目的 探讨妊娠期糖尿病(GDM)患者血清微小RNA-217(miR-217)和分泌型蛋白Dickkopf-1(DKK1)水平与妊娠结局的关系及对妊娠结局的预测价值.方法 选取2021年4月至2023年4月在大连市妇女儿童医疗中心进行定期产检并分娩的97例GDM患者作为GDM组,选取同期同院91例体检健康孕妇作为对照组.采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测miR-217表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)法对DKK1水平进行检测.采用Logistic回归对影响GDM患者发生不良妊娠结局的独立危险因素进行分析,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-217、DKK1水平对GDM患者发生不良妊娠结局的诊断价值.结果 GDM组血清miR-217、DKK1水平均高于对照组(P＜0.001).GDM组发生妊娠不良结局的比例显著高于对照组(P＜0.05).与妊娠结局良好组相比,妊娠结局不良组miR-217、DKK1、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、空腹血糖、空腹胰岛素及糖化血红蛋白(HbAlc)水平均升高(P＜0.05).血清miR-217、DKK1是影响GDM患者发生不良妊娠结局的独立危险因素(P＜0.05).血清miR-217、DKK1及联合诊断GDM不良妊娠结局的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.841、0.849、0.943,miR-217、DKK1联合诊断效能高于单独检测效能(P=0.027).结论 血清miR-217、DKK1水平的升高与GDM不良妊娠结局有关,且miR-217、DKK1及二者联合对GDM患者发生不良妊娠结局均具有预测价值.

Dickkopf-1（DKK1）是一种分泌型糖蛋白，作为Wnt/β-连环素通路的抑制剂，在胚胎发育、神经发生和突触发生等方面发挥重要作用。脑缺血后，DKK1通过促进神经元凋亡及血脑屏障损伤，抑制神经发生和血管生成，从而加重脑损伤。此外，缺血性卒中患者血清DKK1与不同病期及转归相关。因此，开发以DKK1作为靶点的特异抑制剂，有望应用于缺血性卒中的治疗。

目的:1型糖尿病与2型糖尿病均有骨代谢异常，但发病机制存在差异。硬骨抑素(sclerostin, SOST)、Dickkopf相关蛋白1(Dickkopf-related protein 1, DKK-1)、鸢尾素是新近发现的骨代谢调节因子。本研究拟比较1型糖尿病与2型糖尿病患者血清SOST、DKK-1、鸢尾素水平的差异。方法:本横断面研究纳入2017年至2019年于北京协和医院内分泌科门诊就诊的101例1型糖尿病患者、2014年至2015北京昌平社区2型糖尿病管理项目中经口服葡萄糖耐量试验筛查确诊的55例2型糖尿病患者和59名糖耐量正常受试者。使用酶联免疫吸附测定法测SOST、DKK-1及鸢尾素，并分析其组间差异。结果:本研究女性多于男性，平均年龄49岁。1型糖尿病组较2型糖尿病组病程更长( P<0.001)，HbA 1C更高( P<0.001)，两组间年龄差异无统计学意义。1型糖尿病和2型糖尿病组的血清1型原胶原N端前肽(P1NP)均低于对照组[(8 579±400)pg/mL，(7 268±552)pg/mL对(10 051±618)pg/mL, P＝0.039, P＝0.001]，而1型胶原C端肽交联β降解产物(β-CTX)与对照组相比差异无统计学意义。1型糖尿病和2型糖尿病组SOST均高于对照组[(129.7±6.8)pg/mL，(104.8±6.8)pg/mL对(85.9±5.3)pg/mL, P<0.001, P＝0.030]，1型糖尿病与对照组差异在校正血糖、血脂等因素后失去统计学意义，1型糖尿病组与2型糖尿病组组间SOST差异无统计学意义。1型糖尿病组和2型糖尿病组DKK-1与对照组差异无统计学意义，1型糖尿病组DKK-1较2型糖尿病组更低或倾向于更低。1型糖尿病组鸢尾素高于对照组及2型糖尿病组[(16.6±0.7)ng/mL对(9.6±0.6)ng/mL, (9.8±0.6)ng/mL，均 P<0.001]，2型糖尿病组鸢尾素与对照组差异无统计学意义。 结论:1型糖尿病及2型糖尿病患者成骨指标P1NP受到抑制，破骨指标β-CTX无显著改变。SOST在1型糖尿病及2型糖尿病患者中均升高或呈升高趋势，可能与其成骨抑制相关。而1型糖尿病患者还存在鸢尾素升高，也可能参与其骨转换异常的发生发展。

