目的:探讨微小RNA(miRNA，miR)-598-3p靶向调控RNA聚合酶Ⅱ第五亚基调节蛋白(RMP)基因对人胃癌细胞SGC-7901恶性增殖和侵袭迁移的影响及其作用机制。方法:筛选SGC-7901细胞株行后续实验，分别建立稳定过表达或敲减RMP和miR-598-3p的SGC-7901细胞株。采用溴脱氧尿苷(BrdU)、细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖活力，平板克隆形成实验检测细胞集落形成能力，划痕实验检测细胞迁移能力，Transwell实验检测细胞侵袭能力，双荧光素酶报告基因法分析miR-598-3p的结合靶点，蛋白质印迹法(Western blot)检测相关通路相关蛋白表达水平，两样本间比较使用 t检验。 结果:稳定过表达和敲减RMP或miR-598-3p的SGC-7901细胞株建立成功。敲减RMP能显著降低SGC-7901的增殖能力，BrdU(8.867±1.159比26.030±3.630， t＝7.704， P<0.01)，CCK-8(0.560±0.052比1.020±0.107， t＝6.708， P<0.01)，迁移能力(336.000±21.070比252.700±36.120， t＝3.452， P<0.05)，侵袭能力(36.330±7.371比127.300±10.690， t＝12.140， P<0.01)。过表达RMP能显著提高SGC-7901细胞的增殖能力，BrdU(56.400±6.560比24.800±4.423， t＝6.918， P<0.01)，CCK-8(2.105±0.142比1.028±0.110， t＝10.350， P<0.01)，迁移能力(131.300±20.110比257.000±29.140， t＝6.148， P<0.01)，侵袭能力(347.700±41.140比135.000±17.690， t＝8.226， P<0.01)。生物信息学预测miR-598-3p与RMP的3’端非编码区(3’UTR)位点结合，并通过双荧光素报告系统验证。过表达或敲减miR-598-3p能分别降低和提高SGC-7901细胞株的增殖、迁移及侵袭能力，而RMP的回复表达能挽救miR-598-3p引起的细胞增殖、侵袭及迁移的抑制。miR-598-3p通过靶向RMP抑制p70核糖体蛋白S6激酶(p70s6k1)/凋亡蛋白(Bad)和核因子-κB(NF-κB)通路发挥功能。 结论:miR-598-3p靶向RMP基因抑制p70s6k1/Bad和NF-κB通路降低SGC-7901细胞的增殖、集落形成、迁移及侵袭能力。

目的:探讨砷及其主要代谢产物对人肺腺癌细胞系A549细胞凋亡及促凋亡基因 Bad和 Bik表达的影响。 方法:于2020年10月，复苏培养A549细胞，利用细胞计数试剂CCK-8检测细胞活力，确定亚砷酸钠（NaAsO 2）染毒A549细胞的浓度和时间。研究分为NaAsO 2染毒组和代谢产物染毒组：NaAsO 2染毒组染毒剂量为0（对照组）、20、40、60 μmol/L；代谢产物染毒组包括60 μmol/L一甲基胂酸（MMA）染毒组、60 μmol/L二甲基胂酸（DMA）染毒组。采用Hoechst33342/碘化丙啶双染法（Ho/PI）观察细胞凋亡情况，采用实时荧光定量聚合酶链式反应法（qRT-PCR）检测染毒后细胞Bad和Bik mRNA表达水平，采用蛋白免疫印迹法（Western blotting）检测Bad蛋白、磷酸化Bad（P-Bad-S112）蛋白、Bik蛋白、裂解Bik蛋白及下游蛋白多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP1）和细胞色素C（Cyt-C）的相对表达情况，采用分光光度法检测半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）3、6、8、9的活性变化。 结果:与对照组比较，20、40、60 μmol/L NaAsO 2染毒组凋亡细胞占比明显增加，差异均有统计学意义（ P<0.01）。