目的:监测2018年中国院内革兰阴性杆菌对常用抗菌药物的敏感性。方法:前瞻性收集2018年1至12月全国13家教学医院革兰阴性杆菌。采用琼脂稀释法及微量肉汤稀释法测定美罗培南等抗菌药物的最低抑菌浓度（MICs）。采用美国临床和实验室标准协会（CLSI）2019年M100S（第29版）标准进行药敏结果判断。数据分析采用WHONET-5.6软件。结果:共收集1 214株非重复革兰阴性杆菌，血和无菌体液标本来源占96.7%（1 174/1 214）。主要抗菌药物对871株肠杆菌科细菌的敏感率依次为阿米卡星（93.2%，812/871）、美罗培南（92.0%，801/871）、厄他培南（88.9%，774/871）、亚胺培南（88.4%，770/871）、哌拉西林/他唑巴坦（84.0%，732/871）、头孢哌酮/舒巴坦（83.1%，724/871）、头孢吡肟（71.4%，622/871）、米诺环素（68.9%，600/871）、头孢他啶（66.9%，583/871）及左氧氟沙星（54.4%，474/871）。大肠埃希菌对三代头孢菌素的耐药率分别为61.5%（155/252）（头孢曲松）和60.7%（153/252）（头孢噻肟）。肺炎克雷伯菌对三代头孢菌素的耐药率分别为56.3%（125/222）（头孢曲松）和57.7%（128/222）（头孢噻肟）。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β内酰胺酶（ESBLs）检测阳性率分别为50.4%（127/252）和18.0%（40/222），且全部ESBLs阳性菌株对亚胺培南和美罗培南的敏感率均>95%。碳青霉烯耐药的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的发生率分别为2.8%（7/252）和20.3%（45/222）。对阴沟肠杆菌、产气克雷伯菌和弗劳地柠檬酸杆菌，抗菌活性最高的药物依次为替加环素（96.3%~100%）、阿米卡星（94.9%~97.1%）、美罗培南（89.8%~96.6%）及亚胺培南（89.8%~94.9%）。奇异变形杆菌、摩根摩根菌和黏质沙雷菌对美罗培南、阿米卡星的敏感率均大于90%。对67株碳青霉烯耐药的肠杆菌科细菌（CRE）进行改良碳青霉烯灭活试验（mCIM）显示，45株为丝氨酸型碳青霉烯酶，20株为金属酶。铜绿假单胞菌对美罗培南和亚胺培南的敏感率分别为73.2%（112/153）和66.0%（101/153）。鲍曼不动杆菌对黏菌素的敏感率最高（100%，163/163），其次是替加环素（87.1%，142/163）。血标本与其他感染来源的标本相比较，肺炎克雷伯菌[17.6%（27/153）比21.7%（15/69）]和鲍曼不动杆菌[68.3%（71/104）比71.2%（42/59）]碳青霉烯耐药比例低，而大肠埃希菌[2.5%（4/198）比0%（0/54）]和铜绿假单胞菌[37.0%（33/89）比18.8%（12/64）]碳青霉烯耐药比例高。结论:碳青霉烯类对肠杆菌科细菌仍保持较高的抗菌活性，尤其是仅产ESBLs的菌株。碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌应引起足够重视。产碳青霉烯酶是当前我国碳青霉烯耐药肠杆菌科细菌最重要的耐药机制。

