目的:比较行抗病毒治疗的HBeAg阳性慢性乙型肝炎（CHB）患儿无应答组和应答组间基线乙型肝炎核心抗体定量（qAnti-HBc）水平的差异，以探讨不同qAnti-HBc水平患儿外周血CD8 +记忆T细胞亚群比例及其功能活性。 方法:回顾性检测2018年6月至2020年12月于重庆医科大学附属儿童医院感染科就诊的85例HBeAg阳性CHB患儿基线qAnti-HBc水平。分析其中37例抗病毒治疗患儿基线qAnti-HBc水平与HBeAg血清学应答的关系。流式细胞检测59例患儿基线外周血CD8 +记忆T细胞亚群比例及干扰素（IFN）-γ、肿瘤坏死因子（TNF）-α分泌水平，分析qAnti-HBc水平与CD8 +记忆T细胞亚群比例及其功能活性间的关系。计数资料比较采用Pearson’s Chi-square检验，两组或多组间计量资料比较采用Mann-Whitney U检验或Kruskal-Wallis检验，连续性变量间的相关性采用Spearman秩相关分析。 结果:在37例接受恩替卡韦（ETV，21/37）或聚乙二醇干扰素（Peg-IFN，16/37）治疗的患儿中，有18例发生HBeAg血清学转换（ETV组10/21，Peg-IFN组8/16），应答组患儿基线qAnti-HBc水平[4.71（4.64~4.81）log 10IU/ml]显著高于无应答组[4.54（4.45~4.64）log 10IU/ml， Z = -3.316， P = 0.001]。高qAnti-HBc组CD8 +Tem、CD38 +CD8 +Tem、CD38 +CD8 +Temra细胞比例及CD8 +T细胞分泌的IFN-γ、TNF-α水平显著高于低qAnti-HBc组（ P < 0.05）；ALT>1×正常值上限（ULN）组CD8 +Tem、CD38 +CD8 +Tem、CD38 +CD8 +Temra细胞比例显著高于ALT≤1×ULN组（ P<0.05），但两组CD8 +T细胞分泌的IFN-γ、TNF-α水平差异无统计学意义（ P>0.05）。Spearman相关分析显示，qAnti-HBc与CD8 +Tem、CD38 +CD8 +Tem、CD38 +CD8 +Temra细胞比例及CD8 +T细胞分泌的IFN-γ水平呈正相关（ P<0.05）；ALT仅与CD38 +CD8 +Tem、CD38 +CD8 +Temra细胞比例呈正相关（ P<0.05）。 结论:较高的基线qAnti-HBc水平与CHB儿童患者抗病毒治疗HBeAg血清学应答相关；qAnti-HBc较高的CHB患儿外周血效应CD8 +T细胞表现出更强的表型及功能活化特点，此研究可能对CHB儿童抗病毒治疗疗效相关的潜在免疫机制作出一定阐释。

目的:获得乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)C2蛋白的HBV多肽。方法:同源重组法构建含1.2倍HBVC2全基因组表达重组体；脂质体法转染HepG2和Huh-7细胞；荧光定量PCR法检测HBV DNA水平；双抗体夹心酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)法检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和E抗原(HBeAg)的水平；免疫荧光法检测核心抗原(HBcAg)水平和分布。电转染法转染人永生化B淋巴细胞系(B-lymphoblastoid cell line，BLCL)，液相色谱串联质谱(liquid chromatography-mass spectrography/mass spectrometry，LC-MS/MS)法分离鉴定HBV多肽，生物信息学预测亲合力，并检索已报道序列。结果:成功构建了含3881 bp目的片段的HBVC2全基因组的重组体，即pAAV/HBV1.2 C2。HepG2和Huh-7细胞转染重组体后24、48和72 h，培养上清液中HBV DNA、HBsAg和HBeAg均呈现较高水平；HBcAg多分布在细胞核，均在48 h表达水平达高峰。从5株BLCLs细胞裂解液中检出来源于HBsAg、HBeAg和HBcAg的HBV多肽(序列长度≥8aa)共95条。比较分析共同序列和包含或重叠(≥8aa)序列，67条多肽形成了11个HBV多肽热点核心区域，有92条已见报道。51(53.68%)条多肽有相应的人类白细胞表面抗原(human leukocyte antigen，HLA)等位基因分型，而与5株细胞所携带HLA等位基因一致的共有21条。 结论:成功构建和表达了pAAV/HBV1.2 C2，获得了真实世界的HBVC2多肽谱。