与对照组比较，2.0、4.0、6.0 μmol/LNaASO 2染毒组Bad mRNA表达水平、Bik mRNA表达水平升高，Bad蛋白、磷酸化Bad蛋白、Bik蛋白、裂解Bik蛋白、PARP1蛋白、Cyt-C蛋白相对表达量均升高，差异均有统计学意义（ P<0.05），Caspase 3、6、8、9活性明显上调，差异均有统计学意义（ P<0.05）。与对照组比较，DMA染毒组Bad mRNA表达水平为1.439±0.173，差异有统计学意义（ P=0.024），Bik mRNA表达水平差异无统计学意义（ P=0.788）；MMA染毒组Bad和Bik mRNA表达水平差异无统计学意义（ P=0.085、0.063）。与对照组比较，MMA染毒组Bad、Bik、PARP1、Cyt-C蛋白相对表达量（0.696±0.023、0.707±0.014、0.907±0.031、1.032±0.016）差异无统计学意义（ P=0.469、0.669、0.859、0.771）；DMA染毒组Bad、Bik、PARP1、Cyt-C蛋白相对表达量（0.698±0.030、0.705±0.022、0.908±0.015、1.029±0.010）差异均无统计学意义（ P=0.479、0.636、0.803、0.984）。 结论:NaAsO 2可通过引起Bad和Bik蛋白过表达，启动磷酸化Bad的负反馈调节以及Bik的降解，激活下游蛋白PARP1、Cyt-C和Caspase途径，介导A549细胞凋亡。

目的:探究LncRNA PVT1靶向调控Sg1基因在肾细胞癌侵袭和凋亡的机制，以期为临床上肾癌的治疗提供新的靶点。方法:选择2015年12月至2018年12月本院收治的58例肾细胞癌患者为研究对象，术中收集患者的肿瘤组织和癌旁组织。利用GEO数据库中肾癌组织中LncRNAs数据，通过高通量数据分析肾癌组织中LncRNAs的差异性表达，利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测肾癌组织中LncRNA PVT1的相对表达量。通过siRNA干扰技术以及基因过表达技术构建LncRNA PVT1的沉默载体和过表达载体，通过慢病毒转染人肾癌细胞系ACHN细胞，根据是否转染慢病毒以及慢病毒载体的类型，将ACHN细胞分成空白对照组、siRNA沉默组和siRNA过表达组。利用RT-qPCR和Western blot法检测Bcl-2、Bad、Bax和Caspase-3的表达水平。利用Transwell试剂盒检测细胞的侵袭，利用AV-PI试剂盒检测细胞的凋亡。以裸鼠为研究对象，进行种植瘤研究。结果:肿瘤组织中LncRNA PVT1的表达量明显升高( P<0.05)。RT-qPCR结果显示，siRNA沉默组的LncRNA PVT1、Sg1和促凋亡基因Bad、Bax和Caspase-3的mRNA表达量要明显低于空白对照组和过表达组( P<0.05)；siRNA沉默组的抑凋亡基因Bcl-2的mRNA表达量要明显高于空白对照组和过表达组( P<0.05)。Western blot结果显示，siRNA沉默组的LncRNA PVT1、Sg1和促凋亡基因Bad、Bax和Caspase-3的蛋白表达量要明显低于空白对照组和过表达组( P<0.05)；siRNA沉默组的抑凋亡基因Bcl-2的蛋白表达量要明显高于空白对照组和过表达组( P<0.05)。Transwell结果显示，siRNA沉默组细胞的侵袭能力要明显高于空白对照组和过表达组( P<0.05)；过表达组细胞的侵袭能力要明显低于空白对照组( P<0.05)；AV-PI试剂盒检测结果显示，siRNA沉默组细胞的凋亡率要明显低于空白对照组和过表达组( P<0.05)；过表达组细胞的凋亡率要明显高于空白对照组( P<0.05)。siRNA沉默组裸鼠移植瘤的直径明显大于空白对照组和过表达组( P<0.05)；过表达组裸鼠移植瘤的直径要小于空白对照组和siRNA沉默组( P<0.05)。 结论:LncRNA PVT1通过靶向调控Sg1基因调控肾细胞癌的侵袭和凋亡。

