目的 观察大柴胡汤对重症中暑大鼠炎症的治疗效果并探寻其作用机制.方法 SPF级SD雄性大鼠60只随机分为空白对照组、模型组、中药低剂量组、中药高剂量组.将大鼠置于高温气候动物培养箱内[温度(40.50±0.50)℃,湿度(65.00±2.00)％]制备经典中暑模型,模型制备成功后6 h开始灌胃给药,8 h 1次,连续2d.在造模成功后6、24、48 h各处死5只大鼠,检测血清白细胞介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α),同时取回肠组织,采用蛋白质免疫印迹试验测定肠道组织中TLR4、核转录因子-κB(NF-κB)蛋白表达.结果 与空白对照组比较,模型组、中药低剂量组和中药高剂量组各时间点血清IL-1、TNF-α水平和肠道组织中TLR4、NF-κB蛋白表达水平均升高(P＜0.05或P＜0.01);中药低、高剂量组造模后24、48 h血清TNF-α、IL-1水平和肠道组织中TLR4、NF-κB的蛋白表达水平均较模型组显著下降(P＜0.05).中药高剂量组TNF-α、TLR4、NF-κB蛋白表达水平在造模后24、48 h较低剂量组明显下降,而IL-1水平在造模后48 h明显下降(P＜0.05).结论 大柴胡汤能抑制TLR4/NF-KB信号通路,减轻肠道炎症反应,从而起到保护重症中暑大鼠的作用.

目的 探讨血必净注射液调控血管内皮糖萼异常,改善重症中暑大鼠急性肺损伤的机制.方法 将48只Wistar大鼠随机分为对照组、中暑组、血必净组,每组16只,其中8只用于伊文思蓝(EB)法测定.采用高温高湿[温度(40±2)℃,湿度65%±5%]打击60 min制备中暑大鼠模型,血必净组大鼠于造模前连续3 d尾静脉注射血必净注射液(2 ml/kg,2次/d).各组大鼠于造模后2 h行麻醉处理并取材,记录肺湿/干重比,测定肺泡灌洗液(BALF)蛋白浓度,EB法测定肺血管通透性,HE染色观察肺组织病理学变化,免疫荧光染色观察肺血管表面透明质酸(HA)的表达变化,Western blotting检测肺组织多配体蛋白聚糖-1(Syndecan-1)、磷脂酰肌醇聚糖-1(Glypican-1)、血管内皮钙黏蛋白(VE-Cadherin)、紧密连接蛋白(Occludin)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)及E-选择素(E-selectin)等蛋白的表达,酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及肺组织中乙酰肝素酶(HPA)的表达水平.结果 血必净可下调肺湿/干重比,减少蛋白渗出,改善肺血管通透性(P<0.01),减轻肺组织损伤(P<0.01),减少肺血管表面HA、Syndecan-1、Glypican-1降解(P<0.01),增加肺血管连接蛋白VE-Cadherin、Occludin的表达(P<0.01),调控黏附蛋白VCAM-1、E-selectin的过度表达(P<0.01),下调TNF-α、IL-6及HPA蛋白的表达(P<0.01).结论 血必净可减少HPA、改善糖萼崩解、修复肺血管完整性、减轻细胞连接损伤、下调黏附分子表达并抑制炎症反应,进而缓解重症中暑所致急性肺损伤.

目的:探讨姜黄素预处理对沙漠干热环境热射病大鼠肠黏膜损伤保护作用及对TLR4/NF-κB信号通路的影响.方法:随机将40只雄性SD大鼠分为5组,常温对照组(NC组)、干热对照组(DH组)、低剂量姜黄素预处理组(LDC组)、中剂量姜黄素预处理组(MDC组)、高剂量姜黄素预处理组(HDC组).NC组和DH组生理盐水灌胃,其他三组按(50、100、200)mg/kg姜黄素灌胃,连续7天.将DH组和姜黄素各组置于西北特殊环境人工实验舱中,设置温度:(41±0.5)℃,湿度:(10±1)％RH,干热暴露150min建立热射病(重度中暑)模型.麻醉处死后采集回肠组织样本,HE染色观察肠黏膜形态学变化并进行病理损伤评分,Westernblotting检测肠黏膜Toll样受体4(TLR4)、核因子-κB (NF-κB)及其抑制蛋白(IκB)的表达.结果:DH组肠粘膜病理损伤评分较NC组显著升高(P＜0.05);各姜黄素预处理组病理损伤评分较DH组显著降低(P＜0.05).DH组较NC组TLR4、NF-κB表达显著升高,IκB表达显著降低(P＜0.05);各姜黄素预处理组较DH组TLR4、NF-κB表达降低,而IκB表达增加,具有显著性差异(P＜0.05).结论:姜黄素能够减轻沙漠干热环境热射病大鼠肠黏膜病理学损伤,其机制可能与姜黄素抑制TLR4/NF-κB信号通路有关.

