目的:以薏苡仁油和薏苡仁多糖作为双功能辅料包埋雷公藤红素,制备雷公藤红素-薏苡仁组分微乳(Tripterine-Coix seed Components Microemulsions,TCC-MEs),评价其体内抗肺癌疗效.方法:采用超临界萃取法获取薏苡仁油,残渣热水浸提、分级醇沉法制备薏苡仁多糖;以薏苡仁油作为油相,薏苡仁多糖水溶液作为水相,RH40为表面活性剂,PEG400为助表面活性剂,包埋雷公藤红素,一步滴定法制备TCC-MEs;借助动态光散射纳米激光粒度仪和高效液相分别测定其粒径、多分散指数(Polydispersity Index,PDI)、zeta电位、包封率和载药量;皮下注射肿瘤细胞法构建小鼠Lewis肺癌移植瘤模型,采用TCC-MEs灌胃方式考察其体内抗肺癌活性,并通过组织HE染色及生化指标评价其肝肾毒性.结果:TCC-MEs最佳处方为薏苡仁油400 mg,RH40 300mg,PEG400 100 mg,薏苡仁多糖50 mg,雷公藤红素10 mg;雷公藤红素包封率为(90.72±0.28)％,载药量为(1.08±0.17)％,微乳平均粒径为(43.86±0.22)nm,PDI为0.10±0.01,Zeta电位为(-13.14±1.35)mV,TCC-MEs体内抗肺癌活性显著优于各对照组,且治疗后未见明显肝肾毒性.结论:所得TCC-MEs常规辅料用量少,粒径小,且稳定性高,雷公藤红素与薏苡仁组分整合至微乳体系后具有协同减毒增效作用.

目的 构建适用于居家、社区及养老服务机构的普适性"老年长期照护分级综合评价模型".方法 在文献研究、理论析取及质性访谈基础上建立模型指标项目池;采用德尔菲法初步筛选指标形成老年长期照护分级评估问卷;采用问卷调查法再次筛选指标形成最终模型指标体系并进行信效度检验;采用综合评分法计算模型总分,三等分法探讨指标分级,聚类分析法探讨模型分级.结果 最终模型指标体系包括7个一级指标和119个二级指标.7个一级指标的Cronbach'sα系数为0.782～0.986,重复测量Pearson相关系数为0.917～0.980(P<0.05).其中,日常生活能力、认知能力、跌倒风险、压疮风险这4个一级指标采用目前已广泛应用且十分成熟的量表;医疗护理项目、异常表现/症状、自我照护知识需求这3个指标均为本研究自主建立,Bartlett's球形检验结果0.745～0.883,探索性因子分析主成分分析萃取公因子依次为4、3、1个,对总累计方差贡献率分别达68.044％、59.492％、65.395％;经验证性因子分析,修正后公因子分别为4、4、3个.7个一级指标权重依次为0.24、0.15、0.15、0.12、0.12、0.11、0.11,应用综合评分法计算总分后模型可分为5级,分别为:无须依赖、轻度依赖、中度依赖、重度依赖、极重度依赖,级别越高总分越低,表示所需照护强度、力度或难度就越大.结论 老年长期照护分级综合评价模型7个一级指标均具有良好的信效度,采用综合评分法计算模型总分简便易行,各级评分区分度较好,能较全面、具体、确切地反映老年人群对他人照护的依赖程度,可为后期长期护理保险分级定价制度研究提供参考依据.

目的:本研究旨在从海南来源的红毛菜科坛紫菜(Porphyra haitanensis)中发现对神经胶质瘤具有潜在抑制活性的天然化合物.方法:通过95％乙醇水溶液静止浸提,并加以超声波辅助提取,对提取物依次采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇分级萃取,以U87细胞增殖活性为指征,分离纯化活性组分并进行结构鉴定.结果:通过MTT实验确定活性部位为石油醚相和乙酸乙酯相.采用硅胶柱层析和Sephadex LH-20柱层析,获得对U87细胞增殖具有显著抑制活性的单一组分F9.通过MS、1 H-NMR、13C-NMR、图谱鉴定,确定F9为叶黄素.结论:从海南来源的坛紫菜中发现对神经胶质瘤细胞具有潜在抑制活性的天然化合物叶黄素.