近年来老年人群感染HIV的情况日益严峻，多个地区老年人群HIV的新报告病例数呈上升趋势，导致老年患者生活质量较低，死亡率较高。老年人群主要存在对艾滋病的知晓率较低，安全性行为意识较差等问题。感染后的老年患者存在的问题包括：服药依从性较差，晚发现率高，免疫重建功能较差和心理负担较为严重，同时耐药的发生也是一个突出的问题，各地区流行亚型也存在一定差异。老年HIV病例存在机体衰老等特殊性，加上病毒本身毒性和药物毒性的累积，导致该人群患者多器官功能受损，死亡率上升。目前国内尚未有针对老年患者的治疗方案，因此需要对该人群的治疗方案进行更有针对性的研究，从而改善治疗预后，降低死亡率。

卵巢低反应会引起不良妊娠结局，是目前生殖领域亟须解决的难题之一。造成卵巢低反应患者不良妊娠结局的因素较多，除可预知因素如年龄、子宫因素及医源性因素外，我们也应重视那些非预期的因素如促排卵不当、基因缺陷、环境因素、不良生活习惯、体质量指数等，为提高年轻低预后患者的活产率提供临床指导。本文将从卵巢刺激方案、基因缺陷、体质量指数以及其他非预期影响因素进行阐述。

目的:探讨唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素15（sialic acid-binding immunoglobulin-like lectin 15，SIGLEC-15）对喉鳞状细胞癌（laryngeal squamous cell carcinoma，LSCC）的作用及机制研究。方法:应用癌症基因组图谱（The Cancer Genome Atlas，TCGA）、癌细胞系百科全书（Cancer Cell Line Encyclopedia，CCLE）和基因表达谱动态分析（Gene Expression Profiling Interactive Analysis 2，GEPIA2）数据库进行生物信息学分析；应用细胞计数试剂盒（cell counting kit-8，CCK8）、流式细胞术、Transwell法检测其增殖、凋亡、细胞周期、转移及侵袭的变化；应用基因芯片法检测上调及下调的基因，对差异基因进行富集分析；应用蛋白免疫印迹法（WB）和实时荧光定量聚合酶链反应（quantitative real-time PCR，qPCR）检测蛋白表达；裸鼠体内成瘤实验检测SIGLEC-15对喉癌移植瘤生长的影响。采用 t检验、Wilcoxon秩和检验、Log-rank检验进行统计学分析。 结果:SIGLEC-15在LSCC中高表达且与生存期密切相关（ HR=1.1， P=0.010）。构建低表达SIGLEC-15的细胞模型，即TU686 SIGLEC-15-组；与TU686 SIGLEC-15+组相比其增殖活性显著降低（48 h：1.32±0.23比2.56±0.37），迁移［（1 036.52±51.22）个比（1 819.62±180.24）个］和侵袭［（469.21±112.25）个比（961.45±102.03）个］能力降低，差异有统计学意义（ t值分别为6.59、7.22和7.85， P值均<0.05）。早期凋亡增加［（23.27±1.12）%比（5.64±1.61）%， t=11.32， P<0.05］，细胞周期G 0/G 1被阻滞［（59.32±3.65）%比（35.46±3.57）%， t=9.85， P<0.05］。敲低SIGLEC-15导致864个基因上调，357个基因下调，细胞周期、凋亡及 JAK/STAT信号通路发生显著变化，p-JAK2、p-STAT3、Caspase-3、Bad、Bcl-2、Cyclin d1蛋白分子表达明显变化。裸鼠成瘤结果表明TU686 SIGLEC-15-细胞组裸鼠移植瘤增长速度缓慢，种瘤后8周，肿瘤重量分别为（0.382±0.054）g和（1.277±0.126）g，而且SIGLEC-15敲低组移植瘤组织中SIGLEC-15表达更低［（11.29±2.17）比（36.25±7.56）］，差异均有统计学意义（ t值为8.44和9.28， P值均<0.05）。 结论:SIGLEC-15在LSCC中高表达并与预后相关，可通过JAK2-STAT3通路促进LSCC的进展。