目的:探讨儿童肝移植术后耐碳青霉烯类肠杆菌科（CRE）感染的临床特征、治疗方法以及CRE直肠定植筛查的意义。方法:对2017年8月1日至2018年8月1日在天津市第一中心医院行肝移植术的286例患儿进行回顾性调查，分析术后出现CRE感染患儿的临床特点、CRE药敏分析、治疗方法以及预后。所有患儿在肝移植术后均留取直肠拭子标本调查是否存在CRE定植从而分为CRE定植组和无CRE定植组，分析CRE定植与CRE感染的关系以及CRE定植的危险因素，组间比较应用χ 2检验，对危险因素进行单因素分析。 结果:286例行肝移植术患儿中男132例、女154例，年龄（8±4）月龄，术后CRE感染率为7.3%（21/286），感染时间为术后第5（1~14）天。腹腔是肝移植术后CRE感染的最好发部位，占95.2%（20/21），其次是血流感染12例，肺部感染8例，两个及以上部位感染占71.4%（15/21）。共分离出27株CRE菌株，其中耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌24株（88.9%），耐碳青霉烯大肠埃希菌2株（7.4%），耐碳青霉烯产气肠杆菌1株（3.7%）。27株CRE菌株对碳青霉烯类、青霉素类、二代及三代头孢菌素等抗菌药物耐药率均为100.0%。CRE定植组与无CRE定植组CRE感染率差异有统计学意义[26.4%（19/72）比0.9%（2/214），χ 2=51.300， P<0.01]。CRE定植的高危因素为术前三代头孢菌素或碳青霉烯类抗菌药物暴露、术前3个月内住院时间、术前CRE感染、术后非计划手术、术后机械通气时间>24 h（χ 2=20.570、6.410、13.960、14.600、9.560， P均<0.01）。治疗方案主要有美罗培南+磷霉素（13例），美罗培南+替加环素（8例），治疗有效者共计16例，治疗时间为19（1~27）d。CRE感染组术后1年的存活率为71.4%（15/21），而无CRE感染组为98.1%（260/265），差异有统计学意义（χ 2=37.460， P<0.01）。 结论:儿童肝移植术后CRE感染预后不良，需密切注意患儿有无CRE肠道定植及其相关危险因素，及时诊断并治疗，进行CRE肠道定植筛查对CRE感染的早期预警和防控具有重要意义。

目的:探讨结直肠癌腹腔镜术后感染患者的病原菌特征情况，分析感染对患者辅助性T细胞(T helper，Th)1、Th2类炎症因子、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1)以及可溶性髓样细胞触发受体-1(soluble triggering receptor expresses on myeloid cells ，sTREM-1)表达的影响。方法:纳入2017年9月至2020年9月期间沐阳县中医院收治的126例行腹腔镜手术治疗的结直肠癌患者作为研究对象。根据术后患者是否感染分为感染组(49例)和非感染组(77例)。观察感染患者病原菌分布特征情况，采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent adsorption test ，ELISA)检测并分析两组患者Th1、Th2类炎性因子及MCP-1和sTREM-1表达水平。结果:126例结直肠癌腹腔镜手术患者中有49例患者出现术后感染。其中浅部切口感染38例，占77.55%；其次为深部切口感染10例，占20.41%；器官感染1例，占比最低为2.04%。术后感染患者共分离出63株病原菌，其中革兰阳性菌12株，包括表皮葡萄球菌(7.94%)、金黄色葡萄球菌(4.76%)、屎肠球菌(3.17%)以及粪肠杆菌(3.17%)，共占19.05%；革兰阴性菌51株，包括大肠埃希菌(53.97%)、铜绿假单胞菌(11.76%)、肺炎克雷伯菌(7.84%)、产气肠杆菌(5.88%)、奇异变形菌(5.88%)以及鲍氏不动杆菌(1.96%)，共占80.95%，革兰阴性菌比例明显高于革兰阳性菌( χ2＝76.63， P<0.05)；所有病原菌中以大肠埃希菌感染为主，明显高于其他病原菌，差异有统计学意义( χ2＝153.81， P<0.05)。感染组患者白细胞介素(interleukin，IL)-2、γ-干扰素(interferon-γ，IFN-γ)表达水平低于非感染组[(1.39±0.26)μg/L比(1.64±0.28μg/L，(14.32±2.84)μg/L比(21.56±2.92)μg/L， t值分别为5.02和13.71， P值均<0.05]，差异均有统计学意义；肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、IL-6、IL-10、IL-13、MCP-1以及sTREM-1表达水平明显高于非感染组[(2.84±0.36)μg/L比(2.12±0.25)μg/L，(18.92±2.87) μg/L比(10.68±2.15)μg/L ，(34.76±3.38) μg/L比(21.43±2.82)μg/L ，(24.52±3.06) μg/L比(13.67±2.24)μg/L，(252.46±23.52) μg/L比(149.71±16.16)μg/L ，(，64.18±12.54) μg/L比(34.62±8.16)μg/L， t值分别为13.24，18.38，23.92，21.57，29.07，16.04， P值均<0.05 ]，差异均有统计学意义。 结论:革兰阴性菌是结直肠癌腹腔镜手术后感染的主要致病菌，其中以大肠埃希菌为主。术后感染患者Th1、Th2类炎症因子以及MCP-1、sTREM-1表达水平对结直肠癌腹腔镜手术后感染的诊断具有重要意义。

