目的:探讨改良的双环己酮草酰二腙（CPZ）诱导小鼠多发性硬化（MS）脱髓鞘及髓鞘再生模型的建立方法，并分析小鼠MS模型脱髓鞘及髓鞘再生的影像标记。方法:收集30只C57BL/6雄性小鼠，并以羧甲基纤维素钠（CMCNa）适应灌胃1周后，随机分3组，分别造模成对照组（ n=10）、脱髓鞘组（ n=10）及髓鞘再生组（ n=10）。对照组小鼠立即进行MR扫描及病理取材；脱髓鞘组小鼠每日1次使用CPZ-CMCNa悬浊液连续灌胃诱导急性脱髓鞘6周，然后进行MR扫描及病理取材；髓鞘再生组小鼠每日1次使用CPZ-CMCNa悬浊液连续灌胃6周，停止灌胃并恢复正常饮食4周，最后进行MR扫描及病理取材。以胼胝体喙部（rCC）、喙部两侧正常表现白质（NAWM）及双侧大脑皮层（Cx）作为ROI，采用单因素方差分析比较3组归一化T 2WI（T 2-normalized）、各向异性分数（FA）、平均扩散率（MD）、轴向扩散系数（AD）及径向扩散系数（RD）变化及差异。 结果:成功建立了小鼠MS模型脱髓鞘及髓鞘再生模型。对照组、脱髓鞘组和髓鞘再生组rCC的T 2-normalized值分别为0.47±0.03、0.72±0.04、0.54±0.04，差异具有统计学意义（ F=90.511， P<0.05）；组间两两比较差异具有统计学意义（ P<0.05）。3组NAWM及Cx的T 2-normalized值差异均无统计学意义（ P>0.05）。对照组、脱髓鞘组和髓鞘再生组rCC的FA值（分别为0.36±0.04、0.29±0.03、0.32±0.05），MD值［分别为（0.572±0.015）、（0.598±0.034）、（0.626±0.043）×10 -3 mm 2/s］，AD值［（0.79±0.04）、（0.77±0.06）、（0.83±0.04）×10 -3 mm 2/s］及RD值［（0.46±0.02）、（0.51±0.03）、（0.53±0.05）×10 -3 mm 2/s］差异均有统计学意义（ P<0.05），且两两比较发现脱髓鞘组与对照组FA值差异具有统计学意义（ P<0.05）；髓鞘再生组与对照组MD值差异有统计学意义（ P<0.05）；髓鞘再生组与脱髓鞘组AD值差异具有统计学意义（ P<0.05），脱髓鞘组、髓鞘再生组与对照组RD值差异均有统计学意义（ P<0.05）。3组的NAWM及Cx各项扩散张量成像（DTI）参数差异均无统计学意义（ P>0.05）。劳克坚牢蓝-伊红染色显示脱髓鞘组胼胝体喙部髓鞘丢失，髓鞘再生组胼胝体喙部部分再生修复。 结论:改良CPZ-CMCNa模型能够选择性诱导rCC脱髓鞘及髓鞘再生；利用T 2WI联合DTI可以定量检测改良CPZ-CMCNa模型rCC脱髓鞘和髓鞘再生变化，为研究MS病灶变化提供理论依据。

目的:探讨低频磁疗对双环己酮草酰二腙(CPZ)诱导的脱髓鞘模型小鼠胼胝体区髓鞘及炎性反应的影响。方法:将36只6~8周龄雄性C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为对照组、CPZ组和磁疗组。对照组给予常规饲料饲养6周，CPZ组和磁疗组均用含0.3% CPZ混合饲料饲养6周，诱导脱髓鞘模型小鼠。磁疗组于开始喂食CPZ行磁疗干预6周，磁场强度为10 mT，频率为50 Hz。每隔7 d观察小鼠体质量。于第6周末行高架十字迷宫实验观察小鼠焦虑状态，采用卢卡斯快蓝(LFB)染色和髓鞘碱性蛋白(MBP)免疫组化技术观察胼胝体区髓鞘，采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测胼胝体区肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)含量。结果:干预6周后，磁疗组的体质量较CPZ组明显改善( P<0.05)。CPZ组的进入开臂次数[(7.75±2.05)次]、开臂内滞留时间百分比[(8.13±2.34)%]和进入开臂次数百分比[(20.46±3.04)%]均较对照组[(12.50±3.70)次、(25.75±2.20)%和(43.49±2.98)%]显著减少( P<0.01)；而与CPZ组比较，磁疗组的进入开臂次数[(10.00±2.05)次]和进入开臂次数百分比[(24.23±5.63)%]均明显增多( P<0.05)，且开臂内滞留时间百分比[(15.81±6.07)%]显著升高( P<0.01)。LFB染色显示，CPZ组胼胝体区髓鞘脱失明显，与CPZ组相比，磁疗组胼胝体区髓鞘脱失明显改善，MBP免疫组化染色进一步证实了这一结果，CPZ组MBP表达量较对照组明显减少( P<0.01)；而与CPZ组相比，磁疗组MBP表达量明显增多( P<0.01)。与对照组相比，CPZ组的TNF-α和IL-1β的蛋白水平明显升高( P<0.01)；与CPZ组相比，磁疗组胼胝体区TNF-α和IL-1β的蛋白水平均显著降低( P<0.01)。 结论:低频磁疗可以改善小鼠体重和焦虑状态，其机制可能与改善胼胝体区髓鞘脱失及抑制炎性反应有关。

