目的:建立超高效液相色谱法同时测定小儿肝炎颗粒中7种环烯醚萜苷类和4种黄酮类成分的含量测定方法。方法:采用Agilent Ecilipse C18(2.1 mm×100 mm，1.6 μm)色谱柱，柱温30 ℃，流动相为乙腈-0.05%磷酸水溶液，梯度洗脱，流速0.3 ml/min，检测波长240、278 nm。结果:獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷、山栀苷甲酯、羟异栀子苷、京尼平龙胆二糖苷、栀子苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素线性范围分别为19.16～306.56 μg( r＝0.999 4)、3.34～53.28 μg( r＝0.999 1)、5.30～84.64 μg ( r＝0.999 5)、0.80～12.80 μg( r＝0.999 4)、0.46～7.20 μg( r＝0.999 2)、2.78～44.48 μg( r＝0.999 6)、6.02～96.16 μg( r＝0.999 9)、33.22～531.36 μg( r＝0.999 9)、3.92～62.72 μg( r＝0.999 2)、2.38～37.92 μg( r＝0.999 7)、1.32～20.96 μg( r＝0.999 9)；平均加样回收率( n＝9)均在94.62%～107.53%之间， RSD均小于3.0%。 结论:经方法学验证，该法可同时测定小儿肝炎颗粒中11种成分含量，可为其质量控制提供参考。

目的:比较不同产地车前子盐炙前后6种有效成分含量的变化。方法:采用HPLC法对车前子生品和盐炙车前子中的京尼平苷酸、车前素、槲皮素、山柰酚、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷6种成分进行定量分析。结果:京尼平苷酸、车前素、槲皮素、山柰酚、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷6种成分能够良好分离；线性范围分别为0.259 2~ 3.628 8 μg ( r＝0.999 8)、0.054 3~ 0.760 5 μg ( r＝0.999 6)、0.030 0~ 0.420 6 μg ( r＝0.999 4)、0.055 6~ 0.777 8 μg ( r＝0.999 5)、0.287 0~ 4.018 0 μg ( r＝0.999 8)、0.033 1~ 0.463 1 μg ( r＝0.999 7)；平均加样回收率分别为98.68%、98.46%、98.87%、98.99%、98.34%、98.75%( n＝6)。5个产地的8批车前子生品中6种有效成分含量均有一定差异。车前子经盐炙后，车前素含量变化不大；盐炙车前子的黄酮类成分、京尼平苷酸和异毛蕊花糖苷含量明显增多；毛蕊花糖苷含量显著降低。 结论:基于HPLC法对车前子盐炙前后6种成分进行定量分析，为进一步对车前子盐炙前后的质量变化和药效物质基础提供参考依据。

目的:探讨京尼平交联对采用不同方法[曲拉通处理法（TPM）和去污剂联合酶法（DEM）]获得的兔脱细胞气管基质生物相容性的影响。方法:分别采用TPM和DEM对新西兰兔气管行脱细胞处理，随后利用京尼平进行交联。万能拉力试验机测定各气管样本的力学性能，扫描电镜观察其结构，细胞接触毒性实验检测其细胞毒性。将15只健康无特定病原体级成年新西兰兔按随机数字表法分为原生气管移植组、京尼平交联TPM脱细胞气管基质移植组和京尼平交联DEM脱细胞气管基质移植组，每组5只。移植后30 d处死各组动物，获取移植物样本，采用苏木素-伊红染色和CD68分子免疫组化染色观察样本的微观结构。结果:生物力学测试结果表明，京尼平交联脱细胞气管基质的力学性能与原生气管相似。扫描电镜结果显示，京尼平交联脱细胞气管基质的结构更为致密，且京尼平交联DEM脱细胞气管基质外表面形成的网孔状超微结构有利于细胞黏附。细胞接触毒性实验结果显示，京尼平交联DEM脱细胞气管基质的生物相容性更佳。同种异体气管移植实验与组织学染色结果表明，与京尼平交联TPM脱细胞气管基质相比，京尼平交联DEM脱细胞气管基质的免疫原性更低。结论:京尼平可在不引起体内炎症反应的基础上改善脱细胞气管基质的超微结构，且京尼平交联DEM脱细胞气管基质具有更好的生物相容性与更低的免疫原性，适合用于组织工程气管替代。

