO干预组各形态砷、DMA含量构成比、一甲基化率(FMR)、SMR及总砷含量均低于单纯染砷组(P＜0.05);单纯染砷组小鼠肝脏和血液GSH和T-AOC的水平均低于对照组(P＜0.05).给予GSH干预后,肝脏和血液GSH和T-AOC水平均高于单纯染砷组(P＜0.05)且与对照组差异无统计学意义(P＞0.05).BSO干预组小鼠肝脏和血液GSH和T-AOC的水平均低于其他各组(P＜0.05).结论 外源性GSH干预可以增强砷暴露小鼠的砷甲基化能力,增加砷从尿液中的排出,拮抗砷所致的GSH和T-AOC水平下降,从而减少了砷对机体造成的氧化损伤.

目的:采用HPLC-ICP-MS法对藏药仁青常觉中砷(As)在大鼠体内代谢产物—尿液中的形态进行研究.方法:采用Dionex Ion Pac AS 19阴离子色谱柱,以2mmol· L-1磷酸二氢钠-0.2 mmol·L-1乙二胺四乙酸二钠-10 mmol· L-1无水乙酸钠-3 mmol· L-1硝酸钾(pH=10.5q11.3)-无水乙醇为流动相;流速1.0 mL· min-1;进样量10μL,柱温为室温.结果:实验表明,该方法不受40Ar35Cl+干扰,常见的5种As形态化合物的线性范围为0.5～100μg·L-1,甜菜碱(AsB)、二甲基胂(DMA)、三价砷[As(Ⅲ)]、一甲基胂(MMA)及五价砷[As(Ⅴ)]的定量下限分别为0.07、0.34、0.135、0.13、0.2 μg·L-1,相关系数(R2)均大于0.999.通过对尿液中As总量及As形态进行分析,结果As总量在给药第15天达到最大值,主要As形态化合物为AsB、DMA、As(Ⅲ)和As(Ⅴ);在第26天即停药后第11天As总量降到最低,主要As形态化合物为AsB、DMA和As(Ⅴ).仁青常觉中As在大鼠体内的代谢研究表明:As(Ⅲ)通过大鼠给药吸收进入体内,后在大鼠体内被部分氧化为As(Ⅴ),经过生物甲基化反应,转化为DMA,最终通过尿液排出体外.4种As形态在大鼠尿液中的排泄速度以DMA最快.结论:藏药仁青常觉中As在大鼠体内代谢产物—尿液中的形态分析的研究,为藏药中As的毒理学研究提供了依据.

[J]. Environ Int,2019,125:43?50.2019.01.042单核苷酸多态性(SNPs)主要是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性,是人类可遗传的变异中最常见的一种,占所有已知多态性的80%以上.有研究表明,SNPs可能通过影响砷的甲基化效干扰砷代谢.而环境与基因的交互作用是否会影响孕期砷代谢目前尚不明确,因此,本研究分析SNP?砷的交互作用对砷甲基化效率的影响.在孟加拉国招募1 613名孕妇,分别在怀孕4~16周和21~37周采集尿液样本,检测每份尿液样本总砷及代谢物[无机砷(iAs)、单甲基胂酸(MMA)、二甲基胂酸(DMA)],选取63个与砷代谢有关联中候选基因进行基因分型,使用线性回归模型评估每个SNP和DMA之间的关联,以及SNPs和砷对DMA的相互作用,分别在两个尿液收

为探讨尿砷及其代谢产物对p15基因表达的影响,选取某砷冶炼厂76名一线作业工人为暴露组,非职业环境砷暴露的22名当地居民为对照组,采用原子吸收分光光度法检测尿砷各形态水平,计算一、二级甲基化指数;使用qRT PCR法检测外周血中淋巴细胞p15 mRNA的表达情况.结果 显示,砷冶炼厂工人尿中无机砷(iAs)、一甲基胂酸(MMA)、二甲基胂酸(DMA)、总砷水平均高于对照组,二级甲基化指数(SMI)低于对照组,p15 mRNA的相对表达水平高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05);尿中iAs (r=0.492)、MMA(r=0.531)、DMA (r=0.526)、总砷(r=0.531)、MMA％(r=0.340)与p15基因相对表达呈正相关(P＜0.05),p15的表达受SMI的影响且呈负相关(r=-0.256),差异具有统计学意义(P＜0.05).说明砷可导致职业接触人群中p15基因的相对表达上调,并且存在一定的剂量关系.