目的:建立糖尿病微血管病变大鼠模型，模拟糖尿病视网膜及肾微血管病变的生化及病理改变。方法:健康雄性Sprague-Dawley大鼠40只，随机分为空白组、模型组，分别为10、30只。空白组、模型组大鼠分别给予普通饲料、高脂高糖饲料喂养5周后，模型组大鼠按体重35 mg/kg剂量经腹腔单次注射1%链脲佐菌素（STZ）建立2型糖尿病模型。建模后持续喂养至第10周（建模后4周），观察大鼠一般情况，采集样本进行后续实验。采集大鼠动脉血、尿样标本检测血肌酸酐（CREA）、三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDL-C）、低密度脂蛋白（LDL-C）及尿微量白蛋白、尿肌酐（UCr）、尿糖；计算肾脏指数、微量尿白蛋白/尿肌酐比值（UACR）。光相干断层扫描血管成像（OCTA）观察大鼠视网膜浅层毛细血管丛血管变化及无灌注区情况；苏木精-伊红、高碘酸-雪夫染色观察大鼠肾脏、视网膜形态结构变化；免疫荧光染色观察大鼠视网膜Müller细胞神经纤维及细胞核表达情况；透射电子显微镜观察视网膜组织超微结果。组间比较采用独立样本 t检验。 结果:建模后4周，与空白组比较，模型组大鼠体重显著降低，随机血糖显著升高，差异有统计学意义（ t=5.755、－51.291， P<0.05）；肾脏指数、尿糖、UACR显著升高，UCr显著降低，差异有统计学意义（ t=10.878、137.273、3.482、－6.110， P<0.05）；CREA降低，TG、TC、HDL-C、LDL-C升高，差异均有统计学意义（ t=－28.012、33.018、118.018、13.585、16.480， P<0.05）。OCTA检查可见视网膜浅层毛细血管无灌注区。光学显微镜观察发现，模型组大鼠视网膜内界膜肿胀、增厚，表面不平，内、外核层细胞排列紊乱，密度降低；肾小球充血伴皮质管状上皮肿胀，肾小球系膜区增宽，基底膜增厚。免疫染色结果显示，模型组大鼠视网膜内、外丛状层呈片状强绿色荧光表达，内、外核层呈散在点状绿色荧光表达。透射电子显微镜发现，模型组大鼠视网膜微血管基底膜轻度增厚，血管内皮细胞水肿，内皮细胞核及周细胞核固缩、核膜皱缩，线粒体轻度肿胀，空泡化。 结论:高糖高脂喂养联合单次腹腔注射STZ 35 mg/kg可成功建立2型糖尿病微血管病变模型。

目的:构建携带含Krüppel样因子4(KLF4)基因的重组慢病毒载体，建立KLF4基因过表达的骨髓间充质干细胞株(BMSCs)，并观察颈动脉损伤后血管增生的变化。方法:以慢病毒为载体介导KLF4基因转染BMSCs。选用10周龄SD大鼠24只，随机分为3组，分别为假手术组、模型组、KLF4组(注入KLF4修饰的BMSCs细胞)。采用球囊导管构建大鼠颈动脉内皮损伤的动物模型，于14 d后股动脉放血处死大鼠，并采用苏木精-伊红(HE)染色法观察各组颈总动脉血管壁厚度变化及形态学变化；采用Griess法检测各组实验大鼠血清中一氧化氮(NO)的含量；采用蛋白质印迹法(Western blot)检测大鼠颈动脉内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、KLF4蛋白的表达水平。组间比较采用单因素方差分析。结果:模型组内皮细胞增生高于假手术组(1.68±0.29比0.01±0.01， F＝244.345， P<0.05)，差异有统计学意义，而KLF4组内皮细胞增生低于模型组(0.14±0.01比1.68±0.29， F＝244.345， P<0.05)。模型组血清中NO浓度明显低于假手术组(7.22±1.40比21.29±1.83， F＝171.000， P<0.05)，差异有统计学意义，而KLF4组NO浓度明显高于模型组(16.34±1.33比7.22±1.40， F＝171.000， P<0.05)，差异有统计学意义。Western blot显示，KLF4/β-肌动蛋白(β-actin)在假手术组、模型组和KLF4组中的比值分别为0.564±0.015、0.626±0.023、0.916±0.042，差异有统计学意义( F＝125.121， P<0.05)；eNOS/β-actin在假手术组、模型组和KLF4组中的比值分别为0.852±0.043、0.383±0.017、0.707±0.014，差异有统计学意义( F＝223.879， P<0.05)。 结论:KLF4可正性调节eNOS的表达，从而增加血管中NO的浓度，通过抑制血管内皮细胞的迁移和增殖来抑制颈动脉损伤造成的血管狭窄。

