目的:探讨微小RNA(miR)-203对食管癌化疗敏感性的影响及其机制。方法:采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析顺铂(DDP)耐药食管癌细胞株TE-8/DDP和亲本细胞株TE-8细胞中miR-203表达水平。将TE-8/DDP细胞株分为对照组和miR-203组，采用慢病毒感染建立对照和miR-203过表达细胞系。细胞计数试剂盒(CCK-8)分析对照组和miR-203组细胞对DDP的敏感性；流式细胞术分析两组细胞凋亡水平；生物信息学和双荧光素酶实验分析miR-203靶基因。蛋白质免疫印迹分析miR-203靶蛋白表达水平。计量资料比较采用 t检验。 结果:亲本细胞株TE-8细胞miR-203表达水平(1.31±0.15)明显高于DDP耐药食管癌细胞株TE-8/DDP中miR-203表达水平(0.53±0.18)，差异有统计学意义( t＝4.801， P<0.05)。对照组细胞经50 μg/ml和100 μg/ml DDP处理36 h后细胞吸光度值(1.98±0.13、1.43±0.12)明显高于miR-203组细胞吸光度值(1.58±0.11、1.11±0.12)，差异有统计学意义( t＝3.781、3.017， P<0.05)。对照组细胞经50 μg/ml和100 μg/ml DDP处理36 h后细胞凋亡率[(30.54±5.81)%、(51.45±6.29)%]明显低于miR-203组细胞吸光度值[(49.29±5.00)%、(78.27±8.81)%]，差异有统计学意义( t＝3.781、3.017， P<0.05)。100 mg/kg DDP治疗20 d后，对照组细胞形成肿瘤体积[(498.35±43.10) mm 3]明显大于miR-203组细胞体内肿瘤体积[(309.44±27.87) mm 3]，差异有统计学意义( t＝5.091， P<0.05)。对照组细胞形成肿瘤质量[(8.91±1.29) g]明显高于miR-203组细胞体内肿瘤质量[(4.73±1.01) g]，差异有统计学意义( t＝3.182， P<0.05)。生物信息学和双荧光素酶结果显示三磷酸腺苷结合盒转运子E1(ABCE1)是miR-203的靶基因。对照组细胞ABCE1表达水平(0.89±0.09)明显高于miR-203组细胞ABCE1表达水平(0.25±0.07)，差异有统计学意义( t＝4.761， P<0.05)。对照组细胞半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3表达水平(0.38±0.09)明显高于miR-203组细胞Caspase-3表达水平(1.21±0.13)，差异有统计学意义( t＝6.281， P<0.05)。 结论:miR-203通过靶向ABCE1蛋白调控食管癌对顺铂的耐药性。

目的 探讨三七总皂苷(PNS)对巨噬细胞分拣蛋白(sortilin)、腺苷三磷酸结合盒转运子A1(ABCA1)表达的影响和抑制泡沫细胞形成的作用及机制.方法 将巨噬细胞分为A组(常规培养)、B组(转染空载慢病毒)、C组(转染过表达sortilin慢病毒)、D组(转染过表达sortilin慢病毒+60 μg.mL-1 PNS)和E组(转染过表达 sortilin 慢病毒+10 μmol·L-1 PD98059+60 μg.mL-1 PNS).用蛋白质印迹法检测各组巨噬细胞中sortilin、ABCA1、细胞外调节蛋白激酶(ERK)和磷酸化ERK(p-ERK)蛋白的表达水平;用50 μg·mL-1氧化低密度脂蛋白刺激巨噬细胞形成泡沫细胞,用油红O染色评估各组巨噬细胞的脂质含量.结果 A、B、C、D、E组的sortilin蛋白相对表达水平分别为1.00±0.08、0.91±0.15、2.28±0.13、1.62±0.09 和 2.01±0.08,ABCA1 蛋白相对表达水平分别为 1.00±0.01、0.92±0.07、0.29±0.04、0.66±0.09 和 0.44±0.07,p-ERK/ERK 比值分别为 1.00±0.09、0.92±0.05、1.03±0.12、2.00±0.12 和1.64±0.14,脂质含量分别为(4.82±2.19)％、(6.70±0.88)％、(44.56±4.15)％、(27.66±3.25)％和(41.67±5.45)％.除 p-ERK/ERK 外,C组的其他指标与A组相比,在统计学上差异均有统计学意义(均P＜0.01);D组的上述指标与C组、E组比较,在统计学上差异均有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05).结论 PNS通过抑制sortilin表达和上调ABCA1表达,从而减少泡沫细胞的形成;ERK是参与PNS调节sortilin和ABCA1表达的主要信号通路之一.

