获得正常形态结构和功能的牙髓、牙本质和牙周再生一直是牙再生领域的研究热点。目前，以牙髓干细胞为种子细胞的组织工程与再生技术已初步实现类牙组织再生。如何提高再生的有效性和稳定性成为亟待解决的问题。单细胞转录组测序和类器官培养技术的发展，为进一步实现精准、靶向和可控的功能性牙再生提供了可能。本文综述牙髓干细胞在牙再生中的研究进展，归纳牙髓干细胞基本特性并浅析研究热点，为实现稳定高效的牙再生提供新的研究方向和转化应用思路。

牙源性干细胞具有间充质干细胞特性,通过与内皮细胞相互作用或分泌多种血管生成相关细胞因子促进血管再生.目前已分离并鉴定出的牙源性干细胞主要包括牙髓干细胞、脱落乳牙干细胞、牙周膜干细胞、根尖牙乳头干细胞、牙龈间充质干细胞和牙囊干细胞.本文通过整理分析近年文献资料,对上述牙源性干细胞促血管生成与组织再生的相关研究进展进行综述.

牙髓干细胞（dental pulp stem cells，DPSCs）是一种来源于牙齿牙髓组织的多能干细胞，具有自我更新和多向分化的能力。近年来，越来越多的研究表明，DPSCs在再生医学中具有广泛的应用潜力。科学性主要体现在以下几个方面：（1）分化潜能高：DPSCs能够分化为多种细胞类型，包括成骨细胞、神经细胞、脂肪细胞和软骨细胞等，这就决定了它的应用面更广，适应多种治疗需求，为组织修复和再生提供细胞基础。（2）再生能力强：DPSCs属于间充质干细胞，是人体各器官的种子细胞，可以不断分化进而再生我们的组织器官，成为再生医学领域不可或缺的重要资源。这使得DPSCs在器官修复和再生领域，如骨组织工程、神经再生和软骨修复等领域具有广阔的应用前景。（3）低免疫原性：DPSCs的免疫原性极低，为干细胞中的O型血，可供异体使用并不易出现排斥反应。选择使用与自己血缘关系近的DPSCs可以获得更好的治疗效果。（4）获取方便：DPSCs获取方式较为简便，在小朋友脱落乳牙时，年轻人拔智齿和正畸拔牙时也可以获取。DPSCs来源于神经嵴外胚层，能够分泌多种神经相关的活性物质，如生长因子、细胞因子和外泌体，这些物质可以促进神经细胞增殖、抗凋亡、增强细胞活力和修复神经损伤。因此DPSCs在老年性神经疾病治疗，如阿尔茨海默病的治疗中可以发挥重要的作用，本视频将针对这一主题进行详细深入讲解。

目的:探讨关节腔内注射脱落乳牙牙髓干细胞外泌体(SHED-EXO)对大鼠颞下颌关节骨关节炎(TMJ OA)软骨下骨稳态的影响.方法:36只雄性SD大鼠随机分为3组(n=12):对照组(CON组)、碘乙酸钠(MIA)诱导TMJ OA组(MIA组)和SHED-EXO治疗TMJ OA组(治疗组).治疗2、6周后取材,Micro-CT、荧光双标、TRAP染色、免疫组化染色和免疫荧光染色检测成骨与破骨情况,qRT-PCR检测ADAMTs5,IL-1β,OCN,OPG/RANKL等相关因子表达变化.结果:MIA组骨量丧失明显,骨髓腔明显扩大,相较于CON组,BV/TV和Tb.Th降低(P＜0.001),BS/BV、Tb.Sp和Tb.N升高(P＜0.01),且5 d内骨生成速率低于对照组(P＜0.001);SHED-EXO组与MIA组相比,骨形态与骨量显著增加,BV/TV和Tb.Th升高(P＜0.01),BS/BV、Tb.Sp和Tb.N降低(P＜0.05),骨生成速率增加(P＜0.01).2、6周后,MIA组较对照组与治疗组,下骨内破骨细胞数量均升高(P＜0.01),而H型血管与OCN阳性面积减少(P＜0.01).结论:关节腔注射SHED-EXO 可以通过促进成骨和抑制破骨调节TMJ OA大鼠髁突软骨下骨稳态.

