目的:评价自拟温阳活血汤联合孕三烯酮胶囊治疗子宫腺肌病痛经的疗效。方法:将符合入选标准的2016年1月-2018年12月青海省大通县中医院子宫腺肌病痛经患者88例，按随机数字表法分为2组，每组44例。对照组采用西医常规疗法治疗，研究组在对照组基础上加用自拟温阳活血汤。2组均连续治疗6个月。分别于治疗前后进行中医证候评分和痛经评分，采用阴道超声检测并计算子宫体积，采用诺丁汉健康调查表(Nottingham Health Poofite, NHP)评估患者生活质量，采用双抗夹心ELISA法检测血清糖类抗原125(carbohydrate antigen 125, CA125)、TNF-α、IL-8水平，评价临床疗效。结果:研究组总有效率为93.2%(41/44)、对照组为72.7%(32/44)，2组比较差异有统计学意义( χ2＝6.510， P<0.01)。治疗后，研究组中医证候评分、痛经评分及子宫体积均低于对照组( t值分别为7.956、4.959、4.235， P值均<0.01)；疼痛、精力、情感、睡眠、社会活动及身体活动评分均低于对照组( t值分别为8.592、9.341、6.652、13.597、4.085、7.858， P值均<0.01)。治疗后，研究组血清CA125[(33.02±5.11)IU/ml比(46.22±6.51)IU/ml， t＝10.580]、TNF-α[(41.13±5.03)pg/ml比(55.50±6.15)pg/ml， t＝11.997]、IL-8[(38.02±5.50)pg/ml比(49.42±6.51)pg/ml， t＝8.873]水平均低于对照组( P<0.01)。 结论:自拟温阳活血汤联合孕三烯酮胶囊可降低血清CA125、TNF-α、IL-8水平，改善子宫腺肌病痛经患者的临床症状，提高生活质量。

目的:探讨宣白承气汤加味结合西医常规疗法对急性脑梗死昏迷患者促醒作用的影响。方法:将符合入选标准的2019年3月-2020年1月淮北市中医医院急性脑梗死昏迷患者72例，按随机数字表分为2组，每组36例。对照组采用西医常规疗法治疗，治疗组在对照组基础上结合宣白承气汤加味鼻饲给药。2组均治疗7 d。采用美国国立卫生研究院卒中量表（National Institutes of Health Stroke Scale, NIHSS）评估神经功能缺损程度，采用全面无反应性量表（Full Outline of Unresponsiveness Scale, FOUR）评估意识障碍程度，行头颅CT三维重建识别并标记水肿区域，采用双抗夹心ELISA法测定血清高敏C反应蛋白（hs-CRP)、同型半胱氨酸（Hcy )、内皮素-1(ET-1)水平，观察治疗期间的不良反应，评价临床疗效。结果:治疗组总有效率为100% (36/36)、对照组为86.1%(35/36) ，2组比较差异有统计学意义( Z＝-0.242 ， P＝0.015)。治疗组治疗后第3、7天NIHSS评分低于对照组( t值分别为26.567、17.982， P值均<0.001) ；治疗组治疗后3 d( t＝15.235、14.892、18.452、11.232、16.235)、治疗后7 d ( t＝19.568、16.232、10.356、9.546、11.098)睁眼反应、运动反应、脑干反射、呼吸节律评分及总分均高于对照组( P <0.01)。治疗组治疗后血清hs-CRP、Hcy、ET-1水平及脑水肿CT阈值均低于对照组( t值分别为22.352、17.789、11.908、19.652， P值均<0.001)。2组治疗过程中未见药物不良反应。 结论:宣白承气汤加味结合西医常规疗法可改善急性脑梗死昏迷患者的神经功能，促进觉醒，作用机制可能与降低hs-CRP、Hcy、ET-1水平，改善微循环、减轻脑水肿有关。

