目的:探讨星状神经节阻滞(stellate ganglion block，SGB)对创伤后应激障碍(post-traumatic stress disorder，PTSD)模型小鼠条件性恐惧记忆的调控作用及其机制。方法:选取8～9周龄SPF级雄性C57BL/6J小鼠，根据随机数字表法分组，并完成以下实验：(1)32只小鼠分为PTSD组、PTSD＋七氟烷组(Sev组)、PTSD＋生理盐水组(NS组)、PTSD＋SGB组(SGB组)，每组8只。采用条件性恐惧实验建立PTSD模型，检测4组小鼠的恐惧记忆；(2)取3只小鼠，采用伪狂犬病病毒(pseudorabies virus，PRV)逆行示踪观察星状神经节(stellate ganglion，SG)到脑内的神经投射；(3)取24只小鼠，分为空白对照(negative control，NC组)、Sev组、NS组、SGB组，每组6只，采用免疫荧光染色观察蓝斑核(locus coeruleus，LC)去甲肾上腺素(norepinephrine，NE)能神经元(LC NE)中c-Fos的表达；(4)取3只小鼠，采用霍乱毒素B亚基(cholera toxin subunit B，CTB)逆行示踪LC到基底外侧杏仁核(basolateral amygdala，BLA)的神经投射；(5)使用化学遗传学和光遗传学方法，借助病毒载体增强神经元活性，观察LC NE-BLA神经环路的化学或光遗传学激活对小鼠恐惧记忆的影响。采用GraphPad Prism 8.0对数据进行单因素方差分析。 结果:(1)造模后，NS组小鼠在测试阶段僵立时间百分比[(59.83±6.31)%]与PTSD组[(62.21±7.90)%]和Sev组[(63.61±8.48)%]相比均差异无统计学意义(均 P>0.05)，SGB组小鼠僵立时间百分比[(47.78±7.02)%]低于NS组( P<0.05)。(2)SG注射PRV病毒示踪结合免疫荧光结果显示，LC NE神经元投射至SG。(3)免疫荧光染色检测小鼠LC NE神经元活动性，结果显示与NC组[(5.52±2.70)%]相比，NS组[(16.75±3.44)%]和Sev组[(14.90±2.73)%]小鼠LC NE神经元中c-Fos表达均明显较高(均 P<0.01)，SGB组小鼠c-Fos表达[(10.90±3.29)%]较NS组低( P<0.05)。(4)CTB逆行追踪结果显示，LC神经元投射到BLA。(5)SGB小鼠经化学遗传激活后，其僵立时间百分比高于激活前[(67.02±9.49)%，(45.97±7.15)%] ( P<0.01)；SGB组小鼠经光遗传学激活后，小鼠的僵立时间百分比也明显高于激活前[(77.37±11.66)%，(47.76±9.63)%] ( P<0.001)。 结论:SGB可以有效降低PTSD模型小鼠的恐惧记忆，并降低了小鼠LC NE神经元活动性，这可能是通过抑制LC NE-BLA神经环路机制实现的。

伪狂犬病毒（PRV）是一种猪疱疹病毒，可感染多种动物，其中猪是PRV的天然宿主。PRV自发现以来已在全球范围内传播，对养猪业造成重大经济损失。近年来，人感染PRV的病例屡有报道，提示PRV存在跨种属感染人的风险。随着对PRV病原特征的进一步分析和对PRV致病机制的深入了解，避免PRV变成人类传染病成为当前研究和防控工作重点。为了解PRV变异特征，本研究从PRV变异特征、流行特征方面综述了最新研究进展，以期为更好地开展相关防控工作提供依据。

目的:为探究PRV-2022毒株gD蛋白不同突变对与Nectin-1受体结合的影响。方法:通过PCR、RT-qPCR和基因测序技术对PRV-2022毒株进行鉴定，利用生物信息学方法对PRV-2022毒株gD基因进行遗传进化分析。体外构建PRV-2022毒株gD蛋白胞外域第69位和第82位氨基酸突变的重组表达质粒并表达纯化，通过His-pull down和生物层干涉技术比较了重组gD蛋白不同突变与Nectin-1受体的结合能力。结果:从伪狂犬病毒PRV-2022毒株中调取gD基因，通过遗传进化分析发现PRV-2022毒株与2011年之前分离的毒株分属于同一个分支，遗传距离较近。成功构建含有A69V和S82N氨基酸突变的gD蛋白胞外域表达质粒，表达纯化得到重组PRV gD胞外域蛋白，比较发现gD-69、gD-82、gD-2022、gD-Bartha蛋白均能与Nectin-1相互作用。相对于PRV经典疫苗株Bartha，gD蛋白第69位和第82位氨基酸双突变后与人Nectin-1亲和力最高，而无论单独任一突变位点都使gD蛋白与Nectin-1的亲和力降低。结论:PRV的gD蛋白存在A69V和S82N突变时明显影响与人Nectin-1受体结合能力且同时突变时与人Nectin-1亲和力最高。

本刊2024年第4期报道专题为中枢神经系统感染性疾病,重点内容包括:新时代感染神经病学及其学科建设;人类伪狂犬病毒感染性脑炎诊断与治疗进展;新疆维吾尔自治区感染相关性自身免疫性脑炎临床特征分析;中枢神经系统奴隶卡菌感染影像学特征分析;伴脑膜炎和(或)脑炎的Vogt-小柳-原田综合征临床特征分析;隐球菌性脑膜炎预后不良危险因素分析及列线图预测模型构建;新型冠状病毒相关副感染性脑病三例;颅内肺炎链球菌感染两例;中枢神经系统曲霉菌感染一例;重症发热伴血小板减少综合征脑炎一例

病毒载体是当前神经科学研究的重要工具与手段.本综述重点介绍神经科学研究中较为常用的重组腺相关病毒、慢病毒、狂犬病病毒、伪狂犬病病毒、单纯疱疹病毒、犬腺病毒、水泡性口角炎病毒等7种病毒载体的研究工作,通过举例解析其在神经通路标记、目的基因过表达/敲低/敲除调控、光遗传与化学遗传操纵以及基因治疗等方面的应用策略及验证方法,旨在为神经科学研究者遴选病毒载体提供思路与依据.

