分泌粒蛋白Ⅲ(SCG3)是一种广泛分布于人体组织和细胞中的具有内分泌功能的蛋白颗粒。其作为粒蛋白家族(granin家族)中的一员，通常被认为参与内分泌和神经分泌的调节活动，同时也作为一种高度特异性的血管生成因子，在糖尿病性视网膜病变(DR)和早产儿视网膜病变动物模型中发挥减轻视网膜血管渗漏和新血管形成的作用。除此之外，SCG3还与炎症因子、抗脑源性神经营养因子等在神经细胞中共表达。本文综述了目前对SCG3作为分泌颗粒蛋白以及其粒蛋白家族的认识，分析了SCG3在体内的分布，讨论了其在血管新生方面的作用，认为SCG3与新生血管的形成存在相关性，同时重点探讨了SCG3在DR中可能存在的作用及意义，特别是与微血管病变、炎症因子及视网膜神经变性相关的作用；通过比较SCG3与血管内皮生长因子(VEGF)在信号通路与相关受体结合等方面的差异，对抗SCG3药物治疗DR的效果和优势进行展望。

目的:探讨脂肪干细胞-细胞外囊泡(ASC-EVs)对肌成纤维细胞转分化过程中转化生长因子β(TGF-β)-Smad信号通路的调控作用。方法:脂肪干细胞来源于南昌大学第二附属医院整形美容科行吸脂术患者的抽吸脂肪。真皮成纤维细胞来源于同一科室包皮环切术患者自愿捐赠的皮肤组织。将脂肪抽吸物离心纯化后经酶消化提取脂肪来源于细胞(ASCs)，扩增后行流式细胞术检测表面蛋白标记物。收集第3～5代ASCs上清液提取胞外囊泡(EVs)，透射电镜观察微观形态，纳米颗粒跟踪分析仪NanoSight检测粒径分布，流式细胞术检测其膜表面标志性蛋白CD63、Alix和TSG101。用PKH67荧光标记的ASC-EVs与真皮成纤维细胞共培养后，共聚焦显微镜观察细胞对EVs的摄取情况。通过TGF-β1持续诱导真皮成纤维细胞5 d，并添加50、100 μg/ml浓度的ASC-EVs，通过免疫荧光染色，RT-PCR和蛋白质印迹法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)以及Smad-2/3/4的表达。结果:流式细胞术结果提示，第3代ASCs表面标记物CD73、CD49d、CD90、CD105为阳性，CD34、CD45为阴性。透射电镜下ASC-EVs为圆形膜性囊泡，边缘清晰，由双层磷脂膜包裹。95%以上的ASC-EVs粒径为(30.0～261.0)nm，平均(166.0±86.1)nm。EVs高表达标志蛋白CD63、Alix和TSG101。共聚焦显微镜下可见携带绿色荧光的ASC-EVs被真皮成纤维细胞摄取并分布在胞浆内，部分ASC-EVs在细胞核周围分布。α-SMA免疫荧光染色后，经连续5 d的TGF-β1诱导，共聚焦显微镜下见真皮成纤维细胞中α-SMA绿色荧光的表达显著提高，而采用50 μg/ml和100 μg/ml ASC-EVs作用的真皮成纤维细胞中，α-SMA的表达较未经ASC-EVs作用的真皮成纤维细胞显著降低，但不呈现浓度依赖；细胞α-SMA和Smad-2/3/4的mRNA转录水平较未经ASC-EVs作用的真皮成纤维细胞显著下降，α-SMA和Smad-2/3/4的蛋白表达也显著降低。此外，ASC-EVs可显著降低细胞分泌至上清液中的Ⅰ型胶原的含量，但对Ⅲ型胶原的分泌量无明显干预作用。结论:ASC-EVs抑制瘢痕增生的作用机制可能与抑制真皮成纤维细胞中TGF-β-Smad信号通路，干扰肌成纤维细胞转分化，减少Ⅰ型胶原分泌密切相关。