目的 探讨ω-3鱼油脂肪乳注射液对动脉血相关指标的影响及其机制.方法 将90只SD大鼠按随机数字表法分为3个组,分别为正常对照组、中暑模型组、ω-3鱼油脂肪乳注射液治疗组,每组30只大鼠.将大鼠置于40℃,60％相对湿度的恒温箱中1h复制中暑模型.ω-3鱼油脂肪乳治疗组于制模后尾部静脉注射ω-3鱼油脂肪乳注射液1.67 ml/(kg·d);正常对照组和中暑模型组尾部静脉均注射同等剂量的生理盐水,2组均每日1次,共3d.各组于制模后12、24、48 h记录大鼠的体温、心率、平均动脉压(MAP);在以上3个不同时间点每组取10只大鼠采集腹主动脉血后分离血清,对血清样本采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定动脉血相关指标脂多糖(LPS)、核转录因子-κB(NF-κB)、P53等的表达水平.结果 与正常对照组比较,中暑模型组于制模后12、24、48 h三个时间点的体温、心率、LPS、NF-κB、P53均明显升高(P＜0.05),MAP均明显降低(P＜0.05);与模型组比较,ω-3鱼油脂肪乳治疗注射液组在制模后12、24、48 h三个时间点的如上动脉血相关指标均得到改善(P＜0.05).结论 ω-3鱼油脂肪乳注射液可显著改善中暑大鼠的动脉血相关指标LPS、NF-κB、P53等的表达水平,提示其可抑制LPS进入血液、可能影响血管内皮细胞.

目的 观察高温环境对清醒非束缚大鼠血液动力学的影响并探讨其机制.方法 选择清洁级SD雄性大鼠30只,随机分为正常对照组和模型组,每组15只,分别暴露于24℃室内和42℃热舱中50 min,在清醒非束缚状态下采用植入式生理信号遥测系统监测体核温度(Tc)、平均动脉压(MAP)、动脉收缩压(SAP)、动脉舒张压(DAP)、心率(HR),以及各组大鼠血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、尿素氮(BUN)、肌酐(CR)水平,并观察心组织病理改变.结果 模型组大鼠人舱10～30 min时,Tc、MAP、SAP、DAP、HR均明显高于正常对照组,30 min达到最高值,差异有统计学意义(P＜0.05).模型组大鼠入舱35、40 min时各指标仍高于正常对照组,但45、50 min时除Tc继续升高外,MAP、SAP、DAP、HR均低于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).模型组大鼠血清AST、ALT、ALP、LDH、CK、BUN、CR水平明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 高温环境引起大鼠血液动力学急剧改变,可能与高温环境导致循环系统功能障碍和多器官衰竭有关.

目的 探讨姜黄素预处理对干热下中暑大鼠肠黏膜热休克蛋白70 (HSP70)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达及血清炎症因子的影响.方法 30只SD大鼠随机分为正常对照组(NC组)、干热中暑组(DH组)及姜黄素灌胃组(Cur组),每组各10只.NC组、DH组生理盐水灌胃,Cur组按200 mg/kg姜黄素灌胃(连续7d,每天1次).DH组和Cur组灌胃结束后将其置于模拟干热环境的实验舱中,温度为(41±0.5)℃,相对湿度为(10±1)％,干热暴露150 min造成重度中暑模型后,Western blotting检测回肠组织中HSP70、HMGB1和ICAM-1表达,ELISA检测血液中内毒素(LPS)和炎症因子TNF-α、IL-1β及IL-6的水平.结果 DH组HSP70、HMGB1和ICAM-1表达及LPS、TNF-α、IL-1β、IL-6浓度较NC组显著增加(P＜0.05);Cur组HSP70表达(8.75±0.46)较DH组(2.17±0.14)显著增加(P＜0.05),Cur组HMGB1、ICAM-1表达(6.95±0.42、9.31±0.76)较DH组(17.76±1.54、19.39±1.64)显著降低(P＜0.05),Cur组LPS、TNF-α、IL-1β、IL-6浓度较DH组显著降低(P＜0.05).结论 姜黄素预处理可能通过调控肠黏膜HSP70、HMGB1和ICAM-1的表达,起到保护肠黏膜和减少肠腔内细菌或内毒素的移位,从而减轻干热环境下中暑引起的全身性炎症反应.

