目的 观察补肾健脾方对环磷酰胺诱导的卵巢储备功能减退大鼠模型卵巢功能的影响,并基于肿瘤坏死因子诱导相关细胞凋亡途径探讨补肾健脾方调控大鼠卵巢储备功能减退的机制研究.方法 60只动情周期正常的健康雌性SD大鼠,随机分成正常组 10只和造模组 50 只,造模组采用环磷酰胺 75 mg/kg单次腹腔注射造模.造模成功的大鼠再随机分为模型组、西药组[戊酸雌二醇 0.103 mg/(kg·d)+黄体酮胶囊 2.575 mg/(kg·d)]、补肾健脾方低剂量组[3.21 g/(kg·d)]、补肾健脾方中剂量组[6.43 g/(kg·d)]、补肾健脾方高剂量组[12.85 g/(kg·d)],每组 10只.正常组及模型组均予等体积蒸馏水灌胃,每组干预 1次/d,干预 14 d.检测各组大鼠动情周期、体质量、卵巢脏器指数、子宫脏器指数;ELISA法检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)含量;免疫荧光法检测大鼠卵巢颗粒细胞内B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2 相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)蛋白表达情况;HE染色检测卵巢组织病理情况;Western blot法检测卵巢磷酸化蛋白激酶B(posphorylated-proteinkinase B,p-AKT)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mammalian target of rapamycin,p-mTOR)、自噬蛋白苄氯素-1(Beclin-1)表达情况.结果 与正常组比较,模型组大鼠动情周期紊乱,可见卵巢结构紊乱、各级卵泡数量不同程度的减少、未见成熟卵泡,卵巢间质中见到明显炎细胞浸润;大鼠体质量、卵巢脏器指数和子宫脏器指数无明显变化;血清TNF-α、IFN-γ水平升高(P<0.05,P<0.01);卵巢颗粒细胞Bcl-2、Bax、Beclin-1 蛋白表达水平升高(P<0.05,P<0.01),p-AKT、p-mTOR蛋白表达水平降低(P<0.01).与模型组比较,西药组及补肾健脾方低、中剂量组血清TNF-α、IFN-γ水平降低(P<0.05,P<0.01);补肾健脾方中剂量组Bax蛋白表达水平降低(P<0.05);补肾健脾方高剂量组Bcl-2 蛋白阳性表达升高(P<0.05);西药组、补肾健脾方低剂量组Beclin-1 蛋白表达水平降低(P<0.05,P<0.01),p-AKT、p-mTOR蛋白表达水平升高(P<0.01).与西药组比较,补肾健脾方高剂量组TNF-α水平升高(P<0.01);补肾健脾方低、高剂量组IFN-γ水平降低(P<0.05);补肾健脾方低剂量组Bax蛋白表达水平升高(P<0.05),补肾健脾方中剂量组Bcl-2 蛋白水平表达升高(P<0.05);补肾健脾方中、高剂量组Beclin-1 蛋白表达水平升高(P<0.05,P<0.01),p-AKT、p-mTOR蛋白表达水平降低(P<0.01).结论 补肾健脾方可改善卵巢病理变化、提高卵巢储备功能,其机制可能通过抑制肿瘤坏死因子TNF-α、IFN-γ表达,增强Bcl-2 蛋白表达水平,降低Bax蛋白表达水平,激活mTOR通路抑制大鼠卵巢颗粒细胞的自噬与凋亡,从而改善环磷酰胺造模所致的大鼠卵巢储备功能减退的影响.

糖尿病是对生命健康具有不良影响的代谢障碍性疾病,糖尿病肾病是糖尿病最为常见的并发症之一,炎症因子是发生糖尿病肾病的重要病理基础,"诸转反戾,水液浑浊,皆属于热"理论是《素问·至真要大论篇》中"病机十九条"之一,该文以此理论为基础,探讨炎症因子对糖尿病肾病的病理演变作用."湿热内伤,脾肾失司,精微不固"为发病之本,诸多炎症因子作用于机体导致"阴火炽盛,壮火内生"是糖尿病肾病形成的关键.复方益糖康具有健脾清热、养阴益气、活血化瘀功效,方中各药物的有效成分都具有保护肾脏、防止肾损伤的作用,方中药物组合使用能够通过抑制JAK2/STAT3、NF-κB、MAPK等信号通路,降低肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)、转化生长因子β(transforming growth factor β,TGF-β)等炎症因子的水平,对糖尿病肾病起到良好的治疗作用.