目的:确定临床分离菌株产气克雷伯菌整合子、质粒介导的喹诺酮耐药(PMQR)基因的分布，并分析整合子与临床常用抗菌药物耐药性的关系。方法:收集2015年11月至2021年3月上海市奉贤区中心医院分离自临床样本中的产气克雷伯菌91株，PCR筛查第1、2类整合酶基因( intI1、 intI2)，分析启动子类型和可变区基因盒组成结构。同时对分离株PMQR基因进行检测，并分析整合子与临床常用抗感染治疗药物间的关系。 结果:91株产气克雷伯菌对氨曲南耐药率>40.00%，对其余常用抗菌药物耐药率均<35.00%。91株产气克雷伯菌中30株检出 intI1，未检出 intI2。第1类整合子检出7种可变区基因盒组合，在产气克雷伯菌中检出基因盒组合 aac(6′)-11 C- ΔereA2- IS1247- aac3- arr- ΔereA2。第1类整合子可变区启动子以活性较弱的PcH1启动子为主。 intI1阳性菌株与 intI1阴性菌株在ICU、神经外科和临床其他科室的检出率差异有统计学意义( P<0.05)。 intI1阳性菌株对部分临床常用抗菌药物耐药率明显高于 intI1阴性菌株( P<0.05)。 qnrS为PMQR基因的主要基因型。除2016年外，其余年份分离的产气克雷伯菌中整合子和PMQR基因的检出率均较低。 结论:产气克雷伯菌耐药性的产生与整合子密切相关，产气克雷伯菌中整合子在不同临床科室的分布具有一定的差异性，ICU和神经外科应持续加强细菌耐药的监测。 qnrS是本地区产气克雷伯菌对喹诺酮类药物产生耐药的主要原因。

目的:分析菌群移植（FMT）治疗脑出血继发急性肠假性梗阻（AIPO）患者的临床效果。方法:分析南方医科大学南方医院收治的1例脑干出血继发AIPO患者的临床资料，比较粪菌制剂供者与患者主要菌群组成，以及患者FMT治疗前和治疗后第25天菌群的变化情况。结果:该患者主要表现为严重腹胀、肠管扩张及腹腔高压，常规保守治疗1周仍无法缓解，并逐渐加重至影响呼吸功能，粪便菌群分析提示肠道菌群失调，遂尝试FMT挽救性治疗。经FMT治疗，患者消化道症状缓解明显；FMT后25 d随访，该患者未再次出现消化道症状；复查粪便菌群分析提示定植于肠道的菌群以益生菌阿克曼菌、双歧杆菌为主，潜在的促炎及产气菌明显减少，菌群多样性增加。患者在FMT治疗后的25 d部分菌群组成趋向于与供者一致；在门水平上，拟杆菌门、疣微菌门、厚壁菌门和放线菌门细菌大幅增加，变形菌门比例大幅下降；在纲水平上，疣微菌纲、拟杆菌纲、放线菌纲、红蝽菌纲和梭状芽孢杆菌均明显增加，丙型变形菌纲明显减少；在目水平上，拟杆菌目、疣微菌目、梭菌目、红蝽菌目增加，β-变形菌目和肠杆菌目减少；在科水平上，双歧杆菌科、阿克曼菌科、瘤胃菌科增加，肠杆菌科减少；在属水平上，阿克曼菌、双歧杆菌增加，埃希-志贺菌和克雷伯菌水平减少。1年后随访，该患者已生活自理，格拉斯哥预后评分（GOS）5分。结论:FMT治疗对脑出血继发AIPO患者可能有较好疗效，其可能是通过调节患者的肠道菌群，重建适宜的肠道屏障，从而维持肠道微生态的稳定。