目的:探讨丙泊酚在小型猪心肺复苏模型中对血清S100β蛋白浓度及其表达的影响。方法:小型猪12只，采用电击致颤制作心跳骤停-心肺复苏模型，采用随机数字表法分为丙泊酚组和对照组(10%脂肪乳剂)，心跳骤停4 min开始复苏，自主循环恢复(ROSC)后分别给予丙泊酚1 mg/kg，随后按照丙泊酚10 mg/(kg·h)持续静脉泵注6 h，对照组给予同等量的10%脂肪乳剂，观察6 h拔除气管插管，24 h后静脉注射氯化钾处死，取大脑皮层，采用双抗夹心酶联免疫分析法(ELISA)测定两组基线、RSOC即刻(0 min)、15 min、1、2、4、6、24 h血清S100β蛋白浓度，采用免疫组织化学法测定大脑皮层S100β蛋白的表达，统计小型猪24 h存活率。两组间及组内不同时间点均采用 t检验。 结果:S100β蛋白水平在6 h上升并达峰值，丙泊酚组血清S100β浓度[(461.58±16.72) ng/L]较对照组[(560.82±30.857) ng/L]上升较少，两组差异有统计学意义( t＝-7.341， P<0.05)，24 h丙泊酚组血清S100β浓度[(383.82±29.586) ng/L]较对照组[(463.97±20.463) ng/L]上升低，两组差异有统计学意义( t＝-6.553， P<0.05)，大脑皮层S100β蛋白表达阳性细胞丙泊酚组[(7.2±0.5)个/HP]与对照组[(10.8±0.8)个/HP， t＝7.707， P<0.05]，差异有统计学意义。 结论:心肺复苏后静脉输注1 mg/kg丙泊酚，后持续6 h静脉输注丙泊酚10 mg/(kg·h)，能降低血清中S100β蛋白的浓度及S100β蛋白在大脑皮层的表达，但对于24 h存活率并无明显影响。

目的:探讨老年皮肤癌患者血清可溶性Fas、FasL水平及临床意义。方法:选择浙江省诸暨市人民医院和浙江省人民医院2014年1月至2017年12月住院手术治疗的老年皮肤癌患者82例作为皮肤癌组，选择同期健康体检老年人82例作为对照组。采用双抗夹心酶联免疫吸附法（ELISA法）测定两组血清sFas、sFasL水平，并进行比较。结果:皮肤癌组血清sFas、sFasL水平均高于对照组[（21.06 ± 3.23）μg/L比（5.64 ± 1.18）μg/L、（14.52 ± 3.42）μg/L比（3.27 ± 0.96）μg/L]，差异有统计学意义（ t=40.606、28.679， P<0.05）。皮肤癌患者血清sFas、sFasL水平与病理分级和淋巴结转移关系密切，病理分级Ⅲ~Ⅳ级患者血清sFas、sFasL水平高于Ⅰ~Ⅱ级患者[（23.57 ± 3.16）μg/L比（16.35 ± 3.62）μg/L、（17.16 ± 3.29）μg/L比（12.15 ± 3.58）μg/L]，差异有统计学意义（ t=8.931、6.173， P<0.05）；有淋巴结转移患者血清sFas、sFasL水平高于无淋巴结转移患者[（24.09 ± 3.46）μg/L比（14.37 ± 3.19）μg/L、（18.17 ± 3.64）μg/L比（11.02 ± 3.27）μg/L]，差异有统计学意义（ t=13.124、9.306， P<0.05）；皮肤癌患者血清sFas、sFasL水平与年龄、性别、部位、类型无关（ P>0.05）。皮肤癌患者治疗后血清sFas、sFasL水平低于治疗前[（7.94 ± 1.21）μg/L比（21.06 ± 3.23）μg/L、（5.38 ± 1.02）μg/L比（14.52 ± 3.42）μg/L]，差异有统计学意义（ t=34.445、23.191， P<0.05）。 结论:老年皮肤癌患者血清sFas、sFasL水平升高，血清sFas、sFasL水平与老年皮肤癌患者的病理分级、淋巴结转移关系密切，可评估临床疗效。