目的:基于网络药理学筛选中药葛根抗高脂蛋白血症的活性成分,预测葛根抗高脂蛋白血症的潜在作用靶点及信号通路,探讨其作用机制.方法:采用TCM数据库收集葛根的化学成分;采用Drugbank数据库基于结构相似性原理,筛选与葛根药效分子结构相似的药物,并预测其作用靶点;采用OMIM数据库筛选高脂蛋白血症的相关蛋白.借助STRING数据库和Cytoscape 3.6.0软件构建疾病蛋白-靶点网络、药物活性成分-靶点-疾病蛋白网络.通过网络拓扑分析和聚类分析法预测葛根治疗高脂蛋白血症的关键蛋白.通过京都基因与基因组百科全书(KEGG)对靶点进行通路富集分析,预测葛根抗高脂蛋白血症的关键信号通路.结果:葛根抗高脂蛋白血症的主要活性成分有7种,即4-甲氧基葛根素、黄豆苷、大豆黄素4'-7二葡萄糖苷、蝙蝠葛碱、γ-谷甾醇和甲基对羟基肉桂.葛根治疗高血蛋白脂症有20个潜在作用靶点,即酪氨酸蛋白激酶(Src)、核因子κB(NF-κB)、过氧化物体增殖物激活受体(PPARs)、雌激素受体α(Esr1)、芳香烃受体(AHR)、载脂蛋白A(APOAⅠ、APOAⅡ、APOAⅤ)、载脂蛋白B(APOB)、载脂蛋白C(APOCⅠ、APOCⅡ)、载脂蛋白E(APOE)、低密度脂蛋白受体(LDLR)、脂蛋白脂肪酶(LPL)、三磷酸腺苷结合盒转运蛋白A1(ABCA1)、溶血磷脂酸(LPA)、糖基磷脂酰肌醇高密度脂蛋白结合蛋白1(GPIHBP1)、纤维蛋白原A(FGA)、细胞色素P450(Cyp158A2)和雄激素受体(AR).KEGG通路有8条,主要是PPAR信号转导通路.结论:采用网络药理学筛选出葛根治疗高脂蛋白血症的7种可能的药效分子,通过活性成分-靶点-疾病网络特征分析,得到20个潜在治疗靶点和8条相关通路,借此预测葛根可能通过PPARs、AR、LDLR等受体和相关蛋白调节胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白(LDL)的代谢,以发挥抗高脂蛋白血症的作用.

为评价绞股蓝总苷颗粒以及其与他汀联用的降血脂作用,采用高脂饲料诱导构建高脂血症C57BL/6J小鼠模型.随机分为空白组、模型组、阳性药组(Lip,10 mg/kg)、绞股蓝总苷颗粒低、中、高剂量组(L、M、H,90,120,180 mg/kg),联合组(Lip+H,180 mg/kg+10 mg/kg).连续给药4周后检测血脂成分、血清ALT、AST及载脂蛋白B(Apo B)含量,H&E染色观察小鼠肝脏病理变化,利用RT-PCR法和Western blot法测定三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)、肝X受体(LXRα)、胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)和B族Ι型清道夫受体(SR-BΙ)等肝脏胆固醇代谢关键因子蛋白、基因表达水平.结果显示绞股蓝总苷颗粒能显著降低小鼠体重、腹部脂肪质量及血清总胆固醇(TC)、AST水平,并修复受损小鼠肝细胞;联合组能显著降低小鼠TC水平,效果优于绞股蓝总苷颗粒高剂量组和阳性药单用组.此外,绞股蓝总苷颗粒能显著升高ABCA1的蛋白水平,同时上调ABCA1、CYP7A1和SR-BΙ的基因表达.实验结果表明,绞股蓝总苷颗粒能够显著降低血脂,且与阿托伐他汀联用后降脂效果提高,并可降低血清转氨酶,初步探索其降脂机制可能是通过参与胆固醇逆转运调节TC含量.