乙型肝炎核心抗体是病毒感染后产生的特异性抗体，出现早，持续时间长，利用双抗原夹心化学发光微粒子免疫检测法测量其在血清中的水平，具有更高的灵敏度和特异性，为乙肝患者的诊断、治疗及停药管理提供新的临床指标。本文就乙肝核心抗体定量检测的临床意义及研究进展作综述，阐述其在临床实践中的研究应用及前景。

慢性乙型肝炎（CHB）严重威胁国人健康。病毒学指标在患者抗病毒治疗、新药研发中意义重大。然而，传统的血清病毒学指标如HBV DNA和乙型肝炎表面抗原（HBsAg）在评估抗病毒治疗效果和准确反映患者共价闭合环状DNA（cccDNA）的转录活性方面存在一定的局限。近年来HBV RNA、乙型肝炎核心相关抗原（HBcrAg）及核心抗体定量（qAnti-HBc）等新病毒学指标在准确反映cccDNA转录活性、判定患者治疗效果以及预测停药后复发风险等方面的作用越来越受到关注。现简要介绍在CHB患者抗病毒治疗的各阶段新、旧指标的应用情况，并结合新型病毒学新指标在药物疗效评价中的应用，阐述其在抗病毒新药研发中可能发挥的作用。

目的:分析基线乙型肝炎核心抗体定量（qHBcAb）与乙型肝炎病毒（HBV）相关慢加急性肝衰竭（HBV-ACLF）患者预后的相关性，及其对HBV-ACLF预后的预测价值。方法:纳入2019年7月1日至2021年12月30日无锡市第五人民医院收治的HBV-ACLF患者91例（HBV-ACLF组），并纳入慢性乙型肝炎（CHB）患者50例（CHB组）及慢性HBV携带状态患者50例（HBV携带组）为对照，收集qHBcAb、血常规、生化、凝血功能、乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎e抗原（HBeAg）、HBV DNA等基线资料，进行回顾性分析。将qHBcAb、HBsAg和HBV DNA数据进行对数转换。采用Cox多因素回归分析qHBcAb水平与生存结局的相关性；随访90 d，用Kaplan-Meier法进行生存分析；用受试者工作特征（ROC）曲线评价qHBcAb对HBV-ACLF患者预后的预测价值。结果:HBV-ACLF组基线qHBcAb水平为（4.83±0.42）IU/ml，高于CHB组［（4.59±0.54）IU/ml］及HBV携带组［（3.86±0.74）IU/ml］（ P均<0.05）。随访90 d后，HBV-ACLF组生存46例（50.5%），死亡45例（49.5%）。生存患者基线qHBcAb水平高于死亡患者［（4.93±0.22）IU/ml比（4.70±0.52）IU/ml， P<0.01］。生存和死亡患者在甲胎蛋白、国际标准化比值、凝血酶原时间、抗凝血酶Ⅲ活性、血小板计数、终末期肝病模型评分、是否合并肝性脑病的差异均有统计学意义（ P均<0.05）。Cox多因素回归分析显示基线qHBcAb是患者90 d生存结局的独立影响因素（ HR=0.027，95% CI 0.001~0.696， P<0.05）。基线qHBcAb水平预测肝衰竭患者90 d生存结局的ROC曲线下面积为0.639（95% CI 0.525~0.752， P<0.05），截断值为4.89 IU/ml。基线qHBcAb≥4.89 IU/ml患者累积生存率高于基线qHBcAb<4.89 IU/ml患者（ P<0.05）。 结论:基线qHBcAb水平与HBV-ACLF患者的预后相关，可能作为预测HBV-ACLF临床结局的一种新型生物学标志物；当qHBcAb<4.89 IU/ml时，患者病死率较高。