目的:探讨携带人血管内皮生长因子165（vascular endothelial growth factor 165, VEGF 165）的重组腺病毒（Ad-hVEGF 165）和携带人组织基质金属蛋白酶抑制剂1（tissue inhibitor of metalloproteinase 1, TIMP-1）的重组腺病毒（Ad-hTIMP-1）对心肌梗死大鼠的作用及可能机制。 方法:健康雄性清洁级8周龄Wistar大鼠30只，采用随机数字表法随机分为5组，假手术组（Sham），空载病毒对照组（Ad-Track），Ad-hVEGF 165组，Ad-hTIMP-1和双基因组（hVEGF 165+hTIMP-1），每组6只。除Sham组外，各组大鼠均结扎冠状动脉左前降支建立心肌梗死模型，以心电图出现ST段弓背抬高，Q波或T波倒置，局部心肌变白为模型成功。分别在心肌梗死区域四点注射相应重组腺病毒病毒生理盐水稀释液100 μL（1×10 10 VP/100 μL）；Sham组未予任何处理。4周后实验动物完成超声心动图检测后处死取心脏组织。免疫组织化学检测大鼠心肌组织hVEGF 165和hTIMP-1基因表达；实时荧光定量PCR检测各组大鼠心肌组织凋亡相关因子mRNA表达；免疫组织化学检测各组大鼠心肌组织凋亡相关因子蛋白表达。正态分布计量资料多组间均数比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD- t检验。 结果:超声心动图检测结果显示：Ad-Track组心率（heart rate，HR）（480.83±24.09）次/min、左室舒张末径（left ventricular end-diastolic dimension，LVEDD）（6.88±0.44）mm、左室收缩末径（left ventricular end-systolic dimension，LVESD）（4.85±0.42）mm均较Sham组（433.16±17.86)次/min、（6.20±0.45）mm、（4.06±0.70），增加（ P<0.05），左室射血分数（left ventricular ejection fraction，LVEF）（62.70±3.17）、左室短轴缩短率（left ventricular fractional shortening，LVFS）（29.52±1.88）%均较Sham组（72.78±5.44）%、（37.20±4.71）%显著降低（ P<0.01）；hVEGF 165-hTIMP-1组LVEF（71.50±6.23）%、LVFS（36.17±5.27）%均显著高于Ad-Track组（ P<0.01），LVEDD（6.22±0.39）mm、LVESD（4.13±0.23）mm均低于Ad-Track组（ P<0.05）；hVEGF 165-hTIMP-1组LVEF、LVFS均高于Ad-hVEGF 165组（64.65±4.00）%、（30.95±2.57）%（ P<0.05）。实时荧光定量PCR结果显示：hVEGF 165-hTIMP-1组心肌组织Bcl-2相关X蛋白（Bax）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）、Bal-xl/Bcl-2相关死亡促进因子（Bad）mRNA表达均较Ad-Track组降低（ P<0.01或 P<0.05），B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）mRNA表达均较Ad-Track组升高（ P<0.01）；hVEGF 165-hTIMP-1组心肌组织Bax、Caspase-3 mRNA表达较Ad-hVEGF 165组降低（ P<0.05）。hVEGF 165-hTIMP-1组心肌组织Bax、Caspase-3、Bad、Bcl-2 mRNA表达与Sham组差异无统计学意义（均 P>0.05）。免疫组织化学结果显示：hVEGF 165-hTIMP-1组Bax和Caspase-3蛋白表达较Ad-hVEGF 165组、Ad-hTIMP-1组及Ad-Track组显著降低（均 P<0.01），Bcl-2蛋白表达较Ad-hVEGF 165组、Ad-hTIMP-1组及Ad-Track组升高（均 P<0.05）。与Sham组比较，hVEGF 165-hTIMP-1组Bax、Caspase-3、Bcl-2蛋白表达差异无统计学意义（均 P>0.05）。 结论:联合hVEGF 165和hTIMP-1基因过表达可改善大鼠心肌梗死后心脏收缩功能，其机制可能与抑制心肌细胞凋亡相关，且hVEGF 165和hTIMP-1联合可能具有协同作用。

