目的 正交试验优选辽宁道地药材北五味子的蜜制工艺,并对蜜五味子炮制品进行质量标准评价.方法 研究收集10个不同厂家生产的共10批生北五味子,采用蜜蒸法炮制蜜五味子,以五味子醇甲的含量作为考察指标,采用正交试验优选蜜五味子的最佳炮制工艺;研究对蜜五味子进行性状、水分、总灰分检查;采用薄层色谱法对蜜五味子进行定性鉴别;采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)对蜜五味子中的五味子醇甲进行含量测定.结果 正交试验得出蜜五味子的最佳炮制工艺条件:闷润时间1 h,炼蜜量为每100 kg五味子,用10 kg炼蜜,蜜水比例为1∶2,蒸煮时间为40 min.所得10批蜜五味子均性状较佳;该品含水量为12.95%,总灰分为3.36%,均未超过《中华人民共和国药典》标准的16.0%和7.0%;薄层色谱显示10批蜜五味子样品中五味子醇甲均斑点清晰,分离效果好;HPLC色谱检测得出10批蜜五味子样品中五味子醇甲的含量为0.48%～0.70%,平均值为0.59%,高于《中华人民共和国药典》中的含量限度0.40%.结论 研究所得北五味子的蜜制工艺稳定可行,建立的质控标准准确度高、专属性强、重复性好,可作为蜜五味子炮制品的质量评价标准.

瘢痕增生会严重影响烧伤患儿的功能和外观，早期预测瘢痕的远期结果是对患儿进行针对性治疗和随访的前提条件，然而现有的测量瘢痕的吸附装置Cutometer在评估增生性瘢痕时存在局限性。苏黎世联邦理工学院机械与工艺工程系机械系统研究所的Bettina Müller 在《Burns & Trauma》杂志上发文《Longitudinal monitoring and prediction of long?term outcome of scar stiffness on pediatric patients》。该研究团队开发了一种新型的吸附测量装置Nimble，比较了Nimble与现有瘢痕测量方法的性能，同时量化瘢痕成熟过程中皮肤生物力学特性随时间变化的情况。该研究团队在1年的时间内使用Cutometer和Nimble这2种吸附装置对11例患儿的瘢痕硬度进行了多次测量，同时应用患者和观察者瘢痕评估量表（POSAS）对瘢痕进行评分。结果表明，3种工具均显示瘢痕硬度在伤后3~12个月内呈时间依懒性减轻。其中Nimble[组内相关系数（ICC）=0.99]和Cutometer（ICC=0.97）表现出优异的区分不同人群的能力。伤后12个月，瘢痕POSAS评分的曲线下面积（AUC）为0.67，Cutometer测量方法的AUC为0.46，Nimble测量方法的AUC为0.79，提示Nimble似乎能够根据早期的测量结果预测伤后12个月瘢痕的柔韧性。总之，该研究团队认为3种工具均能够量化瘢痕硬度的变化趋势，初步证据表明Nimble最适合于预测与远期瘢痕成熟相关的硬度变化。

目的:探讨吉林省销售的碘酸钾碘盐的稳定性及其影响因素。方法:2020年11月在吉林省全省范围内以市（州）为单位，选择10所大型超市，每所大型超市选择2种碘酸钾碘盐，每种5份，共100份碘盐样品，采用分光光度法（碘-淀粉光度法）检测样品碘含量；将碘盐样品按不同盐种（井矿盐、海盐、湖盐）及不同生产工艺（精制盐、非精制盐）分类，开袋放于室温条件下储存，并分别于开袋后0、10、20 d测定盐碘含量，比较不同盐种、不同生产工艺碘含量衰减率。结果:碘盐样品中井矿盐、海盐、湖盐分别为45、45、10份，存放第0天的碘含量[（19.89 ± 1.38）、（20.62 ± 1.91）、（19.78 ± 1.01）mg/kg]比较，差异无统计学意义（ F = 2.57， P = 0.093）；第10天时，井矿盐的碘含量低于海盐、湖盐（ P均< 0.05）；第20天时，井矿盐的碘含量低于海盐（ P < 0.05）。井矿盐存放第0、10、20天的碘含量比较，差异有统计学意义（ F = 90.62， P < 0.001）；海盐、湖盐存放第20天的碘含量均明显低于第0、10天，差异均有统计学意义（ P均< 0.05）。井矿盐、海盐、湖盐第0 ~ 10天碘含量衰减率与第10 ~ 20天比较，差异均有统计学意义（ Z = 2.24、2.94、2.80， P均< 0.05）。井矿盐、海盐、湖盐存放第0 ~ 10天的碘含量衰减率比较，差异有统计学意义（ Z = 24.05， P < 0.001）；第10 ~ 20天不同盐种的碘含量衰减率比较，差异无统计学意义（ Z = 5.86， P = 0.053）。碘盐存放第0 ~ 10、10 ~ 20天时，精制盐与非精制盐的碘含量衰减率比较，差异均无统计学意义（ Z = 1.16、0.28， P均> 0.05）；精制盐、非精制盐第0 ~ 10天碘含量衰减率与第10 ~ 20天比较，差异均无统计学意义（ Z = 0.76、1.90， P均> 0.05）。 结论:吉林省销售的碘盐包装开封20 d后发生碘损失，其碘含量的衰减受盐种、生产工艺的影响较小。建议食碘盐在打开包装后20 d内食用。

