目的:探讨星状神经节阻滞(stellate ganglion block，SGB)对创伤后应激障碍(post-traumatic stress disorder，PTSD)模型小鼠条件性恐惧记忆的调控作用及其机制。方法:选取8～9周龄SPF级雄性C57BL/6J小鼠，根据随机数字表法分组，并完成以下实验：(1)32只小鼠分为PTSD组、PTSD＋七氟烷组(Sev组)、PTSD＋生理盐水组(NS组)、PTSD＋SGB组(SGB组)，每组8只。采用条件性恐惧实验建立PTSD模型，检测4组小鼠的恐惧记忆；(2)取3只小鼠，采用伪狂犬病病毒(pseudorabies virus，PRV)逆行示踪观察星状神经节(stellate ganglion，SG)到脑内的神经投射；(3)取24只小鼠，分为空白对照(negative control，NC组)、Sev组、NS组、SGB组，每组6只，采用免疫荧光染色观察蓝斑核(locus coeruleus，LC)去甲肾上腺素(norepinephrine，NE)能神经元(LC NE)中c-Fos的表达；(4)取3只小鼠，采用霍乱毒素B亚基(cholera toxin subunit B，CTB)逆行示踪LC到基底外侧杏仁核(basolateral amygdala，BLA)的神经投射；(5)使用化学遗传学和光遗传学方法，借助病毒载体增强神经元活性，观察LC NE-BLA神经环路的化学或光遗传学激活对小鼠恐惧记忆的影响。采用GraphPad Prism 8.0对数据进行单因素方差分析。 结果:(1)造模后，NS组小鼠在测试阶段僵立时间百分比[(59.83±6.31)%]与PTSD组[(62.21±7.90)%]和Sev组[(63.61±8.48)%]相比均差异无统计学意义(均 P>0.05)，SGB组小鼠僵立时间百分比[(47.78±7.02)%]低于NS组( P<0.05)。(2)SG注射PRV病毒示踪结合免疫荧光结果显示，LC NE神经元投射至SG。(3)免疫荧光染色检测小鼠LC NE神经元活动性，结果显示与NC组[(5.52±2.70)%]相比，NS组[(16.75±3.44)%]和Sev组[(14.90±2.73)%]小鼠LC NE神经元中c-Fos表达均明显较高(均 P<0.01)，SGB组小鼠c-Fos表达[(10.90±3.29)%]较NS组低( P<0.05)。(4)CTB逆行追踪结果显示，LC神经元投射到BLA。(5)SGB小鼠经化学遗传激活后，其僵立时间百分比高于激活前[(67.02±9.49)%，(45.97±7.15)%] ( P<0.01)；SGB组小鼠经光遗传学激活后，小鼠的僵立时间百分比也明显高于激活前[(77.37±11.66)%，(47.76±9.63)%] ( P<0.001)。 结论:SGB可以有效降低PTSD模型小鼠的恐惧记忆，并降低了小鼠LC NE神经元活动性，这可能是通过抑制LC NE-BLA神经环路机制实现的。

目的:研究中枢蓝斑区促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)系统在IBS中的作用，探索影响其改变的分子机制。方法:采用母婴分离联合出生后复合应激构建大鼠IBS模型，后采用脑核团微取样的方法获得大鼠蓝斑区的组织样本。应用实时荧光定量PCR技术检测对照组和IBS组大鼠蓝斑核内细胞癌基因 Fos( c- Fos)，以及 CRH和其相应受体促肾上腺皮质激素释放激素受体( CRHR)1、 CRHR2的mRNA表达；同时检测DNA甲基转移酶( DNMT)1、 DNMT3a和 DNMT3b的mRNA表达；采用蛋白质印迹法检测组蛋白甲基转移酶——ASH2样蛋白(ASH2L)，以及SET核癌基因和MYND域2蛋白(SMYD2)的表达。统计学分析采用 t检验。 结果:IBS组的直肠充气压低于对照组[(69.82±5.47) mmHg比(86.86±5.98) mmHg(1 mmHg＝0.133 kPa)]， c- Fos基因的mRNA水平较对照组升高(2.11±0.44比1.00±0.19)， CRH的mRNA水平较对照组升高(1.99±0.35比1.00±0.13)，SMYD2的蛋白表达水平较对照组上调(1.04±0.21比0.61±0.12)，差异均有统计学意义( t＝6.215、2.321、2.797、4.451， P均<0.05)。IBS组大鼠 CRHR1、 CRHR2、 DNMT1、 DNMT3a、 DNMT3b的mRNA水平以及ASH2L的表达与对照组比较(分别为0.96±0.13比1.00±0.26、1.35±0.63比1.00±0.43、1.40±0.61比1.00±0.19、1.39±0.58比1.00±0.21、1.45±0.71比1.00±0.39和0.80±0.19比1.05±0.26)，差异均无统计学意义( P均>0.05)。 结论:母婴分离联合出生后复合应激通过影响蓝斑核内 Crh基因的转录进而造成CRH系统和去甲肾上腺能系统应激调控网络的激活，导致大鼠内脏敏感性增加。 Crh基因转录异常可能与SMYD2介导的组蛋白H3K36的甲基化有密切关系，而与DNA的甲基化修饰无关。

