目的 探讨无需缝合的外科嵌入式方法在复制小鼠原位肝癌(HCC)肿瘤模型中的应用,并评估该模型在肿瘤生物学研究中的价值.方法 通过体外培养Hepa1-6细胞至适宜浓度,并采用小动物一体式麻醉系统对C57 BL/6J小鼠实施麻醉.该研究采用细胞法、挂线法和嵌入法复制原位肝癌移植瘤模型,并对手术时长、小鼠复苏时间及存活率进行比较.此外,通过MRI技术动态监测肿瘤的形成过程,并对比3种方法的肿瘤成瘤率、单瘤率及腹壁肿瘤种植率.通过病理学检测评估肿瘤组织的结构和病理特征.结果 细胞法组手术时间较挂线法组短(P＜0.05),嵌入法组手术时间较挂线法组短(P＜0.05),细胞法组与嵌入法组手术时间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).细胞法组复苏时间较挂线法组短(P＜0.05),嵌入法组复苏时间较挂线法组短(P＜0.05),细胞法与嵌入法复苏时间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).MRI结果显示,挂线法组肿瘤呈块状生长,可见分隔及类圆形伪影,局部观察受限.细胞法组肿瘤呈片状不规则生长,可见多发肿瘤.嵌入法组肿瘤呈团块状均匀生长,边缘较清.细胞法组模型复制后第7天平均肿瘤体积较挂线法组大(P＜0.05),嵌入法组模型复制后第7天平均肿瘤体积较挂线法组小(P＜0.05),细胞法组与嵌入法组模型复制后第7天平均肿瘤体积比较,差异无统计学意义(P＞0.05).各组模型复制后第21天平均肿瘤体积比较,差异无统计学意义(P＞0.05).各组平均肿瘤重量比较,差异无统计学意义(P＞0.05).各组单瘤率、腹壁肿瘤种植率比较,差异有统计学意义(P＜0.05),嵌入法组单瘤率较细胞法组高(P＜0.05).各组成瘤率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).HE染色结果示,各组肿瘤细胞呈巢状分布,排列紧密,核深染呈分裂象,肿瘤浸润肝组织,符合肝癌病理学特点.结论 采用嵌入法复制的原位移植瘤小鼠模型操作简单,手术时间短,可重复性高,为肝癌的相关基础实验研究及在体动态监测提供了一种重要的实验工具.

目的:探讨巨噬细胞游走抑制因子（MIF）在肝细胞癌（HCC）组织中的表达及其与ERK1/2信号通路之间相关性，为深入研究MIF促进HCC的分子机制建立理论依据。方法:2020年2月至2021年8月，收集天津医科大学肿瘤医院及解放军联勤保障部队第九四〇医院有乙肝肝硬化（HBV-LC）基础的HCC癌组织和癌旁组织各52例作为试验组，其中男39例，女13例，年龄35~65岁。选择20例正常肝组织作为对照组，采用免疫组化检测2组肝组织中MIF、ERK1/2及p-ERK1/2蛋白的表达，采用原位杂交检测2组肝组织中ERK1/2 mRNA表达；选择HepG2肝癌细胞和L-02正常肝细胞与不同浓度rMIF共培养，通过Western 印迹法检测2种肝细胞ERK1/2蛋白的表达及其磷酸化水平，通过RT-PCR检测2种肝细胞ERK1/2 mRNA的表达水平，计量资料采用单因素方差分析，计数资料采用χ 2检验。 结果:MIF、ERK1/2、p-ERK1/2和ERK1/2 mRNA在HCC和癌旁组织中表达均明显增强（HCC组表达MIF为78.8%，癌旁组表达MIF为75.0%；HCC组表达ERK1/2为80.8%，癌旁组表达ERK1/2为71.8%；HCC组表达p-ERK1/2为75.0%，癌旁组表达p-ERK1/2为46.2%；HCC组表达ERK1/2 mRNA为76.9%，癌旁组表达ERK1/2 mRNA为78.8%），与正常肝组织比较，差异有统计学意义（ P<0.05），HCC与癌旁组织比较差异无统计学意义（ P>0.05）。HepG2肝癌细胞ERK1/2、p-ERK1/2和ERK1/2 mRNA表达明显升高，且随rMIF浓度的递增而增加，当rMIF浓度为200 ng/ml时升高最明显，与L-02正常肝细胞比较，差异有统计学意义（ P<0.05）。 结论:MIF、ERK1/2和p-ERK1/2在HCC组织和HepG2肝癌细胞中高表达，提示MIF可能通过ERK1/2信号通路促进肝细胞癌的发生与发展。

