目的:确定古代经典名方乌药汤制剂适宜的提取工艺.方法:分别采用传统工艺、传统工艺水煎液蒸馏分离挥发油、二次回流提取工艺、双提法制备不同提取液,以传统工艺提取液(传统汤剂)特征图谱、指标成分含量及出膏量为参照,比较不同提取液物质基础的异同.结果:3 种工艺与传统汤剂特征图谱相似度均>0.96,出膏量均差异无统计学意义(P>0.05).与传统汤剂20 个特征峰及6 个指标成分相比,传统工艺水煎液蒸馏分离挥发油中13 个峰绝对峰面积显著降低,2 个指标成分含量显著降低(P<0.05);二次回流提取工艺中6 个峰绝对峰面积显著增加,4 个指标成分含量显著增加(P<0.05);双提法中2 个峰绝对峰面积显著增加,1 个指标成分含量显著增加(P<0.05),其余成分无显著性变化(P>0.05).结论:双提法与传统汤剂关键质量属性基本一致,且能保留挥发性活性物质,为适宜的提取工艺.

胃癌是常见的恶性肿瘤之一,由于病程日久及受多种因素影响,胃癌多在寒邪凝滞的基础上有"癌毒"积热的临床表现,因此寒热错杂是胃癌重要的核心病机.在临床治疗上应以平调寒热为主,同时顾护脾胃,重视气机的升降功能.通过传承百合乌药汤古方,围绕胃癌寒热错杂之病机,再结合肿瘤防治,化裁形成了百合乌药汤加减方.此方旨在平调寒热,辅以活血止痛、调节气机,达到治疗疾病的目的 .

郝建梅教授根据中医经典书籍记载百合的药效及临床经验,提出百合"安心定胆以宁神,甘寒生津以养肺,土金相和以达木"的3个特性.其采用经方"百合地黄汤"合经验方"解郁合欢汤""疏肝化瘀汤"治疗肝失疏泄,肝气郁结,气机失调,郁热相火上扰引起心不能主神明导致的失眠;经方"百合知母汤""百合地黄汤"合经验方"甲苓饮"治疗肝肾阴虚,肾不主水,肝不能通利三焦,水液运化失常,相火上扰灼伤肺金的鼓胀并发的咳嗽;时方"百合乌药汤"合"四逆散"、经验方"桃红化浊汤"治疗因肝气郁结日久化热,横逆犯脾胃,使脾胃运化失常,湿热中阻导致的痞满,均取得很好疗效.

目的:利用网络药理学方法探讨乌药汤治疗原发性痛经的作用机制.方法:借助中药系统药理学分析平台(TCMSP)筛选乌药汤的活性成分;通过Pharmmapper数据库筛选活性成分潜在靶点基因,使用GeneCards数据库得到原发性痛经相关基因靶点;将活性成分的潜在靶点基因与原发性痛经相关基因进行比对,得到乌药汤治疗原发性痛经的潜在靶点基因;使用KOBAS3.0数据库对靶点基因功能(gene ontology,GO)和KEGG通路进行分析,得到乌药汤治疗原发性痛经的重要调节通路;采用Cytoscape3.6.1软件构建“成分-靶点-通路”网络;将筛选得到的主要活性成分和关键靶点进行分子对接验证.结果:从乌药汤中共筛选出菜蓟苦素、金圣草(黄)素、异黄檀素、甘草素f等31个活性成分,涉及包括ESR1、CASP3、MMP9、HRAS在内的23个基因靶点,影响了内分泌抵抗(Endocrine resistance)、雌激素受体信号传导通路(Estrogen signaling pathway)和催乳激素信号通路(Prolactin signaling pathway)等95条与原发性痛经相关的信号通路.分子对接结果显示,筛选得到的主要活性成分与关键靶点有较强结合,其中菜蓟苦素(cynaropicrin)和关键靶点的结合能力与阳性药接近.结论:本研究通过构建“成分-靶点-通路”网络图,揭示了乌药汤能通过多成分、多靶点、多通路发挥药效,为进一步阐释乌药汤治疗原发性痛经作用机制提供了科学依据.

张静生教授,首届全国名中医,从医五十年,一直从事中医临床与研究,善用经方、名方、小方,治疗内、妇、儿科疾病,尤其擅长治疗重症肌无力、冠心病等.张老强调读经典、学各家、做临床的重要性,临床活用经方,注重搜集历代名方,如高枕无忧散、清上蠲痛汤等.张老重视百合乌药汤等由两三味药组成的小方的应用,认为小方药少力专,法度严谨,运用更加灵活.除古代医籍外,张老亦学习近现代名家良方,为我所用.张老是辽宁省中西医结合事业的开拓者,主张用现代科技挖掘古方,研究中医.他用现代方法研究瓜蒌薤白半夏汤,总结出益气养阴、祛痰化瘀法治疗冠心病的新方剂;提出了脾肾虚损是贯穿重症肌无力病程始终的基本病机,通过脾肾双补法治疗重症肌无力,研发了治疗重症肌无力的新药“复方黄杞颗粒”.张老反对用西医的方法来指导中医科研,强调中医科研必须根于临床,只有遵从经典,才能古方今用,衷中参西.