目的:探讨氟对大鼠脊髓神经细胞凋亡及氧化应激水平的影响。方法:取54只6周龄Sprague-Dawley雌性大鼠，体重为150 ~ 200 g，适应性喂养1周后，采用随机数字表法分为对照组[给予含0 mg/L氟化钠（NaF）去离子水]、低氟组（给予含50 mg/L NaF去离子水）、高氟组（给予含100 mg/L NaF去离子水），每组18只，各组均食用标准饲料。染氟4、8、12周，每组选择6只大鼠观察氟斑牙发生情况，并采用Basso-Beattie-Bresnahan（BBB）评分对大鼠后肢运动功能进行评估；随后腹腔注射5%水合氯醛进行麻醉，经心脏穿刺处死大鼠，采集脊髓组织，检测氧化应激因子超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及丙二醛（MDA）、过氧化氢酶（CAT）含量。染氟12周，利用尼氏（Nissl）染色观察大鼠脊髓神经元形态学变化，原位缺口末端标记法（TUNEL）细胞凋亡检测试剂盒检测脊髓神经细胞凋亡情况，蛋白质印迹法检测大鼠脊髓组织B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）基因相关X蛋白（Bax）、Bcl-2基因相关启动子（Bad）、Bcl-2蛋白表达情况，免疫荧光染色观察脊髓神经元中Bax、Bcl-2蛋白表达情况。结果:染氟12周，低、高氟组大鼠均发生不同程度氟斑牙；对照、低氟、高氟组大鼠BBB评分比较，差异有统计学意义（ F = 14.09， P < 0.001）。染氟12周，对照、低氟、高氟组SOD[（124.04 ± 4.87）、（96.66 ± 15.01）、（91.12 ± 15.87）U/mg prot]、GSH-Px活性[（561.92 ± 59.65）、（456.83 ± 29.51）、（385.07 ± 74.87）U/mg prot]及MDA[（9.96 ± 1.50）、（16.64 ± 2.05）、（20.80 ± 3.37）nmol/mg prot]、CAT含量[（8.97 ± 1.05）、（6.39 ± 0.97）、（6.42 ± 0.83）nmol/mg prot]比较，差异均有统计学意义（ F = 11.17、14.19、30.12、14.52，均 P < 0.05）；其中，低、高氟组SOD、GSH-Px活性及CAT含量均低于对照组，MDA含量均高于对照组（均 P < 0.05）；且高氟组GSH-Px活性低于低氟组，MDA含量高于低氟组（均 P < 0.05）。对照组大鼠脊髓神经元结构完整、细胞核清晰可见，Nissl小体染色均匀、数量较多，未见凋亡细胞；低、高氟组大鼠脊髓神经元Nissl小体染色不均匀、数量较少，凋亡细胞较多。对照、低氟、高氟组大鼠脊髓神经细胞凋亡率，脊髓组织Bax、Bad、Bcl-2蛋白表达水平比较，差异均有统计学意义（ F = 272.81、35.53、17.57、92.50，均 P < 0.05）。免疫荧光染色显示，对照、低氟、高氟组大鼠脊髓神经元中Bax、Bcl-2蛋白荧光强度比较，差异均有统计学意义（ F = 12.67、22.14，均 P < 0.05）。 结论:慢性氟中毒可诱导大鼠脊髓神经抗氧化酶活性降低、脂质过氧化水平升高，神经细胞凋亡增加。

