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患者来源腮腺多形性腺瘤类器官模型构建和组织学与功能初步表征
编辑人员丨1天前
目的:构建患者来源腮腺多形性腺瘤(PA)类器官模型,并对其组织学、相关标志物和功能进行初步表征。方法:收集大连大学附属中山医院口腔颌面外科术中取材新鲜肿瘤组织标本,采用头颈部肿瘤类器官培养体系进行体外培养,构建腮腺PA类器官。观察PA类器官的体外生长情况并进行光镜拍摄。对培养成功的类器官进行传代和冻存,并对冻存的PA类器官进行复苏再培养,观测其活性和PA类器官再形成能力。对比患者来源组织,对PA类器官进行组织学表征,相关标志和功能蛋白进行表征与检测,评价PA类器官对来源组织的复现性。结果:构建的腮腺PA类器官形成紧实致密球状结构,HE染色提示类器官与其来源组织形态相似,免疫组化可见类器官及其来源肿瘤组织钙调蛋白、细胞角蛋白7、上皮膜抗原胞质阳性,提示类器官与其来源组织的病理学特征一致;PA类器官过碘酸希夫(PAS)染色及淀粉酶消化后PAS染色呈阳性,阳性着色位于类器官球体内部及外周,提示PA类器官具有类似于腮腺的分泌功能。结论:成功构建患者来源PA类器官,该模型在组织形态和标志物上可高度复现来源组织情况,并具有黏液分泌的生物学功能,是研究腮腺肿物发生发展的良好体外模型。
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编辑人员丨1天前
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三维可视化技术在消化内镜的应用进展
编辑人员丨1天前
近年来,数字智能化医学迅速发展,相较于传统的二维成像,三维可视化技术可提供直观、立体的三维图像,便于临床医生多层次、多角度观察病变及其毗邻结构。3D打印技术将可视化图像转化为肉眼可见的物理模型,可进一步提升对复杂疾病形态特征的理解。此外,虚拟现实和混合现实等高级可视化技术,可增加更多真实、互动的医学体验。本文阐述了三维可视化、3D打印及现实技术的基本概念,并对其在消化内镜领域的应用研究进行总结与展望。
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编辑人员丨1天前
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脂肪组织来源的脱细胞基质生物水凝胶修复大鼠坐骨神经缺损
编辑人员丨1天前
目的:观察脂肪组织来源的脱细胞基质水凝胶(DAT-gel)对大鼠坐骨神经缺损的修复效果。方法:2019年4月-2020年4月,收集在解放军总医院第一医学中心整形修复科行大腿或腹部吸脂术的健康成年女性的术后废弃无菌颗粒状脂肪组织,术前均获得患者知情同意。对脂肪组织行脱细胞和酶消化处理制备成DAT-gel。扫描电镜(SEM)观察水凝胶的超微结构,流变学测试水凝胶的凝胶动力学和粘弹性。建立大鼠坐骨神经缺损模型,并将其随机分为3组:单纯几丁质导管组(Chitin组)、DAT-gel加几丁质导管组(DAT-gel组)和自体神经反接组(Autograft组),每组10只动物。术后12周分别对再生神经的大体观、功能学以及形态学等一系列指标进行观察,评估损伤神经的修复情况。采用单因素方差分析(one-way ANOVA)进行数据分析,如果组间差异有统计学意义,则进一步采用Turkey法进行两两比较, P<0.05为差异有统计学意义。 结果:SEM检查结果显示DAT-gel凝胶内部呈三维疏松多孔的纤维网络结构。流变学测试结果显示:水凝胶在4 ℃与37 ℃时复数粘度分别为148.91 mPa·s和801.29 mPa·s。DAT-gel随温度增高发生溶胶-凝胶相变结果显示DAT-gel具备良好温敏效应,其溶胶-凝胶相变临界点近似体内温度。动物实验结果显示,术后12周,DAT-gel组的再生神经形态及其功能均优于Chitin组( P<0.05)。 结论:DAT-gel可能对大鼠坐骨神经缺损的修复具有明显的促进作用。
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编辑人员丨1天前
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肛门直肠畸形外科治疗前沿:机器人手术现状及未来趋势
编辑人员丨1天前
