目的:探讨人偏肺病毒(human metapneumovirus，hMPV)感染后辛伐他汀是否可以抑制病毒复制。方法:体外试验，hMPV感染16HBE细胞(人支气管上皮样细胞)后用辛伐他汀试剂处理，qPCR和Western blot检测病毒滴度和自噬的强弱以及相关通路表达水平；体内试验，利用辛伐他汀灌胃处理被hMPV感染的BALB/c小鼠，肺组织切片观察病理情况，提取肺组织蛋白和RNA检测病毒载量的变化、自噬发生情况以及相关通路的表达。结果:体外试验，辛伐他汀干预组病毒滴度降低，自噬水平高于病毒组；辛伐他汀干预组AKT/mTOR通路被抑制，使用通路特异性抑制剂雷帕霉素处理后进一步验证了通路的准确性。体内试验，辛伐他汀干预组病毒滴度低于病毒组，但自噬表达水平两组无明显差异，辛伐他汀干预组AKT/mTOR通路下调；HE染色病毒组病理改变明显，辛伐他汀干预后病理情况改善。结论:辛伐他汀在人偏肺病毒感染后可以抑制其复制，该过程与AKT/mTOR通路诱导的自噬反应相关。

目的:探讨以心律失常为首要和主要表现的结节病患者的临床特征。方法:回顾性分析北京协和医院呼吸内科门诊2017年1月至2020年12月接诊并规律随诊的4例累及心脏的结节病患者资料，其中男1例，女3例，年龄42~58岁，平均51岁；分析其临床表现、诊疗经过及转归。结果:4例患者均以心律失常为首发或主要临床表现就诊：1例为Ⅲ°房室传导阻滞、1例为Ⅱ°Ⅱ型房室传导阻滞、2例为频发室性早搏和短阵室性心动过速。3例在心律失常的诊断过程中，发现胸部CT异常而同期诊断了呼吸系统结节病；1例在心律失常5年后因颈部淋巴结肿大而发现胸部CT异常诊断呼吸系统结节病。4例患者均经支气管镜检查获取组织、病理证实为上皮样细胞肉芽肿性炎。2例患者接受心肌灌注延迟成像核磁共振检查，均有典型的心脏结节病的影像学表现，3例患者经正电子发射计算机断层显像证实心脏受累。4例患者均经口服糖皮质激素、免疫抑制剂以及抗心律失常药物治疗后病情控制，2例接受了心脏起搏器植入术。结论:不明原因的高度房室传导阻滞、室性心律失常的中老年患者需要考虑到心脏结节病的可能。建议常规行胸部CT筛查；而对于疑诊患者建议完善心脏增强核磁和（或）PET检查来明确诊断心脏结节病的诊断；口服糖皮质激素和免疫抑制剂有效。

目的:探讨发生在肺部和气管的血管球肿瘤的临床病理特点。方法:收集2010—2019年同济大学附属上海市肺科医院（4例）和复旦大学附属肿瘤医院（7例）诊断的11例肺部血管球肿瘤的临床资料、影像学特征、组织病理学形态、免疫学表型，并复习相关文献。结果:患者中男性5例，女性6例，发病年龄29~66岁，中位年龄43岁。6例位于肺内，5例位于气管。肿瘤直径1.0~7.5 cm，平均直径2.6 cm。低倍镜下肿瘤细胞呈弥漫分布，或呈分叶状，由大小相对一致的圆形或短梭形的瘤细胞组成，围绕血管生长。4例为良性血管球瘤，其中1例细胞核深染、退变，为良性奇异性血管球瘤。2例为恶性潜能未定血管球瘤，肿瘤呈浸润性生长，细胞有一定异型性。5例为恶性血管球瘤，见肿瘤性坏死及脉管侵犯，肿瘤细胞异型性显著，核仁明显，可见核分裂象（2~20个/10个HPF），包括病理性核分裂象。免疫组织化学染色显示肿瘤细胞阳性表达平滑肌肌动蛋白（SMA，11/11）、波形蛋白（7/8）、Ⅳ型胶原（4/4）、Caldesmon（5/5），少数病例表达结蛋白（1/7）和突触素（1/7），CD34、广谱细胞角蛋白、S-100蛋白等阴性。8例患者获得随访，时间6~95个月，2例恶性病例死亡，其他6例患者在随访期间均无复发及转移。结论:原发性肺和气管血管球肿瘤为罕见病，该组病例恶性血管球瘤较多，其次为良性血管球瘤和恶性潜能未定血管球瘤。形态学瘤细胞呈弥漫分布的圆形上皮样细胞，围绕血管内皮下生长，与类癌等相似，需要结合免疫组织化学染色SMA、Caldesmon、Ⅳ型胶原等阳性予以鉴别。