目的:观察槲皮素对双环己酮草酰二腙(cuprizone, CPZ)诱导脱髓鞘模型小鼠髓鞘再生的影响。方法:将50只C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为正常组，模型组，槲皮素低、中、高剂量组，每组10只。除正常组外，其余各组小鼠给予0.2% CPZ饲料进行喂养以诱导小鼠脱髓鞘模型。槲皮素低、中、高剂量组灌胃槲皮素溶液25、50、100 mg/kg，正常对照组和模型组灌胃等体积蒸馏水，1次/d。连续灌胃5周，每周记录小鼠体重，并进行转棒实验。5周后取材，采用快蓝染色及透射电镜观察小鼠胼胝体髓鞘病理学改变，并计算G-ratios值；采用免疫荧光染色法测定小鼠胼胝体区髓磷脂碱性蛋白(myelin basic protein, MBP)和少突胶质细胞转录因子(oligodendrocyte transcription factor 2, Olig2)蛋白表达；采用Western blot法测定小鼠脑组织MBP与环核苷酸-3'磷酸水解酶(cyclic nucleotide-3'phosphate hydrolase, CNPase)蛋白表达。结果:第2～5周，与模型组比较，槲皮素中、高剂量组小鼠体重升高( P<0.01)，转棒维持时间延长( P<0.01)；与模型组比较，槲皮素低、中、高剂量组胼胝体脱髓鞘评分[(2.23±0.25)分、(1.50±0.15)分、(1.14±0.97)分比(2.83±0.18)分]降低( P<0.01)、G-ratio值[(0.75±0.05)、(0.75±0.08)、(0.73±0.08)比(0.87±0.05)]降低( P<0.01)；槲皮素中、高剂量组小鼠胼胝体区MBP[(37.40±2.41)、(37.40±1.14)比(24.40±3.65)]、Olig2[(7.40±1.14)、(4.60±1.14)比(2.80±0.84)]阳性表达升高( P<0.05)，脑组织MBP蛋白[(1.32±0.12)、(0.80±0.34)比(0.21±0.07)]、CNPase蛋白[(0.72±0.13)、(1.06±0.36)比(0.36±0.21)]表达升高( P<0.05)。 结论:50、100 mg/kg剂量的槲皮素可减轻CPZ诱导的脱髓鞘模型小鼠的髓鞘损伤，促进髓鞘再生，有一定的神经保护作用。

多发性硬化(Multiple sclerosis,MS)是以人类中枢神经系统炎性脱髓鞘为主要特点的神经退行性疾病,并伴随着轴突损伤、胶质细胞增生、炎性细胞浸润等病理特征.双环己酮草酰二腙(Cuprizone,CPZ)是一种铜离子螯合剂,给小鼠饲喂CPZ可诱导小鼠中枢神经系统产生脱髓鞘病变,引起少突胶质细胞凋亡、少突胶质细胞祖细胞增殖、星形胶质细胞和小胶质细胞激活等病理变化,停止饲喂CPZ后,小鼠的中枢神经系统会逐步发生髓鞘再生现象,因此是研究MS脱髓鞘和髓鞘再生的常用模型.本文从CPZ小鼠模型构建、少突胶质细胞、星形胶质细胞、小胶质细胞以及髓鞘再生等不同方面进行了总结,并对采用CPZ模型的特色疗法进行了概括,从而为CPZ模型在科研与医学实践中的广泛应用提供了详细的理论依据.