目的:初步观察应用明胶海绵微粒肝动脉化疗栓塞(GSMs-TACE)联合同种异体原位肝移植治疗肝癌合并Ⅱ、Ⅲ型门静脉癌栓患者的安全性及临床疗效。方法:回顾性分析2018年1月至2018年6月清华大学附属北京清华长庚医院行GSMs-TACE联合肝移植的7例肝癌伴Ⅱ或Ⅲ型癌栓受者。术后结合肿瘤标记物、影像学检查、术后并发症、生存时间综合评估安全性及临床疗效。结果:中位随访24个月，受者术前平均行介入的次数为1.5次，术后无胆瘘、腹腔出血、肝肾功能衰竭、动脉狭窄、胆道狭窄等并发症发生。所有受者GSMs-TACE术后肿瘤及癌栓均有不同程度坏死；5例受者GSMs-TACE术后甲胎蛋白较术前下降，7例受者异常凝血酶原较术前下降。7例受者目前均存活，1年存活率为100%，1年无瘤生存率为71.4%。2例受者出现肺转移，复发时间分别为4个月与10个月。结论:GSMs-TACE联合肝移植治疗肝细胞癌合并门静脉癌栓受者，具有一定的临床疗效及良好的安全性。

目的:探究半乳糖靶向纳米探针Gal-OH-BDP(GOB)在近红外二区(NIR-Ⅱ)进行原位肝癌荧光成像的可行性和成像效果。方法:合成NIR-Ⅱ纳米荧光探针GOB，通过人源HepG2肝癌细胞构建BALB/c裸鼠原位肝癌模型，将12只裸鼠采用简单随机抽样法分为2组，每组各6只。使用GOB瘤内注射法进行NIR-Ⅱ成像的记为NIR-Ⅱ GOB组，使用吲哚菁绿(ICG)静脉注射法并先后进行近红外一区(NIR-Ⅰ)和NIR-Ⅱ成像，分别记为NIR-Ⅰ ICG组和NIR-Ⅱ ICG组。利用NIR-Ⅰ/Ⅱ相机进行体内成像试验。使用Image J软件对图片进行荧光图像处理，定量计算肝癌荧光图像的肿瘤-正常组织比(TNR)和肿瘤边缘分辨率，通过石蜡切片及苏木精-伊红染色法进行病理学验证。样本数据采用 t检验和方差分析。 结果:通过病理学成功验证了瘤内注射后GOB在肝癌组织内的靶向积累。NIR-Ⅱ GOB组的TNR高于NIR-Ⅱ ICG组和NIR-Ⅰ ICG组(5.61±0.98比3.35±0.63比2.01±0.54， F＝29.022， P<0.05)。对组成TNR的3项指标(肿瘤区域荧光、正常肝组织背景荧光和环境背景荧光)进行的亚组分析结果表明，在肿瘤区域荧光方面，NIR-Ⅱ GOB组高于NIR-Ⅱ ICG组(228.04±5.60比207.62±14.86， t＝3.149， P<0.05)；在正常肝组织背景荧光方面，NIR-Ⅱ GOB组低于NIR-Ⅱ ICG组(43.22±8.68比63.47±8.88， t＝－3.992， P<0.05)。通过计算跨越肿瘤边缘像素点的灰度值变化率来量化肿瘤边缘分辨率，NIR-Ⅱ GOB组高于NIR-Ⅱ ICG组和NIR-Ⅰ ICG组(170.01±30.92比98.96±23.99比36.82±10.19， F＝48.882， P<0.05)。 结论:通过瘤内注射Gal-OH-BDP纳米荧光团在NIR-Ⅱ窗口实现优于传统ICG介导的原位肝肿瘤荧光成像。