目的:探讨circ-SFMBT2对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)细胞生物学行为的影响以及对miR-7-5p/ADAM10分子轴的调控作用。方法:采用qRT-PCR法与Western印迹法分别检测NSCLC与癌旁组织中circ-SFMBT2、miR-7-5p、ADAM10的表达量；用Pearson法分析circ-SFMBT2与miR-7-5p、以及miR-7-5p与ADAM10的相关性；体外培养人支气管上皮样细胞(human bronchial epithelial-like cells, HBE)与肺癌细胞系H1650、H460、A549、H1299。用CCK-8与EdU实验检测细胞的增殖能力。用平板克隆形成实验检测细胞的克隆形成能力。用流式细胞术检测细胞凋亡率。用Transwell小室实验检测细胞侵袭。用双荧光素酶报告实验检测circ-SFMBT2与miR-7-5p、以及miR-7-5p与ADAM10的靶向关系。用裸鼠移植瘤实验检测敲低circ-SFMBT2对移植瘤生长的影响。用免疫组化实验检测移植瘤组织中ADAM10与Ki67蛋白阳性率。结果:circ-SFMBT2与ADAM10在NSCLC组织及细胞系中表达升高，而miR-7-5p的表达降低，circ-SFMBT2与miR-7-5p的表达呈负相关，而miR-7-5p与ADAM10的表达呈负相关。沉默circ-SFMBT2及miR-7-5p过表达可抑制细胞增殖、克隆形成及侵袭，还可促进其凋亡。circ-SFMBT2可靶向调控miR-7-5p，而ADAM10是miR-7-5p的靶基因。沉默circ-SFMBT2与抑制miR-7-5p联合作用，以及miR-7-5p过表达与ADAM10过表达联合作用均可促进细胞增殖、克隆形成及侵袭，并抑制其凋亡。沉默circ-SFMBT2可抑制移植瘤的生长。结论:沉默circ-SFMBT2可通过调控miR-7-5p/ADAM10分子轴而减弱NSCLC细胞增殖、克隆形成、侵袭能力并诱导其凋亡。

患者女，36岁，因四肢皮下结节5年余于2021年5月就诊。2016年患者无明显诱因出现四肢皮下结节，曾于外院行局部糖皮质激素封闭治疗，稍好转。2017年患者眉部文绣后，2019年局部出现黄红色斑块（图1A）。2020年4月14日于外院行右侧眉部皮损组织病理检查示，表皮角化过度，未见异型细胞，真皮内见肉芽肿形成，周围炎症细胞浸润；未见坏死、异物等特殊病变（图1B）；抗酸染色、过碘酸雪夫染色、六胺银染色均阴性，排除其他特异性感染。发病以来，患者无发热、咳嗽，无明显体重变化。既往无糖尿病、结核病史，家族中无类似病史。体检：各系统检查无异常。皮肤科检查：四肢可见大小不等、米粒至钱币大小紫红色质硬皮下结节（图2A），眉部可见扁平黄红色斑块。取左上臂结节行组织病理检查：真皮内见上皮样细胞岛，其内混杂少量淋巴细胞（图2B），异物巨细胞中可见"星状体"（图2C）。实验室检查：结核分枝杆菌抗体IgG、IgM阴性。由于医院实验室检查项目有限，血清血管紧张素转换酶和白细胞介素2R水平未检测。胸部CT：①纵膈、双肺门多发肿大淋巴结，双肺内多发结节、斑点片影，符合结节病表现；②胸背部皮下多发小结节灶。2021年6月8日患者于呼吸内科进一步排查系统累及情况，完善支气管镜检查，取纵膈右下支气管旁淋巴结少量组织送检，见类上皮细胞增生，炎症细胞浸润，肉芽肿形成。

