目的:探讨小探头内镜超声扫查消化道黏膜下病变在管壁的分布特点以及对消化道黏膜下隆起性病变的诊断价值。方法:回顾性分析2017年1月—2018年10月在武汉协和医院行小探头内镜超声检查消化道隆起性病变316例，患者均行内镜下治疗切除，组织送病理检查，通过超声检查结果结合病理诊断明确病变的层次和性质。结果:316例消化道隆起性病变中黏膜下病变198例，其中平滑肌瘤118例，间质瘤27例，脂肪瘤、囊肿各15例，乳头状瘤4例，神经内分泌瘤7例，异位胰腺9例，颗粒细胞瘤、神经鞘瘤和布氏腺瘤各1例。病变分布在整个消化道管壁，以起源于黏膜肌层最常见，有7例病变在小探头内镜超声下未明确层次。结论:小探头内镜超声可以明确黏膜下病变在消化道中的分布，并对病变大小、层次起源提供高准确率的判断，对治疗方案的选择亦有重要指导意义。

目的:探讨卵巢上皮性癌（卵巢癌）患者腹水来源的外泌体对卵巢癌干细胞样细胞（OCS-LC）干性特征及侵袭能力的影响。方法:（1）采用无血清悬浮培养法诱导卵巢癌细胞系A2780细胞生成OCS-LC，并采用成球实验、分化功能实验以及流式细胞仪检测等方法鉴定OCS-LC的成球克隆生长、定向分化潜能、干性标志物CD 133表达等干性特征。（2）采用超速离心法提取卵巢癌来源外泌体（OCDE），包括卵巢癌患者腹水来源及A2780细胞来源的外泌体［即腹水来源外泌体（ADE）及细胞来源外泌体（CDE）］，采用透射电镜观察外泌体形态、纳米颗粒跟踪分析（NTA）法测量外泌体粒径、蛋白印迹（western blot）法检测特异性蛋白分子热休克蛋白70（HSP-70）、CD 63、CD 9的表达等方法对外泌体ADE和CDE进行鉴定。（3）将ADE和CDE分别与OCS-LC共培养，即ADE+OCS-LC组、CDE+OCS-LC组，以磷酸盐缓冲液（PBS）与OCS-LC共培养作为空白对照组。通过观察3组OCS-LC的成球周期、最大球直径及成球率，评估各组OCS-LC的成球能力；采用免疫荧光染色法检测3组OCS-LC的干性标志物CD 133的表达；实时荧光定量PCR技术检测3组OCS-LC中干细胞转录因子八聚体结合转录因子4（Oct-4）和Nanog mRNA的表达；穿膜小室（transwell小室）实验检测3组OCS-LC的侵袭能力。 结果:（1）OCS-LC的鉴定：成球实验显示，OCS-LC单细胞悬液在无血清培养基中可二次成球生长；分化功能实验显示，OCS-LC细胞球在含血清培养基中改变生长方式，分化成呈贴壁生长的A2780细胞；流式细胞仪检测显示，OCS-LC中CD 133阳性（ CD133+）细胞的比例为（18.9±0.9）%，显著高于其对照（即A2780细胞）的（0.6±0.5）%（ t=38.570， P<0.01）。（2）OCDE的鉴定：透射电镜下观察，外泌体ADE和CDE均可见清晰的脂质双层膜结构，一侧呈凹陷的半球形或杯托样；NTA法测量显示，外泌体粒径主要在30~100 nm范围，平均粒径67.2 nm；western blot法检测显示，特异性蛋白分子HSP-70、CD 63、CD 9均呈阳性表达。（3）共培养后，成球实验显示，空白对照组、ADE+OCS-LC组、CDE+OCS-LC组OCS-LC均可继续成球生长，其中ADE+OCS-LC组细胞呈现两种生长方式，大部分细胞继续维持干性成球生长，小部分细胞出现分化，呈贴壁生长；3组OCS-LC的成球周期分别为（15.3±1.5）、（10.3±0.6）、（6.7±0.6） d，细胞球最大直径分别为（100.3±3.2）、（145.2±5.1）和（170.0±2.1） μm，成球率分别为（1.05±0.20）%、（4.15±0.10）%和（10.45±0.25）%，3组分别比较，差异均有统计学意义（ P均<0.05），且CDE+OCS-LC组分别与ADE+OCS-LC组比较，差异也均有统计学意义（ P均<0.05）。免疫荧光染色法检测显示，空白对照组、ADE+OCS-LC组，CDE+OCS-LC组OCS-LC细胞球中呈绿色荧光的 CD133+细胞数依次增多，3组OCS-LC细胞球中 CD133+细胞比例［分别为（26.6±1.5）%、（46.2±2.1）%和（58.4±2.2）%］比较，差异有统计学意义（ F=187.588， P<0.05），且CDE+OCS-LC组较ADE+OCS-LC组更高（ t=6.753， P<0.05）。实时荧光定量PCR技术检测显示，空白对照组、ADE+OCS-LC组、CDE+OCS-LC组OCS-LC中Oct-4 mRNA的表达水平分别为1.04±0.12、3.46±0.24、4.03±0.31，Nanog mRNA表达水平分别为1.00±0.07、1.57±0.32、2.66±0.15，3组分别比较，差异均有统计学意义（ P均<0.05），且CDE+OCS-LC组均显著高于ADE+OCS-LC组（ P均<0.05）。transwell小室实验显示，空白对照组、ADE+OCS-LC组、CDE+OCS-LC组的侵袭细胞数依次增多，分别为（30±5）、（102±4）、（210±7）个，3组比较，差异有统计学意义（ F=820.800， P<0.05），且CDE+OCS-LC组显著高于ADE+OCS-LC组（ t=23.202， P<0.05）。 结论:卵巢癌ADE能够增强和维持OCS-LC的干性特征，促进肿瘤细胞的侵袭转移，但CDE优于ADE。