目的:探讨高危型人乳头瘤病毒16（HR-HPV16）阳性患者阴道灌洗液辅助性T细胞（Th）、调节性T细胞（Treg细胞）相关细胞因子变化及其对子宫颈癌发生的预测效果。方法:选择2022年1月至12月于邢台市人民医院就诊的200例HR-HPV16阳性患者作为试验组，根据病理检查结果将试验组患者分为无病变组（78例）、低级别鳞状上皮内病变（LSIL）组（49例）、高级别鳞状上皮内病变（HSIL）组（39例）和子宫颈癌组（34例）。选择同期健康体检者100名作为健康对照组。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）双抗夹心法检测各组阴道灌洗液白细胞介素（IL）-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12、IL-17、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、干扰素γ（IFN-γ）、转化生长因子β（TGF-β）水平。采用多因素logistics回归分析子宫颈癌发生的危险因素，建立列线图模型。以病理结果为金标准，绘制受试者工作（ROC）曲线，计算曲线下面积（AUC）以评价列线图模型的预测能力。结果:试验组患者阴道灌洗液中IL-6、IL-10、IL-17、TNF-α及TGF-β均高于健康对照组，IL-2、IL-12及IFN-γ水平均低于健康对照组，差异均有统计学意义（均 P<0.05），两组IL-4水平差异无统计学意义（ P>0.05）。无病变组、LSIL组、HSIL组及子宫颈癌组IL-6、IL-10、IL-17、TNF-α、TGF-β、IL-2、IL-12及IFN-γ水平差异均有统计学意义（均 P<0.05），其中子宫颈癌组IL-6、IL-10、IL-17、TNF-α、TGF-β水平均最高，IL-2、IL-12及IFN-γ水平均最低，无病变组、LSIL组、HSIL组及子宫颈癌组IL-4水平差异无统计学意义（ P>0.05）。logistics回归分析结果显示，HR-HPV16阳性患者阴道灌洗液中低IL-2、高IL-4、高IL-6、高IL-10、低IL-12、高IL-17、高TNF-α、低IFN-γ及低TGF-β表达均为发生子宫颈癌的独立危险因素（均 P<0.05）。列线图分析结果显示，患者阴道灌洗液IL-6、IL-10、IL-17、TNF-α及TGF-β是预测HR-HPV16阳性患者发生子宫颈癌的因素。ROC曲线分析结果显示，列线图模型预测HR-HPV16阳性患者发生子宫颈癌的AUC为0.945（95% CI 0.901~0.988），预测效能较好。 结论:HR-HPV16阳性患者阴道灌洗液Th、Treg细胞相关细胞因子水平在子宫颈癌患者中呈现病理性改变，且具有较高的预测子宫颈癌发生的价值。

目的:评价健脾化痰活血汤结合左甲状腺素钠片治疗亚临床甲状腺功能减退症(subclinical hypothyroidism, SCH)的疗效。方法:将符合入选标准的2017年1月－2018年12月广州中医药大学第一附属医院105例SCH患者，采用随机数字表法分为对照组52例和研究组53例。对照组口服左甲状腺素钠片治疗，研究组在对照组基础上加用健脾化痰活血汤。2组均连续治疗3个月。采用双抗夹心ELISA法检测血清促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone, TSH)、游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodothyronine, FT3)、游离甲状腺素(free thyroxine, FT4)、IL-10、IL-2、IL-2R水平，采用全自动生化分析仪检测血浆TC、TG、LDL-C及HDL-C水平，评价临床疗效。结果:研究组总有效率为94.3%(50/53)、对照组为75.0%(39/52)，2组比较差异有统计学意义( χ2＝7.601， P＝0.006)。治疗后，研究组血清TSH [(4.39±1.05)mU/L比(8.20±2.11)mU/L， t＝11.747]水平低于对照组( P<0.01)，FT3[(5.53±1.33)μmol/L比(4.15±1.26)μmol/L， t＝5.456]、FT4[(18.54±5.56)μmol/L比(16.18±5.12)μmol/L， t＝2.261]水平高于对照组( P<0.05)；血清IL-10水平高于对照组( t＝3.218， P＝0.002)，IL-2、IL-2R水平低于对照组( t值分别为11.203、3.071， P值均<0.01)；血浆TC、TG及LDL-C水平低于对照组( t值分别为2.764、9.473、9.628， P<0.05或 P<0.01)，HDL-C水平高于对照组( t＝5.724， P<0.01)。 结论:健脾化痰活血汤可明显改善SCH患者的甲状腺功能和血脂水平，调节炎性细胞因子水平，提高疗效。