张铁忠教授认为，脾肾不足导致的水谷精微运化失常是高脂血症发病关键环节。肾气不足，脾失健运，可致水谷精微运化失常及转化异常，日久湿痰瘀互结，变证丛生。张教授以益气健脾补肾为基本治法，结合祛湿、降浊、化瘀等治法，创制“荷薤汤”为基础方，药用荷叶、薤白、苍术、白术、党参、制何首乌、决明子、茯苓、泽泻、法半夏、炒山楂、丹参，标本兼顾，常获佳效。

目的:评价健脾化痰汤联合西医常规疗法治疗COPD稳定期肺脾两虚证患者的临床疗效。方法:将2017年2月－2018年2月符合本院入选标准的102例患者，按随机数字表法分为2组，每组51例。对照组采用西药常规疗法治疗，研究组在对照组基础上加服健脾化痰汤。2组均连续治疗3个月。分别于治疗前后从咳嗽、咳痰、胸闷、喘息、乏力、大便异常、纳食异常7个方面进行中医症状评分，采用肺功能仪检测FEV1、FVC，计算FEV1/FVC比值，采用ELISA法检测痰液中TNF-α、IL-6及IL-8水平，评价临床疗效。结果:研究组总有效率为82.4%(42/51)、对照组为62.8%(32/51)，2组比较差异有统计学意义( χ2＝4.923， P＝0.027)。研究组治疗后咳嗽、咳痰、胸闷、喘息、乏力、大便异常及纳食异常评分均低于对照组( t值分别为8.705、6.969、9.844、9.140、15.540、11.941、5.968， P值均<0.01)。治疗后，研究组FEV1[(1.97±0.50)L比(1.58±0.43)L， t＝4.223]、FVC[(2.57±0.47)L比(2.13±0.45)L， t＝4.829]、FEV1/FVC[(76.65±4.11)比(74.18±4.33)， t＝2.955]均高于对照组( P<0.01)。研究组治疗后痰液中TNF-α、IL-6、IL-8水平低于对照组( t值分别为3.917、5.598、8.846， P值均<0.01)。 结论:健脾化痰汤联合西医常规疗法可明显减轻COPD稳定期肺脾两虚证患者的临床症状，改善肺功能，抑制气道炎症反应，且安全性较好。

目的:探讨高压氧（HBO）辅助健脾解毒方处理对体外培养人结肠癌SW620细胞恶性生物学行为的影响及其作用机制。方法:体外培养人结肠癌SW620细胞完成后，按照实验设计分成4组：对照组、HBO组、健脾解毒方组和联合组。对照组SW620细胞不作如何处理，HBO组予以0.25 MPa HBO处理，健脾解毒方组予以1.50 mg/ml健脾解毒方制剂处理，联合组予以1.50 mg/ml健脾解毒方剂处理后再予以0.25 MPa HBO处理。首先在200倍倒置显微镜下观察SW620细胞形态的变化，采用MTT法检测SW620细胞的增殖能力，利用Hoechst 33258染色法检测SW620细胞凋亡情况，划痕实验检测SW620细胞迁移能力，Western blotting实验检测SW620细胞内凋亡蛋白的表达水平。结果:处理48 h后，倒置显微镜下发现健脾解毒方组SW620细胞密度轻度减少，悬浮细胞稍微增多；联合组SW620细胞密度明显减少，部分细胞皱缩变圆，悬浮细胞明显增多（ P<0.05）。Hoechst 33258荧光染色发现对照组和HBO组SW620细胞核形态和数量变化不明显；健脾解毒方组SW620细胞核呈致密浓染，形态异常，颜色发白，出现部分细胞凋亡；联合组SW620细胞核更加致密浓染，凋亡细胞明显增多（ P<0.01）；健脾解毒方组和联合组SW620细胞迁移能力受到明显抑制，联合组划痕愈合率明显高于健脾解毒方组（35.4% vs.48.9%， P<0.05）；对照组、HBO组、健脾解毒方组SW620细胞G1期、S期和G2期变化不明显（ P>0.05）；而联合组SW620细胞G1期明显降低，S期明显增高（ P<0.05），而G2期变化不明显（ P>0.05）；与对照组、健脾解毒方组、HBO组比较，联合组SW620细胞内凋亡蛋白Bax、caspase-3、Cytochrome C表达水平明显升高，Bcl-2蛋白表达明显降低（ P<0.01）。 结论:HBO辅助健脾解毒方处理对SW620 细胞具有抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡及抑制细胞迁移的作用，其作用机制可能与下调Bcl-2蛋白表达，提高Bax、caspase-3、Cytochrome C蛋白表达水平有关。