目的:探讨胸腺类癌的临床病理特征，并对其预后及影响因素进行分析。方法:收集郑州大学第一附属医院2011年8月至2020年10月诊断的25例胸腺类癌，分析其临床病理特征及预后，并对1例多发性内分泌腺瘤病1型（MEN1）患者及其子的外周血进行基因遗传学分析。结果:25例胸腺类癌中，男性18例，女性7例，男女比例2.6∶1.0，年龄23~67岁，平均年龄50岁，15例（60%）患者有吸烟史；典型类癌1例（4%），不典型类癌24例（96%）；15例患者（60%）伴有肿瘤压迫症状，1例（4%）有内分泌相关症状（满月脸、皮肤紫纹），3例（12%）有转移引起的相关症状，6例（24%）无症状。8例（32%）患者血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）水平升高，2例为MEN1患者，1例合并Cushing综合征。Ⅰ期20例（80%），Ⅱ期1例（4%），Ⅲ期3例（12%），Ⅳ期1例（4%）。手术治疗18例（72%）、手术联合放疗2例（8%）、手术联合化疗5例（20%）。镜下观察：肿瘤细胞排列呈梁状、腺样、实性，瘤细胞巢间血窦丰富。其中5例可见梭形细胞形态，1例为嗜酸细胞亚型。广谱细胞角蛋白、CD56、突触素、嗜铬粒素A、甲状腺转录因子1、p53及PAX8的阳性率分别100%（25/25）、92%（23/25）、96%（24/25）、72%（18/25）、4%（1/25）、0/15、0/16，Ki-67阳性指数为5%~30%。1例MEN1患者及其子均有MEN1基因突变。Cox多因素分析未发现影响胸腺类癌的预后因素（ P>0.05）。 结论:胸腺类癌以不典型类癌常见，临床症状不典型，明确是否为胸腺原发需结合临床及影像学资料；伴MEN1的胸腺类癌患者，要对其直系亲属进行基因检测和随访；影响胸腺类癌的预后因素需更多病例及更长时间的随访。

目的:评价压力控制容量保证模式(PCV-VG)对Trendelenburg体位腹腔镜手术老年患者的肺保护作用。方法:择期行腹腔镜前列腺癌根治术或腹腔镜全膀胱切除术患者60例，年龄65～80岁，体重指数19～27 kg/m 2，ASA分级Ⅰ～Ⅲ级。采用随机数字表法分为2组( n＝30)：VCV组(V组)和PCV-VG(P组)。麻醉诱导后行气管插管术，连接麻醉机行机械通气，2组通气参数设置：V T 7 ml/kg(校正体重)，PEEP 5 cmH 2O，吸呼比1∶2，吸入氧浓度50%，新鲜气流量2 L/min，RR 12～15次/min，于停药前5 min使用30 cmH 2O复张压力持续30 s行手法肺复张。于气管插管后5 min(T 1)、改变体位后5 min(T 2)、气腹5、30、60、90、120 min(T 3-7)和结束气腹且恢复平卧位后5 min(T 8)时，记录气道峰压(P peak)、气道平台压(P plat)、驱动压(DP)和肺动态顺应性(Cdyn)。于T 1、T 4、T 6和PACU中改良Aldrete评分达10分时采集桡动脉血样行血气分析，记录pH值、PaO 2、PaCO 2、SaO 2和肺泡-动脉血氧分压差(P A-aO 2)。于麻醉诱导前和术毕即刻采集桡动脉血样，采用ELISA法测定血清肺Clara细胞分泌蛋白(CC-16)、IL-6和中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)浓度。记录术后7 d内肺部并发症的发生情况。 结果:与V组比较，P组T 1-8时P peak、T 5-7时P plat和DP降低，T 2-7时Cdyn升高，T 1，4，6时P A-aO 2降低，术毕即刻血清CC-16、IL-6和NE浓度降低( P<0.05)，术后7 d内肺部并发症发生率差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:PCV-VG对Trendelenburg体位腹腔镜手术老年患者具有一定的肺保护作用。

