目的:年龄相关性白内障是成人白内障中最常见的类型,也是主要的致盲眼科疾病.目前关于年龄相关性白内障动物模型的建立报道较少.本课题组在东方田鼠实验动物化培育过程中首次发现12～15月龄东方田鼠能自然发生白内障.本研究通过对东方田鼠自发性白内障进行鉴定分析,探讨其发展成为年龄相关性白内障动物模型的可能性.方法:分别选用12月龄健康东方田鼠为对照组和12月龄白内障东方田鼠为实验组.通过裂隙灯生物显微镜观察晶状体透明度;苏木精-伊红染色观察东方田鼠的晶状体病理变化;生物化学方法测定2组东方田鼠的血常规、血糖水平及血清中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性.最后通过实时反转录聚合酶链反应(real-time reverse transcription PCR,real-time RT-PCR)检测2组东方田鼠晶状体中白内障发病相关基因的转录水平.结果:与对照组比较,实验组东方田鼠的晶状体呈现不同程度的浑浊,晶状体结构被严重破坏,晶状体上皮细胞出现明显肿胀、大量空泡、变性/坏死、钙化、增生和纤维液化等病理变化,纤维结构紊乱,分布不规则,变性的晶状体纤维中有马氏小体聚集.与对照组比较,实验组东方田鼠的血糖水平差异无统计学意义(P＞0.05),白细胞数量(P＜0.05)、淋巴细胞数量(P＜0.01)、淋巴细胞比率(P＜0.05)均显著降低,而中性粒细胞百分比(P＜0.05)和单核细胞比率(P＜0.01)均显著增加,血清中SOD和GSH-Px活性均降低(均P＜0.05);实验组东方田鼠晶状体中白内障发病相关基因CRYAA、CRYBA1、CRYBB3、Bsfp1、GJA3、CRYBA2、MIP、HspB1、DNase2B和GJA8的mRNA水平均显著降低(均P＜0.05).结论:白内障东方田鼠与健康东方田鼠相比,晶状体病理变化、过氧化物酶水平和白内障相关基因表达均有显著差异.东方田鼠自发性白内障具有年龄相关性,白内障东方田鼠有望发展成为年龄相关性白内障研究的理想动物模型.

目的 掌握沈阳市不同年份、不同生境类型下鼠密度、种群分布及季节消长等动态变化规律,为鼠类防治提供科学依据.方法 采用夹夜法进行监测,设置居民区、餐饮业和农村自然村 3 类监测环境类型,每类监测环境类型分别设置 2 个监测点位.结果 2018-2022 年共收集到有效夹为 17 476 只,捕鼠数为 47 只,总体鼠密度为 0.27%.5 年期间鼠密度控制在＜1.00%;沈阳市不同生境的鼠密度:农村自然村(0.34%)＞餐饮业(0.28%)＞居民区(0.19%),不同生境鼠密度差异有统计学意义(χ2 =18.668,P＜0.001);沈阳市鼠密度高峰出现在夏季 7 月,冬季鼠密度最低;共捕获鼠类 47 只,分别为褐家鼠、黑线姬鼠、小家鼠和东方田鼠,其中褐家鼠为沈阳市优势种,5 年共捕获 32 只,占鼠类总捕获数量的 68.09%.结论 结合沈阳市鼠类优势种群的生态学习性、鼠类生境特点以及沈阳市鼠类季节消长情况制定全年防鼠灭鼠计划方案,有针对性地开展综合防治措施,夏季城镇居民区及餐饮业要开展以褐家鼠为主的防制工作,清除褐家鼠适宜的栖息地,切断其食物来源,定点投放鼠药及捕鼠器械;农村自然村应针对黑线姬鼠及褐家鼠的生存习性及特点开展灭鼠防鼠工作,切断农村自然村鼠类食物来源途径,提高农村自然村生活垃圾处理效率,定时开展鼠类防制工作,从而达到有效控制鼠密度,降低鼠传疾病的发生.