目的:观察缺氧通过抑制血管内皮细胞生长因子受体结合蛋白2接头蛋白2(GAB2)的表达，导致下肢动脉内皮损伤的分子机制。方法:血管标本取材于上海交通大学医学院附属仁济医院血管外科，粥样硬化股动脉标本取自于下肢动脉粥样硬化闭塞(ASO)截肢患者，正常动脉血管取自于意外车祸截肢患者。通过组织免疫荧光(IF)、实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测正常动脉血管与ASO病变动脉血管内膜组织中GAB2表达差异。采用RT-qPCR和Western blot检测缺氧条件下内皮细胞中微小RNA(miR)-30a及GAB2表达改变。内皮细胞中沉默或过表达GAB2后Western blot检测自噬标志物LC3 Ⅱ/Ⅰ的表达。组间比较采用 t检验。 结果:组织免疫荧光(IF)和Western blot检测显示内皮细胞自噬水平ASO组织高于正常组织(5.252±0.449， t＝15.950， P<0.01；1.805±0.210， t＝5.471， P<0.01)，同时GAB2表达ASO组织低于正常组织(0.349±0.028， t＝32.120， P<0.01；0.399±0.059， t＝5.180， P<0.01)；体外实验显示内皮细胞中GAB2表达缺氧组低于对照组(0.668±0.088， t＝3.774， P<0.01)；内皮细胞自噬标志物LC3 Ⅱ/Ⅰ水平沉默GAB2组高于对照组(1.197±0.036， t＝9.376， P<0.01)。进一步机制研究结果显示，内皮细胞中miR-30a表达量缺氧组高于对照组(2.349±0.118， t＝9.257， P<0.01)，GAB2 mRNA水平过表达miR-30a组低于对照组(0.207±0.040， t＝6.031， P<0.01)。 结论:缺氧促进血管内皮细胞表达miR-30a，通过降解GAB2 mRNA，引起血管内皮细胞自噬水平升高，导致动脉内皮损伤。

目的 观察"手十二井穴"放血预处理对大鼠急性低氧肺组织损伤模型血气相关指标、低氧诱导因子(HIF)-1α及血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响,探讨"手十二井穴"放血预处理对急性低氧肺组织损伤的影响.方法 将72 只雄性SD大鼠随机分为对照组 8 只、低氧(模型)组 32 只、井穴放血预处理(放血)组 32 只,模型组和放血组又分为 6、24、48、72 h 4 个时间段亚组,每组各 8 只.采用实验动物低氧模拟舱模拟 15%O2 浓度,制备大鼠急性低氧肺组织损伤模型.放血组按"少商""商阳""中冲""关冲""少冲""少泽"的顺序,每天 1 次,共 5 d.用手持式血气分析仪检测肺动脉血气氧分压(PaO2)、血氧饱和度(SaO2)、酸碱度(pH)、二氧化碳分压(PaCO2)等相关指标,采用Western印迹法检测HIF-1α表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测VEGF含量.结果 与对照组比较,模型组各时间段PaO2、SaO2 明显降低,HIF-1α和VEGF表达水平显著升高(P＜0.01).与同时间段模型组比较,放血组PaO2 和SaO2 均出现升高,PaO2 在 6、48 h时有统计学意义,SaO2值在 6、24、48 h时有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01),HIF-1α表达在各时段明显下调,VEGF含量在 24、48、72 h时明显下降(P＜0.05,P＜0.01).但放血组PaO2 各时间段和SaO2(6、24 h)仍低于对照组,HIF-1α(6、48、72 h)和VEGF各时间段表达水平仍高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论 "手十二井穴"放血预处理在一定时间和程度上可改善大鼠急性低氧(15%O2,85%N2)肺组织损伤模型的缺氧情况,其可能的作用与升高动脉血 PaO2、SaO2 及下调 HIF-1α 表达、降低VEGF含量有关,从而有利于模型大鼠适应急性低氧环境.