目的:探讨人牙源性干细胞（DSC）的数据独立采集（DIA）蛋白质组学的建立方法。方法:2021年8月至2022年9月于苏州口腔医院收集牙齿，培养来自不同个体的牙髓干细胞（DPSC）、牙龈间充质干细胞（GMSC）、牙周膜干细胞（PDLSC）、根尖乳头干细胞（SCAP）和人脱落乳牙来源的干细胞（SHED），每种细胞各3个样本，共计15个样本进行DIA蛋白组学测序。通过唯一肽段分布和蛋白质覆盖分布、蛋白质质量分布评估蛋白质鉴定结果，通过组内变异系数（CV）、主成分分析及样本定量相关性等方面来评估DIA数据的质量。结果:从细胞中提取的蛋白质样本合格，总样本中共鉴定出8 662个蛋白质。蛋白质鉴定的基本统计表明所鉴定的蛋白质是可靠的。差异蛋白分析显示，DSPC组与其他各组（GMSC、PDLSC、SCAP和SHED）比较，上调和下调的蛋白分别为125、168、100、102和106、107、94、107个。差异蛋白的热图显示，同DPSC比较，GMSC、PDLSC、SCAP和SHED均有不同高表达的蛋白图谱。京都基因和基因组百科全书数据库（KEGG）分析表明不同DSC的蛋白质富集在不同的信号通路。结论:本研究成功建立了不同DSC的DIA蛋白质组学分析方法，为后续研究奠定了基础。

脱落乳牙牙髓干细胞(SHED)因增殖能力强、致癌风险低,具有较高的细胞分化能力和免疫抑制能力,成为组织工程和再生医学的主要关注领域.近年来,有关SHED在肝脏疾病中的疗效与安全性方面研究逐渐增多,本文集中对SHED在肝脏疾病中的应用与研究进展作一综述,以期为后续进一步临床推广提供参考.

迄今为止,已有多种牙源性间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)从具有外胚间充质来源的牙齿和牙周组织中分离出来,主要包括牙髓干细胞(dental pulp stem cells, DPSCs)、脱落乳牙干细胞(stem cells from human exfoliated deciduous teeth,SHED)、牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)、根尖乳头干细胞(stem cells from apical papilla,SCAP)、牙囊干细胞(dental follicle stem cells,DFSC)、唾液腺干细胞(salivary gland stem cells,SGSCs)等.

背景:microRNA-26b(miR-26b)对干细胞的多种功能具有重要的调节作用,但其对人脱落乳牙牙髓干细胞和人脐带间充质干细胞生物学特性的影响尚不清楚.目的:探讨miR-26b对人脱落乳牙牙髓干细胞和人脐带间充质干细胞增殖、迁移和成骨分化的影响.方法:培养及鉴定人脱落乳牙牙髓干细胞和人脐带间充质干细胞;用miR-26 mimics(实验组)和miRNAs mimics对照(对照组)转染2种细胞,构建过表达模型用于后续实验.CCK-8法检测过表达miR-26b细胞的增殖能力;Transwell和划痕实验分析过表达miR-26b细胞的迁移能力;RT-qPCR法检测过表达miR-26b细胞成骨诱导后成骨标志物的表达.结果与结论:①转染miR-26b模拟物可提高2种细胞中miR-26b表达量,促进人脱落乳牙牙髓干细胞增殖,对人脐带间充质干细胞的扩增无明显影响;②相较于对照组,2种细胞过表达miR-26b后迁移能力增强;③miR-26b在2种细胞成骨分化过程中表达水平降低;④相较于对照组,2种细胞过表达miR-26b后,成骨相关基因骨钙素、骨桥素、碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原蛋白mRNA水平均下调.结果表明,过表达miR-26b能促进人脱落乳牙牙髓干细胞增殖、迁移,抑制其成骨分化;也促进人脐带间充质干细胞迁移,抑制其成骨分化,但对其增殖无明显影响.

