目的:比较发热伴血小板减少综合征（SFTS）与恙虫病两种疾病患者病程中免疫损伤的差异。方法:采用前瞻性病例对照研究，选择2014年10月至2017年6月安徽医科大学第一附属医院收治的31例SFTS患者和16例恙虫病患者，另外以10例健康体检者作为对照。用流式细胞仪检测患者外周血CD4 +、CD8 + T淋巴细胞计数以及CD3 + T淋巴细胞、自然杀伤细胞（NK细胞）、B淋巴细胞及浆细胞的比例；同时用Luminex液相芯片平台技术检测外周血34个细胞因子水平。比较两组患者间淋巴细胞及细胞因子的差异。 结果:SFTS患者外周血CD3 + T淋巴细胞比例、CD4 +及CD8 + T淋巴细胞计数明显低于恙虫病患者（ t值分别为4.860、9.411和5.030，均 P<0.01），NK细胞及B淋巴细胞比例明显高于恙虫病患者（ t值分别为2.344和5.896，均 P<0.05）。SFTS患者病程中外周血浆细胞比例为（7.7±1.2）%，危重患者最高可达30%，都表现为λ单克隆型细胞群；而恙虫病患者外周血中未检测到浆细胞。检测34个细胞因子水平发现，SFTS与恙虫病患者白细胞介素- 1受体抗体（IL-1RA）、白细胞介素（IL-6、IL-15、IL-10、IL-8）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、γ -干扰素（IFN-γ）、粒细胞集落刺激因子（G-CSF）、嗜酸粒细胞趋化因子（Eotaxin）、IFN -γ诱导蛋白10（IP-10）、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）、巨噬细胞炎症蛋白（MIP-1α、MIP-1β）、血小板源生长因子（PDGF-AA、PDGF-AB/BB）及受激活调节正常T细胞表达和分泌因子（RANTES）表达均异常，其中SFTS患者IL-1RA、IL-6、IL-15、IL-10、TNF-α、IFN-γ、G-CSF、Eotaxin、IL-8、IP-10、MCP-1和MIP-1α水平明显高于恙虫病患者（ Z值分别为2.312、2.447、3.660、5.444、1.965、2.402、2.402、2.997、3.525、2.481、3.817和2.211，均 P<0.05），PDGF-AA、PDGF-AB/BB和RANTES分泌水平明显低于恙虫病患者（ Z值分别为3.728、2.514和2.649，均 P<0.05）。相关性分析发现，RANTES、PDGF-AA和PDGF-AB/BB水平均与SFTS、恙虫病患者血小板水平呈明显正相关（SFTS： r值分别为0.223、0.365、0.330，恙虫病： r值分别为0.263、0.632、0.407，均 P<0.05）。在SFTS患者中，与存活组（21例）比较，死亡组（10例）CD3 + T淋巴细胞比例、CD4 + T淋巴细胞计数明显降低，浆细胞比例明显升高（ t值分别为3.980、3.314和26.692，均 P<0.01），IL-1RA、IL-6、IL-15、IL-10、TNF-α、IFN-γ、G-CSF、Eotaxin、IL-8、IP-10、MCP-1、MIP-1α和MIP-1β明显升高，PDGF-AA、PDGF-AB/BB和RANTES明显降低（ Z值分别为3.930、4.014、2.832、3.592、2.958、3.508、2.578、3.254、4.270、3.465、2.663、3.085、3.107、3.639、3.043和3.825，均 P<0.05）。 结论:SFTS患者较恙虫病患者免疫功能受损更严重；SFTS患者过强的体液免疫及T淋巴细胞凋亡程度与死亡发生密切相关。病程中检测CD4细胞、浆细胞及IL-6、IL-10为代表的促炎和抗炎细胞因子对SFTS与恙虫病的鉴别及病情评估有重要临床意义。