目的:评价不同剂量西维来司他钠对急性Stanford A型主动脉夹层(AAAD)手术患者围术期急性肺损伤(ALI)的影响。方法:急诊拟行AAAD手术患者120例，性别不限，年龄30~64岁，BMI 18.5~24.9 kg/m 2，ASA分级Ⅲ或Ⅳ级。采用随机数字表法将患者分为西维来司他钠低剂量组(SL组)、西维来司他钠中剂量组(SM组)和西维来司他钠高剂量组(SH组)，每组40例。SL组、SM组和SH组患者分别于麻醉前10 min经静脉泵注西维来司他钠4.8、6.0和7.2 mg/kg至24 h时泵注完毕。于麻醉诱导后切皮前(T 1)、术毕即刻(T 2)、术后24 h (T 3)和72 h (T 4)时采集桡动脉血，行血气分析，计算肺泡-动脉血氧分压差(PA-aDO 2)、氧合指数(OI)和呼吸指数(RI)。记录术后机械通气时间、重症监护室(ICU)停留时间和术后住院时间。T 1-T 4时抽取中心静脉血，测定血清TNF-α、IL-6和IL-8浓度。分别于术前1 d、术后1和3 d时抽取外周静脉血，测定白细胞计数(WBC)、中性粒细胞计数(NEUT)和中性粒细胞百分比(NEUT%)及C反应蛋白(CRP)浓度。记录患者术后肺部并发症发生情况及90 d内全因死亡率。 结果:与T 1时比较，T 2-4时3组患者PA-aDO 2和RI升高，OI降低，血清TNF-α、IL-6和IL-8浓度升高( P<0.05)。与术前1 d比较，术后1和3 d时3组WBC、NEUT和NEUT%及CRP浓度升高( P<0.05)。与SL组和SM组比较，SH组患者T 2-4时PA-aDO 2和RI降低，OI升高，血清TNF-α、IL-6和IL-8浓度降低，WBC、NEUT和NEUT%及CRP浓度降低，术后高碳酸血症、低氧血症、新出现肺部啰音和支气管痉挛发生率降低，术后机械通气时间和ICU停留时间缩短( P<0.05)，术后住院时间和90 d内全因死亡率差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:西维来司他钠7.2 mg/kg可有效地抑制AAAD手术患者炎症反应，减轻围术期ALI，改善患者早期预后。

目的:探讨糖尿病视网膜病变（DR）患者外周血和玻璃体液中分泌颗粒蛋白Ⅲ（SCG3）的表达情况。方法:横断面研究。收集2018年5至12月于天津医科大学眼科医院玻璃体视网膜科接受玻璃体切除术的患者77例（77只眼），年龄（60.75±11.34）岁，男性41例，女性36例。根据血糖水平、糖尿病病史和眼底表现分为DR组和非糖尿病组，进一步按血脂水平和体重指数（BMI）分为血脂偏高和血脂正常、BMI偏高和BMI正常者分别进行观察。所有患者进行眼部检查，根据身高和体重计算BMI，取外周血检测血脂水平。患者于玻璃体切除术中取玻璃体液，采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法测定所有患者玻璃体液标本中及外周血血浆中的SCG3。应用Wilcoxon秩和检验对SCG3浓度进行统计学比较。结果:DR组患者43例，其中脂血偏高25例，正常18例；BMI偏高22例，正常21例。非糖尿病组34例，其中脂血偏高13例，正常21例；BMI偏高17例，正常17例。DR组SCG3［6.02（4.34，11.76）ng/ml］高于非糖尿病组［4.30（3.20，10.78）ng/ml］（ Z=-2.339， P<0.01）。DR组中血脂偏高者的SCG3［7.94（5.33，13.51）ng/ml］高于非糖尿病组中血脂者正常者［4.04（3.12，7.77）ng/ml］（ Z=-3.473， P<0.01）。DR组中血脂偏高者的SCG3高于血脂者正常者［4.45（3.71，9.14）ng/ml］（ Z=-2.511， P<0.01）。DR组中BMI较高者的SCG3［7.12（4.56，13.12）ng/ml］高于非糖尿病组BMI正常者［3.53（3.16，4.38）ng/ml］（ Z=-3.767， P<0.01）。DR组中BMI正常者的SCG3［5.72（4.10，11.60）ng/ml］高于非糖尿病组BMI正常者（ Z=-2.862， P<0.01）。血浆中的SCG3极少或无法检测到。 结论:DR患者玻璃体液中SCG3表达上调，但SCG3几乎很难在正常的血管系统中被检测到。 （中华眼科杂志，2020，56：933-937）