东方田鼠是已知的唯一一种天然抗日本血吸虫病的哺乳动物.来源于血吸虫病疫区和非疫区以及实验室培育的东方田鼠对日本血吸虫有着相同的抗性.野生东方田鼠经过30多年的实验室培育,已经实现了实验动物化.同时,研究人员对东方田鼠的生长发育、生殖生理、血清生化、血液学指标、组织解剖等生物学性状进行了较详细的研究,并且进一步深入探讨了东方田鼠的抗血吸虫病特性及机制.上海实验动物研究中心培育的洞庭湖东方田鼠封闭种群(S:DTMF)在2021年经中国实验动物学会实验动物资源与评价工作委员会认定为中国实验动物资源.本综述着重总结近10年,特别是国家科技支撑计划项目实施中在东方田鼠生物学特性、标准化、基因组以及抗血吸虫病机制等方面的研究进展.

目的 探讨东方田鼠E77.43基因片段治疗日本血吸虫感染的生物学功能.方法 构建pRevTRE-E77.43重组逆转录病毒载体,转染PA317细胞,用Hygromycin筛选后获得稳定表达的细胞株,并进行重组逆转录病毒的包装、浓缩与纯化.通过静脉或腹腔途径将制备的重组病毒注射到日本血吸虫感染模型小鼠体内,探讨目的基因在小鼠体内的表达以及体内治疗血吸虫感染的作用.结果 病毒注射动物机体7 d后目的基因就有表达,且一直能持续表达45 d以上.pRevTRE-E77.43诱导小鼠产生了31.0％的减虫率,高于pRevTRE的1.2％(t=3.524,P<0.01);pRevTRE-E77.43诱导小鼠产生了35.0％的减卵率,高于pRevTRE的0.9％(t=9.485,P<0.01).结论 pRevTRE-E77.43能对血吸虫感染模型小鼠产生一定程度的治疗效果,说明东方田鼠E77.43基因参与了东方田鼠抗日本血吸虫感染的生物学作用过程.

运用微卫星分子标记研究洞庭湖东方田鼠(Microtus fortis calamorum)的多父权行为.利用筛选获得的6对微卫星引物对7只母鼠及其胎崽DNA进行PCR扩增,PCR产物经凝胶电泳和银染后分析,结果表明2只母鼠所怀的胎崽明显具有2个以上的父权现象,其他母鼠所怀的胎崽至少拥有一个父权.研究结果显示东方田鼠存在多父权的婚配制度.

目的 探讨实验室饲养和野外生存条件下东方田鼠肠道菌群的分布和差异.方法 应用高通量测序技术测定实验室饲养和野外捕捉东方田鼠的肠道细菌16S rDNA-V4-V5区序列,统计操作分类单元(OTUs)数量,分析菌群物种丰度、分布及差异性.结果 稀疏曲线表明取样数量合理,测序充分.在门水平,实验室饲养和野外生存的肠道菌群分布和占比基本相似,实验组有1个独有的门,即黏胶球形菌门(Lentisphaerae),野生组有3个独有的门,分别是梭杆菌门(Fusobacteria)、奇古菌门(Thaumarchaeota)和未分类的门,丰度差异最大的为软壁菌门(Tenericutes).在属水平,野外东方田鼠肠道细菌较实验室饲养的丰富,丰度差异最大的为瘤胃球菌属(Ruminococcus).结论 获得了实验室饲养和野外生存条件下东方田鼠肠道菌群结构和差异性,进一步充实了东方田鼠基础生物学数据.