目的:研究卵巢滤泡激素（FLCN）在干扰素γ（IFN-γ）介导的黑素细胞凋亡及趋化因子分泌中发挥的作用。方法:从正常人包皮环切组织及白癜风移植患者正常部位的吸疱表皮分离正常原代黑素细胞及白癜风原代黑素细胞。采用Western印迹检测正常原代黑素细胞、白癜风原代黑素细胞及人原代黑素细胞系PIG1细胞中FLCN蛋白的表达。以10 ng/ml IFN-γ刺激48 h的PIG1细胞为诱导组，未经处理的PIG1细胞为对照组，采用qRT-PCR检测两组细胞FLCN及自噬相关微管相关蛋白1轻链3（LC3）Ⅱ、Beclin基因mRNA表达，Western印迹检测FLCN、Beclin1、LC3Ⅱ/Ⅰ水平及腺苷酸激活蛋白激酶（AMPK）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）的磷酸化水平。进一步对采用10 ng/ml IFN-γ刺激的黑素细胞感染FLCN抑制病毒进行不同的处理，分为阴性对照组、FLCN抑制组、抑制FLCN及添加mTOR抑制剂的自噬增强组和抑制FLCN及添加AMPK抑制剂的自噬抑制组。采用流式细胞仪检测各组PIG1细胞凋亡，酶联免疫吸附实验检测各组细胞上清液中趋化因子CXCL10和CCL20的浓度。多组间计量资料比较采用单因素方差分析，组间比较采用LSD- t检验。 结果:正常原代黑素细胞（0.850 ± 0.120）、白癜风原代黑素细胞（1.507 ± 0.170）和PIG1细胞（0.697 ± 0.130）FLCN蛋白的相对表达差异有统计学意义（ F = 50.09， P < 0.001），白癜风原代黑素细胞高于正常原代黑素细胞和PIG1细胞（ t = 4.06、5.89，均 P < 0.01）。诱导组FLCN mRNA及蛋白相对表达均高于对照组（均 P < 0.01），LC3Ⅱ、Beclin mRNA及蛋白相对表达均低于对照组（均 P < 0.01）；诱导组PIG1细胞LC3Ⅱ/Ⅰ水平（0.72 ± 0.02）、AMPK磷酸化水平（0.714 ± 0.023）低于对照组（1.13 ± 0.02、1.176 ± 0.002， t = 7.34、6.67，均 P < 0.01），mTOR磷酸化水平（1.051 ± 0.023）高于对照组（0.451 ± 0.016， t = 3.81， P = 0.009）。对照组、诱导组及各处理组PIG1细胞凋亡率及CXCL10、CCL20浓度差异均有统计学意义（均 P < 0.001），诱导组高于对照组，FLCN抑制组低于阴性对照组，自噬增强组低于FLCN抑制组，自噬抑制组高于FLCN抑制组（均 P < 0.05）。 结论:白癜风黑素细胞中高表达FLCN，FLCN表达以及下游信号通路受IFN-γ调控，FLCN可通过调节自噬参与IFN-γ介导的黑素细胞凋亡和趋化因子分泌。

目的:探讨仑伐替尼(lenvatinib,Len)增强免疫检查点抑制剂在小鼠肝细胞癌(hepatocellular carci-noma,HCC)中的疗效,并分析其在肿瘤微环境中的免疫调节机制.方法:分析不同浓度的Len对人脐静脉血管内皮细胞迁移和CXC趋化因子配体10(CXC chemokine ligand 10,CXCL10)分泌的影响并分析Len影响CXCL10分泌的机制.构建小鼠原位HCC模型,将荷瘤小鼠随机分为PBS组、BMS-202(PD-1/PD-L1抑制剂)组、Len组和Len/BMS-202组,通过小动物活体成像观察小鼠原位HCC的生长情况.治疗第13天处死小鼠取肿瘤组织,免疫荧光法检测肿瘤组织凋亡、血管结构和缺氧情况.免疫组化法检测肿瘤组织内增殖标志物Ki67和转化生长因子β(trans-forming growth factor-β,TGF-β)的表达水平,及CD4+T细胞、CD8+T细胞的浸润程度.ELISA检测小鼠血清中的免疫因子干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)、CXCL10和TGF-α的分泌情况,进行统计学分析.结果:(1)Len在低剂量范围内可促进内皮细胞迁移,且Len通过阻断FGFR增强肿瘤细胞对IFN-γ的响应,进而促进肿瘤细胞分泌CXCL10.(2)与PBS组相比,各给药组肿瘤生长均较缓慢,其中以Len/BMS-202组荷瘤小鼠肿瘤生长受抑制为著(P<0.05).(3)与PBS组及单药组相比,Len/BMS-202组明显促进了肿瘤组织的凋亡和抑制肿瘤细胞的增殖(P<0.05).(4)与PBS组及BMS-202组相比,Len组及Len/BMS-202组肿瘤组织周细胞覆盖率明显提升(P<0.01),缺氧状态明显缓解(P<0.01).(5)与PBS组及单药组相比,Len/BMS-202组肿瘤内CD4+T细胞和CD8+T细胞浸润明显增加(P<0.01),TGF-β的表达显著下降(P<0.01).(6)与PBS组相比,各治疗组不同程度促进了小鼠血清中IFN-γ、CXCL10和TGF-α的分泌(P<0.05),其中Len/BMS-202组效果最好(P<0.01).结论:Len可能通过促进肿瘤血管正常化、改善缺氧及促进CXCL10分泌,共同激活肿瘤免疫微环境,从而协同增强BMS-202对HCC的治疗效果.