目的 探讨分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)、分泌型糖蛋白Dickkopf1(DKK1)在口腔颌面部间隙感染患者中的水平及其对预后不良的预测价值.方法 选取2019年1月至2021年12月该院收治的120例口腔颌面部间隙感染患者作为研究对象,根据预后分为预后不良组和预后良好组.病原菌鉴定采用微生物鉴定仪;采用ELISA检测血清SFRP1、DKK1水平;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清SFRP1、DKK1水平对口腔颌面部间隙感染患者预后不良的预测价值;采用多因素Logistic回归分析口腔颌面部间隙感染患者预后不良的影响因素.结果 120例口腔颌面部间隙感染患者共检出50株病原菌,其中排前3位的病原菌依次为溶血性链球菌(40.00％)、大肠埃希菌(26.00％)、金黄色葡萄球菌(22.00％).预后不良组血清SFRP1、DKK1水平均高于预后良好组,差异均有统计学意义(P＜0.05).年龄≥60岁、术后需在重症监护病房(ICU)监护、住院天数≥10 d的口腔颌面部间隙感染患者血清SFRP1、DKK1水平均高于年龄＜60岁、术后无需在ICU监护、住院天数＜10 d的患者,差异均有统计学意义(P＜0.05).ROC曲线分析结果显示,SFRP1、DKK1单独及2项指标联合检测预测口腔颌面部间隙感染患者预后不良的曲线下面积分别为0.788(95％CI:0.706～0.871)、0.773(95％CI:0.691～0.856)、0.872(95％CI:0.808～0.935).多因素 Logistic 回归分析结果显示,血清 SFRP1、DKK1水平升高是口腔颌面部间隙感染预后不良的危险因素(P＜0.05).结论 血清SFRP1、DKK1对口腔颌面部间隙感染患者预后不良有重要预测价值,并且与患者年龄、术后需在IC U监护、住院天数均密切相关.

目的 基于Wnt/β-连环蛋白(β-Catenin)信号通路研究吴门骨密葆方含药血清促进骨髓间充质干细胞成骨分化机制.方法 将大鼠骨髓间充质干细胞为正常血清组、经典诱导剂[间充质干细胞成骨诱导分化培养基(OBM)]组、吴门骨密葆方含药血清低(10g生药/kg)和高剂量(20g生药/kg)组、抑制剂[分泌型蛋白Dickkopf-1(DKK-1),0.1 ng·mL1]组以及吴门骨密葆方含药血清低、高剂量+抑制剂组,成骨诱导分化后干预7d时采用CCK8法检测细胞活力,随后采用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色法和ALP试剂盒检测不同剂量吴门骨密葆方含药血清及加入Wnt/β-Catenin信号通路特异性阻滞剂DKK-1干预的间充质干细胞ALP染色强度和活性,Western Blot测定间充质干细胞Wnt信号蛋白家族 3alpha(Wnt3a)、β-Catenin、糖原合成酶激酶 3β(glycogen synthase kinase 3β,GSK-3β)、破骨细胞抑制因子(osteoprotegerin,OPG)和核因子 κ B 受体活化因子配体(receptor activator ofNF-KB ligand,RANKL)蛋白表达水平.结果 与正常组比较,吴门骨密葆方含药血清干预均可有效促进间充质干细胞增殖(P均＜0.05),吴门骨密葆方含药血清可有效促进间充质干细胞ALP染色的强度和活性(P均＜0.05),以及调控成骨分化相关的Wnt3a、β-Catenin、GSK3β、OPG和RANKL蛋白表达(P均＜0.05),但是这些调控作用均可被DKK-1在一定程度上逆转.结论 吴门骨密葆方含药血清诱导骨髓间充质干细胞的成骨分化,可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路以及影响OPG/RANKL通路而实现.