目的:观察乙胺丁醇中毒性视神经病变（EON）患者的临床特征及视力预后的相关影响因素。方法:队列研究。2014年1月至2017年12月在解放军总医院神经眼科病房诊治的EON患者24例46只眼纳入研究。其中，男性14例26只眼，女性10例20只眼；男女性别比为1.4∶1。平均年龄（42.79±15.13）岁，平均体重（62.46±12.31）kg。自开始用药至发病的平均时间（9.94±16.49）个月。乙胺丁醇平均使用时间（7.06±11.68）个月，平均累计剂量（156.70±1 779.00）g，日均剂量（15.07±8.95 ）mg/ （kg·d ）。所有患者均行视力、眼底、色觉、OCT、视野、VEP及眼眶增强MRI等眼部检查；同时行OPA1和mtDNA基因检测。所有患者明确诊断后立即停药，并给予全身营养神经、改善微循环等药物治疗2周。随访时间均大于12个月。根据末次随访时较好眼视力是否>0.1将患者分为视力较好组和视力较差组。组间计数资料比较采用 χ2检验与 Fisher确切概率法检验，计量资料比较采用 Wlincox秩和检验。Logistic回归方法分析视力预后相关影响因素。 结果:46只眼中，初次发病视力≤0.1者30只眼（65.2%），>0.1但<0.5者11只眼（23.9%），≥0.5者5只眼（10.9%）；末次随访视力≤0.1者20只眼（43.5%），>0.1但<0.5者17只眼（36.9%），≥0.5者9只眼（19.6%）。眼底检查发现，伴视盘水肿7只眼（15.3%）。OCT检查发现，患眼视网膜神经纤维层（RNFL ）明显丢失，主要以视盘颞侧RNFL丢失为主。所有患眼均出现不同程度的色觉损害，以红绿为主。视野损害类型主要表现为中心暗点（52.2%），其他依次为弥漫性视敏度下降（30.4%）、颞侧偏盲（17.4%）。眼眶MRI检查结果显示，24例患者中，视神经长T2信号12例（50.0%），其中视神经同时伴有T1强化6例（25.0%）。基因检测结果显示，24例患者中，基因异常4例（16.7%）。其中，检测出OPA1基因突变2例，mtDNA14340、11778位点突变各1例。24例患者中，视力较好组13例，视力较差组11例。两组患者伴有基因突变例数及乙胺丁醇日均剂量比较，差异有统计学意义（ P=0.031、0.023）。Logistic多因素回归分析结果显示，乙胺丁醇日均剂量与EON视力预后相关，乙胺丁醇日均剂量>18mg/ （kg·d）时患者视力预后较差（95% CI 0.007~ 0.736， OR=0.069， P=0.027）。 结论:EON多累及双眼，视盘水肿少见，43.5%的患眼视力呈不可逆性损伤。EON可伴有OPA1或mtDNA异常。乙胺丁醇日均剂量与EON的视力预后相关。

目的:探讨乳腺癌超声成像特征与关键基因表达状态的相关性.方法:在美国国家医学图书网PubMed数据库检索乳腺癌关键基因相关文献,汇总乳腺癌相关基因.利用基因与蛋白相互作用检索搜查工具(STRING)和Cytoscape软件对相关基因构建蛋白质相互作用(PPI)网络筛选出关键基因,利用基于基因表达水平值的交互式分析平台(GEPIA)和Kaplan-Meier Plotter数据库对潜在关键基因进行表达验证和患者的预后分析.回顾性分析2022年9月至2023年9月于山西医科大学第一医院就诊的36例经手术病理证实为乳腺癌患者,采用转录组测序技术检测乳腺癌关键基因的表达,收集乳腺癌患者的超声声像图特征,分析其与关键基因的相关性.结果:从筛选的57个基因中共鉴定出排名前10的潜在的关键基因,分别为透明质酸介导的运动受体(HMMR)、苯并咪唑出芽抑制解除同源物(BUB1)有丝分裂检查点丝氨酸与苏氨酸激酶B(BUB1B)、纺锤体微管的装配因子(ASPM)、周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(BUB1)、驱动蛋白家族成员2C(KIF2C)、TPX2微管成核因子(TPX2)、母体胚胎亮氨酸拉链激酶(MELK)、着丝粒蛋白F(CENPF)和拓扑异构酶2A(TOP2A).10个潜在的关键基因在乳腺癌样本中高表达且预后不良.最大径＞2 cm乳腺癌患者关键基因TPX2水平高于病灶最大径≤2 cm的乳腺癌患者,有微小钙化乳腺癌患者关键基因MELK水平高于无微小钙化乳腺癌患者,差异均有统计学意义(Z=-2.483、-2.888,P＜0.05).剪切波弹性成像参数弹性最大值(Emax)与关键基因BUB1、KIF2C、TPX2、CENPF、TOP2A的表达水平呈正相关(r=0.411、0.399、0.447、0.446、0.337,P＜0.05).结论:乳腺癌超声特征可用于预测关键基因的表达状态,可为乳腺癌的早期诊断、治疗方案选择及预后评估等提供更多的依据.