目的 探讨京尼平苷对高脂肪/高果糖饮食诱导代谢综合征(HFFD-MS)大鼠的干预作用及对脂肪因子的影响.方法 高脂肪/高果糖饮食持续 16 周,构建大鼠 HFFD-MS 模型,随机分为模型组、京尼平苷三个剂量组(分别按 30、60、120 mg/kg)、阳性对照组(二甲双胍 50 mg/kg);另取同期给予普通饲料和纯水饲养的大鼠为正常组,每组 10 只.灌胃给药8 周,计算脂体比及胰岛素抵抗模型评估指数(HOMA-IR),检测空腹血糖(FBG)及血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、游离脂肪酸(FFA)及胰岛素(INS)水平,观察肾周脂肪细胞病理学改变,放射免疫法检测血清脂肪因子瘦素(LP)、内脂素(VIS)、脂联素(APN)、抵抗素(RES)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素 6(IL-6)的表达水平.结果 与模型组相比,京尼平苷各剂量组肾周脂肪细胞体积更小,排列更紧密;且可明显降低HFFD-MS大鼠的体质量、内脏脂肪质量及脂体比,差异有统计学意义(P<0.05).另外,京尼平苷各剂量组可显著下调TC、TG、FFA、FBG、INS水平及HOMA-IR指数(P<0.01),可使血清LP、RES、TNF-α、IL-6水平明显降低(P<0.05),且京尼平苷高剂量组可显著上调APN的表达,差异有统计学意义(P<0.01),对VIS无显著性影响.结论 京尼平苷具有调控脂肪因子的异常分泌、减少内脏脂肪堆积、纠正糖脂代谢紊乱等作用,可明显改善HFFD-MS病理进程.

目的:探讨解偶联蛋白2(UCP2)抑制剂京尼平(GEN)对人下咽癌FaDu细胞增殖及线粒体功能的影响.方法:使用不同浓度的GEN作用于FaDu细胞24 h,实验分为GEN 0(对照)、50、100、200和400 μmol/L组.采用CCK-8法检测各组细胞增殖能力,DCFH-DA探针及JC-1染色联合流式细胞术检测GEN对FaDu细胞活性氧(ROS)含量及线粒体膜电位的影响,激光共聚焦显微镜观察GEN对FaDu细胞线粒体膜通透性转换孔的影响,可见分光光度法检测细胞中乳酸的含量,WB法检测细胞中UCP2蛋白的表达变化.结果:与对照组相比,GEN可显著抑制FaDu细胞的增殖活力(P<0.05或P<0.01)、细胞中UCP2蛋白的表达(P<0.05),降低线粒体膜电位(P<0.05或P<0.01)、乳酸含量(P<0.000 1),改变细胞线粒体膜孔道通透性,提高细胞中ROS水平(P<0.05或P<0.01).结论:GEN通过调节细胞中UCP2的表达水平进而影响细胞的氧化还原能力及线粒体功能,从而发挥抑制人下咽癌FaDu细胞增殖并诱导细胞凋亡的作用.

目的 建立泻青丸多指标成分定量方法,同时借助化学计量学及灰色关联度分析(GRA)评价其综合质量.方法 采用高效液相色谱法(HPLC),以Venusil MP C18 为色谱柱,乙腈-0.2%冰醋酸为流动相,同时测定泻青丸中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷、山栀子苷、羟异栀子苷、京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、升麻素苷、升麻素、亥茅酚苷、洋川芎内酯H、洋川芎内酯I、洋川芎内酯A和藁本内酯含量.结合化学计量学挖掘影响泻青丸产品质量的差异标志物.以相对关联度为测度,对泻青丸综合质量进行评价.结果 完成 14个成分含量测定方法学验证,结果均符合中国药典要求.化学计量学分析显示栀子苷、龙胆苦苷、藁本内酯、京尼平龙胆双糖苷、洋川芎内酯A、升麻素苷和羟异栀子苷是影响泻青丸产品质量的主要因子.GRA结果显示相对关联度为0.385～0.584,可用于泻青丸质量优劣评价.结论 HPLC多组分定量与化学计量学及GRA方法结合可综合评价泻青丸质量.

急性肝衰竭(ALF)是临床上最危重的一种肝脏疾病,严重影响我国人民生命健康.由于ALF的发病率和死亡率高、发病机制不明确、治疗手段有限,成为肝病领域亟待解决的重大难题.近年来,越来越多研究表明,内质网应激是ALF进展中一个关键的生物学过程,IRE1α/TRAF2/JNK通路作为内质网应激信号传导的一部分,在疾病的发展中发挥着放大炎症反应、促进肝细胞凋亡、抑制肝再生能力等作用.而中医药作为我国传统瑰宝,从中药单体中寻找有效防治ALF的药物成为研究热点.本文旨在通过阐述IRE1α/TRAF2/JNK通路在ALF发展中的作用机制,以及总结红景天苷、楮实子、补骨脂+五味子、黄芩素、京尼平、山柰酚、白藜芦醇、沙棘多糖提取物、木犀草素等中药单体调控该通路的潜在价值,以期为ALF的进一步研究和临床实践提供参考依据.