目的:探究新西兰白兔肥胖模型经导管胃左动脉及胃十二指肠动脉栓塞术后胃及十二指肠组织病理及免疫组织化学变化。方法:成功建立新西兰白兔肥胖模型20只，分层随机分成2组，实验组经导管明胶海绵颗粒（350~560 μm）栓塞新西兰兔胃左动脉及胃十二指肠动脉，对照组经导管生理盐水（5 ml）灌注胃左动脉及胃十二指肠动脉，术后4周处死动物行胃及十二指肠组织病理、免疫组织化学检查及Western Blot检测，测量产胃饥饿素细胞密度及胃饥饿素蛋白条带灰度比值，采用独立样本 t检验进行分析比较。 结果:大体病理检查提示1只实验组新西兰白兔胃体部前壁出现溃疡，组织病理学检查提示3只实验组新西兰白兔胃体部黏膜溃疡，免疫组织化学检查提示实验组胃基底部及十二指肠产胃饥饿素细胞较对照组显著减少（胃基底部分别为10.0±5.1、27.7±3.4， t=12.35， P<0.05；十二指肠分别为5.6±2.6、12.3±2.1， t=4.73， P<0.05）。Western Blot检测提示实验组胃基底部及十二指肠胃饥饿素蛋白条带灰度比值较对照组显著降低（胃基底部分别为0.65±0.05、1.12±0.09， t=9.62， P<0.05；十二指肠分别为0.55±0.03、0.94±0.08， t=7.98， P<0.05）。 结论:胃左及十二指肠动脉栓塞减肥术后免疫组织化学及Western Blot检测证实实验组白兔胃基底部及十二指肠的产胃饥饿素细胞较对照组明显减少，且术后组织病理学检查提示此技术较为安全。

本文报道发生于蝶窦内异位沉默型稀疏颗粒型促肾上腺皮质激素细胞腺瘤一例。患者女，60岁，颅脑CT及MRI检查示蝶窦内实性肿块，蝶窦窦壁变薄，局部见骨质破坏，累及枕骨斜坡。MR增强扫描病灶似筛泡样强化，同时伴有空泡蝶鞍。病理证实为蝶窦内异位稀疏颗粒型促肾上腺皮质激素细胞腺瘤，结合患者阴性临床检测，最终诊断为蝶窦内异位沉默型稀疏颗粒型促肾上腺皮质激素细胞腺瘤。

