目的 探讨外源性音猬(Sonic Hedgehog,Shh)因子补充对骨质疏松症模型小鼠骨吸收和骨形成能力的影响.方法 取健康雌性小鼠48只,随机分为空白对照组、模型组、Shh组,建模和干预后最终分别入组16、8、7只.模型组、Shh组小鼠采取手术切除双侧卵巢构建骨质疏松症模型,Shh组小鼠尾静脉注射2 μL Shh液,空白组及模型组尾静脉注射等体积生理盐水,三组均持续干预7d.观察小鼠组织病理学,比较骨密度值、Shh基因水平、雌二醇(estradiol,E2)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨吸收指标[Ⅰ型胶原交联C-末端肽(C-telopeptide of type Ⅰ collagen,CTX-Ⅰ)、抗酒石酸酸性磷酸酶5b(tartrate-resistant acid phosphatase 5b,TPACP5b)、骨钙素N端中分子片段(N-terminal mid-fragment of osteocalcin,N-MID)水平]、骨形成能力[骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、骨钙素(bone gla protein,BGP)、骨特异性碱性磷酸酶(bone specific alkaline phosphatase,BALP)]及破骨细胞分化因子[核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-kappaB ligand,RANKL)]、自噬相关蛋白1(autophagy related protein 1,Beclin-1)、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(microtubule associated-protein 1 light chain 3-Ⅱ,LC3-Ⅱ)蛋白相对表达量.结果 模型组见大量脂肪细胞增生,部分胞核消失或破碎或空骨陷窝;空白对照组髓腔脂肪细胞结构完整、大小及形态均匀;Shh组脂肪细胞形态基本正常、结构完整.空白对照组、Shh组、模型组Shh因子、骨密度值、E2、N-MID、BV/TV、Tb.Th、Tb.N依次明显降低,ALP、CTX-Ⅰ、TPACP5b、Tb.Sp依次明显增高,组间两两比较差异有统计学意义(P<0.05).模型组OPG、BGP、BALP 较空白对照组、Shh组明显低,Shh组也明显低于空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).模型组RANKL、Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白相对表达量较空白对照组、Shh组明显高,Shh 组也明显高于空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 外源性Shh因子的补充可减弱去势对小鼠骨密度、骨吸收和骨形成能力等的影响,有效调控RANKL、Beclin1、LC3-Ⅱ蛋白表达,促进骨质疏松症小鼠骨形态的恢复.

目的 探讨酒花提取物对去卵巢骨质疏松大鼠的作用及机制.方法 将 60 只雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性对照组(戊酸雌二醇,0.105 mg·kg-1)和酒花提取物低、中、高剂量组(65.625、131.120、196.875 mg·kg-1),每组 10 只.除假手术组外,其余各组大鼠均切除双侧卵巢,术后灌胃给药,每日 1 次,连续给药 90 d.采用 HE染色法观察大鼠骨组织病理形态变化,测定骨形态计量学参数,计算骨小梁数目(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁分离度(Tb.Sp)和骨小梁面积百分数(Tb.Ar);测定大鼠骨组织生物力学指标:最大载荷、弹性模量、断裂强度;采用 ELISA 法测定大鼠血清雌激素(E2)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP5b)、骨钙素(OC)、骨特异性碱性磷酸酶(BALP)含量;采用全自动生化仪测定大鼠血清碱性磷酸酶(ALP)含量;采用 RT-PCR 及 Western Blot 法检测大鼠胫骨组织 OPG、RANKL、ER α、ER β、Wnt16、β-catenin mRNA及蛋白表达水平.结果 与假手术组相比,模型组大鼠胫骨骨小梁断裂,骨髓腔变大,呈现骨质疏松结构;胫骨Tb.N、Tb.Th、Tb.Ar明显降低(P＜0.05),Tb.Sp明显升高(P＜0.05);股骨的最大载荷、弹性模量和断裂强度均明显降低(P＜0.05);血清E2 含量明显降低(P＜0.05),TRACP5b、OC、ALP、BALP含量均明显升高(P＜0.05);胫骨组织的OPG、OPG/RANKL、ERα、ERβ、β-catenin、Wnt16 mRNA及蛋白表达明显下调(P＜0.05),RANKL mRNA及蛋白表达明显上调(P＜0.05).与模型组相比,阳性对照组及酒花提取物高剂量组的上述指标均明显回调(P＜0.05).结论 酒花提取物对绝经后骨质疏松症具有一定的防治作用,其作用机制可能与调控Wnt/β-catenin信号通路,进而调控OPG/RANK/RANKL信号通路有关.