目的 探讨模拟军事训练致热损伤动物休克模型脑损伤及凝血功能异常的相关因素.方法 根据热处理和37℃恒温处理方法不同,将150只健康SD大鼠按随机数字表法分为热处理30、60、90、120 min组和热处理死亡组,以及恒温(37℃)处理30、60、90、120 min组和恒温处理死亡组,每组15只.分析比较各组凝血功能[D-二聚体水平、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)以及纤维蛋白原(FIB)]、血气分析指标[血液氧分压(PaO2)、二氧化碳分压(PaCO2)、pH值]、颅内压、脑灌注压,原位标记法(TUNEL)检测海马神经细胞凋亡率.结果 热处理90、120 min组和热处理死亡组D-二聚体水平[(0.73±0.22)、(0.93±0.34)、(1.15±0.33)mg/L]均高于恒温处理同时间点组(P<0.05);热处理60、90、120 min组以及热处理死亡组PT[(16.51±1.05)、(19.79±1.97)、(27.65±2.55)、(36.28±3.88)s]、APTT[(38.87±3.30)、(49.95±7.88)、(56.47±8.62)、(63.84±9.94)s]以及TT[(22.54±1.50)、(28.74±3.93)、(36.99±4.82)、(40.18±6.26)s]均较恒温处理同时间点组明显延长(P<0.05);热处理60、90、120 min组和热处理死亡组FIB水平[(2.01±0.18)、(1.53±0.24)、(1.05±0.22)、(0.82±0.20)mg/dL]显著低于恒温处理同时间点组(P<0.05).热处理各组大鼠PaO2、血pH随处理时间的延长呈逐渐降低趋势,PaCO2逐渐升高(P<0.05).热处理60、90、120 min组和热处理死亡组脑含水量[(74.25±0.5)％、(80.54±0.8)％、(83.54±0.2)％、(84.41±0.3)％]、脑海马神经细胞凋亡率[(19.52±0.61)％、(20.96±0.58)％、(24.33±1.61)％、(28.20±2.74)％]明显高于恒温处理各组(P<0.05),热处理90、120 min组和热处理死亡组颅内压[(1.88±0.33)、(2.19±0.11)、(2.78±0.39)、(3.21±0.58)kPa]显著高于恒温处理同时间点组大鼠(P<0.05);热处理60、90、120 min组和自然死亡时脑灌注压[(8.25±0.71)、(6.38±0.82)、(5.59±0.69)、(4.89±0.65)kPa]均低于恒温处理同时间点组(P<0.05).结论 高温环境下易导致中暑,该过程影响机体凝血功能、呼吸功能、酸碱平衡,从而导致脑水肿以及神经细胞凋亡.

目的 观察大豆皂苷对重症中暑大鼠炎症因子水平、抗氧化活性及运动能力的影响.方法 将80只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、热打击模型组、生理盐水对照组和大豆皂苷组,剔除实验过程中死亡及直肠温度(Tc)＜41 ℃的大鼠,最终纳入54只,每组18只.将大鼠置于30 ℃仿真热气候动物舱,30 min内将舱内温度升至39 ℃,湿度65% ;同时进行跑台运动,跑步速度设置为15 m/min,坡度为0°,每次8 min,间隔2 min,时间为90 min的状态下复制热打击大鼠模型.正常对照组大鼠饲养于温度23～25 ℃,相对湿度为50%～70%环境中.制模后,生理盐水对照组和大豆皂苷组每日灌胃生理盐水及大豆皂苷(10 mg/kg),连续3个月;热打击模型组不给予任何处理.于大鼠出舱24 h后取股动脉血,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清白细胞介素(IL-6、IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;采用自动生化分析仪检测血清血红蛋白(Hb)、尿素(BUN)、乳酸脱氢酶(LDH)、血乳酸(Lac)含量.结果 热打击模型组IL-6、IL-1β、TNF-α、IFN-γ、MDA、Hb、BUN、LDH、Lac均较正常对照组明显升高〔IL-6(ng/L):86.17±4.82比 12.60±3.49,IL-1β(ng/L):83.00±5.98 比 15.70±3.64,TNF-α(ng/L):72.22±6.93 比 13.75±2.69, IFN-γ(ng/L):36.22±3.02比7.35±1.60,MDA(nmol/mg):19.78±4.56比6.40±1.35,Hb(g/L):136.22±1.93比 126.75±5.84,BUN(mmol/L):21.06±3.44 比 5.65±1.35,LDH(μmoL·s-1·L-1):9.65±0.83 比 2.12±0.17, Lac(mmol/L):552.56±78.33比1.32±0.18,均P＜0.05〕,SOD、GSH-Px均较正常对照组明显降低〔SOD(kU/L):97.89±10.57比126.65±11.35,GSH-Px (kU/L):19.22±2.58比43.45±4.02〕;但大豆皂苷组IL-6、IL-1β、TNF-α、IFN-γ、MDA、BUN、LDH、Lac较热打击模型组明显降低〔IL-6(ng/L):45.28±3.54比86.17±4.82, IL-1β(ng/L):41.61±2.93 比 83.00±5.98,TNF-α(ng/L):37.22±2.46 比 72.22±6.93,IFN-γ(ng/L):19.22±2.60 比 36.22±3.02,MDA(nmol/mg):11.28±1.74 比 19.78±4.56,BUN(mmol/L):11.78±2.13 比21.06±3.44,LDH(μmoL·s-1·L-1):3.70±0.26比9.65±0.83,Lac(mmol/L):274.56±59.08 比552.56±78.33,均P＜0.01〕,SOD、GSH-Px、Hb较热打击模型组明显升高〔SOD(kU/L):116.11±11.28比97.89±10.57, GSH-Px(kU/L):31.17±2.90比19.22±2.58,Hb(g/L):141.33±3.79比136.22±1.93,均P＜0.01〕;热打击模型组与生理盐水对照组上述指标比较差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论 热打击和运动处理后,大鼠血清炎症因子产生和释放增加,脂质过氧化水提高.大豆皂苷可通过减少重症中暑大鼠血清炎症因子的产生和释放,降低脂质过氧化水平,达到提高机体承受热打击和高强度运动能力的目的.

