目的 研究灵芝孢子粉对去卵巢骨质疏松大鼠的治疗作用.方法 随机取39只SD雌性大鼠进行去卵巢手术建立骨质疏松模型,剩余20只进行假手术.饲养16周建模成功后随机从假手术大鼠中取10只设为空白组(C组),随机取30只去势大鼠分为模型组(M组)、灵芝孢子粉低浓度组(BL组,400 mg/kg)和灵芝孢子粉高浓度组(BH组,1 600 mg/kg),每日1次灌胃治疗,持续10周.比较各组大鼠的体重变化、脏器指数、股骨骨密度、骨小梁微观结构变化、骨小梁参数、骨生物力学性能、血清中骨代谢物水平.结果 各组大鼠体重变化差异无统计学意义(P＞0.05),肝、脾和胸腺的脏器指数差异无统计学意义(P＞0.05),与C组相比,M组大鼠的子宫系数显著降低(P＜0.01),而BL组与BH组大鼠的子宫系数显著高于M组(P＜0.05).与M组相比,BL组与BH组大鼠的股骨骨密度(BMD)、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)、最大载荷、弯曲强度、弹性模量和血清中雌二醇水平(E2)均显著提升(P＜0.05);而骨小梁分离度(Tb.Sp)、血清中骨钙素(OC)、骨碱性磷酸酶(BALP)和抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)水平均显著降低(P＜0.01).Micro-CT骨微结构图像显示M组大鼠骨小梁减少而稀疏,而BL组与BH组大鼠骨小梁增多而致密.结论 灵芝孢子粉对去卵巢大鼠的骨质疏松有一定治疗作用,推测其通过改善内分泌功能提升雌激素水平,以此平衡骨吸收与骨形成,从而改善骨质量、提升骨强度、提高骨密度.

为准确测定灵芝孢子粉产品的酸价,阐明影响酸价的关键因素,本试验建立了高效液相色谱-蒸发光散射检测器(high performance liquid chromatography-evaporative light scattering detector,HPLC-ELSD)分析方法测定孢子油中游离脂肪酸的含量.通过优化色谱条件,建立了亚油酸、棕榈酸和油酸的HPLC的定量测定方法.该方法精密度、重复性和稳定性好,可用于灵芝孢子粉、孢子油及其相关产品中亚油酸、棕榈酸和油酸成分的定量测定.与国标化学法测定的结果比较,两种方法的匹配度较好,HPLC-ELSD 法灵敏度高,可以测定不同脂肪酸的含量.通过比较分析发现,贮存时间对破壁灵芝孢子粉脂肪酸影响最大,同时产地和采收时间也影响酸价的大小.对 8 种不同品牌市售灵芝孢子油产品的脂肪酸含量测定,发现脂肪酸含量相差较大,其中含量最高的为(99.81±10.21)mg/g,最低的为(1.90±0.12)mg/g.因此新建立的HPLC-ELSD法可精确定量灵芝孢子粉中游离脂肪酸,为市场上灵芝孢子类产品的质量控制提供科学依据.

灵芝孢子粉是灵芝的生殖细胞,包含灵芝所有的化学成分,主要含有灵芝三萜类、多糖类、甾体类、脂肪酸类和蛋白质类等多种化合物.灵芝孢子粉具有抗肿瘤、免疫调节、抗氧化、保护心血管、保肝护肝等药理作用.《中国药典》2020年版对灵芝孢子粉的质量控制标准尚未明确规定,就灵芝孢子粉化学成分和药理作用研究进展进行综述,并基于质量标志物(qualitymarker,Q-Marker)理论,从植物亲缘性与特有性、有效性、可测性、临床应用、可入血成分等方面进行Q-Marker预测分析,初步推测多糖类、灵芝酸、甾醇类(麦角甾醇)、不饱和脂肪酸(油酸)等成分为其Q-Marker,为规范灵芝孢子粉质量研究和建立、完善灵芝孢子粉质量标准提供参考.

灵芝是一味传统的中药材,具有很高的药用价值,多糖是其主要的活性成分之一,可从其子实体、孢子粉、发酵菌丝体和胞外液中获得.近年来,从灵芝菌丝体和胞外液中发现的多糖越来越得到研究者们的关注.本文从发酵培养基成分及发酵条件对灵芝胞内外多糖的影响、灵芝胞内外多糖的结构、灵芝胞内外多糖生物活性 3 个方面进行综述,为发酵来源灵芝多糖的开发利用提供科学理论依据.