目的:探讨超保守长链非编码RNA uc.77(uc.77)在肺癌中的表达及其分子机制。方法:肺癌组织及癌旁正常组织来自2014—2016年解放军南部战区总医院确诊肺癌并行手术的61例肺癌患者。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肺癌细胞株中uc.77的相对表达水平，同时在61对肺癌组织及其癌旁正常组织中验证其表达趋势，分析uc.77的表达与肺癌患者临床病理特征的关系。转染uc.77 siRNA敲低uc.77的表达，采用细胞计数试剂盒8法和克隆形成实验检测细胞增殖能力，流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期变化。将转染uc.77 siRNA的肺癌H1299细胞注射至BALB/c裸鼠构建荷瘤模型，观察uc.77对肿瘤生长的影响，对肿瘤组织进行HE染色和免疫组化检测，qRT-PCR和Western blot法检测p21 mRNA和蛋白表达水平。结果:肺癌细胞系95-D、H1299、A549、H460、H446和16HBE-T中uc.77的表达水平高于正常支气管上皮样细胞16HBE(均 P<0.05)；61例肺癌组织中uc.77的表达水平高于旁正常组织( P<0.001)。肿瘤体积、有无淋巴结转移、TNM分期与uc.77的表达有关(均 P<0.05)。转染uc.77 siRNA 48和72 h后，siRNA-1组H1299、95-D、16HBE-T细胞 A值低于各自对照组和siRNA-NC组(均 P<0.05)。转染uc.77 siRNA-1后，H1299 siRNA-1组细胞G 0/G 1期细胞比例[(71.86±3.46)%]高于H1299对照组[(47.62±5.48)%]和H1299 siRNA-NC组[(61.38±5.62)%，均 P<0.05]；H1299 siRNA-1组细胞S期细胞比例[(14.99±3.61)%]低于H1299对照组[(34.95±7.05)%]和H1299 siRNA-NC组[(23.75±5.87)%，均 P<0.05]。H1299 siRNA-1组细胞凋亡率[(4.90±1.80)%]高于H1299对照组[(3.30±0.80)%]和H1299 siRNA-NC组[(2.80±1.20)%，均 P<0.05]。H1299 siRNA-1组细胞克隆形成率[(19.20±2.00)%]低于对照组[(32.60±2.00)%]及siRNA-NC组[(34.40±1.00)%，均 P<0.05]。H1299 siRNA-1组小鼠肿瘤体积低于H1299对照组和H1299 siRNA-NC组(均 P<0.05)，H1299 siRNA-1组小鼠肿瘤重量低于H1299-对照组和H1299 siRNA-NC组(均 P<0.05)。Ki-67免疫组化结果显示，H1299对照组和H1299 siRNA-NC组肿瘤细胞增长标志物Ki-67呈阳性，而H1299 siRNA-1组呈弱阳性。qRT-PCR检测结果显示，H1299 siRNA-1组细胞中p21的mRNA表达水平(2.57±0.45)高于对照组(1.00±0.00， P＝0.001)和H1299 siRNA-NC组(1.52±0.37, P＝0.009)。Western blot结果表明，H1299 siRNA-1组细胞p21蛋白表达水平升高。 结论:超保守长链非编码RNA uc.77在肺癌细胞株和肺癌组织中均表达升高，敲低uc.77的表达可抑制肺癌细胞增殖和肿瘤生长，提示uc.77在肺癌中发挥促癌基因的作用，uc.77可能是肺癌的潜在治疗靶标。