目的:探讨活体肝移植（LDLT）技术应用于成人完全劈离式肝移植（fSLT）的疗效并比较左半供肝（LHG）和右半供肝（RHG）移植的特点。方法:回顾性收集2021年3—12月宁波市医疗中心李惠利医院肝胆胰外科实施的25例fSLT的供受者资料。13例fSLT供者中男性11例，女性2例，年龄［ M（IQR）］38（19）岁（范围：25~56岁），身高168（5）cm（范围：160~175 cm），体重65（9）kg（范围：50~75 kg）。25例受者中男性17例，女性8例，年龄 52（14）岁（范围：35~71岁）；原发性肝癌15例，良性终末期肝病10例；终末期肝病模型评分10（9）分（范围：7~23分）。按供肝类型将受者分为LHG组和RHG组，比较两组的手术疗效及技术特点。随访截至2022年1月。定量资料的组间比较采用Mann-Whitney U 秩和检验。分类资料的组间比较采用χ 2检验或Fisher确切概率法。 结果:按LDLT技术实施原位完全左右半肝劈离，获取有效左半供肝和右半供肝13对，获取时间230（53）min（范围：125~352 min），获取出血量250（100）ml（范围：150~1 000 ml）。经中国人体器官分配与共享计算机系统分配13个LHG和12个RHG用于本中心25例等待者。与RHG组（12例）相比，LHG组（13例）女性和良性终末期肝病占比高，体重和供肝质量较轻（ P值均 <0.05）。总移植物和受者体重比（GRWR）为1.2（0.4）%（范围：0.7%~1.9%），其中LHG组为1.1（0.5）%（范围：0.7%~1.6%），RHG组为1.3（0.5）%（范围：0.9%~1.9%），差异无统计学意义（ P>0.05）。在脉管分配方面，肝中静脉主干均归LHG组，腹腔干、门静脉主干和胆总管分配给LHG和RHG的比例分别为10∶3（ P=0.009）、9∶4（ P>0.05）和4∶9（ P=0.027）；腔静脉前期12例归LHG，后期1例分别归LHG和RHG（ P<0.01）。总体冷缺血时间和无肝期分别为240（90）min（范围：138~420 min）和50（16）min（范围：31~98 min），手术时间和术中出血量分别为474（138）min（范围：294~680 min）和 800（640）ml（范围：200~5 000 ml），差异均无统计学意义（ P值均>0.05）。LHG组3例受者的GRWR≤0.8%，术后有小肝综合征表现，经处理后好转。术后发生Clavien-Dindo并发症分级系统≥Ⅲ级并发症6例（24.0%），其中LHG组4例（4/13），RHG组2例（2/12），经再手术及介入等处理好转5例，术后2周死于继发严重感染1例，术后住院病死率为4.0%，两组并发症的差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:依赖精准的供受者评估和LDLT技术的应用，成人间原位fSLT的并发症发生率和病死率是可以接受的。