目的:探讨前列腺孤立性导管内癌（isolated intraductal carcinoma of the prostate，iIDC-P）的临床病理特征、分子改变、鉴别诊断及预后。方法:回顾性收集宁波市临床病理诊断中心2016—2022年间的3例iIDC-P的临床病理学资料，进行光镜观察、免疫组织化学染色、高通量DNA靶向测序及随访，并复习相关文献。结果:例1~3患者年龄分别为61、67、77岁，术前总前列腺特异性抗原（TPSA）水平分别为7.99、7.99、4.86 μg/L。例1和例2包含前列腺穿刺和根治标本，例3为经尿道前列腺电切标本。镜下：例1穿刺标本仅1条组织见导管内癌（累及2个导管）、根治标本其中6张切片见导管内癌（病灶直径0.3~1.1 cm），其中1张切片见小灶低级别腺泡腺癌（病灶直径0.05 cm）。例2穿刺标本6条组织见导管内癌，根治标本其中13张切片见导管内癌（病灶直径0.5~1.6 cm），另外3张切片可见低级别腺泡腺癌（最大病灶直径0.6 cm）。例3电切标本其中5条组织见导管内癌。例1和例2导管内癌呈实性生长，导管-腺泡显著膨胀，核显著异型；例3呈致密筛状或疏松筛状结构，核显著异型，核仁明显。例2伴有粉刺样坏死，3例核分裂象均易见。导管内癌免疫表型：双标34βE12+P504s显示基底细胞表达34βE12/异型肿瘤细胞表达P540s，p63和CK5/6显示腺泡/导管周围基底细胞，肿瘤细胞表达NKX3.1、雄激素受体、前列腺特异性抗原、前列腺特异性酸性磷酸酶，不表达GATA3，导管内癌和腺泡腺癌均弱表达PTEN、不表达ERG。高通量DNA靶向测序：例2和例3伴有MAPK/PI3K通路基因改变（KRAS、MTOR和PTEN），例2伴有p53突变、例3伴有FOXA1突变。3例均未发现TMPRSS2：：ERG融合，3例均显示微卫星稳定，肿瘤突变负荷低（2.1~3.1 muts/Mb）。随访16~91个月，均无生化复发及远处转移。结论:iIDC-P是一种特殊的前列腺导管内癌，不同于伴有高级别前列腺癌的前列腺导管内癌，具有独特的分子改变，可能代表一种特殊类型前列腺癌的原位病变。

目的:探讨镭-223治疗转移性去势抵抗性前列腺癌(mCRPC)患者的有效性和安全性。方法:回顾性分析2021年1月至2022年1月重庆大学附属肿瘤医院采用镭-223治疗的22例mCRPC患者的临床资料。年龄(70.7±1.3)岁；美国东部肿瘤协作组(ECOG)评分1分7例，2分15例；骨转移分级Ⅱ级7例，Ⅲ级15例。针对mCRPC，既往行一线治疗1例(4.6%)，二线治疗4例(18.2%)，三线治疗10例(45.5%)，四线治疗4例(18.2%)，五线治疗3例(13.6%)；平均经历三线治疗。从诊断mCRPC至开始镭-223治疗的中位时间为29(20，34)个月。治疗前中位碱性磷酸酶(ALP)为147.0(101.8，212.5)U/L，中位前列腺特异性抗原(PSA)为44.7(20.2，99.1)ng/ml；6例(27.27%)合并1~2级贫血，血红蛋白中位值115.0(103.8，122.5)g/L，中性粒细胞计数(3.0±0.3)× 10 9/L，血小板计数(169.8±17.0) ×10 9/L。患者每4周静脉注射镭-223(剂量为55kBq/kg)，最多6个周期。统计分析总生存时间(OS)、影像学无进展生存时间(rPFS)、PSA进展时间、PSA缓解率、疼痛缓解率、疼痛进展时间，根据镭-223治疗前经历的治疗线数分层分析OS、rPFS、PSA进展时间等。同时分析镭-223治疗的主要不良反应。 结果:本组22例采用镭-223治疗平均2.7(1~6)个周期，共4例完成6个周期；12例(54.6%)治疗≥3个周期，10例(45.5%)治疗<3个周期。13例(59.1%)单独采用镭-223治疗，9例(40.9%)联合其他治疗(其中多西他赛化疗1例，恩扎卢胺2例，奥拉帕利3例，磷酸雌莫司汀3例)。本组所有患者均未使用双磷酸盐治疗。本组中10例(45.5%)死亡，均死于疾病进展；22例中位生存时间11.0(2.2，19.8)个月。3例(13.6%)、7例(31.8%)、3例(13.6%)、1例(4.5%)分别于治疗后2、3、4、10个月出现影像学进展，余8例(36.4%)均未出现影像学进展，22例中位rPFS为4.0(3.1，4.9)个月。