目的 探索半定量风险评估模型和评估技术的可行性与适用性.方法 采用职业健康风险评估技术导则的半定量风险评估模型方法, 运用到宜昌市某己内酰胺生产企业工作场所的重点危害因素和关键岗位, 将职业健康风险评估结果与作业分级结果进行比较分析.结果 该企业10个关键岗位职业健康风险指数最低为2.82, 最高为3.91, 除加氢反应器外操工接触苯和硫胺结晶巡检工接触氨评估结果均为高风险外, 其它8个岗位接触职业健康风险评估结果均为中等风险.萃取塔外操工和配制釜外操工作业危害分级指数分别为7.50和10.56, 半定量风险评估法和作业危害分级方法的评估结果有较大差异.结论 半定量风险评估模型可以用于己内酰胺生产企业职业健康风险评估, 应用该模型开展职业健康风险评价预测具有较强的适用性和可操作性.

环链棒束孢广泛存在于自然界,并且在植物病虫害防治中起重要作用,目前相关的研究多集中于其发酵条件、生物学特性及杀虫毒力的研究,对该菌发酵液中的化学物质研究甚少.本文依次用石油醚和乙酸乙酯对环链棒束孢发酵液进行分级萃取,借助气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术和超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱法(UPLC/Q-TOF-MS)鉴定分析石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和萃余物中的化学物质组成.共鉴定69个化合物的结构,其主要化学成分为酚类、酯类、烷烃、烯烃、卤代烃和酮类非极性/弱极性的小分子化合物等,其中邻苯二甲酸二丁酯、角鲨烯、环戊烯丙菊酯物质、瓜叶菊素Ⅰ等物质具有特殊的作用.发酵液提取物中还含有多种小分子化学物质,应结合多种色谱分离手段和波普学手段对代谢产物进行分离、纯化和结构鉴定,为其次生代谢产物的广泛利用提供数据支撑.

为了探讨超临界二氧化碳(supercritical carbon dioxide,SC-CO2)技术与提取物的分级分离在萃取芸香活性成分的应用价值,本研究采用SC-CO2和乙酸乙酯萃取芸香中植物蜡和活性成分,并调查粒径和CO2流量对提取产量的影响.在250 bar、40℃条件下提取,并使第一个分离器冷却到-10℃,可获得较好的提取效率.当粒径较小时,提取过程更快,即内部传质控制该过程.分级分离可选择性去除表皮植物蜡,约占由SC-CO2处理产生的总提取物的77.5％ W/W.第二分离器中的获得的提取物中活性化合物可达86.3％ W/W.随后采用气相色谱-质谱联用仪(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)分析表明,乙酸乙酯提取物低于SC-CO2提取物的萃取效率,主要是由于提取物中含有大量的植物蜡.本研究为超临界二氧化碳技术在萃取芸香活性成分方面的提供技术参考.

利用索氏萃取技术,依次采用石油醚、乙酸乙酯、丙酮、无水乙醇和甲醇等5种溶剂对蝉虫草纯粉进行分级萃取,运用傅里叶变换红外光谱分析法和气相色谱-质谱联用技术对5级萃取物进行分析鉴定.傅里叶变换红外光谱分析显示萃取物中含有与烯烃类、羧酸类、酯类、醇类和酮类等化合物相关的C-H、C=O、C-O和C=C等官能团.气相色谱-质谱联用技术共鉴定出有机小分子化合物34种,以酯类和脂肪酸类为主,多为碳链长度为15-20的长链脂肪酸及对应的酯,其中十八碳不饱和脂肪酸相对含量高达28.95％;分别存在于两种或以上萃取物中的有机化合物共有11种;仅存于石油醚萃取物中的化合物6种,乙酸乙酯萃取物中3种,丙酮萃取物中2种,无水乙醇萃取物中6种,甲醇萃取物中6种.在一定极性范围内,利用溶剂的极性梯度变化,可实现蝉虫草中活性物质的按极性梯度分离;采用分级萃取技术可有效分离蝉虫草中部分化学成分.鉴定结果充实了蝉虫草中化合物的种类资源,为蝉虫草中活性物质谱图库的完善、构效关系的建立及蝉虫草产品的利用开发提供支撑.