先天性肛门直肠畸形(anorectal malformations,ARM)发病率位于小儿消化道畸形首位,是小儿外科领域极具代表性的病种。手术是ARM唯一的治疗方法,过去几十年来,手术方式经历了从开放手术到微创手术的巨大转变。传统腹腔镜设备在操作精确度、维度上存在局限,未能满足外科医生对于更高技术水平操作的追求。机器人辅助手术以操作灵活、高清三维图像为特点,最初应用于成人外科,其后逐渐扩展到小儿外科领域,现已开始应用于小儿ARM的治疗。本文结合国内外文献报道,系统性回顾和概述机器人手术系统在ARM治疗中的应用进展及展望。
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编辑人员丨1天前
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基于甲基丙烯酸酐化明胶悬滴培养小鼠毛乳头细胞制备仿生毛乳头球的生物活性及其在裸鼠中的毛发诱导功能
编辑人员丨1天前
目的:探讨基于甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA)仿生微环境与悬滴法三维培养小鼠毛乳头细胞(DPC)制备仿生毛乳头球的生物活性及其在裸鼠中的毛发诱导功能。方法:采用实验研究方法。采用酶消化法获取雄性5~6周龄C57BL/6J小鼠触须毛的DPC以及1 d龄C57BL/6J小鼠皮肤角质形成细胞(KC),经免疫荧光法鉴定前者第3代细胞稳定表达DPC标志物神经细胞黏附分子、碱性磷酸酶(ALP)、β连环蛋白及α平滑肌肌动蛋白,后者原代细胞稳定表达KC标志物角蛋白15。取第8代DPC,用GelMA重新悬浮并接种至Transwell孔板插件底面,光交联后倒置培养,于光学显微镜下观察培养0(即刻)、3 d GelMA悬滴中DPC聚集情况(聚集成球即仿生毛乳头球),采用活/死染色试剂盒检测培养3 d仿生毛乳头球中细胞活性。将传统二维培养的原代DPC、第8代DPC以及按前述方法制备的仿生毛乳头球分别设为原代DPC组、第8代DPC组、仿生毛乳头球组,利用高通量测序技术平台对每组培养3 d的3个样本中DPC进行转录组测序,利用基迪奥生物信息云工具平台(OmicShare Tools)对转录组数据进行主成分分析、Pearson相似性分析、差异表达基因筛选,利用时间序列趋势分析软件对差异表达基因进行表达模式聚类分析,利用基迪奥生物信息云工具平台对具有特定表达模式的差异表达基因进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)和基因本体论(GO)富集分析。同前进行细胞分组,采用随机数字表法从差异表达基因中抽取性别决定区Y框蛋白8( SOX8)、基质金属蛋白酶9( MMP- 9)、26型胶原纤维α1( COL26A1)、无翅型MMTV整合位点家族成员6( Wnt6),采用实时荧光定量反转录PCR(RT-PCR)法验证差异表达基因mRNA表达情况与测序结果的一致性(样本数为9);采用实时荧光定量RT-PCR法检测DPC生物功能标志物成纤维细胞生长因子7(FGF7)、Wnt10a、淋巴样增强因子1(LEF1)、ALP、β连环蛋白、多功能蛋白聚糖、SOX2的mRNA表达情况(样本数为9)。取3只5~6周龄雄性BALB/c裸鼠,分别设为原代DPC组、第8代DPC组、仿生毛乳头球组,将原代DPC、第8代DPC、仿生毛乳头球分别与原代KC以2∶1细胞数比例混合后分别注射至相应组别裸鼠皮下,每只注射6个区域。注射后2周,取注射区域全厚皮,计数再生毛发,行苏木精-伊红染色后观察再生毛囊情况。对数据行单因素方差分析、Tukey检验并进行Bonferroni校正。 结果:培养3 d,DPC在GelMA悬滴中由培养0 d的分散状态聚集成仿生毛乳头球,制备的仿生毛乳头球中细胞活性良好。培养3 d,主成分分析显示,相比于第8代DPC组,原代DPC组、仿生毛乳头球组组内样本间变异程度较低,仿生毛乳头球组与原代DPC组组间样本变异程度最低,3组DPC样本超过90%的基因谱数据变异可由第1个和第2个主要成分来解释;Pearson相似性分析显示,组内样本重复性好,原代DPC组和仿生毛乳头球组样本间的相关系数为0.84~0.95,原代DPC组和第8代DPC组样本间的相关系数为0.72~0.87;3组DPC间差异表达基因分析筛选出642个组间交集差异表达基因,对其进行表达模式聚类显示有2种基因表达模式有显著趋势( P<0.05),分别为第8代DPC组基因表达显著低于原代DPC组/仿生毛乳头球组、第8代DPC组基因表达显著高于原代DPC组/仿生毛乳头球组,共包含411个差异表达基因;KEGG富集分析显示这411个差异表达基因在Wnt信号通路以及磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B信号通路显著富集( P<0.05),GO富集分析表明细胞外基质、经典Wnt信号通路、细胞分化等GO术语被显著富集( P<0.05)。