4例(18.2%)出现PSA缓解，其中3例(13.6%)后期PSA再次升高，1例(4.5%)PSA持续稳定下降；22例中位PSA进展时间为3.6(2.2，5.1)个月。15例(68.2%)治疗1个月疼痛缓解，其中5例(22.7%)后期出现疼痛加重，10例(45.5%)疼痛持续缓解；22例疼痛进展时间中位值5.5(3.5，7.6)个月。本组无骨折患者，无因疼痛行放疗或手术患者。7例(31.8%)治疗后ALP较基线下降≥30%。镭-223治疗主要不良反应为恶心(15例，68.2%)、呕吐(7例，3.8%)、血小板减少(8例，36.4%)、贫血(6例，27.3%)、中性粒细胞减少(4例，4.6%)，均为1~2级，无≥3级不良反应；无因不良事件导致治疗中断者。结论:镭-223治疗mCRPC患者疼痛缓解率高，可延长OS、rPFS及PSA进展时间；治疗期间无严重不良反应，患者耐受性好。结论尚需进一步扩大样本量及延长随访时间以验证。

目的:探讨血清 CircRNA_0048211的表达水平对绝经后骨质疏松症（postmenopausal osteoporosis，PMOP）的诊断价值及其与骨特异性碱性磷酸酶（bone specific alkaline phosphatase，BALP）、骨桥蛋白（osteopontin，OPN）、Ⅰ型原胶原N-端前肽（procollagen type I N-terminal propeptide，PINP）及β-胶原降解产物（β-crosslaps，β-CTX）的相关性。 方法:收集2019年1月至2021年12月进行体检的绝经后女性资料。所有研究对象采用双能X线吸收法检测骨密度（bone mineral density，BMD），根据BMD水平分为PMOP组、骨量减少组和骨量正常组。比较各组血清 CircRNA_0048211、BALP、OPN、PINP及β-CTX的水平。应用二元logistic回归分析PMOP发生的危险因素，绘制受试者特征曲线（receiver operating characteristic curve，ROC）分析判断 CircRNA_0048211、BALP、OPN、PINP及β-CTX对PMOP的诊断价值。采用Pearson相关分析 CircRNA_0048211表达水平与BALP、OPN、PINP及β-CTX的相关性。 结果:共218例患者纳入研究。年龄（60.52±6.83）岁（范围47~76岁），体质指数（24.27±2.28）kg/m 2（范围22.18~25.73 kg/m 2），绝经时间（10.16±4.25）年（范围2.30~21.80年）。PMOP组40例、骨量减少组97例、骨量正常组81例。血清 CircRNA_0048211、BALP、OPN、PINP及β-CTX水平在PMOP组、骨量减少组和正常组之间的差异有统计学意义（ F=21.15， P<0.001； F=12.52， P<0.001； F=17.86， P<0.001； F=14.32， P<0.001； F=15.52， P<0.001）；PMOP组血清CircRNA_0048211水平（0.37±0.08）低于骨量减少组（1.05±0.46）和正常组（1.73±0.81），差异有统计学意义（ P<0.05）；PMOP组BALP[（28.42±7.35）μg/L]、OPN[（17.28±7.30）ng/ml]、PINP[（58.40±14.37）ng/ml]及β-CTX[（1.52±0.28）μg/L]水平高于骨量减少组[（22.61±5.93）μg/L，（11.95±5.64）ng/ml，（49.16±11.24）ng/ml，（0.81±0.17）μg/L]和骨量正常组[（16.30±4.18）μg/L，（7.62±3.25）ng/ml，（35.48±7.12）ng/ml，（0.37±0.10）μg/L]，差异有统计学意义（ P<0.05）。二元logistic回归显示 CircRNA_0048211表达水平[ OR=3.53，95% CI（2.73，10.32）]降低是PMOP发生的危险因素（ P<0.001）。