目的 探讨难治性肺炎支原体肺炎(RMPP)患儿血清白细胞介素-17A(IL-17A)、受激活调节正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)水平变化及临床意义.方法 选取华北医疗健康集团邢台总医院2019年12月至2021年12月162例RMPP患儿作为研究组,另取同期120例普通肺炎支原体肺炎(GMPP)患儿作为对照组.收集两组一般资料,检测并比较两组血清IL-17A、RANTES、GM-CSF水平,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清IL-17A、RANTES、GM-CSF水平对RMPP患儿的诊断价值,采用单因素及多因素Logistic模型分析影响RMPP的因素.结果 研究组肺不张、肺实变、胸腔积液占比、FEV1、FVC、CRP及D-D均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组血清IL-17A、RANTES、GM-CSF水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析显示,RMMP患儿FEV1、FVC均与血清IL-17A、RANTES、GM-CSF水平呈负相关(P<0.05);Pearson相关性分析显示,RMMP患儿血清IL-17A与RANTES、GM-CSF呈正相关,RANTES与GM-CSF呈正相关(P<0.05);ROC曲线显示,血清IL-17A、RANTES、GM-CSF水平联合诊断RMPP患儿的AUC为0.906,显著高于各自单独诊断的0.785、0.752和0.765(P<0.05);Logistic模型分析显示,存在肺不张(OR=2.052,P<0.001)、存在肺实变(OR=2.591)、存在胸腔积液(OR=2.309)、血清IL-17A≥10.77 pg/mL(OR=1.984)、RANTES≥32.95 μg/L(OR=1.833,P<0.001)、GM-CSF10.58 μg/L(OR=1.902)均为影响RMPP的独立危险因素.结论 IL-17A、RANTES、GM-CSF在RMPP患儿血清中呈高表达,三指标联合检测的诊断效能较高,可为临床尽早诊断、尽早干预RMPP提供一定的帮助.

目的 观察促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)联合腹腔镜手术对卵巢子宫内膜异位囊肿(OEC)患者血清性激素和卵巢储备功能的影响.方法 选取2020 年 1 月至2022 年 3 月宜宾市第二人民医院收治的 150 例OEC患者作为研究对象.采用随机数字表分组法将其分为GnRH-a组(n = 75)与对照组(n =75).对照组仅接受腹腔镜手术治疗,GnRH-a组在接受腹腔镜手术治疗的基础上联合使用GnRH-a治疗.比较治疗后两组的治疗效果,观察治疗前、治疗后两组月经情况(经期、痛经程度)、性激素[黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、孕酮(P)、雌二醇(E2)]、卵巢储备功能、细胞因子[血清调节激活正常T细胞表达和分泌细胞因子(RANTES)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)],随访 1 年,统计两组囊肿复发及妊娠情况.结果 治疗后,两组总有效率比较,差异具有统计学意义(P＜0.05).治疗后,GnRH-a组月经情况(经期、痛经视觉模拟评分法评分)、性激素(LH、FSH、P、E2)、血清 RANTES、HMGB1 水平均低于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05);GnRH-a组基础状态卵泡数与卵巢体积均高于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 GnRH-a联合腹腔镜手术治疗OEC具有显著疗效,可有效改善患者的临床症状、性激素水平、卵巢储备功能,调节细胞因子,降低复发率,提高妊娠率.

目的:探讨格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分联合血清转位蛋白(TSPO)、受激活调节正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)对重型颅脑损伤(sTBI)患者去骨瓣减压术(DC)后短期死亡的预测价值.方法:选取2019年1月～2022年7月新疆医科大学第四附属医院重症医学科收治的102例接受DC的sTBI患者,根据30 d(短期)预后情况分为死亡组和存活组.计算GCS评分和检测血清TSPO、RANTES水平.采用多因素Logistic回归分析sTBI患者DC后短期死亡的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析GCS评分和血清TSPO、RANTES水平对sTBI患者DC后短期死亡的预测价值.结果:102例sTBI患者DC后30 d死亡率为30.39％(31/102).与存活组比较,死亡组GCS评分降低,血清TSPO、RANTES水平升高(P＜0.05).死亡组合并多发伤、受伤至手术时间≥6h、瞳孔散大、颅内血肿量≥40mL、中线移位≥5 mm比例高于存活组(P＜0.05).多因素Logistic回归分析显示,受伤至手术时间≥6h、瞳孔散大、中线移位≥5 mm、TSPO和RANTES升高为sTBI患者DC后短期死亡的独立危险因素,GCS评分增加为其独立保护因素(P＜0.05).ROC曲线分析显示,GCS评分联合血清TSPO、RANTES预测sTBI患者DC后短期死亡的曲线下面积大于GCS评分和血清TSPO、RANTES单独预测(P＜0.05).结论:GCS评分和血清TSPO、RANTES水平与sTBI患者DC后短期死亡独立相关,GCS评分联合血清TSPO、RANTES预测sTBI患者DC后短期死亡的价值较高,可能成为sTBI患者DC后短期死亡的辅助预测指标.