急性心肌梗死是冠状动脉粥样硬化性心脏病的一种类型,大多是由于冠状动脉狭窄闭塞,发生冠状动脉血供减少甚至中断,使供氧不足的心肌细胞发生严重持久的缺血坏死,导致心肌细胞代谢紊乱、脂质沉积,引起炎症因子表达升高,触发细胞凋亡,导致大量心肌细胞被吞噬降解,心功能急剧恶化.近年来研究发现,生长分化因子15(GDF-15)在急性心肌梗死后缺血缺氧的心肌细胞中呈高表达状态,这可能是一种对受损心功能的保护性应答反应.GDF-15可抑制细胞凋亡、缓解细胞损伤、调控脂质代谢、稳定斑块、减轻炎症反应、改善心肌缺血、减轻心肌梗死面积的持续扩大、促进内皮细胞增殖及血管新生.本文通过阐述急性心肌梗死后GDF-15对心血管系统的保护作用,进一步论证GDF-15在心血管疾病尤其是心肌梗死的发生发展中起到的作用及临床意义.

目的 探讨枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharide,LBP)在力竭运动致大鼠胸主动脉血管内皮细胞损伤中的保护作用.方法 雄性SD大鼠40只,按体重随机分为空白对照组,有氧运动组,力竭运动组,力竭运动+LBP组,进行5周游泳训练,建立力竭运动模型.采用离体血管环灌流技术测定大鼠胸主动脉血管环对去甲肾上腺素(NE)诱导的血管反应性;高倍镜下观察HE染色的大鼠胸主动脉血管组织形态的变化;流式细胞术检测外周循环血液中的内皮细胞数;激光共聚焦显微镜检测各组氧化应激(H2O2)后细胞内[Ca2+]i浓度变化.结果 灌服LBP可以抑制NE诱发的血管收缩反应(P＜0.01),减少内皮细胞脱落,降低细胞内Ca2+浓度.结论 力竭运动会导致大鼠胸主动脉血管内皮细胞损伤脱落;LBP对大鼠胸主动脉内皮细胞损伤有一定的保护作用.

目的 观察四妙勇安汤对大鼠尾动脉血管吻合术后吻合口再狭窄及血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的作用.方法 雄性SD大鼠随机分为两组,每组12只,均采用尾动脉离断后行显微镜下吻合手术造模,造模后12h进行干预,实验组予四妙勇安汤灌服,对照组予0.9％氯化钠注射液灌服.分别于造模后第3日和第7日的末次灌胃2h后分批留取血管组织标本,HE染色观察、免疫组织化学法检测VEGF蛋白表达,并采用图像分析软件IPP 6.0(Image-Pro-Plus 6.0)进行分析.结果 与对照组比较,四妙勇安汤组在术后第3日和第7日时的血管内膜面积均明显增加(P＜0.05),VEGF蛋白表达升高(P＜0.05),而吻合口血管狭窄程度减低(P＜0.05).结论 四妙勇安汤能促进血管吻合术后血管内皮细胞增殖,并通过调节VEGF蛋白水平的变化,加快血管修复,达到预防吻合口再狭窄的作用.

目的 观察抗炎合剂对脓毒症血管内皮细胞(vascular endothelial cell, VEC)损伤-微循环障碍-脏器功能障碍的临床疗效.方法 共纳入73例患者,采用随机数字表法将研究对象分为治疗组40例,对照组33例.对照组给予常规西医综合治疗,治疗组在对照组基础上加用抗炎合剂,2组均连续治疗7 d.观察治疗前后2组患者的血管内皮损伤指标可溶性血栓调节素(soluble thrombomodulin, sTM)、VEGF-2、内皮特异性分子-1(endothelial specific molecule-1, ESM-1),微循环障碍指标动脉血乳酸(lactate, Lac)、中心静脉血氧饱和度(central venous blood oxygen saturation, ScvO2)、舌下微血管的总血管密度(total vessel density, TVD)、灌注血管密度(perfused vessel density, PVD)、灌注血管比例(proportion of perfused vessels, PPV)、微血管流动指数(microcirculatory flow index, MFI).记录治疗前后序贯器官衰竭评分(Sequential Organ Failure Assessment, SOFA).结果 治疗7 d后中药抗炎合剂治疗组sTM[(12.37±5.08)μg/L比(18.77±6.88)μg/L,t＝3.448]、VEGF-2[45.6 ng/L(14.3,112.5)比52.4 ng/L(17.2,123.6),Z＝4.009]、ESM-1[(15.54 ± 4.09)ng/ml 比(17.64 ± 6.79)ng/ml , t＝-1.551] , Lac [(2.6 ± 1.2)mmol/L 比(3.7 ± 1.8)mmol/L,t＝2.366]和 SOFA[(4.1±1.7)比(6.1±3.2),t＝-2.118]低于对照组(P＜0.05);ScvO2[(0.719± 0.243)比(0.603±0.201),t＝-2.773],PVD[(14.8±5.8)mm/mm2比(13.1±5.1)mm/mm2,t＝-5.114], PPV[(59.1%±22.5%)比(53.9%±20.6%),t＝1.779],MFI[(9.4±4.6)比(7.2±2.2),t＝4.339]高于对照组(P＜0.05).相关性分析显示,sTM 与 PPV 为负相关(r＝-0.755,P＜0.01),ESM-1 与 PVD、PPV、MFI为负相关(r＝-0.877,P＜0.01;r＝-0.799,P＜0.01;r＝-0.821,P＜0.01);ESM-1与SOFA呈正相关(r＝0.840,P＜0.01).结论 中药抗炎合剂可改善脓毒症患者VEC功能.

