目的:探讨砷及其主要代谢产物对人肺腺癌细胞系A549细胞凋亡及促凋亡基因 Bad和 Bik表达的影响。 方法:于2020年10月，复苏培养A549细胞，利用细胞计数试剂CCK-8检测细胞活力，确定亚砷酸钠（NaAsO 2）染毒A549细胞的浓度和时间。研究分为NaAsO 2染毒组和代谢产物染毒组：NaAsO 2染毒组染毒剂量为0（对照组）、20、40、60 μmol/L；代谢产物染毒组包括60 μmol/L一甲基胂酸（MMA）染毒组、60 μmol/L二甲基胂酸（DMA）染毒组。采用Hoechst33342/碘化丙啶双染法（Ho/PI）观察细胞凋亡情况，采用实时荧光定量聚合酶链式反应法（qRT-PCR）检测染毒后细胞Bad和Bik mRNA表达水平，采用蛋白免疫印迹法（Western blotting）检测Bad蛋白、磷酸化Bad（P-Bad-S112）蛋白、Bik蛋白、裂解Bik蛋白及下游蛋白多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP1）和细胞色素C（Cyt-C）的相对表达情况，采用分光光度法检测半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）3、6、8、9的活性变化。 结果:与对照组比较，20、40、60 μmol/L NaAsO 2染毒组凋亡细胞占比明显增加，差异均有统计学意义（ P<0.01）。与对照组比较，2.0、4.0、6.0 μmol/LNaASO 2染毒组Bad mRNA表达水平、Bik mRNA表达水平升高，Bad蛋白、磷酸化Bad蛋白、Bik蛋白、裂解Bik蛋白、PARP1蛋白、Cyt-C蛋白相对表达量均升高，差异均有统计学意义（ P<0.05），Caspase 3、6、8、9活性明显上调，差异均有统计学意义（ P<0.05）。与对照组比较，DMA染毒组Bad mRNA表达水平为1.439±0.173，差异有统计学意义（ P=0.024），Bik mRNA表达水平差异无统计学意义（ P=0.788）；MMA染毒组Bad和Bik mRNA表达水平差异无统计学意义（ P=0.085、0.063）。与对照组比较，MMA染毒组Bad、Bik、PARP1、Cyt-C蛋白相对表达量（0.696±0.023、0.707±0.014、0.907±0.031、1.032±0.016）差异无统计学意义（ P=0.469、0.669、0.859、0.771）；DMA染毒组Bad、Bik、PARP1、Cyt-C蛋白相对表达量（0.698±0.030、0.705±0.022、0.908±0.015、1.029±0.010）差异均无统计学意义（ P=0.479、0.636、0.803、0.984）。 结论:NaAsO 2可通过引起Bad和Bik蛋白过表达，启动磷酸化Bad的负反馈调节以及Bik的降解，激活下游蛋白PARP1、Cyt-C和Caspase途径，介导A549细胞凋亡。

目的:探讨饮水型地方性砷中毒（简称饮水型砷中毒）病区人群砷代谢模式及影响因素。方法:2004年12月，采用整群抽样方法，选取内蒙古自治区巴彦淖尔市饮水型砷中毒病区内砷中毒人群（砷中毒组）与健康人群（对照组）作为调查对象，对其进行问卷调查。采用高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法检测调查对象家中饮用水砷含量，尿砷及其代谢产物[三价砷（As Ⅲ）、无机砷（iAs）、一甲基胂酸（五价，MMA V）、二甲基胂酸（五价，DMA V）、总砷（tAs）、无机砷百分比（iAs%）、一甲基胂酸百分比（MMA%）、二甲基胂酸百分比（DMA%）、一甲基化率（PMI）、二甲基化率（SMI）]水平；采用原子荧光光度计检测指甲砷和指甲硒水平。采用多元线性回归分析砷代谢模式的影响因素。 结果:共纳入调查对象536人，其中砷中毒组155人、对照组381人，水砷含量范围为0.0 ~ 825.7 μg/L。与对照组比较，砷中毒组性别、文化程度、氟斑牙患病分布情况，差异均无统计学意义（均 P > 0.05）；而年龄、婚姻状况、吸烟、饮酒、水砷含量分布情况，差异均有统计学意义（均 P < 0.05）。与对照组比较，砷中毒组尿As Ⅲ、iAs、MMA V、DMA V、tAs、MMA%、MMA/DMA和指甲砷水平均较高（均 P < 0.05），尿DMA%、SMI和指甲硒水平均较低（均 P < 0.05），而尿iAs%和PMI水平差异均无统计学意义（均 P > 0.05）。性别、文化程度、水井深度、水砷含量、总井数和指甲砷水平是尿As Ⅲ水平的影响因素（β = - 19.82、- 23.83、0.61、0.21、7.26、2.98，均 P < 0.05）；年龄、水井深度、水砷含量和指甲砷水平是尿tAs水平的影响因素（β = 3.18、3.25、1.31、15.59，均 P < 0.05）；性别、文化程度、水井深度、水砷含量、总井数和指甲砷水平是尿iAs水平的影响因素（β = - 20.47、- 25.90、0.64、0.25、7.87、3.11，均 P < 0.05）；年龄、性别、文化程度、水砷含量和指甲砷水平是尿MMA V水平的影响因素（β = 0.52、- 17.07、- 21.84、0.22、2.77，均 P < 0.05）；年龄、水井深度、水砷含量和指甲砷水平是尿DMA V水平的影响因素（β = 2.35、2.47、0.85、9.22，均 P < 0.05）。 结论:与健康人群比较，饮水型砷中毒人群砷代谢模式存在差异，年龄、性别、文化程度、水井深度、水砷含量、总井数以及指甲砷水平可能是不同砷代谢模式的影响因素。