目的:研究天山雪莲总酚酸(PSI)抑制脂多糖(LPS)刺激的RAW264.7 细胞炎症因子释放的作用及其作用机制.方法:采用大孔吸附树脂分离PSI,利用超高效液相色谱法(UPLC)对其进行成分分析.建立LPS诱导的RAW264.7 细胞炎症模型.采用噻唑蓝法检测细胞活力;Griess法检测一氧化氮(NO)的生成;酶联免疫吸附法(ELISA)检测炎症因子释放水平;蛋白免疫印迹(Western blot)技术检测Toll样受体 4(TLR4)信号通路关键蛋白的表达水平;免疫荧光技术检测核转录因子(NF)-κB亚基p65、激活子蛋白 1(AP-1)亚基c-Jun和干扰素调节因子 3(IRF3)的入核情况.结果:PSI主要含有绿原酸(23.60%),质量浓度为 12.50～100.00 μg·mL-1 时能显著抑制LPS刺激下炎症因子NO、前列腺素E2(PGE2)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-10、IL-6、趋化因子单核细胞趋化蛋白(MCP)-1、巨噬细胞炎症蛋白(MIP)-1α和调节激活正常T细胞表达分泌因子(Rantes)的释放,并能剂量依赖性地降低TLR4 信号通路关键蛋白κB抑制因子(IκB)α、IκB激酶(IKK)α/β、p65、TANK结合激酶 1(TBK1)、IRF3、p38、胞外信号调节激酶(ERK)1/2 及c-Jun的磷酸化水平,同时抑制LPS诱导的p65、c-Jun和IRF3 的入核.结论:PSI能抑制LPS刺激下RAW264.7 细胞炎症因子的产生,其作用机制可能与抑制TLR4 信号通路有关.

目的 分析人单核细胞株(THP-1)过表达人巨细胞病毒(HCMV)编码miR-US25-1-3p后蛋白质表达谱变化及价值.方法 采用脂质体将hcmv-miR-US25-1-3p模拟物转染THP-1细胞构建hcmv-miR-US25-1-3p过表达细胞株,RT-qPCR验证转染效果;采用串联质谱标签标记联合液相色谱-串联质谱对hcmv-miR-US25-1-3p过表达后THP-1细胞蛋白质组学进行定量分析,生物信息学分析差异表达蛋白质生理病理功能;western blot验证重要差异蛋白表达变化.结果 与对照相比,THP-1细胞过表达hcmv-miR-US25-1-3p后65种蛋白质呈现差异表达,其中17种上调,48种下调.GO、COG和KEGG注释及功能预测结果显示,差异表达蛋白主要参与炎症反应信号通路、代谢过程、细胞及遗传信息功能,与肿瘤、病毒性心肌炎、非酒精性脂肪肝、原发性免疫缺陷病、类风湿关节炎、多种病原体感染、阿尔茨海默病、亨廷顿病等多种疾病相关.48种下调蛋白质中,文献调研和生物信息学分析发现,肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)和受激活调节正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)参与抗病毒及炎症反应,上述蛋白质下调表达经western blot验证.结论 HCMV编码的hcmv-miR-US25-1-3p能够影响宿主蛋白表达谱,并可能通过抑制TRAIL和RANTES表达,促进病毒潜伏、免于宿主细胞杀伤.