例1 　女，18岁。因周身鳞屑性红斑伴发热及关节疼痛8年，于2020年6月就诊于我院皮肤科。患者8年前无明显诱因出现多发红斑伴脱屑，5年前逐渐弥漫至全身，2年前先后出现双膝关节、足跖、足跟、足趾关节及腰部疼痛。1年前就诊于我院风湿免疫科，诊断为银屑病性关节炎，给予甲氨蝶呤7.5 mg每周1次，治疗1月余，疗效欠佳，后自行停药。体检：体温37.9 ℃，心率125次，呼吸23次，血压115/80 mmHg。心肺听诊无异常，腹部柔软，无压痛、反跳痛等；腋下及腹股沟可触及多个肿大淋巴结。皮肤科情况：头面、躯干、四肢弥漫肿胀性红斑伴脱屑，累及98%体表面积；双手足指（趾）均可见水肿性红斑伴脱屑，有关节压痛，不伴关节肿胀、变形；双手足指（趾）甲均可见甲板增厚，部分远端分离。骶髂关节、双膝关节、足跟和足底疼痛。母亲有银屑病史。实验室检查：血常规白细胞9.98 × 10 9/L，血小板602 × 10 9/L，中性粒细胞6.84 × 10 9/L，单核细胞0.85 × 10 9/L；尿常规示尿潜血++，尿白蛋白±，尿白细胞酯酶+++；红细胞沉降率59 mm/1 h，C反应蛋白17.2 mg/L，血人类白细胞抗原B27测定阴性。骶髂关节CT平扫示双侧骶髂关节面密度增高、毛糙，关节面下可见多发锯齿样骨质破坏，双侧骶髂关节间隙变窄。血电解质、血脂、梅毒甲苯胺红不加热血清试验、梅毒抗体、梅毒螺旋体明胶凝集实验、HIV抗体、抗核抗体、抗dsDNA抗体、类风湿因子、丙型肝炎病毒抗原、抗体和乙型肝炎病毒表面抗原、e抗原、e抗体、核心抗体定量检测以及结核感染T细胞检测均无异常，乙型肝炎病毒表面抗体阳性，乙型肝炎病毒DNA低于检测下限（100 IU/ml）。胸CT检查：两肺间质纹理增多。诊断：红皮病型银屑病（erythrodermic psoriasis，EP）合并关节病型银屑病。治疗：于2020年6月26日给予依奇珠单抗皮下注射，第0周160 mg，之后第2、4、6周各80 mg。2周时红斑脱屑明显好转，银屑病皮损面积和严重程度指数（psoriasis area and severity index，PASI）评分改善达50%，关节疼痛明显减轻，但2周后皮疹复发，于第6周时恢复至治疗前的周身弥漫性红斑伴发热，关节疼痛较治疗前好转。于2020年8月5日更换为阿达木单抗皮下注射，第0周80 mg，第1周40 mg，之后每2周40 mg，随访至第16个月。阿达木单抗治疗第3周时，患者周身弥漫性红斑伴脱屑较前明显改善，皮肤肿胀消退，PASI评分改善达30%。第5周时，皮损较前进一步好转，仅遗留散在细碎鳞屑，出现正常色泽皮肤，达到PASI60。第12周时，原有弥漫性红斑脱屑基本消退，仅四肢及头皮可见少量点状红斑及鳞屑，达到PASI95，关节疼痛症状也基本消失。见图1。随访至2021年11月，患者未出现严重不良事件。