目的 探讨去壁灵芝孢子粉水溶成分(A-GSP)在头颈鳞癌细胞中的生物学作用.方法 利用MTS法检测A-GSP在头颈鳞癌细胞系SCC15和SCC25中的细胞活力.采用平板克隆、划痕愈合实验和穿室实验探究A-GSP对头颈鳞癌细胞增殖、转移能力的影响.通过流式分析试剂盒检测A-GSP对头颈鳞癌细胞凋亡能力和细胞周期分布的影响.免疫蛋白印迹法检测A-GSP处理后上皮间质转化(EMT)分子和细胞周期蛋白的表达变化.结果 A-GSP作用后,头颈鳞癌细胞的增殖能力减弱(F=62.72,P＜0.000 1),转移能力下降(F=95.7,P＜0.000 1),细胞凋亡能力增加(F=87.65,P＜0.000 1),G2/M 期停滞(F=15.31,P＜0.01).此外,A-GSP处理导致上皮细胞标志物E-cadherin上调,间质细胞标志物Vimentin、N-cadherin、Snail、Slug下调,细胞周期激酶CDK1下调,P21和P27上调,但是,并未引起凋亡通路蛋白Caspase和Bax水平改变.结论 A-GSP通过诱导细胞周期G2/M期停滞和抑制EMT从而抑制头颈鳞癌细胞的增殖转移.

目的 探究灵芝孢子粉对M2型巨噬细胞极化的影响及其可能的作用机制.方法 采用IL-4(100ng·mL-1)刺激小鼠RAW264.7巨噬细胞,建立M2型巨噬细胞模型,分别给予灵芝孢子粉1、2、4 mg·mL-1进行孵育.CCK8法观察灵芝孢子粉对正常巨噬细胞活力的影响,流式细胞术检测M2型巨噬细胞表面分子CD206和CD86的表达,RT-qPCR、ELISA检测TGF-β1、IL-10和Arg-1的表达;Western blot检测JAK1和STAT6磷酸化表达水平.结果 与正常组相比,IL-4组M2型极化相关标志物CD206、TGF-β1、IL-10和Arg-1等表达显著升高(P＜0.001),JAK1、STAT6磷酸化蛋白水平显著上升(P＜0.001);灵芝孢子粉干预后,上述M2型极化相关标志物和蛋白磷酸化水平显著降低(P＜0.05,P＜0.001).结论 灵芝孢子粉可以抑制M2型巨噬细胞极化,其作用机制可能与抑制JAK1/STAT6信号通路有关.

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目的 建立灵芝浓缩丸的处方、制备方法 .方法采用塑制法制备灵芝浓缩丸.以成丸的情况、丸粒性状、烘干时间、丸粒质量、崩解时限及水分含量为指标确定处方工艺,并根据药典相关要求进行质量标准的检测.结果 破壁孢子粉与灵芝流浸膏用量比例为1:2,在60℃环境下烘干5 h后打光,置60℃下干燥1 h,制得的灵芝浓缩丸成丸性好,表面光洁,水分含量、崩解时限均符合药典要求.结论 塑制法制备灵芝浓缩丸工艺简单,适合于工业化生产.

目的:了解广州市第十二人民医院(以下简称"我院")门诊尘肺病患者的用药情况,为合理用药提供参考.方法:对2015年1月—2017年9月我院门诊尘肺病患者处方6050张中患者一般情况和药品的用量、销售金额、用药频度、限定日费用及销售金额排序/用药频度排序的比值等进行统计分析.结果:2015年1月—2017年9月我院门诊尘肺病患者处方用药的销售金额及用药频度均呈下降趋势;免疫增强剂、呼吸系统用药和抗肺纤维化药为主要用药;销售金额与用药频度呈现不一致性;限定日费用较高的有汉防己甲素注射液、灵芝孢子粉胶囊和头孢唑肟钠,但各品种的限定日费用变动不大,在2017年普遍略微降低,与广东省在2017年7月取消药品加成相关.结论:我院门诊尘肺病患者用药结构基本合理,但也存在一定的不合理情况,应根据疾病进展情况、合并症及患者经济能力选择合适的治疗方案.

目的:研究破壁灵芝孢子粉(GLS)对肝癌SMMC-7721细胞裸鼠皮下成瘤模型的作用及其机制.方法:构建人肝癌裸鼠皮下成瘤模型,将裸鼠随机分为模型组、GLS低剂量组(0.5 g· kg-1)、中剂量组(1.0 g·kg-1)、高剂量组(2.0 g·kg-1).给药30天后取血检查血清ALT、AST、Urea、Cr,取瘤体进行HE染色,观察病理改变;采用RT-PCR技术检测各组瘤体PCNA及AFP mRNA表达;采用IHC-P及Western-Blot技术检测各组瘤体PCNA及CD34表达.结果:与模型组比较,GLS组肿瘤生长较慢,瘤重较小,差异有统计学意义(P＜0.05);瘤体病理观察显示GLS组坏死较模型组多;GLS高剂量组血清ALT、AST均低于模型组(P＜0.05),Urea、Cr与模型组比较无差异;GLS高剂量组PCNA、AFP及CD34 mRNA表达均低于模型组(P ＜0.05);PCNA蛋白在模型组表达最高,阳性率为85％;GLS低剂量组阳性率为65％;GLS中剂量组阳性率约50％,GLS高剂量组阳性率约35％;GLS高剂量组CD34蛋白表达显著低于模型组(P＜0.05).结论:破壁灵芝孢子粉能够抑制裸鼠肝癌SMMC-7721细胞皮下瘤体生长,其机制可能与抑制肿瘤血管生成有关.