目的:探索来源于健康人脂肪干细胞(ADSC)的外泌体对局限性硬皮病成纤维细胞(LSFs)纤维化的体外调控作用。方法:取2021年1月至2022年1月中国医学科学院北京协和医院整形外科10例健康人吸脂手术剩余脂肪组织，体外分离培养ADSC，以超速离心法收集其外泌体(ADSC-Exo)；取同期15例局限性硬皮病患者患处皮肤组织，体外分离培养成纤维细胞。采用不同方向的诱导分化染色、纳米粒子追踪分析、透射电子显微镜、PKH26染色和蛋白质印迹法对ADSC及ADSC-Exo进行鉴定。通过细胞外囊泡分泌抑制实验检验ADSC是否通过其外泌体影响LSFs纤维化标志物[Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)]的表达。取被ADSC-Exo干预的LSFs，通过CCK-8法、划痕实验检测LSFs的增殖和迁移能力。采用实时荧光定量PCR、免疫荧光染色和蛋白质印迹法检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、α-SMA、转化生长因子β(TGF-β)和p-Smad2/3的表达情况。两组比较采用独立样本 t检验；多组比较采用方差分析，组间两两比较采用SNK- q检验。 结果:成功于体外分离并培养ADSC和LSFs，并提取ADSC-Exo，且证明ADSC-Exo可以内化到LSFs中发挥作用。细胞外囊泡分泌抑制实验证明，ADSC可通过分泌细胞外囊泡降低LSFs的纤维化标志物表达；CCK-8法、划痕实验结果显示，ADSC-Exo干预后LSFs的增殖和迁移能力降低；实时荧光定量PCR、免疫荧光染色和蛋白质印迹结果显示，相较于对照组，ADSC-Exo干预组的Ⅰ型胶原、α-SMA、TGF-β和p-Smad 2/3表达显著降低。结论:在体外，ADSC-Exo可以通过抑制TGF-β/Smad通路来影响LSFs的生物学功能和降低纤维化标志物的表达。

目的:观察严重烫伤大鼠早期胰岛素分泌功能变化情况并探讨其信号转导机制。方法:将24只7周龄雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为单纯假伤组、假伤＋BPV(HOpic)组、单纯烫伤组和烫伤＋BPV(HOpic)组，每组6只。单纯烫伤组、烫伤＋BPV(HOpic)组大鼠在94 ℃热水中浸浴腹部6 s、背部12 s，造成50%体表总面积Ⅲ度烫伤；单纯假伤组、假伤＋BPV(HOpic)组大鼠在37 ℃温水中浸浴腹部6 s、背部12 s，模拟致伤。伤后0(即刻)～2 d，烫伤＋BPV(HOpic)组、假伤＋BPV(HOpic)组大鼠每天一次性腹腔注射0.5 mg/mL磷脂酰肌醇3－激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路增强剂BPV(HOpic)溶液0.6 mg/kg，单纯烫伤组、单纯假伤组大鼠每天一次性腹腔注射等体积二甲基亚砜。伤后72 h，剪尾法取大鼠尾血，用血糖仪测定空腹血糖；取大鼠胰腺组织，苏木精－伊红染色观察胰岛组织病理学表现，透射电镜观察胰岛β细胞超微结构以计数每10微米细胞膜上锚接胰岛素颗粒并计算胰岛素空泡占比，蛋白质印迹法检测胰腺PI3K/Akt信号通路中Akt磷酸化水平。对数据行单因素方差分析和LSD检验。结果:(1)伤后72 h，单纯假伤组与假伤＋BPV(HOpic)组大鼠空腹血糖水平均正常且相近( P>0.05)，与该2组比较，单纯烫伤组大鼠空腹血糖水平显著升高( P<0.01)，烫伤＋BPV(HOpic)组大鼠空腹血糖水平没有明显变化( P>0.05)。