目的:对壁虎体外抗Bel-7402肿瘤细胞的活性部位进行筛选研究,为壁虎抗肿瘤活性物质研究奠定基础.方法:采用超声﹑萃取的方法依次分级提取壁虎的石油醚部位、二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位,并采用噻唑蓝(MTT)法对不同极性部位的体外抗Bel-7402肿瘤细胞作用进行研究.结果:壁虎醇提物的石油醚部位、二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位在体外对Bel-7402肿瘤细胞抑制率分别为93.24％、74.81％、93.25％、91.03％和25.13％,抑制率从高到低依次为石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、二氯甲烷部位、水部位.结论:壁虎醇提物的石油醚部位、二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位对Bel-7402肝癌细胞均有一定抑制作用,其中以石油醚部位的抑制作用最强.

采用极性不同的6种溶剂(石油醚、乙酸乙酯、丙酮、乙醇、甲醇和水)、按索氏提取法逐级萃取破壁灵芝孢子粉,并同时运用气相色谱-质谱联用(GC/MS)和超高效液相串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF/MS)技术对各萃取物进行化学成分分析与鉴定.结果 表明:GC/MS共鉴定出101种化合物,其中酸类10种、酯类40种、醇类7种、酮类6种、酚类2种、烃类18种、甾类9种和杂原子化合物9种;UPLC-Q-TOF/MS共推断出40种化合物,其中倍半萜类1种、二萜类1种、三萜类9种、生物碱类4种、酰胺类7种、有机酸类9种以及其他化合物9种.两种测定方法间共有化合物仅1种,仅存在于5种有机溶剂(石油醚、乙酸乙酯、丙酮、乙醇和甲醇)萃取物之一的化合物共105种,2种或2种以上萃取物共有的化合物共31种,实验方法较好地实现了样品中化合物组分的充分分离,扩大了可检测化合物的范围.研究结果为灵芝孢子粉中化学成分的系统分析与鉴定、及灵芝孢子粉的化合物谱图库的完善提供了基础资料,为相关药理、药效分析及灵芝的药用模式真菌研究提供参考.

背景与目的 已证明吲哚胺2,3-双加氧化酶1(indoleamine 2,3-dioxygenase 1,IDO1)和色氨酸(tryptophan,Trp)分解代谢在肿瘤免疫抑制中起重要作用.本研究检测了IDO1在阴茎鳞状细胞癌(penile squamous cell carcinoma,PSCC)中的表达和催化活性,并探讨了其临床意义.方法 通过免疫组化和固相萃取–液相色谱–串联质谱法检测114例PSCC患者的IDO1表达水平、Trp和犬尿氨酸(kynurenine,Kyn)的血清浓度.采用Kaplan-Meier法和log-rank检验评估生存期.通过单因素和多因素Cox回归分析评估死亡风险比(hazard ratio,HR).通过主要成分分析确定免疫细胞类型.采用Pearson相关性分析法进行相关性分析.结果 PSCC细胞中IDO1的表达水平与血清Kyn浓度和Kyn/Trp比(Kyn/Trp ratio,KTR)呈正相关(均P<0.001),与血清Trp浓度呈负相关(P=0.001).此外,癌细胞中IDO1表达上调和血清KTR浓度升高与晚期N分期(均P<0.001)和病理高分级(分别为P=0.008和0.032)显著相关.癌细胞中IDO1的高水平表达和血清KTR与短的疾病特异性生存期相关(均P<0.001).但是,除了N分期[HR=6.926;95％置信区间(confidence interval,CI):2.458–19.068;P<0.001]和病理分级(HR=2.194;95％CI:1.021–4.529;P=0.038),只有血清KTR(HR=2.780;95％CI:1.066–7.215;P=0.036)是PSCC预后的独立预测因素.在PSCC组织中,IDO1表达与干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ;P<0.001)、免疫抑制标志物(程序性细胞死亡受体1、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4和程序性死亡因子配体1和2,均P<0.05)及免疫细胞(包括细胞毒性T淋巴细胞、调节性T淋巴细胞、肿瘤相关巨噬细胞和骨髓源性抑制细胞,均P<0.001)的浸润呈正相关.此外,在PSCC细胞中,IFN-γ以剂量依赖的方式诱导IDO1表达.结论 在PSCC中,IFN-γ诱导的IDO1在免疫编辑和免疫抑制中起关键作用.而且,血清KTR作为IDO1分解代谢活性的指标可作为PSCC的独立预后因素.