卵巢癌是导致女性癌症死亡的第五大原因,其中75%的卵巢癌患者检出时即为晚期.目前该病缺乏有效的早期筛查手段,同时临床治疗效果较差,已经成为严重威胁妇女健康的重大疾病.借助卵巢癌动物模型开展相关研究工作,是阐明其发病机制或者筛选有效的诊断、治疗措施的重要手段.目前,按照制备方法分类,该疾病模型主要分为有自发型、诱发型、移植型、基因干预型等四类造模方法.该模型所选择的动物主要有小鼠、大鼠、鸡、东方田鼠、长爪沙鼠等.本文结合近年来的文献报道,综述了卵巢癌动物模型制备方法,并介绍了各种方法制备的动物模型的评价标准及主要特点.

目的 测定和比较东方田鼠洞庭湖种群(DTH)(长江亚种)和青铜峡种群(QTX)(指名亚种)的繁殖及生长特性.方法 东方田鼠雌雄1∶1长期同居法饲养繁殖,观察两种群东方田鼠的窝产仔数、胎间隔、初生体质量、离乳体质量等繁殖指标.两种群田鼠雌雄各选30只,测定不同时间点的体质量,并用Von Bertalanffy模型方程拟合其生长曲线.结果 DTH窝产仔数(4.70±1.15)只,胎间隔(30.78±10.21)d,出生体质量(4.09±0.13)g,离乳体质量(27.31±1.10)g;QTX窝产仔数(3.58±1.00)只,胎间隔(35.60±12.48)d,初生体质量(4.37±0.09)g,离乳体质量(28.22±0.46) go从生长曲线可见,两种群东方田鼠的体质量性二型分化分别出现在14d和28 d,雄性田鼠的体质量显著高于雌鼠.拟合结果显示,两种群田鼠雌性体质量生长曲线体质量拐点出现时间比雄性鼠早.结论 DTH田鼠繁殖能力较QTX高,两个种群田鼠雌雄鼠的体质量均有明显的性二型分化特征,雌体较雄体早熟.

为明确洞庭湖区东方田鼠Microtus fortis肥满度的时空特征及其与东方田鼠常用预警生态因子的关系,采用夹日法对洞庭湖7个调查区域不同生境的东方田鼠进行调查分析;收集洞庭湖区降水、温度、归一化植被指数(NDVI)等环境因子数据,分析不同性别东方田鼠肥满度与降水、温度、NDVI的关系.结果表明:1)不同性别东方田鼠肥满度时空特征较一致,春季和冬季不同生境雌雄东方田鼠的差异有高度统计学意义;在洲滩芦苇生境,雄雌东方田鼠在各季节间的差异有高度统计学意义;在洲滩苔草+芦苇+杨树生境,雄性肥满度各季节间的差异有统计学意义.2)雌性肥满度与季平均降水量呈显著正相关,雄性肥满度与季平均降水量无显著的相关关系.3)雌性和雄性的肥满度与季平均温度均无显著的相关关系.4)雌性肥满度与农田生境的NDVI呈显著正相关,雄性肥满度与农田生境的NDVI无显著的相关关系;雌性和雄性的肥满度与洲滩生境的NDVI均无显著的相关关系.研究认为,洞庭湖东方田鼠肥满度可以在一定程度上反映其对环境压力的反应,雌性对不利环境较雄性更加敏感,但在特定情况下,栖息地、食物可获得性等通过影响雌性东方田鼠肥满度,进一步影响东方田鼠种群增长.

为了解东方田鼠(Microtus fortis)筑巢行为在不同环境条件下的适应性进化.在实验室内采用48 h等级法和连续144 h巢材获取重量法,比较了东方田鼠长江亚种(M.f.calamorumt)和指名亚种(M.f.fortis)筑巢行为.结果表明,东方田鼠指名亚种和长江亚种皆能主动获取巢材并建筑质量良好的巢,具有稳定的筑巢行为;东方田鼠两个亚种的筑巢行为在利用巢材能力(P＜0.01)和获取巢材能力(P＜0.05)上皆具有显著性差异;指名亚种雌雄个体在利用巢材(P＜0.05)和获取巢材的能力(P＜0.05)上皆具有显著差异,而长江亚种在这两个方面都不存在性别差异.