全身麻醉药(以下简称全麻药)的主要药理效应包括：可逆性的意识消失、镇痛、遗忘以及肌松作用，其中意识消失是其最具特征性的表现。迄今为止，全麻药通过何种机制介导意识消失与恢复仍不明确。近年来，多项研究从神经网络调控理论出发以期阐明全身麻醉的调控靶点，发现蓝斑核 [1]、伏隔核 [2]、中缝背核 [3]、外侧下丘脑 [4]等核团均参与全身麻醉的过程，运用光遗传学、化学遗传学等方法调控核团内特定类型的神经元会影响麻醉诱导时间和麻醉苏醒时间，并伴有皮层脑电的同步变化。然而，全身麻醉下通过兴奋或抑制某单个核团，并不能呈现完整的意识变化，提示全身麻醉致意识改变可能是神经通路共同参与调控的结果。因此，探索全麻药对不同神经通路的具体作用可能有助于解开全身麻醉药致意识改变的作用机制。

目的:观察百草枯（PQ）诱导的帕金森病（PD）样小鼠脑干蓝斑核（LC）损伤的动态变化。方法:于2019年10月，将36只雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为染毒组和对照组，各18只。染毒组小鼠给予腹腔注射15 mg/kg PQ，对照组小鼠腹腔注射等容量0.9%生理盐水，每周2次，连续8周。分别于4周、6周、8周末次给药后，观察各组小鼠的神经行为学（爬杆、游泳、旷场、悬尾、高架十字迷宫及水迷宫实验）变化，评估小鼠的运动能力、情绪和认知功能变化。取小鼠脑组织，苏木素-伊红（HE）染色观察LC区病理变化；尼氏染色检测LC区神经元尼氏体数量变化；免疫组织化学（IHC）染色检测黑质（SN）区与LC区神经元标志物神经元核抗原（NeuN），多巴胺（DA）能神经元和去甲肾上腺素（NE）能神经元标志物酪氨酸羟化酶（TH），以及α突触核蛋白（α-syn）表达情况；蛋白免疫印迹（Western blotting）法检测中脑及脑干NeuN、TH、α-syn蛋白表达水平；TUNEL染色检测LC区神经元凋亡情况。结果:与PQ染毒第4周组比较，随着染毒时间的进展，PQ染毒组小鼠爬杆时间、游泳不动时间逐渐增加，高架十字迷宫实验开放臂停留时间比和水迷宫实验小鼠穿越平台次数、平台象限停留时间逐渐减少（ P<0.05）。HE与尼氏染色结果显示，随着染毒时间的进展，染毒组小鼠LC区神经元逐渐排列疏松，细胞核深染，胞质发生固缩，尼氏体数目逐渐减少（ P<0.05）。IHC结果显示，随着染毒时间的进展，染毒组小鼠SN区与LC区神经元NeuN、TH阳性细胞数目逐渐减少，α-syn阳性表达量逐渐增多（ P<0.05）。Western blotting结果显示，随着染毒时间的进展，染毒组小鼠中脑和脑干NeuN、TH表达水平逐渐降低，α-syn寡聚体表达水平逐渐升高（ P<0.05）。TUNEL染色显示，随着染毒时间的进展，染毒组小鼠LC区神经元凋亡率逐渐升高（ P<0.05）。 结论:PQ诱导PD样小鼠LC区出现渐进性损伤，可能是LC区出现病理性α-syn的异常聚集所引起的。