目的:构建和筛选鲍曼不动杆菌外膜蛋白OmpW的B细胞和T细胞表位。方法:运用生物信息学软件预测OmpW的小鼠B细胞及T细胞表位并合成相应肽段；构建重组质粒pET28a-ompW并原核表达、纯化获得OmpW蛋白；以OmpW蛋白皮下免疫BALB/c小鼠，2周免疫1次，共3次。第3次免疫后1周，收集小鼠血清、分离小鼠脾细胞培养。分别用OmpW蛋白及不同的T细胞表位肽刺激脾细胞，72 h后收集脾细胞上清。间接ELISA法检测小鼠血清中的特异性IgG抗体水平，双抗夹心ELISA法检测脾细胞上清液中IFN-γ浓度。结果:筛选并构建了5个B细胞表位及4个T细胞表位，B细胞表位分别是OmpW B1、OmpW B2、OmpW B3、OmpW B4、OmpW B5，T细胞表位分别是OmpW T1、OmpW T2、OmpW T3、OmpW T4；间接ELISA法检测结果显示，OmpW B1和OmpW B5能够与OmpW全长蛋白质免疫小鼠的血清发生抗原抗体反应，其 A450值与对照组相比显著升高( P<0.001)；双抗夹心ELISA法结果显示OmpW T4表位刺激的脾细胞上清中的IFN-γ浓度最高，与对照组相比差异有统计学意义( P<0.001)。 结论:成功构建并筛选出OmpW蛋白的两个B细胞表位OmpW B1及OmpW B5和一个T细胞表位OmpW T4。

目的:探讨柴芍疏肝利胆排石汤辅助腹腔镜胆囊切除术治疗慢性胆囊炎合并胆囊结石的疗效。方法:将符合入选标准的2016年1月-2019年1月本院198例慢性胆囊炎合并胆囊结石患者采用随机数字表法分为2组，每组99例。2组均施以腹腔镜胆囊切除术，对照组在此基础上口服熊去氧胆酸，观察组在对照组基础上加服柴芍疏肝利胆排石汤，2组均治疗8周。分别于治疗前后进行中医症状、体征评分；采用双抗夹心ELISA法检测血清TNF-α、IL-6、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、促胃液素(gastrin, GAS)、促胃动素(motilin, MOT)及生长抑素(somatostatin, SST)水平，记录不良反应，评价临床疗效。结果:观察组总有效率为94.9%(94/99)、对照组为82.8%(82/99)，2组比较差异有统计学意义( χ2=7.364， P=0.007)。治疗后，观察组右胁胀痛、心烦易怒、脘腹满闷、厌油腻、恶心呕吐、嗳气评分均低于对照组( t值分别为7.229、4.773、4.442、2.302、5.887、4.235， P<0.05或 P<0.01)；血清TNF-α、IL-6、hs-CRP水平均低于对照组( t值分别为9.330、18.425、26.886， P<0.05)；血清GAS[(104.53±2.13)ng/L比(96.61± 3.29)ng/L， t=20.106]、MOT[(386.60±9.42)ng/L比(345.50±12.80)ng/L， t=25.731]水平均高于对照组，SST[(40.05±4.39)ng/L比(48.42±5.11)ng/L， t=12.362]水平低于对照组( P<0.01)。2组治疗期间均未发生严重不良反应。 结论:柴芍疏肝利胆排石汤辅助腹腔镜胆囊切除术可有效改善患者的临床症状，抑制炎症反应，改善胃肠功能，提高临床疗效。