目的 了 解无机砷(inorganic arsenic,iAs)介导砷(+3 氧化态)甲基转移酶[arsenic(+3 oxidation state)methyltransferase,As3MT]上调对16HBE细胞增殖、凋亡及激活蛋白-1(Activation of protein-1,AP-1)表达的影响,从而深入了解无机砷在细胞生物学中的作用机制.方法 将16HBE细胞经体外培养后随机分成两大组:以不同浓度(0、2、4、6 μmol/L)亚砷酸钠(sodium arsenite,NaAsO2)为一组和相同浓度(0、6、6、6 μmol/L)一甲基砷酸(monomethylarsonic acid,MMA)、二甲基砷酸(dimethylarsinic acid,DMA)、NaAsO2为一组染毒人支气管上皮样细胞(16HBE)48 h.Western Blot检测As3MT蛋白在细胞中的表达.通过小干扰RNA(small disturbance RNA,siRNAs)转染沉默As3MT可对染毒后细胞产生一系列生物学效应.CCK-8试剂盒来检测细胞活力,JC-1试剂盒检测早期细胞凋亡和HO/PI双染试剂盒检测晚期细胞凋亡和坏死.采取双萤光素酶报告基因检测转录因子AP-1的转录活性.Western Blot检测c-Jun(p-c-Jun)和c-Fos(p-c-Fos)的蛋白表达水平.结果 实验发现,无机砷处理能够显著上调16HBE细胞中As3MT的表达水平,并对细胞的增殖和凋亡产生影响.与对照组相比,染毒后的16HBE细胞中As3MT表达随着NaAsO2浓度的增加而增加,呈剂量-效应关系.相同浓度下,诱导As3MT表达的能力NaAsO2＞DMA＞MMA.细胞转染技术提示,成功沉默As3MT.沉默As3MT后,CCK-8法显示细胞活力下降(NCmean=1.00,S1 mean=0.94,S2mean=0.71),siAs3MTb1 组细胞活力明显低于 siCtrl 组(P＜0.05);siAs3MTb2 组细胞活力明显低于 siCtrl 组(P＜0.05).JC-1 检测提示细胞凋亡增加(NCmean=1.80,S1mean=1.40,S2mean=1.18),siAs3MTb 1 组 550 nm/485 nm 比值明显低于 siCtrl 组(P＜0.05);siAs3MTb2 组 550 nm/485 nm 比值明显低于 siCtrl 组(P＜0.05).HO/PI 双染提示细胞凋亡和坏死增加,siAs3MT组较siCtrl组细胞染色更为明显.双萤光素酶报告基因分析的结果AP-1活性上升(NCmean=48.83,S1mean=132.67,S2mean=163.83),siAs3MTb 1 组 AP-1 转录活性明显高于 siCtrl 组(P＜0.05);siAs3MTb2组 AP-1 转录活性明显高于siCtrl组(P＜0.05).Western Blot结果检测到沉默As3MT后c-Jun表达上升,p-c-Jun表达上升,c-Fos表达上升,p-c-Fos表达下调.结论 本研究发现,无机砷可以显著上调As3MT的表达,对16HBE细胞的增殖、凋亡和AP-1表达产生了影响.进一步的实验表明,无机砷介导As3MT上调与AP-1通路有关.无机砷可能是通过调节As3MT的表达来影响细胞增殖、凋亡和转录因子表达的.