与原代DPC组、仿生毛乳头球组比较,第8代DPC组细胞基因 SOX8、MMP- 9、COL26A1、Wnt6 mRNA表达量均明显下降( q=15.950、8.854、11.890、11.050,9.851、5.884、7.418、4.870, P<0.01),与测序数据一致。与原代DPC组、仿生毛乳头球组比较,第8代DPC组细胞生物功能标志物FGF7、Wnt10a、LEF1、ALP、β连环蛋白、多功能蛋白聚糖、SOX2 mRNA表达量均明显下降( q=11.470、9.795、4.165、9.242、10.970、10.570、8.005,7.472、4.976、3.651、4.784、5.236、6.825、5.214, P<0.05或 P<0.01)。注射后2周,第8代DPC组裸鼠无毛发再生,仿生毛乳头球组与原代DPC组裸鼠再生毛发数量相近( q=1.852, P>0.05)且均显著高于第8代DPC组( q=18.980、17.130, P<0.01);第8代DPC组裸鼠注射区域皮肤仅形成了坏死灶,而仿生毛乳头球组与原代DPC组裸鼠注射区域皮肤均观察到再生毛囊且毛囊横断切面有黑色素沉着。 结论:基于GelMA仿生微环境与悬滴法三维培养小鼠DPC制备仿生毛乳头球的培养模型可一定程度上恢复高传代DPC在裸鼠中的毛发诱导能力,且其生物特性更加类似于原代DPC,可实现DPC的扩增后特性恢复。
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编辑人员丨1天前
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三维消化内镜研制及在活体动物内镜手术的初步应用(含视频)
编辑人员丨1天前
目的:研制三维(three-dimensional,3D)消化内镜,并通过动物实验初步探讨用于胃部内镜黏膜下剥离术(endoscopic submuscular dissection,ESD)的效果和安全性。方法:荷兰小香猪2只,由郑州大学动物实验中心提供。ESD手术操作由2位高年资内镜医师完成,1人完成1例,一位术中佩戴3D眼镜,另一位术中佩戴3D高清头戴式显示器。记录ESD手术是否成功(手术步骤完成,拟定病灶全部剥离,术中及术后止血成功)、成功次数,有无穿孔、穿孔次数,术者(内镜医师及助手)术中立体感体验情况,术者术中、术后有无眼部不适症状(眼疲劳、眼痛、视物模糊),内镜医师对机械操作的信任度及内镜使用过程中存在的问题。结果:2例ESD均成功,无穿孔事件发生。术者反馈:术中3D消化内镜成像清晰,立体感强,进行内镜治疗时有明显的距离感和层次感,对出血点的判定更加精准,有2D图像无法比拟的层次感;术中及术后无眼部不适。内镜医师对3D消化内镜信任程度较高,但反映存在摄像头距离消化道管壁<10 mm时图像模糊的问题。结论:初步结果显示,3D消化内镜能够提供良好的立体成像,在活体动物的胃ESD操作过程中定位更加精准,安全性好,且不会明显增加术者的眼部不适,但存在摄像头与消化道管壁距离过近时的图像模糊尚待改进。
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编辑人员丨1天前
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本期导读
编辑人员丨1天前
胆源性肝脏疾病指胆道系统病变引起肝损伤的一组疾病。早发现,早治疗,规范治疗可改善患者预后,延长患者生存期。治疗包括药物、非药物及综合治疗。因涉及病种多,治疗上存在不同特点,必要时需多学科协作。治疗上还存在一些待解决的问题。本期执行主编段钟平教授述评指出,胆源性肝脏疾病范围广,应加强指南的解读和宣讲,及时给临床医生传达科学、规范及先进的治疗理念,对此类肝病治疗非常重要。另需加强机制研究,为临床治疗提供更多的理论依据(刘燕敏等,第681~684页)。肝内胆管细胞癌、原发性胆汁性胆管炎等胆源性肝脏疾病严重危害患者健康。相较于常规内外科治疗方式,介入治疗,如肝动脉灌注化学治疗、经颈静脉肝内门体分流术等,具有创伤小、恢复快、费用低等优势,已在该领域获得广泛应用。韩国宏教授对常见胆源性肝脏疾病的介入治疗进行了综述,以期为相应的临床诊治及研究提供参考(李凯等,第685~689页)。丁惠国教授指出,消化内镜技术在胆源性肝脏疾病的诊疗中,具有广阔的应用前景。但是,这些消化内镜新技术在国内普及还不够,在胆源性肝脏疾病诊断及治疗中的评估,尚缺乏高质量、多中心的循证医学证据。随着消化内镜技术的普及及医生操作水平的提高,未来人工智能及3D技术的应用,可进一步提高胆道系统的成像质量,显示出“胆树”三维重建结构,真正实现消化内镜对胆源性肝脏疾病的精准诊疗(梁雪莹等,第690~695页)。
