目的 建立丹楂通脉丸的指纹图谱,利用化学计量学分析色谱峰贡献率,结合网络药理学方法预测其药效物质基础.方法 采用Agilent C18 色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),检测波长 280 nm,流动相 0.1%磷酸水-乙腈,流速 1.0 mL·min-1,梯度洗脱,建立丹楂通脉丸甲醇提取物指纹图谱.利用网络药理学筛选相关成分的靶点和通路,构建"成分-靶点-通路"网络,对丹楂通脉丸潜在的药效物质与关键靶点进行分子对接验证.通过体外实验验证潜在的药效物质的抗炎活性.结果 10批样品指纹图谱中有 15个共有峰,2个特征峰被指认,分别为丹酚酸B和丹酚酸A.网络药理学分析表明,丹酚酸B和丹酚酸A是丹楂通脉丸发挥活性作用的有效成分,预测其可作为丹楂通脉丸的主要药效物质.体外细胞实验证明,与模型组比较,丹酚酸B高、中、低剂量组NO释放量均明显降低(P<0.01),丹酚酸A高剂量组NO释放量显著下降(P<0.01),具有一定的抗炎活性.结论 通过指纹图谱和网络药理学预测丹楂通脉丸药效物质,为丹楂通脉丸质量的全面控制和评价提供了科学依据.

目的:探讨丹酚酸C（SalC）对RA成纤维样滑膜细胞（FLSs）的作用，及转录因子-E2相关因子（Nrf2）信号通路在其中所扮演的角色。方法:用丹酚酸C 0.1、1、5、10、20 μmol/L分别处理RA-FLSs 24~72 h，之后用CCK8检测细胞活性。根据半抑制浓度（IC 50）值，选取实验所需的时间和剂量处理RA-FLSs。用伤口划痕实验和Transwell小室技术检测细胞迁移及侵袭能力。ELISA检测TNF-α，IL-1β及IL-6水平，蛋白质印迹实验检测MMP-9和MMP-13的表达及细胞凋亡相关蛋白及Nrf2及介导的相关基因的表达。用ML385干扰Nrf2，实验分成3组RA-FLSs、RA-FLSs+丹酚酸C（10 μmol/L）、RA-FLSs+丹酚酸C（10 μmol/L）+ ML385（2 μmol/L），测量迁移及侵袭能力，并检测凋亡、炎性及Nrf2信号通路相关蛋白的表达。统计学分析采用方差分析，两两比较采用Turkey检验。 结果:与对照组相比，丹酚酸C处理后RA-FLS的细胞迁移水平（丹酚酸C 0.1 μmol/L，0.75±0.05；丹酚酸C 5 μmol/L，0.50±0.05；丹酚酸C 10 μmol/L，0.26±0.05）显著性减少（ t=7.65， P<0.001； t=14.25， P<0.001； t=20.67， P<0.001）和侵袭能力（丹酚酸C 0.1 μmol/L，0.75±0.11；丹酚酸C 5 μmol/L，0.49±0.06；丹酚酸C 10 μmol/L，0.26±0.07）显著性降低（ t=4.93， P<0.001； t=10.32， P<0.001； t=14.96， P<0.001），MMP-9（丹酚酸C 0.1 μmol/L，0.72±0.10；丹酚酸C 5 μmol/L，0.48±0.08；丹酚酸C 10 μmol/L，0.27±0.06）水平显著性降低（ t=5.60， P<0.001； t=11.03， P<0.001； t=5.94， P<0.001）及MMP-13（丹酚酸C 0.1 μmol/L，0.77±0.06；丹酚酸C 5 mol/L，0.58±0.06；丹酚酸C 10 μmol/L，0.32±0.13）水平显著性减少（ t=8.66， P<0.001； t=11.03， P<0.001； t=14.22， P<0.001），促进细胞凋亡。丹酚酸C显著性降低促炎性细胞因子的水平（ P<0.001），激活Nrf2信号通路蛋白Nrf2，过氧化氢酶（CAT），醌NADH脱氢酶1（NQO1）、超氧化物歧化酶1（SOD1）及谷胱甘肽合成酶（GSS）的表达（ P<0.001）。用ML385干扰Nrf2后，显著性逆转丹酚酸C对Nrf2通路蛋白Nrf2（0.68±0.06； t=5.08， P<0.001），CAT（1.44±0.12； t=4.77， P<0.001），NQO1（0.65±0.12； t=5.04， P<0.001），SOD1（1.43±0.10； t=6.36， P<0.001）及GSS（1.42±0.10； t=7.60， P<0.001）的水平，及TNF-α[（260±22）pg/ml； t=13.75， P<0.001]，IL-1β[（701±30）pg/ml； t=12.98， P<0.001]，IL-6[（180.3±10.2）pg/ml； t=16.38， P<0.001]炎症因子的水平。除此之外ML385阻碍丹酚酸C对细胞迁移和侵袭的抑制作用（0.70±0.09； t=11.24， P<0.001；0.64±0.04； t=8.03， P<0.001）及对凋亡的诱导作用（24.4±1.8； t=23.02， P<0.001）。 结论:丹酚酸C可能通过上调Nrf2信号通路，抑制细胞活力及炎症反应，促进凋亡。丹酚酸C是治疗RA的有效潜在药物，但有待进一步动物及临床深入研究。