目的:探讨乙型肝炎病毒（HBV）DNA检测对乙型肝炎患者筛查的临床意义。方法:回顾性分析2017年1月至2021年12月在解放军总医院第五医学中心检测HBV DNA的682 331例乙型肝炎患者，其中男性481 159例，女性201 172例，年龄（41.34±16.13）岁。根据HBV DNA结果分为HBV DNA阳性组（219 879例）和HBV DNA阴性组（462 452例），收集其乙型肝炎5项及乙型肝炎表面抗原定量（HBsAg-QN）、肝功能、甲胎蛋白（AFP）和凝血酶原时间（PT）检测结果及基本临床资料，统计分析HBV DNA阴性和阳性与HBV患者的各年龄段、临床诊断以及临床特征的关系。结果:682 331例HBV DNA检测乙型肝炎患者中，HBV DNA阳性率为32.22%（219 879/682 331）。各年龄段中以18~44岁青年人HBV DNA阳性率最高（40.34%，128 038/317 380）。HBV DNA阳性组的<1、45~59和≥60岁患者比例低于HBV DNA阴性组，而1~17和18~44岁患者比例高于HBV DNA阴性组（ P均<0.001）。2 291例检测HBV DNA的<1岁婴儿中，有71例HBV DNA阳性，其2017—2021年的HBV DNA阳性率依次为4.86%（27/556）、3.68%（14/380）、3.47%（17/490）、1.55%（6/386）和1.46%（7/479），呈逐年下降趋势（ χ2=13.72， P=0.008）。其余680 040例HBV DNA检测的乙型肝炎患者的临床诊断疾病中，急性乙型肝炎患者的HBV DNA阳性率最高（49.88%，208/417）。HBV DNA阳性组急性乙型肝炎（0.09%，208/219 808）和慢性乙型肝炎（80.44%，176 806/219 808）患者比例高于HBV DNA阴性组［分别为0.05%（209/460 232）和65.45%（301 216/460 232）］，而HBV相关性肝硬化（11.28%，24 793/219 808）、HBV相关性肝癌（6.72%，14 775/219 808）、肝癌术后（1.39%，3 055/219 808）和肝移植术后（0.08%，171/219 808）患者比例低于HBV DNA阴性组［分别为22.99%（105 813/460 232）、7.25%（33 385/460 232）、3.50%（16 129/460 232）和0.76%（3 480/460 232）］（ P均<0.001）。同时，HBV DNA阳性组患者的HBsAg阳性率、HBsAg-QN、乙型肝炎e抗原（HBeAg）阳性率、总胆红素、丙氨酸转氨酶、AFP及PT均高于HBV DNA阴性组，而年龄、男性比例和白蛋白水平均低于HBV DNA阴性组（ P均 <0.01）。此外，HBsAg、HBsAb和HBeAg阳性患者HBV DNA载量高于阴性患者，而乙型肝炎e抗体和乙型肝炎核心抗体阳性患者HBV DNA载量低于阴性患者（ P均<0.001）。 结论:HBV DNA检测对乙型肝炎患者筛查具有重要临床意义。<1岁婴儿的母婴传播率呈逐年下降趋势；HBV DNA是乙型肝炎疾病进展的重要因素，其阳性患者的HBsAg-QN值更高且更易出现肝功能等血清学指标异常。

目的:探讨乙型肝炎核心抗体（抗-HBc）预测乙型肝炎表面抗原（HBsAg）清除的可能性。方法:60例既往经聚乙二醇干扰素α-2a联合核苷（酸）类似物（NAs）抗病毒治疗的慢性乙型肝炎患者，根据能否获得HBsAg清除，分为清除组41例，未清除组19例。通过双抗原夹心法检测基线和疗程中24、48、72周及96周患者的抗-HBc定量水平。采用Logistic回归分析和受试者操作特征曲线（ROC）评价相关影响因素对HBsAg清除的预测能力。结果:随着抗病毒治疗的延长，总体人群、清除组和未清除的抗-HBc定量水平均呈进行性下降趋势，但清除组的抗-HBc水平在基线和抗病毒治疗过程中的连续检测时间点均显著高于未清除组（ P值均< 0.05）。多因素Logistic回归示：基线抗-HBc定量水平、24周HBsAg下降幅度（单位：log 10 IU/ml）、治疗中丙氨酸转氨酶（ALT）> 1.5倍正常值上限（ULN）均为HBsAg清除的影响因素（分别为 OR = 0.156， P = 0.026； OR = 0.134， P = 0.023； OR = 0.239， P = 0.028）。其中，基线抗-HBc定量水平是预测HBsAg清除的最佳独立预测因子（ OR = 0.235； P = 0.004），当其> 3.40 log 10 IU/ml时预测HBsAg清除的敏感性和特异性分别为56.1%和89.5%。为提高预测准确性，借鉴Logistic回归模型构建联合预测因子的方法，其中联合因子3的预测价值最高（ROC曲线下面积可达0.870；95% CI为0.781～0.960； P < 0.001）；联合因子3的cut-off值为> 0.386，敏感性和特异性分别为80.5%和78.9%。运用联合指标可进一步提高预测价值，以基线抗-HBc定量水平为基础的任意两个指标或两个以上指标的联合，预测HBsAg清除率可达到94.12%～100%。 结论:基线抗-HBc定量水平的HBsA清除的预测价值最高，与治疗中ALT>1.5×ULN和24周HBsAg下降幅度联合能更精准的预测HBsAg清除，是可靠的非侵入性生物标志物。