[背景]苯并[a]芘(BaP)的活性代谢产物7,8-二羟-9,10-环氧苯并[a]芘(BPDE)可与DNA加合,但BPDE-DNA加合物图谱尚不明确.[目的]采用染色质免疫共沉淀测序技术(ChIP-Seq),在全基因组水平上鉴定BPDE加合位点分布及加合基因,为深入研究BaP的毒作用机制提供依据.[方法]人支气管上皮样细胞 16HBE培养至第四代达对数生长期.收获细胞并加入染色质免疫共沉淀裂解缓冲液,将裂解产物等分为实验组和对照组,实验组添加终浓度 20 μmol·L-1 的BPDE溶液,对照组添加相同体积的二甲基亚砜溶液,在 37℃环境下孵育 24 h.超声获得100～500 bp的染色质小片段.使用BPDE特异性抗体(anti-BPDE 8E11)富集与BPDE加合的DNA片段,高通量测序检测BPDE加合位点,使用MEME和DREME软件对前 1000个峰序列进行模体分析,注释BPDE在全基因组水平的加合靶基因,并通过生物信息学技术对BPDE加合靶基因进行基因本体论(GO)功能分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析.[结果]高通量测序共检测出 842个BPDE结合位点,在各染色体上均有分布.BPDE可以与基因编码区和非编码区共价结合,73.9%的结合位点分布在基因间区,19.6%分布在内含子区,上游 2千碱基区域、外显子区、下游 2千碱基区域及 5'非翻译区也有少量分布.对前 1000个峰序列进行分析,寻找到 4条可靠的模体,发现富含鸟嘌呤(G)和腺嘌呤(A)的位点易于结合.对结合位点进行富集,共鉴定出 199个BPDE加合靶基因,大多分布在 1号、5号、7号、12号、17号和X染色体上.GO分析显示,靶基因主要富集于核酸和蛋白质结合,参与调节催化活性、转运活性、翻译延伸因子活性,在细胞分裂、分化、运动、物质运输和信息传递方面发挥重要作用.KEGG分析显示靶基因主要富集于心血管疾病、癌症、免疫炎症反应等相关通路.[结论]利用ChIP-Seq在全基因组水平上共鉴定出 199个BPDE加合靶基因,主要影响细胞分裂、分化、运动、物质运输和信息传递等生物学功能,与心血管疾病、肿瘤及免疫炎症反应密切相关.

目的 探讨气管腔内血管周上皮样细胞肿瘤(PEComa)的病因、临床表现、诊断、鉴别诊断、治疗及预后.方法 回顾性分析扬州大学附属医院2017年3月31日收治的1例支气管腔内PEComa患者的临床资料,并复习相关文献.结果 肿瘤肉眼为灰白、淡黄、实性,质地中等;免疫组织化学结果:HMB-45(+),Melan-A(+),S-100(+),SMA(+),Desmin(+),CD34(+),Vimentin(+),Ki-67(1％+);病理诊断为PEComa.结论 支气管腔PEComa罕见,经支气管镜高频电凝圈套+氩离子凝固术治疗支气管腔PEComa是一种经济、创伤小的治疗方法.

患者女,51岁,1年前出现活动后胸闷、气短,2个月前症状加重,并出现咳嗽.查体:左肺下叶呼吸音较弱.CT:左肺上叶舌段团片状略低密度,边缘光整,约10.6 cm×5.9cm,平扫CT值30 HU,增强后动脉期及静脉期CT值分别为42 HU、61 HU,呈不均匀轻中度强化,左肺局部支气管狭窄、闭塞,左侧胸膜增厚,可见胸腔积液(图1),CT诊断为左肺上叶舌段肺癌可能性大.行左肺切除、心包部分切除、膈肌部分切除及纵隔淋巴结廓清术,术中见肿瘤位于左肺下叶,累及上叶舌段,侵及心包、膈肌,大小约10 cm×8 cm,质硬,浸润脏层胸膜.大体病理:距支气管断端4 cm肺组织内见9 cm×8 cm×5 cm包块,似有包膜,切面灰红、灰白,质软,累及肺外脂肪组织;镜下表现:肿瘤细胞呈上皮样形态,弥漫分布,间质较少,可见裂隙样血管和扩张的腔隙样结构,部分区域瘤细胞围绕血管形成血管外皮瘤样结构(图2).免疫组化:AEl/AE3和CK7少许局灶(+),EMA少许弱(+),Vim弥漫(+),BCI-2弥漫(+),CD99少许局灶(+),CK20(—),TTF-1(—),CD34(—),Des(—),SMA(—),S-100(—).病理诊断为左肺下叶滑膜肉瘤.