目的:分析吉林和山西省高水砷暴露地区人群尿砷代谢产物，探讨不同人群砷代谢模式和可能的影响因素。方法:2018年10月至2019年8月，采用整群抽样方法，以山西省吕梁市和吉林省白城市部分乡（镇）的饮水砷含量超标村（水砷≥0.05 mg/L）为调查采样点，选择饮用当地集中式供水和小井水的35岁以上常住居民作为砷暴露组，以临近饮食居住习惯相同、经济条件相近的低砷水源地区人群为对照组，开展流行病学调查和一般健康状况检查。采集两组人群尿样，用液相色谱-原子荧光光谱仪（LC-AFS）技术分离和检测4种形态砷化合物，包括三价无机砷（iAs Ⅲ）、五价无机砷（iAs Ⅴ）、一甲基胂酸（MMA）、二甲基胂酸（DMA）。计算总砷（tAs）、无机砷百分比（iAs%）、MMA百分比（MMA%）、DMA百分比（DMA%）、甲基化率（PMI）和二甲基化率（SMI）。采用多元线性回归分析砷代谢的影响因素。 结果:共调查1 415名村民，其中砷暴露组1 256人，对照组159人；对照组与砷暴露组年龄、性别比例、职业分布情况比较，差异均无统计学意义（ P均> 0.05），而吸烟、饮酒、体质指数（BMI）和受教育程度分布情况比较，差异均有统计学意义（ P均< 0.05）。对照组和砷暴露组尿tAs、iAs%、MMA%、DMA%、PMI和SMI中位数（ M）分别为12.86 μg/L、15.03、5.23、76.35、84.97、93.68和69.68 μg/L、10.24、8.37、79.31、89.76、90.65，砷暴露组尿tAs、DMA%和PMI水平均高于对照组，而iAs%和SMI均低于对照组（ U=- 13.87、- 4.30、- 6.64、- 6.64、- 1.99， P均< 0.05）。对人群尿砷代谢影响因素分析发现，年龄和BMI是iAs%的影响因素（ β=- 0.08、- 0.08， P均< 0.05）；性别、饮酒、BMI和受教育程度是MMA%的影响因素（ β=- 0.11、- 0.09、- 0.07、0.08， P均< 0.05）；年龄、性别、BMI和受教育程度是DMA%的影响因素（ β= 0.06、0.09、0.10、- 0.09， P均< 0.05）；年龄和BMI是PMI的影响因素（ β=0.08、0.08， P均< 0.05）；性别、饮酒、BMI和受教育程度是SMI的影响因素（ β=0.09、0.08、0.08、- 0.09， P均< 0.05）。 结论:不同砷暴露人群尿砷代谢模式存在差异，年龄、性别、吸烟、饮酒、BMI以及受教育程度可能是不同砷代谢模式的影响因素。

目的 探讨职业砷暴露人群六个线粒体基因DNA损伤情况,并分析线粒体DNA损伤与尿砷及其代谢的关系.方法 于2017-2018年,选择云南某高污染砒霜厂78名工人为砷暴露组,选择附近村庄无砷接触史的24名居民为对照组,采用氢化物发生-原子吸收分光光度法测定人群尿中不同形态砷含量,采用实时荧光定量PCR方法检测人群外周血中ND1、ATP6、ATP8、COX1、COX2、COX3等六个线粒体基因DNA损伤水平.结果 砷暴露组尿中无机砷、一甲基胂酸、二甲基胂酸及总砷含量均显著高于对照组(P＜0.05),一甲基胂酸和二甲基胂酸百分比显著高于对照组(P＜0.05),二甲基化指数显著低于对照组(P＜0.05).砷暴露组六个线粒体基因DNA损伤水平显著高于对照组(P＜0.05).六个线粒体基因DNA损伤水平与尿中无机砷、一甲基胂酸、二甲基胂酸、一甲基胂酸百分比呈正相关(P＜0.05),与二甲基胂酸百分比呈负相关(P＜0.05).高二甲基化指数组的六个线粒体基因DNA损伤水平显著低于低二甲基化指数组(P＜0.05).结论 职业砷暴露导致人群线粒体DNA损伤,线粒体DNA损伤与砷在机体内甲基化代谢能力有关.