与单纯烫伤组比较，烫伤＋BPV(HOpic)组大鼠空腹血糖水平显著降低( P<0.01)。(2)伤后72 h，单纯假伤组与假伤＋BPV(HOpic)组大鼠胰岛形态完整且胰岛细胞排列整齐，与该2组比较，单纯烫伤组大鼠胰岛形态不完整，胰岛内空泡样变多见，细胞排列不规则，部分胰岛β细胞胞质淡染或透亮；烫伤＋BPV(HOpic)组大鼠胰岛形态变化不明显。与单纯烫伤组比较，烫伤＋BPV(HOpic)组大鼠胰岛形状较为完整，胰岛内空泡样变较少，细胞排列较规则，胰岛β细胞胞质淡染或透亮较少。(3)伤后72 h，单纯假伤组与假伤＋BPV(HOpic)组大鼠胰岛β细胞中每10微米细胞膜上锚接胰岛素颗粒数和胰岛素空泡占比均相近( P>0.05)，与该2组比较，单纯烫伤组大鼠胰岛β细胞中每10微米细胞膜上锚接胰岛素颗粒数显著减少( P<0.01)，胰岛素空泡占比显著增加( P<0.01)；烫伤＋BPV(HOpic)组大鼠胰岛β细胞中每10微米细胞膜上锚接胰岛素颗粒数明显减少( P<0.05)，胰岛素空泡占比没有明显变化( P>0.05)。与单纯烫伤组比较，烫伤＋BPV(HOpic)组大鼠胰岛β细胞中每10微米细胞膜上锚接胰岛素颗粒数显著增多( P<0.01)，胰岛素空泡占比显著减少( P<0.01)。(4)伤后72 h，单纯假伤组、假伤＋BPV(HOpic)组、单纯烫伤组、烫伤＋BPV(HOpic)组大鼠胰腺Akt磷酸化水平分别为0.91±0.03、0.98±0.03、0.78±0.08、0.87±0.08。与单纯假伤组比较，假伤＋BPV(HOpic)组大鼠胰腺Akt磷酸化水平明显升高( P<0.05)，单纯烫伤组大鼠胰腺Akt磷酸化水平显著降低( P<0.01)，烫伤＋BPV(HOpic)组大鼠胰腺Akt磷酸化水平无明显变化( P>0.05)；与假伤＋BPV(HOpic)组比较，单纯烫伤组与烫伤＋BPV(HOpic)组大鼠胰腺Akt磷酸化水平均显著降低( P<0.01)；与单纯烫伤组比较，烫伤＋BPV(HOpic)组大鼠胰腺Akt磷酸化水平明显升高( P<0.05)。 结论:严重烫伤大鼠早期胰腺PI3K/Akt信号通路活性降低，胰岛素分泌功能下降；提高胰腺PI3K/Akt信号通路活性可以改善早期胰岛素分泌功能，恢复血糖生理水平。

目的:探讨骨髓浆细胞形态学检查在浆细胞骨髓瘤（PCM）诊断及预后评估中的应用价值。方法:观察性研究。收集首都医科大学附属北京朝阳医院2017年1月1日至2022年2月28日门诊及住院1 071例PCM患者［男629例，女442例；年龄62（29，93）岁］骨髓形态学图文报告及相应单克隆蛋白（M蛋白）鉴定结果，结合其中427例PCM患者Durie‐Salmon（DS）分期及国际分期系统（ISS）及436例PCM患者总生存（OS）时间，总结相关浆细胞形态及数量特点。采用卡方检验、Kruskal-Walls检验、Spearman相关分析及Kaplan-Meier生存分析进行统计学分析。结果:骨髓形态学图文报告显示573例PCM患者外周血典型形态特征包含浆细胞（40.84%）、幼稚粒细胞（30.89%）、成熟红细胞缗钱状排列（68.94%）及有核红细胞（8.55%）；1 071例PCM患者骨髓浆细胞类型包括原始浆细胞372例（34.73%），幼稚浆细胞674例（62.93%），成熟浆细胞25例（2.34%）。骨髓浆细胞数量（占有核细胞比例）与免疫球蛋白（Ig）G和IgA型M蛋白浓度之间存在正相关（ r=0.55， r=0.60， P<0.01）。1 071例PCM患者M蛋白类型占比从高到低依次为IgG（45.75%）、IgA（23.53%）、轻链型（19.61%），IgD（4.76%）、非分泌型（4.3%）、双克隆型（1.78%）、IgE型（0.19%）、IgM型（0.08%）。