ROC曲线显示， CircRNA_0048211≤0.76对PMOP具有诊断意义，其联合BALP、OPN、PINP及β-CTX诊断PMOP的曲线下面积最大[0.95，95% CI（0.89，1.00）]。Pearson相关分析显示， CircRNA_0048211的表达水平与BALP、OPN、PINP及β-CTX呈负相关（ r=-0.46， P<0.001； r=-0.80， P<0.001； r=-0.81， P<0.001； r=-0.69， P<0.001）。 结论:CircRNA_0048211在PMOP中呈低表达，与BALP、OPN、PINP及β-CTX的水平呈负相关；五项联合对PMOP诊断具有一定的临床价值。

目的:探讨携带泛素化修饰丁型肝炎抗原(hepatitis D antigen, HDAg)的树突状细胞来源的胞外体(dendritic cell derived exosomes，Dexs)在诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte, CTL)反应中的作用及其分子机制。方法:提取并诱导C57BL/6小鼠髓源性树突状细胞(dendritic cell，DC)后与Ub-S-HDAg-Dexs共孵育48 h，流式细胞仪检测表面分子[CD86、CD80、主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex，MHC)Ⅱ]的表达水平。提取C57BL/6小鼠脾源性T淋巴细胞与经胞外体刺激的DC共孵育后共培养72 h，分为Ub-S-HDAg-Dexs组(加入50 μg/mL Ub-S-HDAg-Dexs)、Blank-Dexs组(加入50 μg/mL无质粒转染的DC来源胞外体)、Con-Dexs组(加入50 μg/mL经空白慢病毒转染的DC来源胞外体)、PBS组[加入50 μL/mL磷酸盐缓冲液(phosphate-buffered saline，PBS)]、Ub-S-HDAg-Dexs+AG490组(加入50 μg/mL Ub-S-HDAg-Dexs，经胞外体刺激的DC与T淋巴细胞混合时同时加入50 μmol/L AG490)，流式细胞术检测CD8与γ干扰素双阳性T细胞，非放射性乳酸脱氢酶检测试剂盒检测CTL细胞的杀伤活性。采用实时定量聚合酶链反应和蛋白质印迹法分别检测T淋巴细胞中Jak激酶(Janus kinase, JAK)2、GATA结合蛋白3(GATA-binding protein 3，GATA3)、T-bet、信号转导及转录激活因子(signal transduction and activator of transcription，STAT)1、STAT4的mRNA和蛋白质表达水平。统计学分析采用独立样本 t检验。 结果:经Ub-S-HDAg-Dexs刺激，DC表面分子CD80、CD86、MHCⅡ阳性率为83.850%±0.219%、68.910%±0.134%、84.320%±0.445%。在Ub-S-HDAg-Dexs组，γ干扰素和CD8双阳性率为6.420%±0.028%, 高于PBS组、Blank-Dexs组、Con-Dexs组、Ub-S-HDAg-Dexs+AG490组( t＝90.78、30.32、63.06、85.42，均 P<0.001)；细胞杀伤率为82.4%±3.9%，高于PBS组、Blank-Dexs组、Con-Dexs组、Ub-S-HDAg-Dexs+AG490组( t＝17.28、9.74、3.95、15.89，均 P<0.050)。Ub-S-HDAg-Dexs组JAK2、T-bet、STAT1、STAT4 mRNA相对表达量分别与Con-Dexs组( t＝10.74、32.34、13.00、16.28，均 P<0.001)、Blank-Dexs组( t＝15.05、21.51、6.46、13.12，均 P<0.050)、PBS组( t＝21.83、41.42、7.30、17.50，均 P<0.050)、Ub-S-HDAg-Dexs+AG490组( t＝35.75、20.69、17.02、17.07，均 P<0.001)相比，差异均有统计学意义。Ub-S-HDAg-Dexs组T-bet、STAT1、STAT4蛋白质表达水平高于PBS组，差异均有统计学意义( t＝346.70、57.54、55.81，均 P<0.001)。Ub-S-HDAg-Dexs组加入AG490后，T-bet、STAT1、STAT4的蛋白质表达水平均较Ub-S-HDAg-Dexs组下降，差异均有统计学意义( t＝355.40、52.79、126.10，均 P<0.001)。 结论:胞外体转运泛素化修饰的HDAg能有效促进DC成熟，诱导T淋巴细胞分化，产生特异性CTL反应，为丁型肝炎免疫治疗提供新的思路。