背景:牙源干细胞在再生医学与组织工程等领域的研究不断深入,为牙相关组织修复及全身疾病治疗带来了希望.但目前对不同年龄区间牙源干细胞生物学特性上的差异缺少系统的分析.目的:探讨脐血源血小板裂解液培养人乳牙、恒牙牙髓干细胞的生物学特性,为人血小板裂解液代替胎牛血清提供可靠依据.方法:取出乳牙、少年恒牙及成年恒牙牙髓组织,在含体积分数为10%胎牛血清或5%,10%,15%人血小板裂解液的DMEM/F-12培养基中培养,采用细胞计数法检测4组细胞增殖情况,选取最佳人血小板裂解液浓度进行后续实验.在最佳人血小板裂解液浓度条件下,体外培养乳牙、少年恒牙及成年恒牙牙髓干细胞,显微镜下观察细胞生长状态,流式细胞术检测细胞表面特异性抗原,细胞计数法和CCK-8法检测细胞增殖能力,三系分化实验观察细胞体外分化能力.结果与结论:①10%人血小板裂解液组的细胞增殖速率最高;②各组牙髓组织块周围均有梭形成纤维状细胞生长并扩增,乳牙与少年恒牙细胞形态无明显差异;与同代次乳牙和少年恒牙细胞相比,成年恒牙细胞体积偏大;③流式细胞术检测结果显示乳牙、少年恒牙及成年恒牙牙髓干细胞均符合间充质来源干细胞的表型特征;④成年恒牙牙髓干细胞增殖能力明显低于乳牙及少年恒牙牙髓干细胞(P<0.01);⑤成年恒牙牙髓干细胞中成骨相关基因碱性磷酸酶、骨形态发生蛋白2 mRNA表达,成脂相关基因脂蛋白脂肪酶、过氧化物酶体增殖物激活受体γ2 mRNA表达,成软骨相关基因Ⅱ型胶原α1、软骨寡聚基质蛋白mRNA表达均显著低于乳牙及少年恒牙牙髓干细胞(P<0.01);⑥结果表明,人乳牙与少年恒牙牙髓干细胞相较于成年恒牙牙髓干细胞具有更强的增殖能力与多向分化潜能,更适用于临床研究和疾病治疗.

背景:间充质干细胞来源于多种组织,如骨髓、牙髓、胎盘、脐带和脂肪等,其中乳牙牙髓间充质干细胞具有强大的干性和生物学活性,无排异反应,免疫调节能力强,是非常优秀的生物治疗细胞来源之一.由于乳牙牙髓间充质干细胞取材方便,适宜于大规模培养,因此为牙髓干细胞的产业化奠定了良好基础.目的:观察乳牙牙根吸收情况对牙髓干细胞提取结果的影响,为进一步判断乳牙源齿的拔除时机提供有效的依据.方法:采集173例小学生173颗源齿,年龄7-9岁.在采集前对源齿进行根尖X射线片或曲面体层片检查,检查标准以及方法均遵照世界卫生组织专业检查标准.按牙根吸收情况将乳牙分为牙根吸收1/3、牙根吸收1/2、牙根吸收2/3、牙根完全吸收(髓室底完整)、自然脱落的乳牙5种情况,采集的源齿在拔牙离体后7 s内放入培养液中,于2-4 ℃的冰箱中保存,24 h内由专业的冷链物流送至北京口腔干细胞库进行乳牙牙髓干细胞的提取和保存,对检测结果进行统计分析.结果与结论:①牙根吸收1/3的源齿32颗,牙髓干细胞提取成功30颗,成功率94%,继承恒牙异位萌出12颗,平均萌出时间(2.19±0.18)个月;②牙根吸收1/2的源齿35颗,牙髓干细胞提取成功32颗,成功率92%,继承恒牙异位萌出11颗,平均萌出时间(1.89±0.13)个月;③牙根吸收2/3的源齿59颗,牙髓干细胞提取成功54颗,成功率92%,继承恒牙异位萌出8颗,平均萌出时间(1.42±0.12)个月;④牙根完全吸收但髓室底完整的源齿37颗,牙髓干细胞提取成功34颗,成功率92%,继承恒牙异位萌出2颗,平均萌出时间(1.03±0.15)个月;⑤自然脱落的乳牙10颗,牙髓干细胞提取成功0颗,继承恒牙异位萌出4颗,平均萌出时间(0.65±0.23)个月;⑥结果表明,自然脱落的乳牙为无牙髓的牙齿,无干细胞;乳牙在Ⅱ度松动以内,牙根吸收2/3以上或牙根完全吸收但髓室底完整存在的情况下,提取成功率高,且对恒牙的萌出无太大影响,为最佳的乳牙源齿采集时机.