目的:制备和鉴定抗CD47胞外区蛋白多克隆抗体。方法:通过逆转录PCR(reverse transcription-PCR，RT-PCR)扩增CD47分子胞外区基因序列，分别重组到原核表达载体pET32a(＋)和pET31b(＋)中，利用大肠杆菌表达CD47蛋白，并优化异丙基硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside，IPTG)诱导蛋白表达工艺，表达出CD47蛋白。用纯化的CD47蛋白免疫Balb/c小鼠，获得小鼠多克隆抗体，使用亲和层析法纯化CD47多抗，并对多抗进行酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA )效价检测和Western blot特异性鉴定。结果:成功构建pET32a(＋)-CD47和pET31b(＋)-CD47重组质粒。按照实验设置不同条件诱导表达蛋白后，选出最佳表达载体pET32a(＋)-CD47。在大肠杆菌中获得表达最佳蛋白表达工艺。表达制备CD47蛋白，经过五次免疫后，得到CD47多抗。用ELISA法检测制备多抗的效价能达到1∶128 000。Western blot检测结果显示，自制的CD47多抗能准确检测出小鼠心脏组织样品。结论:成功制备了CD47胞外区蛋白多抗，为进一步研究CD47生物学功能奠定了基础。

研究常山胡柚果皮(Citrus × aurantium Changshan-huyou pericarp,CP)精油化学成分,并对提取条件进行优化.采用水蒸气蒸馏法提取CP精油,利用气相色谱-质谱法进行分析,通过单因素试验考察不同提取条件对提取率的影响,并利用响应面、人工神经网络进行工艺优化.结果表明,CP精油中主要成分为D-柠檬烯;最佳工艺条件:粒径24目、蒸馏水浸泡1 h、液固比34.86 mL/g、提取温度300.00 ℃、提取时间166.21 min,在此条件下,CP精油提取率为0.82％,响应面与人工神经网络相结合,可有效地利用已有数据对目标寻优.同时CP精油对DPPH自由基有明显的清除作用(IC50值为65.01 mg/mL),表明CP精油具有一定的抗氧化活性.

目的 优选土茯苓乙酸乙酯部位总黄酮的纯化条件,建立其特征图谱,并评价其对重金属铅解毒作用,以期为土茯苓解铅毒作用方面的开发和应用提供数据基础及参考.方法 采用紫外分光光度法测定总黄酮的含量,并以此作为评价指标,考察6种不同色谱填料对土茯苓乙酸乙酯部位总黄酮纯化性能,筛选最佳纯化工艺;采用高效液相色谱法建立纯化后总黄酮的特征图谱;并以重金属铅致小鼠慢性毒性为动物模型,以铅含量、生化指标及组织形态学检测结果为指标,评价纯化后总黄酮解铅毒的活性.结果 土茯苓乙酸乙酯部位总黄酮最佳纯化工艺为选用微孔树脂(MCI)填料,25％乙醇水溶液为上样溶剂冲洗3倍柱体积(VB),60％乙醇水溶液为洗脱溶剂洗脱3 VB,总黄酮含量78.0％.建立了总黄酮高效液相色谱(HPLC)特征图谱,指认了 5个特征共有峰.与模型组对比,总黄酮组小鼠采食量增加,血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)水平趋于正常,小鼠血液、肝脏和肾脏铅含量显著降低;病理切片结果显示,总黄酮对于铅诱导的肝、肾功能损伤具有一定的保护作用.结论 土茯苓总黄酮纯化工艺具有结果稳定、操作方便、含量较高特点.总黄酮特征图谱精密度、重复性和稳定性良好.纯化后的总黄酮对重金属铅具有显著解毒作用.研究结果可为土茯苓解铅毒的药效物质基础阐明提供参考,并为研发解铅毒新药提供理论基础.