目的:探讨砷及其主要代谢产物对人肺腺癌细胞系A549细胞凋亡及促凋亡基因 Bad和 Bik表达的影响。 方法:于2020年10月，复苏培养A549细胞，利用细胞计数试剂CCK-8检测细胞活力，确定亚砷酸钠（NaAsO 2）染毒A549细胞的浓度和时间。研究分为NaAsO 2染毒组和代谢产物染毒组：NaAsO 2染毒组染毒剂量为0（对照组）、20、40、60 μmol/L；代谢产物染毒组包括60 μmol/L一甲基胂酸（MMA）染毒组、60 μmol/L二甲基胂酸（DMA）染毒组。采用Hoechst33342/碘化丙啶双染法（Ho/PI）观察细胞凋亡情况，采用实时荧光定量聚合酶链式反应法（qRT-PCR）检测染毒后细胞Bad和Bik mRNA表达水平，采用蛋白免疫印迹法（Western blotting）检测Bad蛋白、磷酸化Bad（P-Bad-S112）蛋白、Bik蛋白、裂解Bik蛋白及下游蛋白多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP1）和细胞色素C（Cyt-C）的相对表达情况，采用分光光度法检测半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）3、6、8、9的活性变化。 结果:与对照组比较，20、40、60 μmol/L NaAsO 2染毒组凋亡细胞占比明显增加，差异均有统计学意义（ P<0.01）。与对照组比较，2.0、4.0、6.0 μmol/LNaASO 2染毒组Bad mRNA表达水平、Bik mRNA表达水平升高，Bad蛋白、磷酸化Bad蛋白、Bik蛋白、裂解Bik蛋白、PARP1蛋白、Cyt-C蛋白相对表达量均升高，差异均有统计学意义（ P<0.05），Caspase 3、6、8、9活性明显上调，差异均有统计学意义（ P<0.05）。与对照组比较，DMA染毒组Bad mRNA表达水平为1.439±0.173，差异有统计学意义（ P=0.024），Bik mRNA表达水平差异无统计学意义（ P=0.788）；MMA染毒组Bad和Bik mRNA表达水平差异无统计学意义（ P=0.085、0.063）。与对照组比较，MMA染毒组Bad、Bik、PARP1、Cyt-C蛋白相对表达量（0.696±0.023、0.707±0.014、0.907±0.031、1.032±0.016）差异无统计学意义（ P=0.469、0.669、0.859、0.771）；DMA染毒组Bad、Bik、PARP1、Cyt-C蛋白相对表达量（0.698±0.030、0.705±0.022、0.908±0.015、1.029±0.010）差异均无统计学意义（ P=0.479、0.636、0.803、0.984）。 结论:NaAsO 2可通过引起Bad和Bik蛋白过表达，启动磷酸化Bad的负反馈调节以及Bik的降解，激活下游蛋白PARP1、Cyt-C和Caspase途径，介导A549细胞凋亡。

目的:探讨二甲双胍对肝脏缺血再灌注损伤的影响及其机制。方法:30只C57BL/6小鼠随机分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)、缺血再灌注组＋二甲双胍组(I/R＋MET组)。I/R组和I/R＋MET组小鼠建立肝脏缺血再灌注损伤模型，Sham组小鼠不建模。I/R＋MET组小鼠术前每日二甲双胍200 mg/kg腹腔注射，术前24 h停止给药。Sham组和I/R组小鼠术前每日腹腔注射等体积生理盐水。3组小鼠在术后6 h，取静脉血，检测血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)浓度。