目的:通过网络药理学和分子对接技术探讨参附注射液经神经-内分泌-免疫系统调控应激反应的潜在作用机制。方法:使用中药系统药理学数据库和分析平台筛选参附注射液的主要活性成分及作用靶点，使用PharmMapper、Swiss Target Prediction平台和Uniprot数据库对靶点补充预测并统一基因名；通过检索GeneCards、OMIM、TTD、CTD、Drugbank、Disgenet和Pharmgkb数据库筛选应激反应调控的相关靶点。使用Venny2.1工具获得参附注射液与应激反应调控交集的潜在作用靶点后，导入STRING数据库构建蛋白相互作用网络并筛选关键靶点。将潜在作用靶点上传至Metascape数据库中，通过GO功能富集分析和KEGG通路富集分析进行机制研究；使用Autoduck、Pymol软件进行分子对接及可视化展示。结果:筛选并获取参附注射液主要活性成分43个，相关作用靶点257个；数据库检索到应激反应调控相关靶点4 811个，与参附注射液成分相关靶点取交集获得188个潜在作用靶点，通过蛋白相互作用网络筛选得到关键靶点14个。GO功能富集分析筛选得到18条，主要涉及循环系统及体液调控、对外来刺激及创伤的反应、MAPK级联反应、突触后膜、受体复合体、离子通道复合体、神经递质受体活性等。KEGG通路富集分析高度相关通路20条，主要涵盖神经活性配体-受体的相互作用、钙信号通路、肾上腺素能信号转导、类固醇激素生物合成、IL-17、TNF、MAPK、cGMP-PKG、PI3K-Akt、NF-κB、Toll样受体信号通路和细胞凋亡等。分子对接结果提示主要活性成分与关键靶点具有较好的结合力。结论:参附注射液中山柰酚、β-谷甾醇、去甲基棱砂贝母碱、豆甾醇、人参皂苷、蛇床子苷、次乌头碱等成分可能作用于AKT1、TNF、IL1B、PTGS2、HSP90AA1、MAPK1、NFKBIA、NR3C1、ADRB2等靶点，通过调节神经-内分泌-免疫系统功能状态、抑制炎症反应、抗氧化应激和减少细胞凋亡等机制对应激反应进行调控。

目的:评价乌头汤联合甲氨蝶呤治疗早期中高疾病活动度类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)的疗效。方法:回顾性纳入2015年7月-2017年6月上海市光华中西医结合医院224例接受乌头汤联合甲氨蝶呤与单纯甲氨蝶呤治疗12周的早期中高疾病活动度RA患者，按治疗方法分为联合组131例和甲氨蝶呤组93例。检测治疗前及治疗后4、8、12周的CRP、ESR水平，采用28个关节活动评分(Disease Activity Score in 28 Joints, DAS28)和健康评估问卷(Health Assessment Questionnaire, HAQ)评估疾病活动度与生活质量，并根据DAS28的改善程度计算临床缓解率和低疾病活动度(low disease activity, LDA)患者比例，评价临床疗效。结果:治疗后8、12周，联合用药组CRP( t值分别为2.100、2.488)，ESR( t值分别为2.130、2.777)水平及DAS28( t值分别为2.886、3.718)、HAQ( t值分别为2.144、2.362)评分均低于甲氨蝶呤组( P<0.05或 P<0.01)。治疗后12周，联合用药组临床缓解率[12.2%(16/131)比4.3%(4/93)； χ2＝4.188， P＝0.041]与LDA患者比例[38.9% (51/131)比25.8%(24/93)； χ2＝4.207， P＝0.040]均高于甲氨蝶呤组；联合用药组临床显效率治疗后8周[37.4%(49/131)比21.5%(20/93)； χ2＝6.450， P＝0.011]、12周[72.5%(95/131)比52.7%(49/93)； χ2＝9.316， P＝0.002]均高于甲氨蝶呤组。 结论:乌头汤与甲氨蝶呤联用可明显改善早期中高疾病活动度RA患者的临床症状，降低疾病活动度，提高生活质量，疗效优于单纯甲氨蝶呤治疗。