目的:探讨环状聚四氟乙烯人工血管重建肝静脉流出道在右半肝活体肝移植中的应用价值。方法:采用回顾性描述性研究方法。收集2015年6月至2018年8月南京大学医学院附属鼓楼医院收治的4例和南京医科大学第一附属医院收治的17例行右半肝活体肝移植供者和对应21例受者的临床病理资料；21例供者中，男10例，女11例；中位年龄为46岁，年龄范围为35～57岁；中位体质量为64 kg，体质量范围为56～72 kg。21例受者中，男16例，女5例；中位年龄为42岁，年龄范围为21～68岁；中位体质量为63 kg，体质量范围为47～77 kg。观察指标：（1）手术及术后情况。（2）随访情况。采用门诊或电话方式进行随访，了解受者术后移植肝功能、肝癌复发、人工血管并发症、人工血管通畅性、生存等情况。随访时间截至2020年8月。受者需终生定期随访。正态分布的计量资料以 x±s表示，偏态分布的计量资料以 M（范围）表示。计数资料以绝对数或百分比表示。采用Kaplan-Meier 法计算通畅率和生存率并绘制通畅率曲线和生存曲线。 结果:（1）手术及术后情况：21例供者手术时间为（367±72）min，供肝质量为（557±68）g，供肝质量与受者体质量比为0.89%±0.16%，住院时间为（10±2）d。21例供者术后未出现需再次手术或有创处理并发症，1例轻度胆瘘，术后留置腹腔引流管1周拔除。21例受者均顺利完成经典原位肝移植。供肝静脉流出道重建时间为（24±4）min，供肝植入时间为（326±66）min，无肝期为（42±6）min。重建肝中静脉V5 18支，直径为（6.1±1.3）mm，V8 15支，直径为（7.2±1.2）mm，肝右后下静脉10支，直径为（6.3±1.3）mm。受者术后入住重症监护室时间为（1.5±0.9）d，总住院时间为（22.6±6.7）d。21例受者中，10例术后发生并发症，其中5例术后1周发生肝功能异常（丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶均>1 000 IU/L，胆红素轻度升高），同时伴腹腔积液增加；行增强CT检查结果示供肝右前叶淤血，肝中静脉V5或V8分支血栓形成，经保肝、抗凝、输注白蛋白等对症治疗后肝功能均恢复正常，腹腔积液减少。2例术后1个月下腔静脉血栓形成，反复出现胸腔积液，行腔静脉造影检查，考虑人工血管血栓形成（其中1例腔静脉旁侧支循环形成，予以球囊扩张并置入腔静脉支架），术后继续口服华法林抗凝治疗后恢复正常。1例胆瘘（腹腔引流液培养出肺炎克雷伯杆菌），1例腹腔感染，1例肺部感染，均经抗感染对症治疗后恢复正常。21例受者无严重并发症和围术期死亡。（2）随访情况：21例受者均获得随访，随访时间为10~57个月，中位随访时间为38个月。21例受者术后6个月均未出现移植肝无功能，其中2例肝癌复发。术后2年6例受者死亡（肝癌复发3例、急性大出血2例、肝衰竭1例），无因人工血管引起的严重并发症死亡。21例受者术后1个月、3个月、6个月、1年、2年肝静脉流出道通畅率分别为88.4%、88.4%、82.4%、68.0%、42.1%。21例受者术后6个月、1年、2年总体生存率分别为100.0%、94.4%、71.4%。结论:环状聚四氟乙烯人工血管重建肝静脉流出道应用于右半肝活体肝移植安全、可行。

Castleman病是一种病因不明的淋巴组织增殖性疾病，常见于纵隔、颈部和腹腔，原发于肝脏较为罕见。本文报道1例原发于肝脏透明血管型Castleman病合并肝硬化的病例，并回顾相关文献。患者男，52岁。体检发现肝脏肿物。患者乙肝病毒血清学标志抗体阳性，肝脏肿瘤测定：铁蛋白644.20 μg/L（30~400 μg/L），影像学考虑原发性肝癌可能。术后病理组织形态为肝组织内淋巴组织增生，可见多量的淋巴滤泡，生发中心萎缩，套区增宽，滤泡间区见显著增生的血管伴玻璃样变性，局部可见“洋葱皮”样和“棒棒糖”样外观。免疫组织化学染色：CD20、CD3未显示优势表达，CD21、CD23显示淋巴滤泡网架，CD10、bcl-6、Ki-67显示萎缩的生发中心，bcl-2显示套区增宽，cyclin D1、SOX11、EB病毒编码的RNA原位杂交均阴性。病理诊断为肝脏透明血管型Castleman病。术后未行其他辅助治疗，随访8个月，患者情况良好，复查未见肿瘤复发，其他部位亦未见病变。肝脏Castleman病患者缺乏典型的临床症状和影像学特征，术前易被误诊为其他良、恶性病变，术后需组织学形态结合免疫表型，必要时分子检测可明确诊断。