目的:评价丹酚酸B(Sal B)对脓毒症小鼠血管平滑肌细胞(VSMC)炎症反应的影响及circACTA2在其中的作用。方法:在体实验：健康雄性C57BL/6小鼠81只，6～8周龄，采用随机数字表法分为3组( n＝27)：假手术组、脓毒症组和Sal B组。采用盲肠结扎穿孔法制作脓毒症模型。模型制备成功后，Sal B组腹腔注射Sal B 7 mg/kg，1次/d，连续2 d。每组随机取20只小鼠用于造模后7 d内测定SBP、DBP、MAP、全血乳酸(Lac)浓度，记录生存情况。造模后48 h时每组随机取7只小鼠，取动脉血管组织，采用免疫荧光染色法测定IL-1β表达，分别采用Western blot法和qRT-PCR法测定IL-1β 、TNF-α 、IL-6及其mRNA的表达，采用qRT-PCR法测定circACTA2的表达。细胞实验：小鼠动脉VSMC培养后，采用随机数字表法分为6组( n＝3)：对照组(C组)、LPS组、Sal B组、si-circACTA2＋C组、si-circACTA2＋LPS组和si-circACTA2＋Sal B组。LPS组采用LPS(终浓度1 μg/ml)、Sal B组采用LPS(终浓度1 μg/ml)和Sal B (终浓度5 μmol/L)孵育24 h。si-circACTA2＋C组仅用si-circACTA2转染VSMC。si-circACTA2转染VSMC 24 h后，si-circACTA2＋LPS组用LPS (终浓度1 μg/ml)、si-circACTA2＋Sal B组采用LPS(终浓度1 μg/ml)和Sal B (终浓度5 μmol/L)孵育24 h。分别采用Western blot法和qRT-PCR法测定IL-1β 、TNF-α 、IL-6及其mRNA的表达，采用qRT-PCR法测定circACTA2的表达。 结果:在体实验：与假手术组相比，脓毒症组SBP、DBP及MAP降低，全血Lac浓度升高，7 d生存率降低，动脉血管组织IL-1β、TNF-α和IL-6及其mRNA表达上调，circACTA2表达下调( P<0.05)，IL-1β荧光增强。与脓毒症组相比，Sal B组SBP、DBP及MAP升高，全血Lac浓度降低，7 d生存率升高，动脉血管组织IL-1β、TNF-α和IL-6及其mRNA表达下调，circACTA2表达上调( P<0.05)，IL-1β荧光减弱。细胞实验：与C组相比，LPS组IL-1β、TNF-α和IL-6及其mRNA表达上调，circACTA2表达下调( P<0.05)。与LPS组相比，Sal B组IL-1β、TNF-α和IL-6及其mRNA表达下调，circACTA2表达上调( P<0.05)。与si-circACTA2＋C组相比，si-circACTA2＋LPS组IL-1β、TNF-α和IL-6及其mRNA表达上调( P<0.05)。与si-circACTA2＋LPS组相比，si-circACTA2＋Sal B组IL-1β、TNF-α和IL-6及其mRNA表达差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:Sal B可减轻脓毒症小鼠VSMC炎症反应，机制可能与促进circACTA2表达有关。

目的:建立丹参-当归药对配伍前后HPLC指纹图谱及多指标成分含量测定方法，探讨丹参-当归配伍对主要化合物溶出的影响。方法:制备丹参、当归单煎及共煎溶液，采用Eclipse XDB-C 18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），以0.1%磷酸水溶液-乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱，流速1.0 ml/min，柱温35 ℃，检测波长280 nm，建立丹参-当归药对配伍前后HPLC指纹图谱，求取指纹图谱共有模式，进行色谱峰归属；测定丹参素、咖啡酸、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A、丹参酮Ⅱ A、阿魏酸、绿原酸、洋川芎内酯9种成分含量，分析配伍前后各成分溶出度变化。 结果:HPLC指纹图谱及含量测定方法精密度良好，溶液中各待测成分在48 h内稳定，各色谱峰 RSD值均<5.0%，9种成分在各自线性范围内均有良好的线性关系，回收率均符合相关规定，各样品指纹图谱相似度均>0.9；丹参-当归药对配伍后共标定出17个共有峰，其中10个成分来自丹参，7个成分来自当归，该色谱条件下未发现有新化合物生成；丹参-当归药对配伍共煎后，丹参中迷迭香酸、丹酚酸B及丹参素平均溶出度较丹参单煎组减少（ P<0.05或 P<0.01）；丹参中咖啡酸平均溶出度较丹参单煎组增加（ P<0.01）；当归中绿原酸及阿魏酸平均溶出度较当归单煎组增加（ P<0.05或 P<0.01）；当归中洋川芎内酯平均溶出度与单煎组比较差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:丹参-当归药对配伍共煎后HPLC指纹图谱特征峰均可归属于丹参与当归，该色谱条件下未发现新化合物生成，对指标性成分的溶出度有显著影响。