原位缺口末端标记法(TUNEL)染色试剂盒分析3组肝脏组织细胞凋亡。放射免疫法检测3组小鼠氧化应激反应。酶联免疫吸附试验(ELISA)分析3组小鼠肝脏炎性因子水平变化。蛋白质免疫印迹分析3组小鼠肝脏组织腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、UNC-51样激酶(ULK1)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、自噬底物p62蛋白表达水平。组间计量数据比较采用单因素方差分析。结果:I/R＋MET组小鼠血清ALT和AST水平[(62.37±8.07)、(121.51±20.45) U/L]明显低于I/R组[(140.53±13.07)、(187.19±18.73) U/L]，差异有统计学意义( t＝18.150、7.489， P<0.05)。I/R＋MET组小鼠肝脏组织炎性因子[(55.70±6.36)、(39.62±6.66)、(64.12±5.33) pg/g]低于I/R组[(99.15±7.45)、(82.73±8.90) 、(102.40±13.17) pg/g]，差异有统计学意义( t＝18.580、14.030、9.630， P<0.05)。I/R＋MET组小鼠血清MDA水平[(1.03±0.05) μmol/ml]明显低于I/R组[(1.73±0.14) μmol/ml]，差异有统计学意义( t＝14.970， P<0.05)。I/R＋MET组小鼠血清SOD水平[(129.70±7.12) U/ml]明显高于I/R组[(99.50±10.66) U/ml]，差异有统计学意义( t＝14.970， P<0.05)。I/R＋MET组小鼠肝脏组织TUNEL染色阳性率[(13.57±2.01)%]明显低于I/R组[(26.40±4.05)%]，差异有统计学意义( t＝8.967， P<0.05)。I/R＋MET组小鼠肝脏组织AMPK磷酸化和ULK1磷酸化水平(1.25±0.06、1.37±0.09)明显高于I/R组(0.65±0.07、0.96±0.06)，差异有统计学意义( t＝19.480、11.670， P<0.05)。I/R＋MET组小鼠肝脏组织自噬底物蛋白p62水平(0.67±0.08)明显低于I/R组(0.98±0.05)，差异有统计学意义( t＝10.050， P<0.05)。 结论:二甲双胍通过激活AMPK，促进细胞自噬，缓解肝脏缺氧缺血引起的氧化应激和炎性反应，对缺血再灌注损伤肝脏起保护作用。

目的:探讨脾脏源性髓源性抑制细胞（MDSCs）在脓毒症诱导肾上腺损伤（SAI）中的作用及其机制。方法:采用随机数字表法将30只6～8周龄C57雄性小鼠分为正常对照组（ n＝5）、假手术组（Sham组， n＝5）、脓毒症模型组〔盲肠结扎穿孔术（CLP）组， n＝10〕和脓毒症+脾切除组（CLPS组， n＝10）。采用CLP法制备小鼠脓毒症模型；Sham组仅开腹分离盲肠后关腹，不给予盲肠结扎穿孔；CLPS组于CLP前切除脾脏；正常对照组不给予任何处理。各组于制模后24 h处死小鼠，收集外周血、脾脏、骨髓及双侧肾上腺；采用苏木素-伊红（HE）染色后光镜下观察肾上腺组织病理学改变，采用流式细胞仪测定外周血、脾脏和骨髓中MDSCs细胞比例，采用实时定量反转录-聚合酶链反应（PCR）检测肾上腺组织中MDSCs表面抗原CD11b、Gr-1和白细胞介素（IL-6、IL-1β）的mRNA表达，采用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测肾上腺组织中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）通路相关蛋白总mTOR（T-mTOR）、磷酸化mTOR（p-mTOR）和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）的蛋白表达。 结果:光镜下显示，正常对照组和Sham组肾上腺皮质、髓质完整，结构清晰；CLP组肾上腺皮质肿胀、出血，可见细胞水肿；CLPS组上述肾上腺组织损伤较CLP组明显减轻。