目的 探究P75 神经营养素受体(neurotrophin receptor P75,P75NTR)裂解抑制剂对双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导脱髓鞘小鼠认知功能及海马髓鞘的改善作用.方法 采用连续喂食 0.2%CPZ的方法构建急性脱髓鞘模型(CPZ小鼠),同时设立对照组;5 周后,在CPZ小鼠海马区注射P75NTR裂解抑制剂或生理盐水.在第 6 周,通过水迷宫、高架十字迷宫实验检测小鼠行为学的改变;通过快蓝染色检测髓鞘脱失情况;通过Western blot检测海马组织中P75NTR及髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)的表达变化;通过免疫组织化学检测海马组织中MBP阳性表达量的变化.结果 与对照组相比,CPZ小鼠逃避潜伏期增加,跨台次数、进入开臂及在开臂中活动时间减少(P均＜0.05);快蓝染色结果显示,CPZ小鼠胼胝体区髓鞘结构疏松,着色明显变浅;CPZ小鼠海马区P75NTR表达增加(P＜0.05);CPZ小鼠海马区MBP表达减少(P＜0.05).相比于生理盐水的干预,P75NTR裂解抑制剂干预后,小鼠逃避潜伏期降低,进入开臂及在开臂中活动时间增加(P均＜0.05);P75NTR裂解抑制剂干预后,小鼠海马区MBP表达上升(P＜0.05).结论 抑制P75NTR的裂解可以改善CPZ模型小鼠的认知功能障碍,其作用机制与减轻海马中髓鞘脱失有关.

目的 探讨拉喹莫德(LAQ)对双环己酮草酰二腙(CPZ)诱导的C57BL/6脱髓鞘小鼠胼胝体区少突胶质细胞的保护作用.方法 将80只C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组(20只)、CPZ组(40只)、LAQ处理组(20只).免疫荧光法观察CPZ组不同时间点(0 d、3 d、7 d、2周、4周、8周)胼胝体区髓鞘碱性蛋白(MBP)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞的分布,免疫印迹法检测三组各个时间点MBP和GFAP蛋白水平,ELISA法检测TNF-α和IL-1β含量.结果 对照组各个时间点均未见脱髓鞘表现.与对照组相比,CPZ组MBP阳性细胞分布逐渐减少,然而GFAP阳性细胞分布逐渐增多,8周形成胶质瘢痕.与CPZ组比较,LAQ组于4周、8周时MBP蛋白表达均显著增加(均P<0.05),于7 d、2周、4周、8周时GFAP蛋白均显著降低(均P<0.05).与正常组相比,LAQ组和CPZ组于7 d、2周、4周、8周时TNF-α、IL-1β均显著升高(均P<0.05).与CPZ组相比,LAQ组于2周、4周、8周时TNF-α、IL-1β表达均显著减低(均P<0.05).结论 LAQ具有保护CPZ诱导的脱髓鞘小鼠胼胝体区少突胶质细胞的作用,可能与抑制活化的星形胶质细胞分泌的炎症因子有关.

目的 观察中药益肾平肝方对精神分裂症的治疗效果以及探究其作用的潜在靶标.方法 实验动物采用成年雄性C57BL/6小鼠,6周龄,实验分为3组,每组10只:对照组,cuprizone (CPZ)模型组和益肾平肝方(Yishenpingganfang,YSPGF)治疗组,实验共进行6周.社会交互实验以及组织采集在最后一次给予中药治疗24h后进行.采用社会交互实验以评价YSPGF对小鼠精神分裂症样行为的影响;采用髓鞘特异性免疫组化和Western blotting观察成熟少突胶质细胞及少突胶质细胞前体细胞的表达变化.结果 CPZ模型组小鼠于第3周出现明显体质量下降(P＜0.05),YSPGF治疗组与CPZ模型组相比,体质量差异无统计学意义(P＞0.05);社会交互实验:Trial 1实验中:对照组小鼠围绕陌生小鼠1(Stranger 1)的时间明显大于围绕空杯子(Empty)的时间(P ＜0.001).YSPGF组与对照组类似,围绕Stranger 1与Empty的时间差异有统计学意义(P＜0.01).但模型组小鼠围绕Stranger 1与Empty的时间之间差异无统计学意义(P＞0.05).Trial 2实验中:对照组小鼠对新加入的Stranger 2较之已经熟悉的Stranger 1更加感兴趣(P＜0.001)第;成熟少突胶质细胞特异性抗体髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)免疫组织化学染色和Western blotting显示:CPZ模型组小鼠成熟胶质细胞/髓鞘在胼胝体有一定程度缺失,YSPGF组与CPZ模型组相比,髓鞘脱失有所好转.进一步实验显示:少突胶质细胞前体细胞血小板源生长因子受体α(platelet-derived growth factor receptor-alpha,PDGFR-α)在CPZ诱导脱髓鞘后有反应性增生.结论 中药YSPGF可以改善CPZ诱导小鼠的社会退缩,改善少突胶质细胞/髓鞘结构的损害.