目的:探究丹酚酸B在脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）诱导的小鼠急性肺损伤（acute lung injury, ALI）中的作用及可能机制。方法:采用随机数字表法将18只健康成年雄性C57BL/6小鼠分为3组（每组6只）：假手术组（Sham组）、LPS组、LPS+丹酚酸B组（LPS+SAB组）。予LPS组和LPS+SAB组小鼠气管内注射10 mg/kg LPS，Sham组气管内注射等体积PBS；经过上述处理，LPS+SAB组即刻经尾静脉注射50 mg/kg丹酚酸B，Sham组和LPS组经尾静脉注射等体积PBS。12 h后通过H-E染色观察肺组织病理改变，使用BCA法检测支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid, BALF）中总蛋白浓度，ELISA法检测BALF中TNF-α、IL-6和IL-1β浓度，Western blot法检测肺组织丝裂原激活的蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase, MAPK）和NF-κB信号通路中p38、c-Jun氨基端激酶（c-Jun-N-terminal kinase, JNK）、胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinase, ERK）、p65蛋白及其磷酸化蛋白水平，使用丙二醛（malondialdehyde, MDA）和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）试剂盒分别检测肺组织中MDA和SOD含量。结果:与Sham组比较：LPS组和LPS+SAB组小鼠肺损伤评分，BALF中总蛋白浓度及TNF-α、IL-6、IL-1β浓度，肺组织中p-p38/p38、p-JNK/JNK、p-ERK/ERK、p-p65/p65，肺组织中MDA含量均升高（ P<0.05）；LPS组和LPS+SAB组肺组织中SOD含量降低（ P<0.05）。LPS+SAB组小鼠肺损伤评分，BALF中总蛋白浓度及TNF-α、IL-6、IL-1β浓度，肺组织p-p38/p38、p-JNK/JNK、p-ERK/ERK、p-p65/p65，肺组织中MDA含量均低于LPS组（ P<0.05）；LPS+SAB组SOD含量高于LPS组（ P<0.05）。 结论:丹酚酸B可通过抑制肺组织炎症蛋白激活和氧化应激，从而减轻LPS诱导的小鼠ALI严重程度。

目的:探究丹酚酸B(Salvianolic acid B,Sal B)对于缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)所致肾小管上皮细胞损伤的保护作用及其机制.方法:体外实验细胞分组为正常对照(Con)组,Sal B+Con组、H/R组、Sal B+H/R组,以及Con组、H/R组、Sal B+H/R组、H/R+CC(Compound c,AMPK抑制剂)组、H/R+Sal B+CC组两部分.体外实验用CCK-8法检测HK-2细胞活性;细胞震碎,取上清,用酶标仪检测GSH和MDA的含量;Western blot检测p-AMPK、GPX4、ACSL4和FSP1蛋白的表达情况;细胞免疫荧光检测铁死亡指标GPX4、ACSL4蛋白的表达情况;流式细胞术检测线粒体膜电位和细胞凋亡.结果:体外实验结果显示,Sal B在 20～160 μmol/L对正常HK-2细胞活性无明显毒性(P>0.05);与模型组相比,20、40、80 μmol/L的Sal B呈剂量依赖性提高HK-2细胞的活性(P<0.01).与模型组相比,H/R+Sal B组细胞MDA含量降低,GSH含量升高,p-AMPK、GPX4和FSP1蛋白的表达水平升高,ACSL4蛋白的表达降低,细胞线粒体膜电位显著升高,细胞凋亡率显著下降(P<0.05);H/R+AMPK组较H/R+Sal B组FSP1 和GPX4蛋白表达水平降低,ACSL4蛋白的表达水平升高(P<0.05),细胞线粒体膜电位显著降低(P<0.05),加入Sal B可以逆转这一情况(P<0.05).结论:Sal B可减轻H/R的肾小管上皮细胞的损伤,其机制可能与激活AMPK通路减轻肾小管上皮细胞铁死亡有关.