目的:制备融合C3Fab的抗程序性死亡-配体1（PD-L1）纳米抗体P3C8-C3Fab，并研究其对血浆半衰期的影响。方法:将来源于蛋白G的C3Fab肽段，通过DNA重组技术与纳米抗体P3C8进行分子融合，并构建重组质粒pET21a-P3C8-C3Fab，在大肠杆菌BL21菌株中进行诱导表达和纯化，并采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测P3C8-C3Fab与PD-L1蛋白、小鼠IgG和表达PD-L1肿瘤细胞的结合，利用双抗夹心ELISA检测不同时间小鼠血清中残留P3C8-C3Fab，以评估C3Fab对PD-L1纳米抗体血浆半衰期的延长作用。结果:成功构建了融合C3Fab的抗PD-L1纳米抗体P3C8-C3Fab，其在BL21菌中以可溶形式高效表达，经纯化获得质量分数约为90%的NbP3C8-C3Fab蛋白，得率为7.18 mg/L。P3C8-C3Fab随着质量浓度的增加，对PD-L1蛋白和小鼠IgG亲和力也逐渐升高，且呈现浓度相关性；P3C8-C3Fab与肺癌A549细胞的结合呈浓度相关性。小鼠血清中P3C8-C3Fab的浓度标准曲线呈典型的S型浓度相关性；P3C8血浆半衰期仅为0.44 h，而P3C8-C3Fab的血浆半衰期达到9.36 h，血浆半衰期延长了21.27倍。结论:C3Fab与纳米抗体P3C8连接可以显著延长其血浆半衰期，对改善纳米抗体的体内作用具有应用价值。

目的:探究猪带绦虫（Ts）14-3-3.3蛋白作为囊虫病疫苗候选分子的潜力。方法:选取60只昆明小鼠，体重为18 ~ 22 g，按体重采用随机数字表法分为3组，分别为生理盐水对照组（对照组）、Ts14-3-3.3重组蛋白疫苗组（疫苗组）、Ts14-3-3.3重组蛋白疫苗 +佐剂组（疫苗 +佐剂组），每组20只。采用多点皮下注射法，在0周首次免疫后进行2次加强免疫，共免疫3次，每次接种间隔2周。3组在首次免疫后0、2、4、6、8周分别剖杀4只小鼠，摘眼球取血和无菌取脾，分别用于分离血清和制备脾淋巴细胞悬液[处理因素：原液、抗原刺激、刀豆蛋白A（ConA）刺激]。采用间接酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测小鼠血清特异性抗体免疫球蛋白（Ig）G、IgG2a、IgG1及IgE水平；采用CCK-8法检测小鼠脾淋巴细胞增殖水平；采用双抗夹心ELISA法检测小鼠脾淋巴细胞培养上清液肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-12、IL-13、IL-10水平。结果:疫苗、疫苗 +佐剂组免疫2 ~ 8周IgG、IgG2a、IgG1水平均高于对照组，且疫苗 +佐剂组免疫2 ~ 8周上述指标均高于疫苗组（ P均 < 0.05）。组间相同处理因素下，免疫2 ~ 8周脾淋巴细胞增殖水平以及培养上清液TNF-α、IL-12、IL-13、IL-10水平比较，差异均有统计学意义（ P均 < 0.05）；疫苗、疫苗 +佐剂组免疫2 ~ 8周脾淋巴细胞增殖水平以及培养上清液TNF-α、IL-12、IL-13、IL-10水平均高于对照组，且疫苗 +佐剂组免疫2 ~ 8周上述指标均高于疫苗组（ P均 < 0.05）。组内不同处理因素下，抗原刺激、ConA刺激时免疫0 ~ 8周脾淋巴细胞增殖水平以及培养上清液TNF-α、IL-12、IL-13、IL-10水平均高于原液，且ConA刺激时免疫0 ~ 8周上述指标均高于抗原刺激（ P均 < 0.05）。 结论:Ts14-3-3.3重组蛋白疫苗可诱导小鼠产生有效的免疫应答。