目的:探讨香砂六君子汤通过影响长链非编码RNA-HC(Lnc-HC)/微RNA-130b(miR-130b)调节胆固醇代谢改善载脂蛋白E(ApoE)-/-动脉粥样硬化(AS)小鼠肝脏脂质沉积防治AS机制研究.方法:10只C57BL/6J小鼠作为正常组,30只健康ApoE/小鼠采用高脂饲料喂养12周,随机分为模型组、香砂六君子汤组(19.12 g-kg-1-d1-1)和辛伐他汀组(2.275 mg-kg1-d-1),连续灌胃4周.全自动生化分析仪检测小鼠血清血脂水平,苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠肝脏病理形态学变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测Lnc-HC,miR-130b mRNA表达,Real-time PCR和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测过氧化物酶体增殖物激活受体y(PPARy),肝X受体(LXR),腺苷三磷酸结合盒转运体Al(ABCAl),腺苷三磷酸结合盒转运体Gl(ABCGl),腺苷三磷酸结合盒转运体G5(ABCG5),腺苷三磷酸结合盒转运体G8(ABCG8)mRNA及蛋白表达.结果:与正常组比较,模型组小鼠血脂异常明显,肝细胞体积变大,脂肪空泡明显,小鼠肝脏Lnc-HC,miR-130b表达显著升高,小鼠肝脏PPARγ,LXR,ABCA1,ABCG1,ABCG5,ABCG8 mRNA及蛋白表达明显降低(P＜0.05,P＜0.01);与模型组比较,香砂六君子汤组和辛伐他汀组小鼠血脂异常得以改善,肝细胞脂肪空泡明显减少,香砂六君子汤组小鼠肝脏Lnc-HC,miR-130b表达明显降低(P＜0.05,P＜O.Ol),香砂六君子汤组和辛伐他汀组小鼠肝脏PPARy,ABCAl,ABCGl,ABCG5,ABCG8 mRNA及蛋白水平呈上升趋势,其中,香砂六君子汤组小鼠肝脏LXR mRNA及蛋白表达明显升高(P＜0.05).结论:香砂六君子汤可能通过影响Lnc-HC/miR-130b调节PPARy介导的胆固醇代谢过程改善ApoE-/-AS小鼠肝脏脂质沉积,进而起到防治AS的作用.

目的:探讨浅表性膀胱癌术后患者采用吡柔比星膀胱灌注化疗后,血清增殖侵袭基因表达和恶性肿瘤相关因子的影响.方法:选取中国人民解放军海军第九零五医院2018年3月～2019年4月期间收治的浅表性膀胱癌患者98例,按照随机数字表法分为对照组(经尿道膀胱肿瘤切除术(TURBT)治疗)和研究组(对照组的基础上接受吡柔比星膀胱灌注化疗),各为49例.对比两组疗效、血清恶性肿瘤相关因子、增殖侵袭基因表达、不良反应发生率和复发率.结果:研究组的临床总有效率高于对照组(P＜0.05).化疗后,两组血清血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平均下降,且研究组均低于对照组同期(P＜0.05).化疗后,两组增殖基因三磷酸腺苷结合盒转运子E1(ABCE1)、核转运蛋白α2(KPNA2)、线粒体核糖体蛋白S5(MRPS5),侵袭基因整合素相关激酶(ILK)、核因子-κBp65(NF-KBp65)下降,且研究组低于对照组同期;侵袭基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)升高,且研究组高于对照组同期(P＜0.05).两组不良反应发生率组间对比无差异(P＞0.05).研究组术后1年、2年、3年复发率均低于对照组(P＜0.05).结论:吡柔比星膀胱灌注化疗用于浅表性膀胱癌术后患者,可有效调节血清恶性肿瘤相关因子水平和增殖侵袭基因表达的影响,降低肿瘤复发率.