目的:探讨精神分裂症神经调节蛋白1(NRG-1)及其受体(ErbB4)与少突胶质细胞脱髓鞘和髓鞘再生之间的关系.方法:采用双环己酮草酰二腙(CPZ)诱导的少突胶质细胞脱髓鞘制备精神分裂症小鼠动物模型.动物分为6组,对照组(食物中未添加CPZ),CPZ喂养2周、3周、4周组,第4周后停止给予CPZ,继续正常喂养1周即5周组;停止给予CPZ后,继续正常喂养2周即6周组.通过实时定量PCR及免疫印迹检测,观察NRG-1和ErbB4在小鼠大脑额叶脱髓鞘和髓鞘再生过程中的表达变化.结果:NRG-1 mRNA和蛋白的表达在第2周、第3周和第4周CPZ组较对照组、第5周和第6周明显降低.ErbB4 mRNA和蛋白的表达在各组与对照组比较均增强.ErbB4在第5周和第6周mRNA和蛋白的表达明显高于第2周、第3周和第4周CPZ组.结论:在小鼠精神分裂症形成过程中,NRG-1和ErbB4的表达变化与少突胶质细胞的脱髓鞘和髓鞘再生有关系.

目的 基于16S rRNA技术研究石珍安神汤(Shi-Zhen-An-Shen-Tang,SZAST)对脱髓鞘模型小鼠肠道菌群多样性的影响,并探讨该复方治疗精神分裂症的作用机制.方法 SPF级5周龄雄性C57BL/6小鼠30只,采用数字表法随机分为普通饲料对照组、模型组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组、喹硫平组,每组5只.适应性喂养2周后,对照组正常饮食,其他组食用混合了0.2％(质量分数)双环乙酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)的特殊饲料.食用特殊饲料4周后,SZAST组给予SZAST灌胃2周(低浓度组5.5 g·kg-1·d-1,中浓度组11.0 g·kg-1·d-1,高浓度组16.5 g·kg-1·d-1),模型组以0.9％(质量分数)氯化钠注射液灌胃2周(10 mL·kg-1·d-1),喹硫平组按10 mg·kg-1·d-1给予喹硫平溶液灌胃.2周后小鼠麻醉取盲肠内容物.以Illumina MiSeq为测序平台,对其16S rRNA V3-V4区的肠道菌群可操作分类单元(operational taxonomic units,OTUs)数量,alpha与beta多样性,丰富度指数与多样性指数以及差异菌与菌属进行综合性分析与评价.结果 石珍安神汤可改善脱髓鞘小鼠OTUs数量及alpha与beta多样性的失调,对脱髓鞘小鼠的β-变形菌纲、伯克菌目、拟杆菌科、产碱杆菌科、毛螺菌属-NK4A136等差异菌分布结构均产生回调作用.结论 石珍安神汤对脱髓鞘模型小鼠的异常菌群多样性起到调节作用,并通过16S rRNA技术揭示了肠道菌群在白质损害导致精神分裂症中的相关病理机制.

目的:探讨大麻素(WIN55212-2)对双环己酮草酰二腙(cuprizone)诱导的脱髓鞘模型小鼠髓鞘的修复作用,阐明其可能机制.方法:选取C57BL/6小鼠95只,随机分为空白对照组、模型组(0.2％的cuprizone饲料喂养6周)、二甲基亚砜(DMSO)组(0.2％cuprizone饲料喂养3周后开始腹腔注射等量的DMSO混合液)和治疗组(0.2％cuprizone饲料喂养3周后开始腹腔注射1 mg·kg-1 WIN55212-2).采用黑金Ⅱ髓鞘染色技术对小鼠髓鞘组织染色,观察其组织形态表现;采用Western blotting法检测小鼠大脑组织中结侧蛋白(JN)、髓鞘碱性蛋白(MBP)和转录因子Nkx 2.2蛋白表达水平.结果:黑金Ⅱ髓鞘染色,空白对照组小鼠大脑胼胝体区域有明显的着色,模型组小鼠大脑胼胝体区着色较浅.与空白对照组比较,模型组小鼠大脑组织中JN和MBP蛋白表达水平均明显降低(P<0.05);与模型组和DMSO组比较,治疗组小鼠大脑组织中JN和Nkx2.2蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01).结论:大麻素可能通过转录因子Nkx2.2蛋白促进cuprizone诱导的脱髓鞘模型小鼠大脑组织中JN蛋白表达,促进髓鞘再生和修复.