目的:分析产气克雷伯菌引起新生儿感染的临床分布特征及质谱同源性，为防控新生儿感染提供依据。方法:回顾性收集2021年4月至2023年4月苏州市立医院新生儿科收集的58株非重复的产气克雷伯菌分离物。利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry，MALDI-TOF MS)技术进行蛋白水平的同源性分析建库。使用MALDI Biotyper 3.1生成主成分分析(principal component analysis，PCA)和主谱图(main spectrum profile，MSP)树状图，以获得蛋白水平的同源性。结果:51例感染患儿中以重症监护室、早产患儿及低体重感染患儿为主，分别占84.31%(43/51)、86.27%(44/51)和84.31%(43/51)。重症监护室内早产患儿气管插管患儿42例，占97.67%，低出生体重患儿气管插管患儿32例，占74.44%。51例产气克雷伯菌感染患儿绝大多数住院时间较长，住院时长> 60 d的占25.49%。58株产气克雷伯菌临床标本主要从血、导管头、痰液、胃液、眼分泌物和尿液中分离出。6例患儿在不同样本类型中同时检出产气克雷伯菌。MSP聚类分析显示，58株产气克雷伯菌分为3个群，其中KA群14株，KB群6株，KC 38株。KC群主要与重症监护室有关，多伴有气管插管和血流感染。KB群主要与早产低体重患儿相关，而KA群主要与普通病房患儿相关。结论:产气克雷伯菌具有高侵袭力，MALDI-TOF MS质谱快速同源性分析对产气克雷伯菌感染快速筛查具有一定的临床意义。

噬菌体疗法是治疗多重耐药菌感染的重要手段之一。这类噬菌体通常从医院污水中分离得到，然而迄今为止对医院污水中噬菌体的分布情况尚无系统研究。本研究旨在以临床分离的常见病原菌为宿主，分离其对应的噬菌体，以此评估医院污水中噬菌体的生态分布情况，并为临床耐药菌噬菌体的分离和应用提供参考。本研究采用横断面研究设计，选择2023年5—6月山东大学齐鲁医院临床微生物实验室分离得到的125株病原菌（分属于16个不同的菌种）作为目标菌株，利用双层平板夹心法从医院污水中分离纯化这些菌株对应的噬菌体。同时，借助宏基因组二代测序技术（mNGS）分析同批次污水中病原菌的分布情况，初步探究污水中病原菌与噬菌体之间的丰度对应关系。结果显示，以125株临床病原菌为宿主，共分离获得56株噬菌体，分别对应鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌等6种病原菌。这6种病原菌均包含了不同耐药程度的菌株，其中鲍曼不动杆菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌中多重耐药菌株占比较高。这6种病原菌的噬菌体获得率由高到低依次为：大肠埃希菌（80%）、嗜麦芽窄食单胞菌（75%）、铜绿假单胞菌（70%）、肺炎克雷伯菌（66.67%）、鲍曼不动杆菌（36.36%）和金黄色葡萄球菌（12.5%）。初步的mNGS测序结果显示，在该批次污水中，丰度较高的病原菌分别为屎肠球菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、粪肠球菌、鲍曼不动杆菌、产气克雷伯菌、密歇根克雷伯菌和铜绿假单胞菌。综上，医院污水中可分离到大多数临床常见革兰阴性病原菌的噬菌体，且分离率较高；然而革兰阳性病原菌的噬菌体分离率较低，在本研究中仅分离到与金黄色葡萄球菌对应的噬菌体。对应的mNGS测序结果表明革兰阴性病原菌在污水中的分布与噬菌体的生态分布可能具有一定的正相关关系。