目的:优选盐菟丝子最佳炮制工艺,并测定不同产地盐菟丝子中总黄酮与金丝桃苷含量,为后期临床应用提供参考依据.方法:采用紫外分光光度(UV)法与高效液相色谱(HPLC)法测定盐菟丝子总黄酮和金丝桃苷含量,通过熵权法计算其熵权值以计算其综合评分.采用三因素三水平法,考察炒制温度、炒制时间和氯化钠溶液质量分数3个因素,确定盐菟丝子最佳炮制工艺参数.用优选出的最佳工艺参数炮制12批不同产地菟丝子,进行含量测定,完善盐菟丝子质量标准研究.结果:盐菟丝子最优炮制工艺为1％氯化钠溶液浸泡2h,100～110 ℃炒制15 min.用预测得出的最佳工艺条件平行试验3次,实际测得平均综合评分为93.57,与理论预测值96.61相对误差为3.14％,与响应面分析预测值接近.12批菟丝子经过炮制后总黄酮含量增加,金丝桃苷含量减少.盐炙品总黄酮含量在27.23～41.26 mg/g之间,金丝桃苷含量在2.72～3.49 mg/g之间.结论:Box-Behnken Design响应面优化盐菟丝子炮制工艺可靠稳定,具有实用价值.盐菟丝子总黄酮含量高于生品,金丝桃苷含量低于生品,建议在盐菟丝子质量标准中加入总黄酮作为含量测定指标.

目的:对嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)来源的谷胱甘肽双功能合成酶(glutathione bifunctional synthetase,GshF)在大肠杆菌(Escherichia coli)进行表达,对 GshFst 进行定点突变,得到酶活和稳定性有所提高的突变株,并对突变株全细胞催化条件进行优化.方法:选择6种不同的表达载体表达,获得最优表达载体后利用单因素试验进行诱导条件的优化,在此基础上,利用AlphaFold2对GshFst进行建模和分子对接,通过预测得到突变位点,经单点突变及组合突变,获得优势突变体,并对催化条件进行优化.结果:GshF在大肠杆菌中成功表达,获得了突变体GshFstL136K/V498C,其比酶活为12.03 U/mg,较野生型提高了 86.80％,在37℃的半衰期为134.24 min,较野生型提高了 40.95％.以GshFstL136K/V498C为出发菌株,采用单因素试验对全细胞催化条件优化,得到的最佳催化条件是:生物量OD600=30,反应温度40℃,反应pH 9.0,缓冲液Tris-HCl 50 mmol/L、L-谷氨酸 40 mmol/L,L-半胱氨酸 25 mmol/L,甘氨酸 40 mmol/L,ATP 25 mmol/L,催化3 h后,GSH浓度可以达到24.17 mmol/L,底物L-半胱氨酸的转化率约为96.68％.结论:筛选到了适合GshFst的表达载体及诱导表达条件,对GshFst进行半理性改造提高了其催化活性和稳定性,通过优化获得了全细胞催化合成GSH的工艺.

目的 考察中药素片质量对薄膜包衣裂片率的影响.方法 以素片硬度、重量和脆碎度为指标评价素片质量.随机测定不同批次中药素片的重量、硬度、脆碎度,在相同生产工艺下测定薄膜包衣裂片率,对素片质量和薄膜包衣裂片率进行Pearson和Spearman相关性分析,采用聚类分析对素片硬度进行分类.结果 中药素片薄膜包衣裂片率与素片硬度、重量和脆碎度的Pearson相关系数分别为-0.568(P<0.01)、-0.021(P>0.05)、0.263(P>0.05);Spearman相关系数分别为-0.455(P<0.05)、0.075(P>0.05)、0.090(P>0.05).以素片硬度为一般变量进行聚类分析,可将 30 批素片聚为 4 类,即素片质量优(素片硬度≥99N)、良(89N≤素片硬度<99N)、合格(72N≤素片硬度<89N)、不合格(素片硬度<72N).素片硬度<72N 时,薄膜包衣裂片率为 0.927‰.结论 在其他条件一定时,素片硬度是薄膜包衣裂片率的主要影响因素.素片硬度越高,薄膜包衣裂片率越低.素片硬度<72N时,在同等操作水平下中药素片薄膜包衣裂片率易超过企业标准操作规程的上限要求.

目的 建立天麻Gastrodia elata鲜切片质量评价方法,为天麻饮片产地加工提供技术参考.方法 以7 个指标(天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷A、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷E、醇溶性浸出物)含量和外观性状得分的综合评分为指标,采用AHP-CRITIC法确定各指标权重系数.在单因素试验结果的基础上,应用响应曲面法考察干燥温度、切片厚度、干燥时间对天麻鲜切片质量的影响,筛选天麻饮片最佳趁鲜加工工艺参数,同时采用化学计量学的方法对不同单因素天麻趁鲜加工工艺进行比较.结果 天麻饮片最佳趁鲜加工工艺为新鲜天麻块茎,洗净,待水沸后置于蒸锅上,一级天麻蒸制25 min,二级天麻蒸制 15 min,三级天麻蒸制 10 min,取出,斜切 6 mm,55℃干燥 13 h.结论 AHP-CRITIC评分法将主客观相结合,综合评价天麻趁鲜加工饮片质量优劣,评分结果科学、可靠,优化后的工艺条件稳定性好、简便可行,可用于天麻饮片趁鲜加工.