目的 探索砒霜厂职业砷暴露工人EGFR、PTEN、Kras、PIK3CA 4 个基因DNA损伤与尿砷及其代谢的关系.方法 选取云南某砒霜厂 78 名一线职业砷暴露工人为暴露组和 24 名无砷职业暴露史人群为对照组.通过实时荧光定量PCR(Q-PCR)的方法检测外周血淋巴细胞中EGFR、PTEN、Kras、PIK3CA 4 个基因DNA损伤,检测所有工人尿中无机砷、一甲基胂酸、二甲基胂酸的含量并计算百分比.结果 职业砷暴露组人群 4 个基因的DNA损伤以及平均损伤高于对照组(P<0.05).4 个基因的平均损伤与尿中的无机砷、一甲基胂酸、二甲基胂酸、一甲基胂酸百分比呈正相关,与二甲基胂酸百分比呈负相关(P<0.05).结论 砷暴露导致人群重要基因损伤、4 个基因平均损伤具有作为损伤评估标志物的潜力.

目的 探讨砷冶炼厂工人肿瘤相关基因mRNA表达变化规律及影响因素.方法 选择在岗砷冶炼工人37名、停止砷冶炼85天的工人43名和对照组51名为研究对象,使用带砷预处理系统的原子吸收分光光度法检测研究对象尿中无机砷、甲基胂酸和二甲基胂酸含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测研究对象外周血Lin28、Bax、Bcl-2、Fas基因的mRNA相对表达量.结果 尿中无机砷、甲基胂酸和二甲基胂酸浓度分别为:在岗砷冶炼工人(133.97±109.53)、(208.93±171.43)和(820.35±487.39) μg/g肌酐;停止砷冶炼工人(123.31±112.72)、(176.21±157.19)和(467.73±392.17) μg/g肌酐;对照组(1.55±1.49)、(0.10±0.09)和(10.47±7.85) μg/g肌酐.砷接触组工人尿中3种砷化合物浓度均显著高于对照组,正在进行砷冶炼的工人二甲基胂酸浓度显著高于停止砷冶炼工人(P＜0.05).研究对象相应外周血Lin28、Bax、Bcl-2、Fas基因的mRNA相对表达量分别为:在岗砷冶炼工人(8.88±2.42)、(6.87±1.10)、(7.24±2.31)和(8.23±2.90);停止砷冶炼工人(6.21±2.94)、(5.81±1.72)、(4.50±1.59)和(6.89±2.35);对照组(5.60±1.43)、(5.56±0.98)、(4.88±1.39)和(6.92±1.87).在岗砷冶炼工人Lin28、Bax、Bcl-2、Fas基因的mRNA相对表达量均显著高于对照组(P＜0.05).结论 砷冶炼工人多种肿瘤相关基因mRNA高表达,无机砷甲基化代谢转化在相关mRNA高表达中具有重要作用.

目的 探讨经口染毒雄黄、亚砷酸钠后,小鼠体内砷代谢及氧化应激指标的变化,为评价雄黄的毒性提供实验数据.方法 清洁级雌性昆明小鼠随机分为对照组(0.5％羧甲基纤维素钠)、0.5 g/kg雄黄组和0.1 g/kg亚砷酸钠组,各组均灌胃染毒3d,用氢化物发生-超低温捕集-原子吸收分光光度法分别测定尿液和肝组织中无机砷(iAs)、一甲基胂(MMA)和二甲基胂(DMA).用试剂盒法测定全血中GSH和肝脏T-AOC水平.结果 雄黄组小鼠尿液和肝脏中各形态砷和总砷含量高于对照组,但低于亚砷酸钠组;一甲基化率(FMR)和二甲基化率(SMR)高于亚砷酸钠组,差异均有统计学意义(P＜0.05).雄黄组全血GSH和肝脏T-AOC水平均高于亚砷酸钠组(P＜0.05),其全血GSH和肝脏T-AOC水平与对照组相比差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 与亚砷酸钠相比,雄黄中的砷在小鼠体内代谢较慢,对氧化应激指标影响较小.