目的 探讨单核-巨噬细胞髓样细胞触发受体-1(TREM-1)对重症中暑大鼠急性肺损伤的作用及其可能机制.方法 将40只大鼠随机分为对照组(Con组)、中暑组(HS组)、低剂量抑制剂组(LD组)和高剂量抑制剂组(HD组),每组10只.采用高温高湿[温度(40±2) ℃,湿度65%±5%]打击60 min制备中暑大鼠模型,LD组、HD组大鼠分别于造模前2 h尾静脉注射50 mg/kg、100 mg/kg LP-17试剂.采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定体循环血及肺组织匀浆上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6和IL-1β的表达水平;流式细胞术检测体循环血中单核细胞TREM-1的表达;HE染色观察肺组织病理学变化;免疫组化法检测肺组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达;Western blotting检测肺组织TREM-1和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)蛋白的表达.结果 抑制单核-巨噬细胞TREM-1活性可抑制中暑大鼠体循环血和肺组织中TNF-α、IL-6和IL-1β的释放(P<0.01),减少外周血中单核细胞TREM-1的异常表达(P<0.01),减轻肺组织损伤(P<0.01),下调肺组织iNOS、TREM-1和MCP-1蛋白的表达(P<0.01).结论 抑制单核-巨噬细胞TREM-1的活性可通过下调循环血和肺组织中TREM-1的表达而减轻炎性损伤,缓解氧化应激反应,抑制趋化因子释放,进而减轻重症中暑大鼠的急性肺损伤.

目的 观察CD200预处理对重症中暑大鼠炎性因子和肺组织NF-κB表达的影响,探索NF-κB在CD200抑制重症中暑大鼠肺部炎症反应中的作用.方法 雄性Wistar大鼠40只,随机分为对照组(n=8)、重症中暑组(HS组,n=16)、CD200预处理组(CD200组,n=16).HS组、CD200组分别注射等体积生理盐水和CD200融合蛋白,然后经热打击制备大鼠重症中暑模型;对照组饲养于(22.0±1.0)℃环境.造模后60 min检测大鼠肺组织NF-κB/p65 mRNA表达,测定血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素6(IL-6)水平,观察肺组织病理形态学改变,记录大鼠存活时间.结果 HS组和CD200组大鼠肺组织NF-κB/p65 mRNA表达水平明显高于对照组(P<0.05),且HS组高于CD200组(P<0.05).HS组、CD200组和对照组血清HMGB1水平分别为(42.63±18.51、34.12±10.01、5.27±2.31)pg/ml,TNF-α水平分别为(138.58±50.89、63.54±25.25、19.32±8.82)ng/ml,IL-6水平分别为(115.65±40.15、51.08±15.08、7.25±2.28)ng/ml,HS组和CD200组均显著高于对照组(P<0.05),且HS组高于CD200组(P<0.05).CD200组大鼠存活时间明显长于HS组[(98.4±21.6)min vs.(81.4±18.3)min,P<0.05].病理形态学观察显示CD200组炎症及肺泡渗出相较HS组明显减轻.结论 CD200预处理可以减轻重症中暑大鼠的炎症反应,这一作用可能涉及NF-κB的活化抑制及炎性因子表达降低.