患者，男，23岁，2018年10月14日因双眼视物模糊3年于外院就诊，双眼裸眼视力0.5，最佳矫正视力右眼－0.25 DS/－0.50 DC×5＝0.6，左眼矫正无助；眼压右眼13 mmHg(1 mmHg＝0.133 kPa)，左眼12 mmHg；考虑诊断为"双眼视神经病变"。图形视觉诱发电位(pattern visual evoked potential，P-VEP)检查示右眼正常，左眼异常。头颅MRI检查示左侧额叶少许脑缺血灶，双眼眼眶未见异常。未检测到线粒体DNA(mitochondrial DNA，mtDNA)3个原发突变位点mtDNA11778、mtDNA14484和mtDNA3460，初步排除Leber遗传性视神经病变及压迫性视神经病变。2019年6月29日患者于广东省人民医院眼科就诊，眼前节照相示双眼晶状体前圆锥样改变(图1A，B)；眼前节光相干断层扫描(optical coherence tomography，OCT)检查证实双眼晶状体前圆锥(图1C，D)。角膜地形图检查示双眼角膜偏薄，右眼瞳孔中心、顶点和最薄点厚度分别为471、470和466 μm，左眼分别为471、471和466 μm，最薄点均在颞下方，角膜前表面和后表面较规则，两子午线曲率差异在正常范围(图1E，F)。右眼角膜内皮细胞计数和六边形细胞比例分别为2 683.7个/mm 2和61%，左眼分别为2 552.7个/mm 2和70%。彩色眼底照相可见双眼黄斑周围点状色素改变(图2A，B)；OCT血流成像(OCT angiography，OCTA)示双眼黄斑无血管区(foveal avascular zone，FAZ)不规则；右眼黄斑旁鼻侧、颞侧、上方和下方视网膜浅层毛细血管密度分别为51.5%、46.3%、46.0%和44.1%，左眼分别为53.9%、51.3%、51.2%和50.6%；右眼鼻侧、颞侧、上方和下方黄斑旁视网膜厚度分别为321、242、275和253 μm，左眼分别为291、238、268和247 μm。双眼黄斑颞侧视网膜明显变薄，主要累及内层(图2C，D)。听力检测：右耳音平均听阈54 dB，骨导纯音平均听阈52 dB，左耳音平均听阈56 dB，骨导纯音平均听阈54 dB，提示双侧感音神经性耳聋。结合患者病史经查阅文献后初步考虑为Alport综合征。2019年7月11日尿常规检测显示红细胞148个/μl、血尿(++)、蛋白尿(+)；尿渗透压+尿位相结果示尿红细胞总数明显升高，为49 500个/ml；尿蛋白定量为0.8 g/24 h。2019年7月25日于肾内科行右侧肾脏穿刺活检术，苏木精－伊红染色和特殊染色三项(PAS、PASM和Masson染色)显示部分肾小球球性硬化，肾小球系膜细胞和基质轻度增生伴局灶内皮细胞增生，基底膜略增厚，毛细血管襻基底膜染色不均一，少数肾小球球囊周纤维化，其内毛细血管襻缺血皱缩，肾小管上皮细胞空泡及颗粒变性，多灶状及片状萎缩，肾间质可见较多泡沫样细胞，多灶状及片状炎症细胞浸润伴纤维化，小动脉管壁增厚，管腔狭窄；刚果红、氧化刚果红、油红O染色均呈阴性(图3A~D)；免疫荧光未见免疫复合物沉积；α1阳性对照正常；α3肾小球基底膜、肾小管基底膜表达缺失；α5肾小球包曼氏囊表达节段性缺失，肾小球基底膜、肾小管基底膜表达缺失(图3E~G)；电子显微镜检查结果示，肾小球基底膜厚薄不一，基底膜致密层增厚，部分呈撕裂状和蛛网状，足突弥漫融合，未见电子致密物沉积(图3H~J)。明确诊断：Alport综合征。患者尿蛋白/肌酐比明显上升，尿白蛋白增加，经过控制血压(苯磺酸氨氯地平片10 mg，每天1片)和护肾治疗(复方α-酮酸片，每次4片和尿毒清颗粒，每次5 g，均为每天3次)后尿蛋白/肌酐比和尿白蛋白均有下降。目前继续控制血压和护肾治疗，定期门诊复诊。