目的:探讨中晚期肝细胞癌患者接受程序性死亡蛋白-1(PD-1)抑制剂联合酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)治疗后实施肝移植的安全性及有效性。方法:回顾性分析首都医科大学附属北京佑安医院与解放军总医院第一医学中心2019年1月至2020年12月中晚期肝细胞癌实施肝移植的6例患者资料，均为男性，年龄(57.5±4.3)岁。分析移植前肿瘤分期、PD-1抑制剂使用情况、移植时PD-1抑制剂停用时长，以及术后肝功能恢复、并发症等情况。门诊复查随访肿瘤复发、无瘤生存情况等。结果:6例中晚期肝细胞癌患者移植前接受了PD-1抑制剂联合TKIs治疗，其中4例肿瘤为巴塞罗那临床肝癌分期(BCLC)C期或中国肝癌分期(CNLC)Ⅲa期，2例为BCLC-B期或CNLC-Ⅱb期。6例患者使用PD-1抑制剂1~20个周期，平均5.5个周期，停用PD-1抑制剂至肝移植时间间隔12~45 d，平均19.5 d。6例患者经PD-1抑制剂联合TKIs治疗后达到肝移植标准，均成功实施了同种异体原位肝移植，术后肝功能恢复良好，无急性排斥反应和其他严重并发症发生。随访时间范围8.2~27.3个月，中位时间11.9个月。随访结束时无患者死亡，2例肿瘤复发。4例患者无肿瘤复发，无瘤生存期2.9~27.3个月，平均10.9个月。结论:肝移植前使用PD-1抑制剂联合TKIs治疗有可能使中晚期肝细胞癌患者获益，并且不会增加移植后急性排斥反应与其他并发症的发生。

目的:观察Runt相关转录因子3(Runx3)基因修饰对肝癌SMMC-7721细胞放射增敏的影响。方法:重组表达载体pcDNA3.1-Runx3转染肝癌SMMC-7721细胞，分为pcDNA3.1-Runx3组、空载pcDNA3.1组及空白组。转染3 d后，反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹法(Western blot)测定Runx3 mRNA和蛋白表达，集落形成法测定细胞放射敏感性，原位缺口末端标记法(TUNEL)法行细胞凋亡检测，裸鼠移植瘤实验检测Runx3修饰对肝癌放射敏感性影响，Western blot检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3蛋白表达。多组比较采用单因素方差分析(ANOVA)，两组数据比较使用 t检验。 结果:pcDNA3.1-Runx3组Runx3 mRNA和蛋白表达明显升高；经过射线放射处理后，pcDNA3.1-Runx3组细胞的增殖能力显著降低( P<0.05)，细胞放射敏感性升高；10 Gy照射后，pcDNA3.1-Runx3组凋亡率为(38.56±2.18)%，高于空载pcDNA3.1组[(19.52±1.76)%]和空白组[(18.95±1.48)%， P<0.05]；射线处理后pcDNA3.1-Runx3组移植瘤生长显著抑制( P<0.05)。pcDNA3.1-Runx3组移植瘤细胞E-cadherin、Caspase-3蛋白水平明显升高( P<0.05)。 结论:Runx3基因修饰可增加肝癌SMMC-7721细胞对X线的敏感性，抑制裸鼠肝癌SMMC-7721细胞移植瘤的生长，增强肿瘤的放射敏感性。

目的:利用生物信息学分析方法，筛选出原位肝癌和转移灶中的差异基因及其参与的代谢通路，寻找肝癌转移治疗新的代谢靶点。方法:从基因表达汇编数据库(GEO)中下载编号为GSE40367的肝癌原发和转移基因表达谱数据。筛选出差异基因后，对差异基因进行基因本体论(GO)功能富集和京都百科全书基因和基因组(KEGG)通路分析。利用STRING数据库和cytoscape软件分析差异基因间的蛋白相互作用。通过文献检索获得肝癌转移中代谢组的变化，对差异基因和代谢物用MetaboAnalyst 4.0进行联合分析。利用Kaplan-Meier生存曲线在线对关键基因进行生存分析。结果:从GSE40367中共筛选出564个差异基因，相比于原位肿瘤，转移癌中上调基因287个，下调基因277个。差异基因GO功能富集在一元羧酸代谢、脂肪酸代谢和脂质转运等过程。KEGG主要富集在胆汁分泌、ABC转运蛋白、半胱氨酸和甲硫氨酸代谢以及糖异生等通路。联合分析表明，主要相关代谢通路是烟酸和烟酰胺代谢、苯丙氨酸代谢、精氨酸生物合成和糖酵解或糖异生等。对关键基因的生存分析发现， CTH基因低表达可能与肝癌不良预后相关， PCK1、 AOX1基因的高表达可能与肝癌不良预后相关。 结论:利用生物信息学分析揭示了与肝癌转移相关的代谢通路及通路中基因和代谢物的变化，提示了肝癌转移发生的分子机制，为肝癌转移治疗提供了新的代谢靶点。