目的:研究过敏原特异性免疫治疗(SIT)对过敏性鼻炎(AR)患者血清中IgE、IgG4和趋化因子水平的影响.方法:选取2013年1月至2014年12月于江苏省泰州市第四人民医院就诊的120例AR患者,其中69名患者接受SIT为SIT组,另外51名患者进行常规治疗为对照组,对所有患者随访3年.在治疗前和治疗后4周、7周、10周、27周,以及治疗后1年、2年、3年收集所有患者的血液标本,检测两组患者血清中IgE、IgG4和趋化因子[白细胞介素(IL)-8、干扰素诱导蛋白10(IP-10)、人巨噬细胞炎性蛋白1(MIP-1)α、MIP-1β、调节激活正常T-细胞表达分泌因子(RANTES)、嗜酸细胞活化趋化因子(Eotaxin)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)]水平.结果:随访结束时,SIT组治疗总有效率为88.4％,显著高于对照组的49.0％(P<0.05);两组治疗后血清IgE、IgG4、MCP-1和Eotaxin浓度变化有明显区别,SIT组患者血清中的MCP-1、Eotaxin浓度在治疗后7周、27周均高于对照组(均P<0.05);在治疗后10周时SIT组治疗后血清中的IgE浓度明显高于治疗前和对照组(均P<0.05),而对照组患者血清中的IgE浓度则显著低于治疗前和SIT组(均P<0.05);治疗后7周开始,SIT组血清中IgG4浓度逐渐升高,直到试验终点,一直保持上升趋势,而对照组患者血清中IgG4浓度一直没有明显变化.结论:SIT能有效治疗AR,可能与IgG4介导的免疫机制发挥的有益作用有关.

目的:分析系统性硬化症(systemic sclerosis,SSc)血清细胞因子表达谱,探讨其可能的调控机制.方法:收集30例SSc患者及80例正常对照组血清和外周血单个核细胞DNA,按照SSc有无合并肺间质病变(interstitial lung disease,ILD)分为SSc合并ILD组及SSc不合并ILD组,根据皮肤受累程度,分为弥漫性系统性硬化症(diffuse cutaneous scleroderma,dcSSc)组和局限性系统性硬化症(limited cutaneous scleroderma,lcSSc)组,根据SSc患者血清中是否存在抗拓扑异构酶-1抗体(即抗Scl-70抗体),分为SSc Scl-70(+)组及SSc Scl-70(-)组.使用LuminexMAGPIX检测系统和Bio-Plex Pro Human Cytokine 27-plex Assay试剂盒检测血清中的27种细胞因子:白细胞介素(interleukin,IL) 1β(IL-1β)、IL-1受体拮抗剂(interleukin-1 receptor antagonist,IL-1 ra)、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-12P70、IL-13、IL-15、IL-17、碱性纤维生长因子(basic fiber growth factor,BASIC FGF)、嗜酸性粒细胞趋化因子(eotaxin)、粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony stimulating factor,G-CSF)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)、干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)、人干扰素诱导蛋白10(interferon-gamma induced protein 10,IP-10)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)、人巨噬细胞炎性蛋白1α(macrophage inflammatory protein-1 α,MIP-1α)、人巨噬细胞炎性蛋白1β(macrophage inflammatory protein lβ,MIP-1β)、人血小板衍生生长因子BB (platelet-derived growth factor BB,PDGF-BB)、调节激活正常T细胞表达和分泌细胞因子(regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted,RANTES)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF).利用Illumina 450K甲基化芯片检测单个核细胞DNA全基因组甲基化位点变化.结果:与正常对照组相比较,12种细胞因子(BASIC FGF、eotaxin、G-CSF、GM-CSF、IFN-γ、IL-1β、IL-1RA、IL-6、IP-10、MCP-1、TNF-α和RANTES)在SSc中表达明显升高(P＜0.05),IL-5在SSc中表达降低(P＜0.05),其余细胞因子表达差异无统计学意义.与lcSSc组比较,9种细胞因子(eotaxin、IL-5、MCP-1、IL-2、RANTES、IL17A、IL-8、MIP-1β和PDGF-BB)在dcSSc组增高,但差异无统计学意义.与SSc不合并ILD组相比较,IL-15在SSc合并ILD组增高[18.2(172.97) ng/Lvs.2.03 (0.05) ng/L,P＜0.05];与SSc Scl-70(-)组相比较,IP-10在SSc Scl-70(+)组表达降低[1 030(2 196.6) ng/L vs.1 878(2 964) ng/L,P＜0.05].分析血清细胞因子与红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)的相关性发现,IL-6与ESR正相关(r=0.04,P=0.017);MCP-1(r =0.49,P=0.043)和MIP-1β(r=0.41,P=0.007)与CRP正相关.分析细胞因子甲基化位点变化,发现IL-10 TSS1500区的cg17744604、IL-12P70TSS200区的cg06111286、IL-1β TSS200区的cg07935264、IL-1 ra TSS1500区的cg01467417、IL-1 ra 5'非翻译区的cg03989987和VEGF TSS200区的cg21099624均呈低甲基化.结论:SSc患者血清存在多种细胞因子变化,且细胞因子变化与皮肤受损程度、肺纤维化有关,多种细胞因子表达受甲基化调控.