目的 分析老年病房耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)的感染变迁及耐药情况,为临床预防和治疗老年CRE感染提供参考依据.方法 收集2017年1月-2022年10月解放军总医院第二医学中心60～106岁老年患者送检标本中分离的肠杆菌科细菌,进行菌株鉴定和体外药敏试验,分析CRE的检出情况、变化趋势、标本来源、菌株构成、科室分布以及耐药性特点.结果 肠杆菌科细菌中共检出CRE 677株(32.27％),2017-2021年间医院CRE检出率整体呈现上升趋势;CRE菌株类型以肺炎克雷伯菌为主(占比75.48％),其次是大肠埃希菌(占比11.37％)和产气肠杆菌(占比7.98％),其中肺炎克雷伯菌CRE检出率最高,但无明显线性变化趋势,而后两者CRE检出率逐年上升且趋势明显;CRE菌株主要来源于呼吸道标本(61.30％);科室分布以呼吸科监护室检出率最高(45.87％);体外药物敏感性试验结果显示,CRE大多呈多耐药表型,三种主要耐药菌对青霉素类、头孢菌素类、β-内酰胺/β-内酰胺酶抑制剂复合物等多种药物耐药率＞75％,替加环素、阿米卡星、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶则保持相对较好的敏感性,但三种菌耐药特点各有不同.结论 老年患者CRE检出率高,科室分布范围广,且对多数临床常用抗菌药物严重耐药,医院应加强老年CRE患者的早期识别和主动筛查、督促临床合理使用抗菌药物、强化CRE感染患者的接触预防、隔离及环境清洁等措施,减少CRE在老年病房的克隆传播和流行.

目的 为了解不同来源的人类条件病原体的特征和耐药机制,预防环境病原体和医院病原体交叉感染,对桑树中分离的克雷伯菌进行耐药性、毒力基因、分子分型特点的探究.方法 从广东和广西两地采集桑树和桑树根际土壤样本,其中共分离得到12株克雷伯菌,对其采用纸片扩散法(K-B法)检测菌株耐药性表征;采用PCR技术对6类9个抗生素相关耐药基因和毒力基因进行检测;采用多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)技术进行遗传分析.结果 12株桑源克雷伯菌检测到blaSHV、tet(D)、tet(A)和aadA1 4种耐药基因,其中携带氨基糖苷类相关基因aadA1的有5株(41.67％);12株桑源克雷伯菌均对氨基糖苷类抗生素红霉素和链霉素表现出耐药,对6种以上抗生素耐药的菌株有6株(50％),对7种抗生素耐药的菌株有2株(16.67％);8株(66.67％)携带脂多糖相关的wabG毒力基因;MLST分析显示12株桑源克雷伯菌划分为3大类,包括产酸克雷伯菌复合体(Klebsiella oxytoca species complex,KoSC)、肺炎克雷伯菌复合体(K.pneumoniae species complex,KpSC)以及产气克雷伯菌(K.aerogenes);可分成7个序列型(sequence typing,ST),ST260为优势序列型,有5株(41.67％).结论 12株桑源克雷伯菌对氨基糖苷类抗生素耐药情况严峻,氨基糖苷类aadA1耐药基因检出率最高;ST260是主要的序列型,菌株之间存在遗传多样性,为环境中桑树来源的克雷伯菌病原体致病机制提供理论依据.

目的 探讨氨基酸配方(AAF)替代喂养对重度牛奶蛋白过敏(CMPA)婴儿肠道菌群特征的影响.方法 纳入23例确诊为重度CMPA且人工喂养的≤3月龄婴儿,采用同一品牌AAF进行喂养干预.干预前及干预3个月后,收集所有婴儿的粪便样本,通过16S rRNA高通量测序及生物信息学分析评估肠道菌群的特征变化.结果 干预前后,重度CMPA婴儿肠道菌群Chao1指数、Shannon指数、observed species指数、Simpson指数差异具有统计学意义(P<0.05),Beta多样性具有差异,且组间差异大于组内差异.门水平的相对丰度分析及LEfSe分析结果均显示,AAF干预后重度CMPA婴儿肠道中厚壁菌门、拟杆菌门显著富集.属水平的相对丰度分析结果显示,AAF干预后重度CMPA婴儿肠道中拟杆菌属、粪杆菌属、双歧杆菌属的相对丰度较干预前明显升高,弓形菌属、克雷伯菌属、梭菌属的相对丰度较干预前降低,LEfSe分析结果显示拟杆菌属、粪杆菌属、弓形菌属、克雷伯菌属为在丰度上有显著差异的标志物种.在种水平上相对丰度排名前10的菌群中,产气荚膜梭菌、产酸拟杆菌、丁酸梭菌、格氏乳杆菌、罗伊氏乳杆菌的相对丰度显著升高.结论 AAF替代喂养可使得重度CMPA患儿肠道菌群多样性增加,拟杆菌、厚壁菌等的丰度增加.