目的:采用高效液相-一测多评(HPLC-QAMS)法联合化学计量学及灰色关联度分析法评价白花蛇舌草质量.方法:采用Alltima C18色谱柱(5.0 μm,250.0 mm×4.6 mm),0.2％磷酸-乙腈为流动相梯度洗脱;以芦丁为参照物,建立其与京尼平苷酸、京尼平苷、车叶草苷酸、车叶草苷、2-羟基-3-甲基蒽醌、1,2-二羟基-3-甲基蒽醌、槲皮素、山柰酚、齐墩果酸、熊果酸、豆甾醇和β-谷甾醇的相对校正因子并进行校正因子耐用性考察.同时采用ESM和QAMS法测定收集到的16批白花蛇舌草中该13种成分的含量,再运用统计软件进行化学计量学及灰色关联度分析.结果:13种成分方法学验证均符合2020年版《中华人民共和国药典》要求.京尼平苷酸、京尼平苷、车叶草苷酸、车叶草苷、2-羟基-3-甲基蒽醌、1,2-二羟基-3-甲基蒽醌、槲皮素、山柰酚、齐墩果酸、熊果酸、豆甾醇、β-谷甾醇与芦丁的平均相对校正因子分别为 0.948 9、0.703 3、0.782 4、1.135 9、0.584 5、0.800 5、0.893 3、1.068 3、0.740 6、0.864 0、0.674 5、0.542 4.两种方法测定结果比较,差异无统计学意义(P＞0.05).化学计量学方法显示16批白花蛇舌草聚为3类,呈现一定的产区差异.芦丁、车叶草苷酸、京尼平苷和齐墩果酸是影响白花蛇舌草产品质量的主要潜在标志物.GRA法分析结果显示7个省中浙江和江西地区所得白花蛇舌草质量最优.结论:本试验所建立的方法操作便捷、结果准确,结合化学计量学及GRA方法可用于白花蛇舌草质量的综合评价.

目的 建立检测黄连解毒汤中6种主要成分的高效液相色谱(HPLC)方法.方法 采用Zorbax Eclipse Plus C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以0.03 mg·mL-1 磷酸二氢钾-乙腈(V∶V=7∶3)为流动相,等度洗脱,流速为1.0mL·min-1,检测波长为345 nm,柱温为37 ℃,进样量为20 μL,建立检测黄连解毒汤6种主要成分(京尼平苷、小檗碱、黄连碱、药根碱、黄芩苷、巴马汀)的HPLC方法.绘制HPLC检测6种成分的标准曲线,并进行方法学评价(线性、加样回收率、准确度和精密度、稳定性).采用建立的HPLC方法检测黄连解毒汤样本.结果 HPLC检测京尼平苷、小檗碱、黄连碱、药根碱、黄芩苷、巴马汀的线性范围分别为25.00～800.00、32.00～1 024.00、20.00～640.00、20.30～650.00、13.13～420.00、25.00～800.00 μg·mL-1,精密度和准确度均＜2％,加样回收率分别为105.30％、102.88％、103.51％、107.76％、96.29％、99.34％.稳定性实验结果显示,室温放置24 h、反复冻融3次、2～8℃保存1周、-80 ℃冻存1个月,京尼平苷、小檗碱、黄连碱、药根碱、黄芩苷、巴马汀的峰面积相对标准偏差(RSD)均＜2％,检测结果均稳定.采用HPLC检测黄连解毒汤的主要成分,浓度从高到低依次为药根碱(2 799.00 μg·mL-1)、小檗碱(2 358.03 μgmL-1)、京尼平苷(1 793.34 μg·mL-1)、巴马汀(945.30 μg·mL-1)、黄连碱(192.00 μg·mL-1)、黄芩苷(171.00 μg·mL-1).结论 建立的同时检测黄连解毒汤6种主要成分的HPLC方法快速、简便、重复性好、准确度高,可为后续黄连解毒汤的相关研究和临床应用奠定基础.

目的 对栀子姜炙过程中的外观性状、含量变化进行客观量化,以此优选出姜栀子的最佳炮制工艺.方法 建立Box-Behnken 设计-响应面法(Box-Behnken design-response surface methodology,BBD-RSM)考察炒制火力、炒制时间、姜汁用量3因素对姜炙过程的影响;采用CM-5型分光测色计(电子眼)从外在角度测定栀子姜炙后的颜色变化(同时辅以姜炙后的气味变化综合得分);选取栀子苷与西红花苷Ⅰ 2个指标性成分的含量作为内在指标,结合醇溶性浸出物的含量变化进行组合加权评分,以评分作为响应值,在此基础上优选出姜栀子的最佳炮制工艺并用试验进行验证.结果 姜栀子的最佳炮制工艺为炒制功率400 W、炒制时间4.5 min、姜汁用量10％.最佳工艺的色度范围为L*:44.600～45.500,a*:21.800～22.700,b*:23.500～23.700,Eab*:55.300～56.600.含量测定结果表明,栀子饮片经姜炙后京尼平龙胆双糖苷、栀子苷的含量均有上升,西红花苷Ⅰ、Ⅱ的含量显著降低.结论 成功优化了姜栀子的炮制工艺参数,以仿生技术对栀子姜炙过程中的色泽变化进行研究,为基于外观性状研究中药饮片炮制工艺提供了参考.