目的:研究健脾清化方对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）模型小鼠肝细胞凋亡的影响，探讨其作用机制。方法:选择29只C57小鼠予60%高脂饲料喂养16周，制备NAFLD模型，另设6只小鼠为正常组，予普通饲料喂养。造模成功后，选择体重较大的12只小鼠按随机数字表法分为中药组和模型组，同时继续喂养高脂饲料。中药组灌胃健脾清化方20.961 g/kg，正常组和模型组灌胃等体积的蒸馏水，1次/d，连续干预4周。采用ELISA法检测血清GOT、GPT水平，油红O染色检测肝组织脂质沉积情况，TUNEL荧光染色检测肝细胞凋亡情况，采用Western blot检测肝组织cleaved Caspase-3、Caspase-3、Bax、Bcl-2及JNK、p-JNK蛋白表达。结果:与模型组比较，中药组小鼠体重降低（ P<0.05），血清GPT水平降低（ P<0.05），肝组织脂质沉积及凋亡细胞减少，肝组织cleaved Caspase-3/Caspase-3比值、p-JNK/JNK比值及Bax蛋白表达降低（ P<0.05），Bcl-2蛋白表达升高（ P<0.05）。 结论:健脾清化方可抑制JNK蛋白磷酸化，减少NAFLD小鼠肝细胞凋亡，从而可能延缓NAFLD向肝硬化和肝癌的发展进程。

“四位一体”是基于“性、位、势、证”四维角度的研究思路，有助于多维度、立体化地辨识分析经方。慢性心力衰竭（CHF）病机为心气心阳亏虚、三焦气化失司日久，后期由虚向实进展可见虚实夹杂。茯苓桂枝白术甘草汤（简称“苓桂术甘汤”）通过“性、位、势、证”四位发挥作用：方性为辛甘而温，淡甘兼苦，辛甘温以化气利水、扶阳涤饮，淡苦以渗水燥湿、通利水道；方位为心、脾、三焦，可鼓舞心阳、健脾蠲饮、通调三焦水道；方势为上下并行、内外兼修、通上利下、宣外补内，则三焦水道借势通达；方证为心阳亏虚、水饮泛滥痰饮证，治疗水气上冲性心脏病应用为多。三焦失司与CHF反复发作互为因果，苓桂术甘汤可暖三焦气化之火、通三焦气化之道，针对CHF的全身性水液潴留发挥作用；其药理作用有抗炎、抗血小板聚集、调节心肌细胞膜离子通道、抗缺血再灌注损伤、调控血管舒缩等。从“四位一体”的角度解构苓桂术甘汤，并结合“三焦气化”理论探讨苓桂术甘汤治疗CHF机制，对重新焕发经方生命力及精准有效应用经方具有重要意义。

目的:探讨补肾健脾开心方对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease，AD)大鼠学习记忆能力的影响及其作用机制。方法:72只雄性SPF级SD大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、补肾组、健脾组、开心组、补肾健脾开心组，每组12只。采用D-半乳糖注射制备AD大鼠模型，1次/d，持续6周。补肾组(3.60 g·kg －1·d －1)、健脾组(4.05 g·kg －1·d －1)、开心组(2.34 g·kg －1·d －1)、补肾健脾开心组(9.99 g·kg －1·d －1)大鼠分别给予对应剂量的药物灌胃，空白组、模型组大鼠给予等体积0.9%氯化钠溶液，1次/d，连续28 d。采用Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力，免疫组化法检测脑皮质组织磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase，PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B，Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin，mTOR)的表达，RT-PCR技术检测脑皮质组织自噬相关蛋白p62和Beclin的表达。采用SPSS 25.0统计软件进行数据处理，多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD检验。 结果:Morris水迷宫结果显示，6组大鼠的逃避潜伏期、穿越平台次数均差异有统计学意义( F＝368.10，47.43，均 P<0.01)。补肾健脾开心组逃避潜伏期比模型组低[(29.30±1.64) s，(55.58±3.23) s]、跨越平台次数比模型组高[(5.17±0.72)次，(1.50±0.52)次] (均 P<0.01)。补肾组、健脾组、开心组逃避潜伏期均比补肾健脾开心组高(均 P<0.01)，补肾组跨越平台次数比补肾健脾开心组低( P<0.01)。免疫组化结果显示，6组间的PI3K、Akt、mTOR阳性蛋白表达水平均差异有统计学意义( F＝68.52，22.22，31.52，均 P<0.01)。补肾健脾开心组PI3K阳性蛋白表达水平[(0.47±0.15)，(0.57±0.12)]、Akt阳性蛋白表达水平[(0.31±0.02)，(0.38±0.02)] 、mTOR阳性蛋白表达水平[(0.22±0.18)，(0.28±0.11)]均比模型组低(均 P<0.01)。补肾组、健脾组、开心组PI3K阳性蛋白表达水平及mTOR阳性蛋白表达水平均比补肾健脾开心组高(均 P<0.01)，补肾组、开心组Akt阳性蛋白表达水平均比补肾健脾开心组高( P<0.01)。RT-PCR结果显示，各组间的Beclin、p62 mRNA水平均差异有统计学意义( F＝8.79，21.01，均 P<0.01)。补肾健脾开心组Beclin mRNA比模型组高[(0.97±0.07)，(0.64±0.12)]、p62 mRNA比模型组低[(0.98±0.16)，(1.16±0.24)] (均 P<0.01)。补肾组、健脾组、开心组p62 mRNA均比补肾健脾开心组高(均 P<0.05)。 结论:补肾健脾开心方可以改善AD大鼠认知障碍，提高学习记忆能力，其作用机制可能与调控PI3K/Akt/mTOR自噬通路有关，且组方用药优于拆方用药。