心律失常是心血管系统的多发病,恶性心律失常更是导致心源性猝死的高危因素.针刺治疗具有简易、便廉、安全与有效的特点,不仅能控制心律失常,而且副作用小,在临床上能作为心律失常的辅助治疗手段.本研究通过梳理国内外针刺防治心律失常的相关研究,总结出针刺能通过调节神经活动、抑制钙超载、抑制细胞自噬和凋亡、抑制炎症反应和调节内分泌等多种途径对抗心律失常,其相关机制与下丘脑外侧区(LHA)-小脑顶核(FN)神经环路、蓝斑核(LC)、血管活性肠肽(VIP)、k-阿片受体(k-OR)信号通路、线粒体活性氧(ROS)升高与磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路、调控炎症基因和α1A-肾上腺素能受体(α1A-AR)等有关,期望为针刺治疗心律失常的作用机制提供新的视角.

右美托咪定是一种α2肾上腺素受体激动剂,具有镇静、镇痛、抗焦虑、抗交感神经的作用,目前已经成为临床麻醉和重症监护室广泛应用的药物.相比于麻醉科其他药物,右美托咪定没有明显的呼吸抑制作用且没有明显的血流动力学改变,且与其他麻醉药配伍可明显减少镇静镇痛药物的用量.在临床应用中发现,右美托咪定可以介导可唤醒的镇静效应.传统认为右美托咪定通过α2肾上腺素受体发挥作用,可以发挥降低血压、舒张血管和降低心率的作用,但对于其如何影响脑内神经环路尚不清楚.近年来关于右美托咪定作用机制的研究逐渐增多,证实下丘脑腹外侧视前区(ventrolateral preoptic nucleus,VLPO)、蓝斑核(locus coeruleus,LC)、中脑腹侧被盖区(ventral tegmental area,VTA)等核团参与其介导的镇静作用,背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)、颈上神经节(superior cervical ganglion,SCG)参与其介导的镇痛作用,下丘脑视前区(preoptic area,PO)和下丘脑室旁核(paraventricular nucleus,PVN)参与其介导的体温和水电解质平衡的变化,为理解右美托咪定在中枢神经系统的作用机制提供了新的方向.

目的 在logistic回归模型下探讨不同灰质核团弥散张量成像(diffusion-tensor imaging,DTI)对帕金森病前驱期(prodromal Parkinson's disease,pPD)的诊断与病情评估的价值.方法 收集20例pPD患者作为病例组(pPD组),同时选取28例健康人群作为对照组(HC组),所有病例均行MRI平扫及DTI检查,运用DSIstudio 软件对所有被检者的DTI图像进行后处理,自动提取pPD与HC组患者基底节、中脑、脑干多个相关灰质核团各参数(FA、MD、AD、RD)值,进行统计学对比分析,采用logistic回归分析,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析比较各参数单独诊断及联合诊断对两组患者的诊断效能;并且对各组参数与简易智力状态检查量表(mini-mental state examination,MMSE)评分进行相关性分析.结果 pPD组与HC组基底节、中脑、脑干多个相关灰质核团、多个参数差异有统计学意义(P<0.05),在logistic 回归方程模型下,最佳阈值为0.63时,诊断pPD的AUC为0.964,鉴别诊断两组的敏感度、特异度分别为:85.0%、100%(P<0.001),联合诊断效能最高.pPD组患者蓝斑核多个DTI参数与MMSE评分存在相关性(P<0.05),以蓝斑核FA值(r =-0.646,P = 0.002)相关系数最高.结论 pPD基底节、中脑、脑干多个相关灰质核团损伤广泛且程度不同,蓝斑核AD值对pPD具有定量诊断价值,蓝斑核FA值可以作为pPD患者认知功能障碍严重程度的特征性敏感指标,运用logistic回归模型下DTI多参数联合诊断可有效提高诊断效能,为pPD的早期诊断,早期干预治疗提供有价值的参考.