目的 对畅脉乐胶囊(Ⅰ)质量进行评价.方法 分析采用 Thermo Scientific AccucoreTM XL C18 色谱柱(4.6 mm×250 mm,4 μm);流动相甲醇-乙腈-0.5%磷酸,梯度洗脱;体积流量1 mL/min;柱温35℃;检测波长230、280 nm,测定天麻素、丹参素、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷、3′-羟基葛根素、葛根素、3′-甲氧基葛根素、葛根素芹菜糖苷、芍药苷、大豆苷、迷迭香酸、紫草酸、异槲皮苷、芒柄花苷、大豆苷元、丹酚酸B、毛蕊异黄酮的含量,建立HPLC指纹图谱,测定相似度.结果 16 种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 0),平均加样回收率 87.4%～103.9%,RSD 0.54%～3.10%.在 230 nm处,10 批样品指纹图谱相似度为 0.954～0.999,而在280 nm处其差异较明显.3′-羟基葛根素、葛根素、3′-甲氧基葛根素、葛根素芹菜苷、大豆苷、大豆苷元是主要差异成分,芍药苷、异槲皮苷含量在各批样品中稳定.结论 该方法简便、准确、可靠,可用于畅脉乐胶囊(Ⅰ)的质量控制.

目的 建立HPLC法同时测定脑脉泰胶囊中 3′-羟基葛根素、2-羟基红花黄色素A、葛根素、葛根素芹菜糖苷、3′-甲氧基葛根素、大豆苷、二苯乙烯苷、木犀草苷、染料木苷、木犀草素、丹酚酸B、迷迭香酸的含量.方法 分析采用Kromasil C18 色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相乙腈-水(含 1.0 g/L 磷酸),梯度洗脱;体积流量0.8 mL/min;柱温 30℃;检测波长 280 nm.再进行聚类分析、主成分分析.结果 12 种成分在各自范围内线性关系良好(r＞0.999 0),平均加样回收率 97.07%～98.30%,RSD 0.86%～1.82%.10 批样品聚为 4 类,4 种主成分累积方差贡献率达 86.262%.结论 该方法简便稳定,可靠准确,可为脑脉泰胶囊的质量控制提供科学依据.

目的 建立参黄养阴胶囊多组分定量控制的方法,探索化学模式识别及灰色关联度分析(GRA)模型在参黄养阴胶囊质量评价中的应用.方法 采用HPLC同时测定参黄养阴胶囊中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rd、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、美迪紫檀素、丹参素钠、丹酚酸B、丹参酮ⅡA、麦冬甲基黄烷酮A和甲基麦冬二氢高异黄酮B的含量.采用Agilent Eclipse Plus C18色谱柱,以乙腈-0.5%磷酸为流动相,梯度洗脱,检测波长分别为203、280、296 nm.通过化学模式识别和GRA对多组分含量结果进行分析,构建参黄养阴胶囊综合质量评价体系.结果 外标法方法学验证结果均符合要求.化学模式识别分析显示,丹酚酸B、芒柄花苷、丹参酮ⅡA、毛蕊异黄酮、人参皂苷Rb3和人参皂苷Rb1是影响参黄养阴胶囊产品质量的主要因子.GRA相对关联度为0.319 8～0.642 1,有利于分析产品间的差异.结论 多成分定量联合化学模式识别及GRA可用于参黄养阴胶囊的质量评价.

目的 建立消核糖浆的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并测定其中10个有效成分的含量.方法 以12批消核糖浆为对象,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法,以Athena C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)为色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为210 nm.色谱图导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012A版)》建立消核糖浆指纹图谱并进行相似度评价.采用ACQUITY UPLC BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7 μm)色谱柱,以0.01%甲酸乙腈-0.01%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,流速为0.4 mL/min,结合高分辨质谱仪,以电喷雾离子源进行正负离子扫描,测定12批消核糖浆中各主要成分的含量.结果 12批样品共标定33个共有峰,相似度均大于0.97;确认其中10个色谱峰,分别为王不留行黄酮苷、芍药苷、阿魏酸、柚皮苷、迷迭香酸、新橙皮苷、丹酚酸B、延胡索乙素、柴胡皂苷A、柴胡皂苷D;含量测定结果显示,上述10个成分在各自的质量浓度范围内线性关系良好(R 2＞0.999),其含量分别为0.35～0.64、3.15～5.61、0.11～0.17、1.68～3.17、1.59～1.90、1.15～1.64、0.78～1.48、0.11～0.26、0.06～0.13、0.33～0.61 mg/mL.结论 12批消核糖浆的主要成分相似但含量有所差异;本研究建立的HPLC指纹图谱和UPLC-MS/MS含量测定方法可用于消核糖浆的全面质量评价.