目的:研究健脾止动汤对Tourette综合征(Tourette syndrome，TS)模型大鼠自主活动及纹状体内多巴胺(dopamine，DA)突触囊泡蛋白表达的影响。方法:4周龄雄性SD大鼠，采用亚氨基二丙腈腹腔注射法建立TS模型；将造模成功的30只大鼠按照随机数字表法分为模型组、中药组、泰必利组，每组10只，另取体质量相匹配的10只大鼠作为对照组。中药组、泰必利组大鼠分别给予健脾止动汤(1.6 g/100 g)和硫酸泰必利混悬液(2.1 mg/100 g)灌胃干预，对照组和模型组大鼠给予等体积0.9%氯化钠溶液灌胃，1次/d，持续4周。采用自主活动程控仪监测大鼠的自主活动次数，采用ELISA法检测大鼠纹状体DA水平，Western blot技术检测纹状体多巴胺转运蛋白(dopamine transporter，DAT)、Ⅱ型囊泡单胺转运体(vesicular monoamine transporter-2，VMAT2)以及α突触核蛋白(α-synuclein，α-syn)的蛋白表达水平。采用SPSS 25.0软件进行统计分析，多组间比较采用单因素方差分析、非参数检验和重复测量方差分析。结果:4组大鼠自主活动次数比较，时间和组别的交互作用显著( F＝184.354， P<0.001)。灌胃1～4周，模型组大鼠的自主活动次数均高于对照组(均 P<0.05)，中药组和泰必利组大鼠自主活动次数均低于模型组(均 P<0.05)，且中药组和泰必利组在灌胃1～4周的自主活动次数均较造模后减少(均 P<0.05)。Western blot结果显示，4组大鼠纹状体的α-syn( H＝29.098)、DAT( F＝54.632)及VMAT2( H＝18.982)蛋白相对表达量均差异有统计学意义(均 P<0.001)。中药组和泰必利组大鼠α-syn蛋白表达水平均低于模型组[0.39(0.36，0.51)，0.39(0.36，0.50)，0.62(0.50，0.70)](均 P<0.05)；中药组DAT蛋白表达水平高于模型组且低于泰必利组[(0.37±0.06)，(0.26±0.07)，(0.49±0.09)](均 P<0.05)，VMAT2蛋白表达水平与模型组比较差异无统计学意义( P>0.05)。ELISA结果显示，4组大鼠纹状体DA水平差异有统计学意义( F＝75.370， P<0.001)。模型组DA水平高于对照组[(7.65±0.72)ng/L，(3.71±0.59)ng/L； P<0.05]；中药组[(3.92±0.81)ng/L]、泰必利组[(4.40±0.53)ng/L]的DA水平低于模型组(均 P<0.05)，中药组和泰必利组DA水平差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:健脾止动汤可改善TS模型大鼠的抽动症状，其机制可能与抑制α-syn过度释放、提高DAT及VMAT2表达、改善DA突触囊泡循环，从而降低大脑突触间隙内的DA水平有关。

通过梳理中医古籍文献并结合现代相关研究，探讨中医脾肾同治在肌少症治疗中的应用，认为肌少症的病位在筋脉肌肉，主要病变脏腑在脾，与肾密切相关，病机为脾肾虚衰、筋肉失养，治疗应以健脾补肾为主，其作用机制可能与改善线粒体功能、降低炎性细胞因子水平、促进胰岛素分泌、修复肌纤维等有关。