目的:基于网络药理学联合GEO芯片差异基因分析的方法,分析百合乌药汤治疗胃癌的分子靶点和作用机制.方法:在TCMSP数据库检索中药药物信息,获得百合乌药汤的活性成分和分子靶点.在GEO芯片数据库通过检索“gastric cancer”分析筛选后获得GSE118916芯片数据,通过R软件分析得出差异基因,并绘制热图和火山图.通过Cytoscape3.7.2构建百合乌药汤与胃癌的成分-靶点网络图,使用插件Bisogenet和CytoNCA绘制核心靶点拓扑网络,并进行药物与疾病基因的GO富集分析(BP、CC、MF)和KEGG富集分析.结果:从GEO数据库下载分析得到与胃癌上调和下调最明显的差异基因40个.获得百合乌药汤有效活性成分10个,主要包括槲皮素(quercetin)、谷固醇(beta-sitosterol)、异松脂酸(Isopimaric acid)等,作用于PTGS2、ADH1C、ADRB2、PLAU、MAOA、CHRM3、CCNA2、MMP9、IL6等31个基因靶点.生物功能和通路富集分析表明,百合乌药汤治疗胃癌主要涉及脂多糖、氧化应激、血红素结合、蛋白激酶调节等方面,通过调节AGE-RAGE、TNF、NF-κB、IL17等信号通路发挥治疗作用.结论:百合乌药汤治疗胃癌的重要活性成分为槲皮素、谷固醇等,涉及TNF、NF-κB、IL17等信号通路.

目的:建立同时测定乌药汤配方颗粒(乌药、当归、木香、香附和甘草)中4种指标性成分含量的方法.方法:采用HPLC法,将乌药汤配方颗粒按组方比例称取并混匀,用50％甲醇超声提取,过0.22 μm微孔滤膜,得提取液.分析采用Agilent ZORBAX Extend-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱;流动相:乙腈-0.5％磷酸,梯度洗脱;柱温:30℃;检测波长:280 nm;流速:1.0 mL/min.结果:去甲异波尔定、阿魏酸、甘草苷和甘草酸单铵盐分别在1.4～84.0 mg/L(r= 1.000 0)、0.417～12.500 mg/L(r= 1.000 0)、3.9～260.0 mg/L(r= 1.000 0)和 8.4～280.0 mg/L(r=0.999 9)范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为100.05％、100.25％、101.41％和100.19％,RSD分别为2.51％、2.93％、2.57％和2.30％.结论:该方法简便、快速、准确、重复性好,可用于乌药汤配方颗粒的质量控制.

继发性闭经是妇科常见疑难病之一.本文追根溯源从《内经》及各家学说对该病进行阐述总结,认为脾胃为冲任胞宫纽带,气血之源,气机之枢与月经来潮、形成、疏泄关系密切,脾胃不调为初始病机,兼病四脏为继发病机,并存在心气虚、肝气郁的体质病机,热邪、痰湿、血瘀的衍生病机.针对继发病机若病在心脾,脾胃生化不足,心气先虚,胞宫被火蚀,气血不行,经闭血枯,治以补脾养心,顺气调经,补心汤治疗;若病在肺脾,脾胃气机不畅,肺气失宣,生热生湿,血行不利,经闭自生,治以提壶揭盖,宣肺泻热,三拗汤合小陷胸汤治疗;若病在肝脾,脾胃湿热,肝横犯于脾胃,热邪伤津耗血,经血瘀滞,经闭病现,治以平肝理气,清胃滋阴,加味逍遥散合益胃汤治疗;若病在脾肾,阳明凝寒,累及肾气,肾阳虚涩,胞宫寒冷,经血不行,经闭乃成,治以温胃暖肾,健脾益气,附子理中汤合乌药汤治疗.

目的 建立经典名方乌药汤物质基准中挥发油的GC-MS指纹图谱,分析物质基准中挥发油的化学组成,并建立多指标含量测定方法.方法 遵古籍并结合前期考察工艺,将不同批次的饮片采用混批的投料方式,制备乌药汤物质基准,采用GC-MS建立物质基准指纹图谱,使用"中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2012年版)"计算相似度,并结合正交偏最小二乘判别分析,挖掘影响不同批次乌药汤物质基准质量的标志性化合物,将其中4个标志性化合物香附烯酮、α-香附酮、去氢木香内酯、藁本内酯作为指标,建立其含量测定方法,并对10批样品进行含量测定.结果 10批样品指纹图谱与对照图谱的相似度0.954～0.990,确定了27个共有峰,鉴定出26个化学成分,并找到8个影响批次间差异的标志性化合物(峰6,21,22,9,23,18,27,20),乌药汤物质基准中香附烯酮、α-香附酮、去氢木香内酯、藁本内酯平均质量分数分别为5.54％,2.93％,1.52％,8.89％.结论 研究建立了GC-MS指纹图谱和多指标含量测定方法,初步形成了经典名方乌药汤物质基准挥发油部分的质量控制方法.

目的 优化经典名方乌药汤挥发性成分的提取工艺.方法 在单因素实验的基础上,以有效成分乙酸龙脑酯、香附烯酮、α-香附酮、藁本内酯、去氢木香内酯含量及挥发油提取率的综合评分为指标,以提取时间、浸泡时间、液料比为响应因素,采用Box-Behnken设计-响应面法优化乌药汤挥发性成分的提取工艺并验证.在此基础上,再对药液的提取状态进行量化.结果 最优提取工艺为液料比13:1(mL/g),浸泡时间0.5 h,暴沸状态下提取6 h.3次验证实验的综合评分分别为0.9487、0.9484、0.9486(RSD=0.02％,n=3),与预测值(0.9479)的偏差均不超过1％.以180℃油浴下药液的沸腾状态作为暴沸状态.结论 所得乌药汤挥发性成分最优提取工艺稳定、可行.