患者男，51岁，因全身皮肤红斑、水疱伴瘙痒3个月，加重1个月就诊。患者3个月前无明显诱因头皮出现红斑、水疱，伴明显瘙痒，1个月前累及全身。曾系统应用糖皮质激素（地塞米松15 mg/d）治疗，病情缓解，但减量后（地塞米松1.5 mg/d）病情反复，故来我院就诊，拟诊"大疱性类天疱疮（bullous pemphigoid，BP）"收入院治疗。患者2年前发现尿蛋白++、尿潜血++，未系统诊治。体检：一般情况可，血压140/87 mmHg（1 mmHg = 0.133 kPa），各系统无明显异常。皮肤科检查：口腔黏膜、头皮、颈部、躯干、四肢及掌跖可见大小不等红斑基础上尼氏征阴性的水疱、糜烂、渗出、结痂，双下肢轻度凹陷性水肿（图1A）。实验室检查：血常规示白细胞12.00 × 10 9/L，中性粒细胞绝对值8.53 × 10 9/L[参考值：（1.8 ~ 6.3）× 10 9/L，下同]，嗜酸性粒细胞比例0.110（0.004 ~ 0.080），嗜酸性粒细胞绝对值1.32 × 10 9/L[（0.02 ~ 0.52）× 10 9/L]；尿常规示尿蛋白++++，尿潜血++；尿蛋白：15.28 g/24 h（阴性< 0.5 g/24 h）；肝功能检查示总蛋白40.5 g/L（65.0 ~ 85.0 g/L），白蛋白18.0 g/L（40.0 ~ 55.0 g/L），胆固醇8.5 mmol/L（2.6 ~ 6.0 mmol/L）；肾功能未见异常；血清IgG 3.33 g/L（8.6 ~ 17.4 g/L），IgE 3 610 IU/ml（阴性< 100 IU/ml），血清抗BP180抗体17.9 U/ml（阴性< 9 U/ml）。腹部彩色多普勒超声：双肾实质弥漫性病变。右上肢皮损组织病理：表皮下水疱，疱内及真皮浅层血管周围见嗜酸性粒细胞、淋巴细胞及少量中性粒细胞。直接免疫荧光：疱壁下缘和真表皮交界处见IgG呈线状沉积。肾活检组织病理符合膜性肾病（图2A），免疫荧光染色示IgG（+++）沿肾小球毛细血管壁颗粒状沉积。肾活检组织电镜检查：基底膜弥漫不规则增厚，厚度达1 800 nm；脏层上皮细胞肿胀，空泡变性，足突弥漫融合；上皮下、基底膜内见多量电子致密物沉积，多量电子致密物包裹在基底膜内，有吸收表现；系膜细胞和基质增生，未见电子致密物沉积，符合Ⅳ期膜性肾病（图2B）。血清抗磷脂酶A2受体抗体阳性（1∶100）。

患者，女，52岁。因发现右眼上睑皮肤红肿20 d，于2022年5月就诊于山东第一医科大学附属眼科医院。患者20 d前无明显诱因出现右眼上睑皮肤红肿，就诊于外院，诊断为睑板腺囊肿，给予妥布霉素地塞米松眼膏治疗，未见明显好转。患者有甲减病史10余年，否认重大全身性疾病，否认药物过敏史，否认家族性遗传病史。眼部检查：右眼最佳矫正视力1.0，眼压11 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa），右眼上睑近中央睑缘处见一直径约5 mm半球形隆起（图1A），质韧，局部皮肤稍有淤青、淤血，压痛阴性，结膜无明显充血，角膜透明，前房中等深浅，瞳孔圆，晶状体透明；左眼检查未见明显阳性体征。血常规、C反应蛋白、尿常规、即刻血糖、凝血功能、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、梅毒螺旋体、人类免疫缺陷病毒检查均正常。临床诊断：右眼眼睑肿物、右眼睑板腺囊肿？完善术前相关检查，患者于2022年6月8日在局部浸润麻醉下行"右眼眼睑肿物切除术"，术中平行睑缘切开肿物表层的眼睑组织，分离周围组织充分暴露肿物，剥离过程中见肿物内有大量白色干酪样及肉芽组织状内容物流出，剪除囊壁及肉芽，压迫止血。术后结膜囊及切口处涂氧氟沙星眼膏1次/d，左氧氟沙星滴眼液4次/d，持续1周。病理检查：送检囊壁组织约6 mm×3 mm×2 mm，灰白色，质地中等，主要成分为增生的纤维结缔组织伴慢性炎细胞浸润；内容物约5 mm×3 mm×2 mm，黄白色，呈颗粒状，主要由蓝染的嗜碱性细胞和嗜酸性的影细胞组成（图1B），病理学诊断：右眼睑钙化上皮瘤。术后右眼上睑切口对合好，无渗血、渗液，上眼睑无明显红肿。患者随访3个月，未见肿物复发。

目的:建立并评估同步分离卵巢内不同发育阶段卵泡的方法——酶消化后滤网过滤法。方法:运用混合有胶原酶Ⅰ和脱氧核糖核酸酶Ⅰ的消化酶来消化小鼠卵巢预切组织，然后依次通过不同孔径（100 μm、40 μm、20 μm）的滤网以实现不同发育阶段卵泡同步分离的目的，将翻转冲洗100 μm滤网得到的卵泡记为A组（>100 μm），翻转冲洗40 μm滤网得到的卵泡记为B组（40~100 μm），翻转冲洗20 μm滤网得到的卵泡记为C组（20~40 μm）。评估并比较经不同孔径滤网筛选获得的卵泡群的数量、大小、形态、活力和发育潜能。结果:数量上，C组获得的卵泡数目最多，A组次之，B组最少；形态上，C组卵泡基底膜完整率高于A组和B组（ P<0.001， P<0.001）。活力上，A组卵泡的存活率70.59%（120/170）高于B组51.79%（58/112）和C组35.90%（28/78）（ P=0.001 6， P<0.001）。发育潜能上，经过96 h体外培养，A组卵泡直径由（113.64±9.57） μm增长至（150.95±45.90） μm（ P=0.002 4），B组卵泡直径由（88.12±9.12） μm增长至（120.61±18.00） μm （ P<0.001），C 组卵泡在培养第24 h内出现单层颗粒细胞贴壁，卵母细胞与颗粒细胞之间失去连接结构，卵母细胞完全裸露，未能培养成功。 结论:酶消化后多重滤网过滤法能快速有效获得大量形态完整、有活力和发育潜能良好的卵泡，且能达到不同发育阶段卵泡同步分离的目的。