目的 探讨给与谷胱甘肽(GSH)及其拮抗剂——丁硫氨酸亚砜胺(BSO)对慢性砷暴露小鼠体内砷代谢及氧化应激的影响.方法 将SPF级雌性昆明小鼠随机分为对照组(蒸馏水)、单纯染砷组(50 m//L亚砷酸钠)、GSH干预组(50 mg/L亚砷酸钠+400 mg/kg GSH)和BSO(50 mg/L亚砷酸钠+600mg/kg BSO)干预组,除对照组小鼠饮用蒸馏水外,其余各组均饮用含50 mg/L亚砷酸钠的水溶液连续染毒30周,然后给予400 mg/kg GSH或600 mg/kg BSO,用蒸馏水配制GSH和BSO水溶液,每天两次腹腔注射,连续2d,用氢化物发生-超低温捕集-原子吸收分光光度法测定尿液各形态砷水平,用DTNB及试剂盒法分别测定全血及肝脏中GSH和总抗氧化能力(T-AOC)水平.结果 GSH干预组小鼠尿中二甲基胂(DMA)、DMA含量构成比、二甲基化率(SMR)及总砷含量高于单纯染砷组(P＜0.05),而BSO干预组各形态砷、DMA含量构成比、一甲基化率(FMR)、SMR及总砷含量均低于单纯染砷组(P＜0.05);单纯染砷组小鼠肝脏和血液GSH和T-AOC的水平均低于对照组(P＜0.05).给予GSH干预后,肝脏和血液GSH和T-AOC水平均高于单纯染砷组(P＜0.05)且与对照组差异无统计学意义(P＞0.05).BSO干预组小鼠肝脏和血液GSH和T-AOC的水平均低于其他各组(P＜0.05).结论 外源性GSH干预可以增强砷暴露小鼠的砷甲基化能力,增加砷从尿液中的排出,拮抗砷所致的GSH和T-AOC水平下降,从而减少了砷对机体造成的氧化损伤.

目的 探讨砷甲基转移酶(As3MT)和N-6-腺嘌呤特异性DNA甲基转移酶1(N6AMT1)基因多态性及基因-环境交互作用与砷暴露所致皮肤损伤(AISL)的关联性.方法 于2010年9月到2011年12月在内蒙古五原县入选饮水型砷暴露人群335人,65例被确诊患有AISL.应用MassARRAY(R)分子量阵列平台检测基因型,高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用法测定尿砷代谢物,砷暴露时间由其高砷水饮用时间确定,多因子降维法与岭回归模型分析基因型、环境因素的单独效应及基因-环境的交互作用.结果 As3MT基因rs3740400位点CA/AA基因型、N6AMT1基因rs1006903位点GC/CC基因型和尿二甲基胂酸(DMA)升高为AISL的独立危险因素(P＜ 0.05).rs3740400位点基因型-尿无机砷(iAs)-单甲基胂酸(MMA)的交互作用与AISL发生风险间存在显著的统计学关联(OR=0.62,95％CI=0.41～ 0.94,P=0.024),模型的验证样本准确率为0.577 6,交叉验证一致性为9/10.结论 As3MT、N6AMT1基因多态性及尿砷化合物水平均与AISL独立相关,rs3740400位点基因型、尿iAs和MMA的交互作用在慢性砷中毒的发生发展中具有重要作用.

目的:采用HPLC-ICP-MS法对藏药仁青常觉中砷(As)在大鼠体内代谢产物—尿液中的形态进行研究.方法:采用Dionex Ion Pac AS 19阴离子色谱柱,以2mmol· L-1磷酸二氢钠-0.2 mmol·L-1乙二胺四乙酸二钠-10 mmol· L-1无水乙酸钠-3 mmol· L-1硝酸钾(pH=10.5q11.3)-无水乙醇为流动相;流速1.0 mL· min-1;进样量10μL,柱温为室温.结果:实验表明,该方法不受40Ar35Cl+干扰,常见的5种As形态化合物的线性范围为0.5～100μg·L-1,甜菜碱(AsB)、二甲基胂(DMA)、三价砷[As(Ⅲ)]、一甲基胂(MMA)及五价砷[As(Ⅴ)]的定量下限分别为0.07、0.34、0.135、0.13、0.2 μg·L-1,相关系数(R2)均大于0.999.通过对尿液中As总量及As形态进行分析,结果As总量在给药第15天达到最大值,主要As形态化合物为AsB、DMA、As(Ⅲ)和As(Ⅴ);在第26天即停药后第11天As总量降到最低,主要As形态化合物为AsB、DMA和As(Ⅴ).仁青常觉中As在大鼠体内的代谢研究表明:As(Ⅲ)通过大鼠给药吸收进入体内,后在大鼠体内被部分氧化为As(Ⅴ),经过生物甲基化反应,转化为DMA,最终通过尿液排出体外.4种As形态在大鼠尿液中的排泄速度以DMA最快.结论:藏药仁青常觉中As在大鼠体内代谢产物—尿液中的形态分析的研究,为藏药中As的毒理学研究提供了依据.