目的:基于虚拟筛选-分子对接-活性评价技术探讨四逆汤治疗抑郁症的药效物质基础.方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP)检索四逆汤(甘草、干姜、附子)的活性成分,并根据类药五原则及相关条件进行二次筛选.通过RCSB PDB数据库检索抑郁症的作用靶点.借助Discovery StudioTM 2016 软件对四逆汤活性成分与抑郁症靶点进行分子对接,探索两者的亲和力和结合方式,进而筛选关键活性成分.HT22 细胞分为空白组、模型组、(R)-去甲乌头碱组、甘草素组及山柰酚组.除空白组外,其余各组细胞加入皮质酮(1 mol·L-1,200 μL)培养24h建立体外抑郁模型.然后,加入相应药物(1 mol·L-1,100 μL)干预24 h,光镜下观察细胞形态,TUNEL染色观察细胞凋亡情况.C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、(R)-去甲乌头碱组(10 mg·kg-1)、甘草素组(15 mg·kg-1)、山柰酚组(20 mg·kg-1).除空白组外,其余小鼠采用慢性不可预见性温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)结合孤养的方式建立抑郁模型.造模首日开始给药,每日1 次,连续28 d.末次灌胃后,通过糖水偏爱实验(sucrose preference test,SPT)、强迫游泳实验(forced swimming test,FST)与悬尾实验(tail suspension test,TST)检测各组小鼠的抑郁情绪和绝望情绪.结果:四逆汤活性成分 493 个,二次筛选得到 91 个化合物.抑郁症作用靶点 4 个,即单胺氧化酶A(monoamine oxidase A,MAO-A)、多巴胺转运体(dopamine transporter,DAT)、5-羟色胺转运体(serotonin transporter,SERT)、组胺H1 受体(histamine receptor H1,H1R).通过分子对接得到15 个四逆汤抗抑郁的关键活性成分,进一步筛选得到 3 个核心成分,即(R)-去甲乌头碱、甘草素、山柰酚.细胞实验显示,空白组细胞光泽度好,突起交错分布且相互连接;模型组细胞光泽度较差,突起连接部分断裂消失,可见细胞变圆皱缩;与模型组比较,(R)-去甲乌头碱组、甘草素组、山柰酚组细胞形态有所改善,突起连接更紧密.空白组基本无细胞凋亡;与空白组比较,模型组细胞凋亡增加;与模型组比较,(R)-去甲乌头碱组、甘草素组、山柰酚组细胞凋亡减少.动物实验显示,与空白组比较,模型组小鼠糖水偏爱度降低(P＜0.05);与模型组比较,(R)-去甲乌头碱组小鼠糖水偏爱度升高(P＜0.05).与空白组比较,模型组小鼠不动时间(TST 和 FST)增加(P＜0.05);与模型组比较,甘草素组小鼠TST不动时间减少(P＜0.05),(R)-去甲乌头碱组、甘草素组小鼠FST不动时间减少(P＜0.05).结论:本研究采用中药新药发现与评价的新模式"虚拟筛选-分子对接-活性评价",深入挖掘四逆汤抗抑郁的物质基础主要为(R)-去甲乌头碱、甘草素及山柰酚.

目的 建立统一条件的色谱指纹图谱鉴别和含量测定分析方法,用于不同产区高乌头炮制品的质量研究.方法 通过HPLC梯度洗脱建立高乌头炮制品的指纹图谱,并采用中药指纹图谱相似度评价系统(2012版)、主成分分析(PCA)和聚类分析(CA)对指纹图谱进行分析.结果 建立了高乌头炮制品指纹图谱,10批高乌头制品的相似度均大于0.90,标定共有峰18个,并对其中2主要成分(高乌甲素、冉乌头碱)进行含量测定,聚类分析(CA)将所有批次高乌头制品分为4类,反映了10批不同产区高乌头制品的质量特征;主成分分析筛选出累计贡献率达到88.824％的4个主成分,得到决定高乌头药材质量7个化学成分.结论 该方法重现性好、特征性强可用于高乌头炮制品全面质量评价.

类风湿关节炎(RA)是一种以侵蚀性关节炎为主要表现的全身性自身免疫疾病.由于其发病机制尚未完全清楚,很难找到一种理想的药物完全治愈此类疾病.RA在中医中属于“痹症”的范畴,是临床难治性疾病之一.传统中药治疗RA具有悠久的历史,根据中医理论应用中药辨证施治在RA的治疗上有其独特的优势.研究中药治疗RA的作用机制,发挥最大的临床效果,降低其不良反应是目前研究的重点.目前,临床常用治疗RA的中药主有雷公藤多苷片、青风藤、白芍总苷、乌头和姜黄,以及桂枝芍药知母汤、黄连解毒汤、清络通痹颗粒等.现就中药治疗RA的研究进展综述如下.

目的 建立不同产区高乌头炮制品的HPLC指纹图谱,并测定2种生物碱成分的含量,为高乌头制品质量控制提供参考依据.方法 通过HPLC梯度洗脱建立高乌头炮制品的指纹图谱,并采用中药指纹图谱相似度评价系统(2012版)、主成分分析和聚类分析对指纹图谱进行分析.结果 建立了高乌头炮制品指纹图谱,10批高乌头制品的相似度＞0.90,标定共有峰18个,并对其中2主要成分(高乌甲素、冉乌头碱)进行含量测定;聚类分析将所有批次高乌头制品分为4类,反映了10批不同产区高乌头制品的质量特征;主成分分析筛选出累计贡献率达到88.8％的4个主成分,得到决定高乌头药材质量7个化学成分.结论 该方法重复性好、特征性强,可用于高乌头炮制品全面质量评价.