目的 对静注人免疫球蛋白(intravenous human immunoglobulin,IVIG)新生产工艺的病毒灭活/去除效果进行验证及评估.方法 选择4种脂包膜病毒[人免疫缺陷综合征病毒(human immunodeficiency virus,HIV)、伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)、辛德毕斯病毒(Sindbis virus,SV)和水疱性口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)]及非脂包膜病毒[猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)]作为验证病毒,在缩小的生产规模条件下考察辛酸钠沉淀/深层过滤、低pH孵放和纳米膜过滤步骤对一种或几种指示病毒的灭活/去除能力.结果 辛酸钠沉淀/深层过滤步骤可灭活/去除PPV 1.88 Log;低pH孵放对HIV、PRV、SV和VSV的灭活效果最低分别为≥5.22、≥4.26、≥6.56和≥5.69 Log;Bio EX纳米膜可去除PPV达4 Log以上.结论 IVIG新生产工艺的病毒灭活/去除效果合格,可有效灭活/去除未知的、新出现的病原体.

为查明贵州省遵义地区某规模化养殖场猪只发生急性死亡的病因,以及明确病原主要毒力基因的分子特征.本试验采用PCR技术、细胞接种试验、动物试验及透射电子显微镜观察等方法进行病原的分离鉴定,并对该病原的主要毒力基因进行克隆、测序及生物信息学分析.结果显示:PCR检测可扩增出PRV特异性核酸阳性条带,接种Vero细胞后可见明显CPE现象,在透射电子显微镜下可见囊泡中呈圆形、160 nm左右的成熟病毒粒子,胞核中可见病毒包涵体和实心、空心2种无囊膜病毒粒子;接种健康猪可引起神经症状,最后麻痹死亡;通过生物信息学分析显示该毒株的gE、gC、gD及TK基因序列均与参考毒株中湖北HNX株和河南HN1201株相对应的核苷酸同源性最高,且在gE基因的48位和496位都有1个天冬氨酸(Asp)的插入;根据gE、gC、gD及TK基因序列的遗传进化树结果显示本次分离毒株与2011年以后所分离鉴定的变异毒株属同一分支.说明本试验成功分离鉴定一株猪伪狂犬病病毒变异毒株,以期为贵州省猪伪狂犬病病毒的流行及变异提供一些参考.

目的 分析狂犬病暴露后免疫失败个案,探讨免疫失败的原因.方法 收集整理安徽省2005-2016年70例狂犬病暴露后免疫失败个案资料,使用Epi Data3.1软件录入数据,用SPSS 22.0软件对数据进行统计分析.结果 65.71％病例暴露后均能在24 h内赴医疗机构进行伤口的冲洗和消毒.81.43％的病例未全程接种疫苗,其原因主要是存在侥幸心理,不愿继续接种疫苗,抗血清使用率2.86％.48.57％的病例在非暴露后门诊进行处置.潜伏期中位数40 d(最短9d,最长10.5年),暴露于头颈部的病例潜伏期较短,不同咬伤部位之间的差异有统计学意义(x2 =25.01,P＜0.01).结论 建立狂犬病暴露后补偿机制,规范狂犬病疫苗流通渠道,打击非法及伪劣产品,加强狂犬病暴露后处置门诊医疗人员的技能培训,提高公众知信行,是预防人间狂犬病暴露后免疫失败的关键.

研究伪狂犬病毒UL54蛋白对I型干扰素表达的作用及机制, 为阐明伪狂犬病毒致病机制提供基础.构建表达UL54的真核质粒, 采用双荧光素酶报告基因检测系统, 检测UL54对IFN-β及其信号通路分子IRF3和NF-κB启动子活性的影响, 并测定UL54对RIGI、TBK1、IRF3和IKKε诱导IFN-β表达的影响;免疫共沉淀方法检测UL54与IRF3的相互作用.构建UL54截短基因表达载体, 用双荧光素酶报告基因检测系统和ELISA方法检测UL54截短基因对IFN-β启动子活性的影响.构建了pCDH-UL54和8个UL54截短基因真核表达载体.UL54显著抑制IFN-β和IRF3启动子活性, 对RIGI、TBK1、IRF3、IKKε介导的IFN-β有抑制作用, 免疫共沉淀方法检测证明其与IRF3存在互作.UL54的1146aa、74361aa和84361aa截短体仍抑制IFN-β启动子活性, 但第94aa后的其他截短体基因均丧失该抑制作用.PRV UL54通过与IRF3互作抑制IFN-β启动子活性, UL54第8494位氨基酸是其抑制IFN-β表达的关键功能区域.

伪狂犬病毒引起的伪狂犬病是一种常见的动物传染病.伪狂犬病毒可诱导感染的宿主产生细胞、体液和黏膜免疫应答,可通过分子生物学技术改造为理想的疫苗载体,从而表达寄生虫、细菌和病毒的多种蛋白.这些病原体包括刚地弓形虫、日本血吸虫、马尔他布鲁菌、猪园环病毒Ⅱ型、猪细小病毒、日本脑炎病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、口蹄疫病毒、猪流感病毒、狂犬病毒和犬瘟热病毒等,本文拟就这方面的研制现状进行综述.