各种M蛋白类型相应骨髓浆细胞典型特征包括成团分布，胞体大小不等，胞浆内可见内容物，胞核可见双核、多核、畸形核。原浆细胞在DSⅢ期所占比例为44.81%（164/366），高于DSⅡ期21.57%（11/51），差异有统计学意义（χ 2=10.2， P<0.05）。骨髓浆细胞数量与DS和ISS分期呈正相关（ r=0.23， r=0.30， P<0.01）。骨髓浆细胞类型为原浆组OS时间较幼浆组明显缩短［56.0（23.0，101.8）个月比75.9（31.6，121.5）个月］， HR=1.42，95% CI 1.05~1.91， P=0.02］，骨髓浆细胞数量≥37.5%组OS时间较<37.5%组缩短［75.9（21.4，122.6）个月比81.3（36.6，108）个月］， HR=1.54，95% CI 1.14~2.07， P<0.05］。 结论:骨髓浆细胞形态及数量为PCM的诊断提供依据，可以作为PCM患者的预后评估指标。

目的:探索靶向表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)的嵌合抗原受体(CAR)修饰的人外周血来源自然杀伤(NK)细胞在脑胶质瘤细胞中的杀伤作用。方法:通过Ficoll密度梯度离心法获得人外周血来源的NK细胞并进行体外扩增培养，并通过慢病毒感染构建靶向EGFRvⅢ的CAR-NK细胞及U87-EGFRvⅢ稳转细胞株。根据不同效应细胞作用于不同靶细胞而将实验组分为NK＋U87组、NK＋U87-EGFRvⅢ组、CAR-NK＋U87组、CAR-NK＋U87-EGFRvⅢ组，通过实时无标记细胞分析(RTCA)及乳酸脱氢酶(LDH)释放实验评价CAR-NK细胞对胶质瘤细胞的杀伤作用，同时使用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)、颗粒酶B(GzmB)以及穿孔蛋白1(PRF1)在细胞培养上清中的分泌情况。结果:流式细胞分析显示分离、培养得到的人外周血来源NK细胞的纯度为97.6%，存活率为98.2%；成功构建第二代靶向EGFRvⅢ的CAR分子，并成功构建靶向EGFRvⅢ的CAR-NK细胞，流式分析显示阳性细胞率为69.6%。RTCA结果显示靶细胞的生长曲线随时间呈上升趋势，过表达EGFRvⅢ的U87细胞增殖速率要高于U87细胞；在加入效应细胞后，细胞指数呈现下降趋势，在相同效靶比(E ∶T)下，CAR-NK＋U87-EGFRvⅢ组的细胞指数下降趋势快于NK＋U87-EGFRvⅢ组，且快于CAR-NK＋U87组。LDH释放实验进一步证明随着效靶比的增加，靶细胞的裂解率逐渐升高( FNK＋U87＝700.61、 FCAR-NK＋U87＝2 063.97、 FNK＋U87-EGFRvⅢ＝5 707.00、 FCAR-NK＋U87-EGFRvⅢ＝28 858.57，均 P<0.05)；在E ∶T＝2 ∶1及E ∶T＝3 ∶1时，NK＋U87-EGFRvⅢ组、CAR-NK＋U87组的细胞裂解率均低于CAR-NK＋U87-EGFRvⅢ组(均 P<0.05)。ELISA结果显示，TNF-α、IFN-γ、GzmB及PRF1的分泌量在相同组别内均随着效靶比的增加而增加(均 P<0.05)；在相同效靶比下，除了在E ∶T＝1 ∶1时，CAR-NK＋U87-EGFRv Ⅲ组较CAR-NK＋U87组GzmB分泌量的差异无统计学意义( P>0.05)；CAR-NK＋U87-EGFRvⅢ组分别与NK＋U87-EGFRvⅢ组、CAR-NK＋U87组相比，TNF-α、IFN-γ、GzmB、PRF1的分泌量均增高(均 P<0.05)。 结论:靶向EGFRvⅢ的CAR-NK细胞对EGFRvⅢ表达阳性的胶质瘤细胞具有较强的杀伤作用，其抗肿瘤能力优于NK细胞。