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编辑人员丨1天前
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高精度腹腔镜显像技术在微创胃癌手术中的精准应用与评价
编辑人员丨1天前
高精度腹腔镜显像技术是近年来新兴的腹腔镜技术平台,其主要包括3D腹腔镜、4K超高清腹腔镜以及吲哚菁绿近红外光成像等技术。在微创胃癌手术中,这些技术能够重建出更真实、更直观的三维立体结构,精准定位肿瘤和胃周淋巴结,从而清晰暴露解剖层次,为腹腔镜下胃周血管裸化、淋巴结清扫和消化道重建等手术操作提供便利。笔者结合团队的实践经验和国内外相关文献,深入阐述高精度腹腔镜显像技术在微创胃癌手术中的最新进展,分析该技术在临床应用中的优势及挑战,旨在推动高精度腹腔镜显像技术在微创胃癌手术中的普及应用。
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编辑人员丨1天前
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消化内镜中心麻醉恢复室护理质量敏感指标体系的构建
编辑人员丨3周前
目的 建立一套适用于消化内镜中心麻醉恢复室(PACU)的护理敏感指标,为临床监控和评估麻醉护理质量提供规范化、科学化的依据.方法 基于"结构-过程-结果"三维理论,参考国内外相关文献,拟定PACU敏感指标体系框架,采用德尔菲法对来自国内4个省市的20名专家进行2轮函询,最终确立消化内镜中心PACU敏感性指标.结果 2轮专家函询的积极系数分别为95%和100%,专家权威系数分别为0.836和0.867,各项指标的变异系数均<0.30,Kendall's W系数为0.311~0.346(均P<0.01),最终建立了包含3项一级指标,18项二级指标的PACU护理敏感指标体系.结论 消化内镜中心PACU护理质量敏感指标体系具有较好的科学性和可靠性,为消化内镜中心麻醉管理提供参考,有利于保证患者围麻醉期的安全管理.
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编辑人员丨3周前
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腹腔镜肝门部胆管癌根治术8例临床体会
编辑人员丨2024/6/22
目的 探讨腹腔镜肝门部胆管癌根治术的可行性.方法 回顾性分析2019年6月至2023年11月7例以及2024年1月1例于南京医科大学附属淮安第一医院行腹腔镜肝门部胆管癌根治术的共8例患者的临床资料,分析患者临床资料、手术情况及术后恢复情况.结果 8例行腹腔镜肝门部胆管癌根治术的患者中,2例术前行经皮经肝胆管穿刺引流(PTCD)减轻黄疸,复查肝功能提示总胆红素降至80 μmol/L以内后手术.Bismuth分型:Ⅰ型2例,Ⅱ型3例,Ⅲa型1例,Ⅲb型2例.手术方式:5例行腹腔镜肝门部肿瘤切除术,2例行腹腔镜肝门部肿瘤+左半肝+尾状叶切除术,1例行腹腔镜肝门部肿瘤+右半肝+尾状叶切除术.中位手术时间375(270~720)min,中位出血量350(200~800)mL,中位淋巴结清扫数7(3~11)个,R0切除率100%.术后8例患者平均引流管留置时间(11.0±2.5)d,平均镇痛时间(4.0±0.8)d,平均禁食时间(2.7±1.0)d,中位住院时间17(15~25)d,平均住院费用(7.8±2.2)万元.3例出现围手术期并发症,1例腹腔感染,1例A级胆瘘,1例上消化道出血,均经保守治疗后病情稳定,顺利出院.随访至2024年3月,中位随访时间16(2~48)个月.6例患者存活,2例因术后复发死亡,患者中位生存时间34个月.结论 本临床中心的初步研究表明,通过精准的术前评估,腹腔镜肝门部胆管癌根治术是安全可行的.
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编辑人员丨2024/6/22