目的:探讨尼可地尔联合曲美他嗪对急性心肌梗死患者急诊经皮冠状动脉介入(PCI)术后血清高敏C反应蛋白(hs-CRP)、内皮细胞特异性分子(ESM-1)、内皮细胞微粒(EMPs)的影响.方法:选择2015年10月至2017年10月我院接诊的92例急性心肌梗死患者进行研究,通过随机数表法分为观察组(n=46)和对照组(n=46),两组均行急诊PCI术,围术期给予常规治疗,对照组术后给予曲美他嗪治疗,观察组联合尼可地尔治疗,连续用药7d.比较两组心电图疗效、PCI术前及治疗后7d心功能、hs-CRP、ESM-1、EMPs的变化,并比较术后30d内不良心血管事件发生率.结果:治疗后7d,观察组临床疗效总有效率为93.48%(43/46),明显比对照组的73.91%(34/46)高(P<0.05);治疗后7d,两组心功能指标较PCI术前均显著改善(P<0.05),观察组左室舒张末期内径(LVDD)、左室收缩末期内径(LVDS)、左室舒张末期容积(LVEDV)、左室收缩末期容积(LVESV)均明显低于对照组,左室射血分数(LVEF)明显比对照组高(P<0.05);治疗后7d,两组血清hs-CRP、ESM-1、EMPs较PCI术前均显著降低(P<0.05),且观察组血清hs-CRP、ESM-1、EMPs均明显低于对照组[(6.84±1.19)mg/L vs(8.94±1.46)mg/L,(0.89±0.11)μg/L vs(1.16±0.15)μg/L,(820.18±113.49)个/μL vs(1017.35±120.47)个/μL](P<0.05);两组术后30d内紧急冠状动脉血运重建、再发心肌梗死、脑卒中、脑卒中心源性死亡的总发生率分别为4.35%、13.04%,比较无显著差异(P>0.05).结论:在急性心肌梗死患者急性PCI术后使用尼可地尔联合曲美他嗪效果显著,可有效改善术后心功能,短期预后良好,其内在机制可能可降低血清hs-CRP、ESM-1、EMPs的表达相关.

目的 探讨ω-3鱼油脂肪乳注射液对动脉血相关指标的影响及其机制.方法 将90只SD大鼠按随机数字表法分为3个组,分别为正常对照组、中暑模型组、ω-3鱼油脂肪乳注射液治疗组,每组30只大鼠.将大鼠置于40℃,60％相对湿度的恒温箱中1h复制中暑模型.ω-3鱼油脂肪乳治疗组于制模后尾部静脉注射ω-3鱼油脂肪乳注射液1.67 ml/(kg·d);正常对照组和中暑模型组尾部静脉均注射同等剂量的生理盐水,2组均每日1次,共3d.各组于制模后12、24、48 h记录大鼠的体温、心率、平均动脉压(MAP);在以上3个不同时间点每组取10只大鼠采集腹主动脉血后分离血清,对血清样本采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定动脉血相关指标脂多糖(LPS)、核转录因子-κB(NF-κB)、P53等的表达水平.结果 与正常对照组比较,中暑模型组于制模后12、24、48 h三个时间点的体温、心率、LPS、NF-κB、P53均明显升高(P＜0.05),MAP均明显降低(P＜0.05);与模型组比较,ω-3鱼油脂肪乳治疗注射液组在制模后12、24、48 h三个时间点的如上动脉血相关指标均得到改善(P＜0.05).结论 ω-3鱼油脂肪乳注射液可显著改善中暑大鼠的动脉血相关指标LPS、NF-κB、P53等的表达水平,提示其可抑制LPS进入血液、可能影响血管内皮细胞.