目的 探讨转化生长因子-β2(transforming growth factor-β2,TGF-β2)在过敏原引起的哮喘气道炎症和重塑中的作用及其靶向干预的治疗潜能.方法 以呈现TGF-β2肽表位的乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)/TGF-β2病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)免疫6只雌性BALB/c小鼠,ELISA法检测小鼠血清中TGF-β2特异的IgG应答,细胞试验检测抗体对TGF-β2活性的中和能力.卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)短期刺激诱导急性气道过敏性炎症,细胞试验检测小鼠支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中TGF-β活性水平;ELISA法检测小鼠血清中OVA特异的IgE水平;光学显微镜下进行BALF中炎性细胞总数及分型计数,并用ELISA法检测BALF中细胞因子水平.经OVA慢性刺激诱导气道纤维化,肺组织切片Masson's trichrome检测胶原积累,并用Sircol胶原检测试剂盒进行可溶性胶原含量定量分析.结果 VLPs免疫诱导了TGF-β2特异性IgG应答,抗血清可有效中和TGF-β2活性.小鼠急性气道过敏性炎症模型中,VLPs免疫下调了气道活性TGF-β水平,显著促进了血清中OVA特异性IgE产生,对气道以嗜酸性粒细胞为主的炎性细胞浸润显示抑制作用,显著促进了Th2炎性细胞因子在气道中的积累.慢性肺纤维化模型中,VLPs免疫显著下调了肺组织胶原沉积及可溶性胶原水平.结论 HBcAg/TGF-β2 VLPs免疫是调控TGF-β2作用的有效手段,TGF-β2在过敏原诱导的炎症应答中总体显示抑制作用,但在纤维化中发挥促进作用.

目的 探讨经核苷(酸)类似物(NAs)治疗的慢性乙型肝炎(CHB)患者,接受序贯IFN α-2b治疗的效果,为NAs经治且应答不佳的CHB患者抗病毒治疗提供参考.方法 经NAs治疗的46例CHB患者中,NAs耐药者31例(N1组),NAs部分病毒学应答者15例(N2组),均接受序贯IFN α-2b重叠NAs治疗12～24周后停用NAs,仅予序贯IFN α-2b治疗.收集2组患者乙肝五项[乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(HBsAb)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝e抗体(HBeAb)、乙肝核心抗体(HBcAb)]、乙肝DNA定量(HBV-DNA)等相关指标,并于治疗第12、24和48周(T1、T2和T3)时进行比较.结果 N1组因严重失眠脱落1例.N1组和N2组患者HBV-DNA定量在T1、T2和T3治疗时间节点均明显低于其基线值(P＜0.05),但2组治疗时间节点间HBV-DNA定量比较差异无统计学意义(P＞0.05).N1组和N2组各治疗时间节点病毒学应答率(T1:53.3％和40.0％;T2:60.0％和47.0％;T3:50.0％和 53.0％),HBsAg 阴转率(T1:6.6％和 0.0％;T2:10.0％和 0.0％;T3:13.3％和 0.0％),HBeAg阴转率(T1:17.4％和 0.0％;T2:26.0％和 0.0％;T3:26.0％和 36.4％)和 HBeAg 血清学转换率(T1:0.0％和 0.0％;T2:4.3％和0.0％;T3:4.3％和18.2％)比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).治疗期间均未出现严重不良反应,停用NAs后未出现肝衰竭等不良事件.结论 NAs部分病毒学应答及NAs耐药CHB患者,IFNα-2b序贯治疗后均可取得较好的效果,安全性均良好.此类患者治疗期间可实现NAs的停用,且可作为临床优化抗病毒治疗的方案之一.