大约50%以上的阿尔茨海默病(AD)患者伴有明显的睡眠障碍,同时睡眠障碍与认知、学习及记忆功能下降有关,增加AD的发生风险并促进AD进展.AD与睡眠障碍存在双向调节关系,睡眠障碍可通过促进Aβ沉积、tau蛋白聚集、蓝斑核—去甲肾上腺素能系统功能失调、食欲素能系统紊乱、氧化应激、神经炎症、谷氨酸能和γ-氨基丁酸能系统功能失调来增加AD发病风险;同时,AD也可通过损害睡眠调节相关脑区或改变睡眠神经通路导致睡眠障碍;而蓝斑核—去甲肾上腺素能系统功能失调对AD病理和睡眠障碍同时具有促进作用.睡眠障碍与AD相互作用,形成恶性循环,深入探讨二者相互作用的分子机制有助于预测AD发病风险、控制疾病进展.

目的 可卡因成瘾即使在戒断后,接触到药物相关环境后依然会有强烈的觅药行为.在众多环境因素中,视觉线索是直接引起成瘾患者复吸的主要因素,阐明视觉线索在可卡因成瘾中的机制对成瘾治疗具有重要的意义.方法 使用不同的线索(视觉线索和触觉线索)进行条件位置偏好(CPP)训练,并在训练的环境下进行CPP检测,使用在体光纤钙信号记录技术、化学遗传学技术、神经环路示踪技术研究分别抑制或激活SC-LC投射,检测其对不同视觉线索条件下可卡因诱导小鼠CPP的影响.结果 在不同的线索条件下进行可卡因诱导的CPP训练,发现可卡因组小鼠训练后CPP得分最高,视觉线索组小鼠CPP得分与可卡因组相比无明显差异;触觉线索组小鼠训练后CPP得分显著低于可卡因组和视觉线索组小鼠.用体光纤钙信号记录技术观察到,CPP训练后小鼠SC脑区CaMKⅡα阳性神经元可被训练使用的视觉线索激活.化学遗传学技术抑制SC脑区CaMKⅡα阳性神经元降低可卡因组小鼠CPP得分.光遗传学技术激活SC-LC投射,可逆转视觉线索改变所致可卡因组小鼠CPP得分下降.化学遗传学技术抑制SC投射到LC的神经元降低可卡因组小鼠的CPP得分,化学遗传学技术激活SC投射到LC的神经元,可逆转视觉线索改变引起的可卡因组小鼠CPP得分下降.结论 视觉线索是可卡因诱导小鼠CPP形成的关键因素,仅在与可卡因训练环境相同的视觉线索暴露下,小鼠表现出位置偏好.SC-LC投射介导视觉线索引起的可卡因成瘾记忆的调节.

目的:探讨中枢注射抗Orexin抗体对禁食大鼠摄食的抑制作用.方法:采用免疫组织化学法和蛋白质免疫印迹分析法,对Orexin抗体的特异性进行了检测,分析Orexin阳性神经元和阳性神经纤维在大脑中的分布.给予24 h禁食大鼠中枢注射抗Orexin抗体,计算其对大鼠食物摄入量的影响.结果:蛋白质免疫印迹分析显示,Orexin抗体能够检测到合成的Orexin-A.免疫组织化学分析显示,Orexin阳性神经元存在于外侧下丘脑区域和穹窿周核,Orexin阳性神经纤维大量投射至弓状核、下丘脑室周核和下丘脑室旁核、菱形丘脑核、丘脑室旁核、缰内侧核和纹质丘脑、中脑的中央灰质区、蓝斑核和中缝核、脑桥和髓质的网状结构、对疑核和迷走神经复合体.与注射羊血清相比,给予45 μg/10 μL抗Orexin抗体侧脑室注射则抑制了大鼠的食物摄入量(P＜0.05).高剂量抗Orexin抗体能显著地抑制大鼠摄食,并且呈剂量依赖关系(P＜0.05).结论:中枢注射抗Orexin抗体对禁食大鼠摄食具有抑制作用,并呈剂量依赖关系.