"十八反"属于中药配伍禁忌的主要内容,长期以来在临床发挥着重要的指导作用[1].而半夏与乌头配伍属于"十八反"的范畴,这里所说的乌头包括川乌、草乌和附子.2015年版《中华人民共和国药典》中半夏的[注意]项标明"不宜与川乌、制川乌、草乌、制草乌、附子同用"在法半夏、姜半夏、清半夏的[注意]项内容与半夏相同;川乌的[注意]项标明"不宜与半夏、瓜蒌、瓜蒌子、瓜蒌皮、天花粉、川贝母、浙贝母、平贝母、伊贝母、湖北贝母、白蔹、白及同用",制川乌、草乌、制草乌、附子的[注意]项与川乌相同.中医药在治疗很多疾病当中发挥重要作用,尤其对于现代一些难治病证如癌症[2].

基于毒性中药的效-毒关系认识,梳理东汉至清朝48部传统中医药古籍中含乌头类中药内治方的应用剂量规律与特点,为临床用药风险警戒提供依据.检索纳入每日剂量明确的处方4 521首,建立乌头类中药内治处方数据表,采用SPSS20.0软件对乌头类中药每日剂量与入药种类、适应证、剂型、炮制、特殊人群用药等的关系进行统计分析.在4 521首处方中,67％处方以附子入药,且90％处方用量小于14.87 g·d-1;乌头(川乌、草乌)90％处方用量小于3.14 g·d-1.在治疗伤寒、时疫、水肿痰饮的处方中,乌头用药剂量较大.在汤剂、酒剂中用量明显高于丸散剂型.且随朝代演变,乌头类中药处方剂量、叠加用药情况均有所降低.特殊人群用乌头类中药比例相对较少,剂量较轻.因此,在现代临床应用中,乌头类中药内治方用量不宜超过现行《中国药典》规定剂量上限,并结合多方面因素严格控制用量,保障效-毒关系平衡.

乌头类中药痹证应用历史悠久、疗效确切,该文以乌头(川乌、草乌)、附子为例,挖掘其传统痹证处方用药规律,为临床用药提供思路与依据.检索东汉至清朝20余部医学、药学及综合类典籍,获得乌头类中药治疗痹证的处方1 106首,运用频次统计、百分位数、关联规则Apriori算法等对处方用药规律进行分析.结果显示,附子应用比例约为60.76％,明显高于川乌、草乌,乌头类中药叠加应用占17.63％.70.34％处方主要用于风寒湿痹证,还可见肝肾两虚型、痰瘀痹阻型、风湿热痹型.在剂量明确的处方中,80％附子用量在0.29 ～2.14 g·d-1,乌头(川乌、草乌)用量0.14～1.01 g·d-1.且受证型分类、剂型、炮制等影响,乌头类中药在风寒湿痹证分类中用量最高,汤剂、酒剂用量明显高于丸、散剂型,93.11％处方使用炮制品入药,制品剂量高于生品.临床应用中,川乌、草乌多与防风、甘草、没药、麻黄等配伍,附子与肉桂、牛膝、防风、川芎等同用,共奏祛风除湿、止痹痛之功.乌头类中药广泛应用于痹证的治疗,起到除痹止痛的功效.

类风湿性关节炎(RA)病势缠绵、较难治愈,常规治疗用药周期长、易诱发不良反应,特别需要考量患者的获益与风险.毒性中药川草乌作为RA治疗重要手段之一,用药存在一定争议.该研究切入临床用药的实际问题,基于多准则决策模型量化评估川草乌中药单独应用以及联用西药的效益与风险.采用RevMan 5.2软件分别综合21项川草乌单独应用治疗RA的随机对照试验(RCT)、49项川草乌联用西药治疗RA的RCT各指标结果,显示相较于常规西药治疗,无论单独应用还是联用西药,川草乌均可提高疗效、降低不良反应/事件发生率.结合RA治疗的效益-风险评价指标决策体系,应用Hiview 3软件以及Crystal Ball蒙特卡洛模拟计算川草乌单独应用与联用西药的效益值、风险值、效益-风险总值.结果显示川草乌联用西药的效益高于其单独应用(效益差=15,95％ CI[9.72,20.25]),但其风险也相对更高(风险差=23,95％ CI[15.57,30.55]),当效益与风险对RA患者同等重要时,川草乌单独应用的效益-风险总值为58,联用西药为55,且单独应用优于联用西药的概率为81.07％.由此可见,川草乌是RA临床治疗手段的重要补充,且当患者对于风险的可接受性较低时,则不推荐中西药联用.