目的 :研究血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、糖抗原19-9(CA19-9)、糖抗原242(CA242)和分泌型蛋白Dickkopf-1(DKK1)联合检查对早期胰腺癌患者的临床诊断价值.方法:选取胰腺癌患者60例作为病变组,胰腺炎患者60例作为对照组.比较两组血清VEGF、TGF-β1、CA19-9、CA242和DKK1水平,分析不同检查方式诊断胰腺癌的价值,并分析血清VEGF、TGF-β1、CA19-9、CA242、DKK1水平与胰腺癌患者病理特征的关系.结果:病变组及对照组在血清VEGF、TGF-β1、CA19-9、CA242和DKK1水平方面对比,前者高于后者(均P<0.05).血清VEGF、TGF-β1、CA19-9、CA242和DKK1联合检测诊断胰腺癌的灵敏度、特异度、准确度分别为95.00％、91.67％、93.33％,相较于上述各项血清学指标单独检测明显提高(均P<0.05).肿瘤分期为Ⅲ ～ Ⅳ期胰腺癌患者血清VEGF、TGF-β1、CA19-9、CA242、DKK1水平相较于Ⅰ ～ Ⅱ期患者更高(均P<0.05).结论:血清VEGF、TGF-β1、CA19-9、CA242和DKK1联合检查应用于早期胰腺癌的诊断,具有较高的灵敏度、特异度、准确度,有利于临床判断胰腺癌患者病情的严重程度.

目的 探讨分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)在子痫前期(PE)患者中的表达水平及其对滋养细胞迁移和侵袭能力的影响.方法 收集2020年1月到2021年10月在长治医学院附属和济医院产科收治的15例PE患者(PE组)和15例健康孕妇(正常组)剖宫产手术中获得的胎盘组织和血液样本;采用酶联免疫吸附试验法和免疫组化法分别检测血清和胎盘组织中SFRP5表达水平;体外培养人滋养层细胞系HTR8/SVneo,分别用重组人SFRP5蛋白、Dickkopf相关蛋白1(Dkk-1)和氯化锂(LiCl)处理细胞;采用划痕实验和基底胶Tr-answell实验检测HTR8/SVneo滋养细胞迁移和侵袭能力;明胶酶谱法检测HTR8/SVneo滋养细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2/9的活性;蛋白免疫印迹法检测HTR8/SVneo滋养细胞中糖原合成酶-3β(GSK3β)和β-cate-nin蛋白的表达.结果 与正常组[(9.03±1.75)ng/mL)]相比,PE组血清SFRP5水平[(48.07±3.81)ng/mL]显著升高,差异有统计学意义(t=36.063、P<0.001).与对照组相比,SFRP5组HTR8/SVneo滋养细胞在体外的迁移和侵袭能力显著降低,MMP-2/9活性降低,GSK3β蛋白表达上调,而β-catenin表达下降(均P<0.05);LiCl处理可促进HTR8/SVneo滋养细胞的迁移和侵袭,并上调β-catenin的表达,SFRP5和LiCl共处理可减弱LiCl对HTR8/SVneo滋养细胞产生的效应(均P<0.05);Dkk-1处理抑制了HTR8/SVneo滋养细胞的迁移和侵袭能力及β-catenin的表达(均P<0.05).结论 PE患者血清SFRP5表达水平显著升高,高表达SFRP5可能通过负向调控Wnt/β-catenin信号通路来抑制HTR8/SVneo滋养细胞的迁移和侵袭,进一步参与PE的发生发展.

目的 探讨老年T2DM患者miR-126、血管内皮生长因子受体 2(VEGFR-2)、Dickkopf相关蛋白 1(DKK1)的表达及与临床特征的相关性.方法 选取 2019 年 1 月至 2020 年 1 月于湖南省脑科医院内分泌科收治的老年T2DM患者 89 例(T2DM组),另选取同期我院体检健康者 80 名为正常对照(NC)组.比较两组miR-126、VEGFR-2、DKK1 表达,分析其与临床特征的相关性.结果 T2DM组FPG、HbA1c、降钙素原、C-RP、IL-6、TNF-α、VEGFR-2、DKK1 高于NC组(P＜0.05),miR-126表达低于NC组(P＜0.05).与BMI＜25 kg/m2、不饮酒、无冠心病(CHD)患者比较,BMI≥25 kg/m2患者miR-126 降低(P＜0.05),VEGFR-2、DKK1 表达升高(P＜0.05),饮酒史、CHD患者miR-126 升高(P＜0.05),VEGFR-2、DKK1 表达降低(P＜0.05).Pearson相关分析显示,miR-126 与VEGFR-2、DKK1呈负相关(P＜0.05),VEGFR-2与DKK1呈正相关(P＜0.05).结论 老年T2DM患者miR-126低表达,VEGFR-2、DKK1 高表达,可能与BMI、饮酒、CHD相关.