患者，男，68岁，因左眼视物不清半年于2020年5月就诊于河北医科大学第二医院。既往史：高血压10余年，目前口服药物血压控制可，否认糖尿病、冠心病，否认手术史。患者半年前无明显诱因出现左眼视物不清，并缓慢加重，1周前就诊当地医院发现左眼球内占位。眼科查体：视力左眼0.04，右眼0.5；眼压左眼10 mmHg(1 mmHg＝0.133 kPa)，右眼10 mmHg；双眼晶状体轻度混浊，余眼前节正常；左眼玻璃体轻度混浊，以后部为甚，右眼玻璃体透明。眼底检查显示，左眼眼底后极部及周边视网膜下广泛弥漫扁平隆起，无色素，可见斑点状色素沉积，呈"豹斑"状，全视网膜未见出血及渗出，黄斑中心凹反光不见，右眼眼底未见异常(图1)。红外自发荧光检查显示，左眼后极部斑点状弱荧光，右眼未见明显异常(图2)。荧光素眼底血管造影(fundus fluorescence angiography，FFA)检查显示，左眼后极部弥漫隆起病灶，病变区弥漫高荧光，其间密集斑片状低荧光，黄斑结构破坏，晚期未见渗漏(图3)，右眼未见明显异常荧光。吲哚菁绿血管造影(indocyanine green angiography，ICGA)检查显示，左眼病灶斑片状低荧光(图4)。光学相干断层扫描(optical coherence tomography，OCT)检查显示，左眼后极部视网膜脉络膜水肿，层间大量颗粒状高反射信号(图5A)。眼部彩色超声检查显示，左眼玻璃体后部可见点状、絮状弱回声，球壁回声广泛增厚，球内及眶内可探及低回声病变，包绕球壁、视神经。彩色多普勒血流成像显示，病变内可见丰富血流信号(图6)，右眼未见异常。超声造影检查显示，病变完全被造影剂填充，为快进快出型。眼眶MRI检查显示，左侧眼环增厚欠光整，以后部为著，其后方可见小条片状T1高、T2低信号，DWI呈高信号，增强扫描延迟期强化，冠状位视神经似见包绕，双眼眼球大小对称，右眼未见异常。全身查体：全身未触及肿大浅表淋巴结，心、肺、腹部查体未见异常。诊断如下：1.左眼球内占位(性质待查)；2.双眼白内障；3.高血压病。入院后多学科会诊，逐步完善肺脏、腹部、盆腔CT及增强CT检查，甲状腺、腹部、泌尿系统、睾丸超声检查，结果均提示未见淋巴瘤及其他肿瘤指征。血、尿、凝血常规，术前四项未见异常。男性肿瘤芯片检查显示，甲胎蛋白(AFP)、甲胎蛋白异质体(AFP-L13)、ALP-13/AFP、癌胚抗原(CEA)、糖基类抗原(CA)-125、CA-199、CA-153、CA72-4、非小细胞肺癌相关抗原(C211)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、铁蛋白(FER)、游离前列腺特异抗原(FPSA)、总前列腺特异抗原(TPSA)、FPSA/TPSA均阴性。

患儿女，13岁，右足部皮疹伴瘙痒5年。皮肤科检查：右足弓内侧散在紫红色扁平丘疹，表面轻微鳞屑，右拇趾外侧散在淡红色丘疹，右足跟散在圆顶紫红色丘疹，基底外周领圈状角化。右足跟丘疹组织病理学检查：表皮角化过度，两侧显著角化过度，颗粒层增厚，棘层无明显增生，基底层局灶液化变性，真皮层大量淋巴细胞、浆细胞增生浸润，无异形性，其中可见较多的中小厚壁血管，管腔扩张，内衬突出饱满的内皮细胞。诊断：儿童肢端假性淋巴瘤样血管角皮瘤。治疗：Nd: YAG长脉宽1 064 nm激光每月治疗1次，治疗7次后，皮疹较前消退，数目减少。