与正常对照组和Sham组相比，CLP组外周血中MDSCs细胞比例明显增加，脾脏中MDSCs细胞比例明显降低，骨髓中MDSCs细胞比例差异无统计学意义，肾上腺组织中CD11b、Gr-1、IL-6、IL-1β的mRNA和caspase-3蛋白表达均明显增加，p-mTOR蛋白表达明显降低，T-mTOR蛋白表达差异无统计学意义；与CLP组相比，CLPS组外周血中MDSCs细胞比例明显降低（0.143±0.011比0.324±0.023， P<0.01），肾上腺组织中CD11b、Gr-1、IL-6和IL-1β的mRNA以及caspase-3的蛋白表达均明显降低〔CD11b mRNA（2 -ΔΔCt）：2.90±0.56比5.74±0.13，Gr-1 mRNA（2 -ΔΔCt）：2.71±0.14比4.59±0.46，IL-6 mRNA（2 -ΔΔCt）：2.44±0.64比5.17±1.04，IL-1β mRNA（2 -ΔΔCt）：3.58±0.52比4.44±0.26，caspase-3蛋白（caspase-3/GAPDH）：0.05±0.01比0.13±0.02，均 P<0.01〕，p-mTOR蛋白表达明显增加（p-mTOR/GAPDH：0.61±0.11比0.27±0.04， P<0.01）。 结论:脾脏是SAI中MDSCs细胞的主要来源；脾切除可减少MDSCs细胞动员，激活mTOR信号通路，从而减轻SAI。

目的:探讨微小RNA(miR)-203对食管癌化疗敏感性的影响及其机制。方法:采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析顺铂(DDP)耐药食管癌细胞株TE-8/DDP和亲本细胞株TE-8细胞中miR-203表达水平。将TE-8/DDP细胞株分为对照组和miR-203组，采用慢病毒感染建立对照和miR-203过表达细胞系。细胞计数试剂盒(CCK-8)分析对照组和miR-203组细胞对DDP的敏感性；流式细胞术分析两组细胞凋亡水平；生物信息学和双荧光素酶实验分析miR-203靶基因。蛋白质免疫印迹分析miR-203靶蛋白表达水平。计量资料比较采用 t检验。 结果:亲本细胞株TE-8细胞miR-203表达水平(1.31±0.15)明显高于DDP耐药食管癌细胞株TE-8/DDP中miR-203表达水平(0.53±0.18)，差异有统计学意义( t＝4.801， P<0.05)。对照组细胞经50 μg/ml和100 μg/ml DDP处理36 h后细胞吸光度值(1.98±0.13、1.43±0.12)明显高于miR-203组细胞吸光度值(1.58±0.11、1.11±0.12)，差异有统计学意义( t＝3.781、3.017， P<0.05)。对照组细胞经50 μg/ml和100 μg/ml DDP处理36 h后细胞凋亡率[(30.54±5.81)%、(51.45±6.29)%]明显低于miR-203组细胞吸光度值[(49.29±5.00)%、(78.27±8.81)%]，差异有统计学意义( t＝3.781、3.017， P<0.05)。100 mg/kg DDP治疗20 d后，对照组细胞形成肿瘤体积[(498.35±43.10) mm 3]明显大于miR-203组细胞体内肿瘤体积[(309.44±27.87) mm 3]，差异有统计学意义( t＝5.091， P<0.05)。对照组细胞形成肿瘤质量[(8.91±1.29) g]明显高于miR-203组细胞体内肿瘤质量[(4.73±1.01) g]，差异有统计学意义( t＝3.182， P<0.05)。生物信息学和双荧光素酶结果显示三磷酸腺苷结合盒转运子E1(ABCE1)是miR-203的靶基因。对照组细胞ABCE1表达水平(0.89±0.09)明显高于miR-203组细胞ABCE1表达水平(0.25±0.07)，差异有统计学意义( t＝4.761， P<0.05)。对照组细胞半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3表达水平(0.38±0.09)明显高于miR-203组细胞Caspase-3表达水平(1.21±0.13)，差异有统计学意义( t＝6.281， P<0.05)。 结论:miR-203通过靶向ABCE1蛋白调控食管癌对顺铂的耐药性。