目的:基于呼出气在线分析系统筛查苯暴露小鼠呼出气中的生物标志物。方法:30只8周龄的雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组（0 mg/m 3）、3、32、324、648、1 296 mg/m 3六个组，采用静式吸入法进行苯染毒28 d。染毒结束后检测小鼠外周血血常规和全血还原型谷胱甘肽（GSH）含量，并利用体外细胞实验检测小鼠血浆染毒HL60细胞的丙二醛（MDA）含量；采用二次电喷雾电离源高分辨质谱（SESI-HRMS）收集小鼠呼出气数据，进行苯代谢产物和氧化应激小分子代谢物的靶向分析，并筛查呼出气中苯暴露及毒效应的生物标志物。 结果:苯暴露小鼠的外周血细胞数目出现了不同程度的降低，其中白细胞（WBC）的下降最为显著，32和324 mg/m 3组的WBC与对照组相比分别下降了27.76%和52.87%（ P<0.05）。同时，与对照组相比，324 mg/m 3组中小鼠外周血细胞的GSH含量降低了13.16%（ P<0.05），324 mg/m 3组小鼠的血浆处理HL60细胞后MDA含量增加了18.11%（ P<0.05）。小鼠呼出气中的苯酚、氢醌/儿茶酚、苯三酚和反-反式粘康酸（ t， t-MA）4种苯代谢产物，可作为苯暴露生物标志物（ R 2>0.8， P<0.001）；5种氧化应激相关的小分子代谢产物（ω-羧脂肪酸C 5H 10O 3、ω-羧脂肪酸C 6H 12O 3、谷氨酸、半胱氨酸和MDA）的峰值强度随着苯浓度的增加而增加（ P<0.05），且与WBC数量降低呈负相关（ P<0.001），可作为苯毒效应的生物标志物。 结论:呼出气中的苯酚、氢醌/儿茶酚、苯三酚和 t， t-MA可作为苯暴露标志物；ω-羧脂肪酸C 5H 10O 3、ω-羧脂肪酸C 6H 12O 3、谷氨酸、半胱氨酸和MDA可能作为苯效应标志物。

目的:探讨重复吸入暴露消毒剂聚六亚甲基胍（PHMG）气溶胶的肺损伤及其毒理学特征。方法:将30只4周龄的C57BL/6N品系的小鼠随机分为对照组和低、高剂量组，每组雌雄各5只。以实验室Ⅱ级纯水作为溶剂对照；采用超声雾化含有PHMG水溶液产生气溶胶，低、高剂量组水溶液中PHMG浓度分别为0.1（0.01%）和1 mg/ml（0.1%），超声雾化后染毒室内PHMG的浓度分别为1.03和9.09 mg/m 3。对实验小鼠进行动式呼吸暴露染毒，动物每天染毒4 h，共21 d。染毒结束后，使用肺灌洗细胞计数法对暴露后肺部炎性细胞进行评估，利用病理评价、特殊染色以及免疫组化的方法对肺部纤维化的关键指标进行评价。 结果:与对照组相比，高剂量组体重出现明显降低，差异有统计学意义（ P<0.05）；低剂量组与对照组体重差异无统计学意义（ P>0.05）。低剂量组小鼠肺灌洗液中炎性细胞数目降低，肺组织病理显示肺部发生损伤，伴随早期纤维化症状（ P<0.05）。高剂量组可见肺组织纤维化改变。低、高剂量组肺纤维化标志物α-SMA均明显上调（ P<0.05）。 结论:吸入PHMG消毒剂能够引起小鼠肺部损伤，导致肺纤维化的发生，提示我们在工业生产和日常使用过程中，需要对这种常用消毒剂进行特殊的警示，并采取呼吸防护措施。

目的:探讨高压氧（HBO）处理对急性一氧化碳中毒迟发性脑病（DEACMP）模型大鼠脑组织中NOD样受体蛋白3（NLRP3）炎症小体的调控作用及其相关机制。方法:健康成年SPF级雄性SD大鼠90只，按照随机数字表法分为3组：假手术对照组（Sham组）、DEACMP组、HBO组，每组30只。DEACMP组和HBO组大鼠依照静态吸入染毒法建立DEACMP模型。每组大鼠又分为染毒前及染毒后3、7、14、21 d 5个亚组，每个亚组6只。采用Morris水迷宫实验评估各组大鼠染毒前后的学习和空间记忆能力。利用ELISA、Western blotting实验分别检测各组大鼠血清白细胞介素（IL）-1β、IL-18水平及脑组织中NLRP3、衔接蛋白凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、黑色素瘤缺乏因子2（AIM2）以及caspase-1蛋白的表达水平；TUNEL实验检测大鼠海马组织神经细胞的凋亡情况。结果:与Sham组比较，DEACMP组和HBO组大鼠在不同时间点的逃避潜伏期明显延长（ P<0.05），平台象限活动时间明显缩短（ P<0.05），血清IL-1β和IL-18水平明显降低（ P<0.05）。与DEACMP组比较，HBO组逃避潜伏期和平台象限活动时间从染毒后第7天开始明显改善（ P<0.05），血清IL-1β和IL-18水平明显降低（ P<0.05）。与Sham组比较，DEACMP组大鼠脑组织中NLRP3、ASC、AIM2以及caspase-1表达水平和海马组织神经细胞凋亡指数均明显提高（ P<0.05）；与DEACMP组比较，HBO组上述蛋白表达和细胞凋亡水平均明显提高（ P<0.05）。 结论:HBO通过阻断NLRP3炎症小体活化抑制DEACMP引起的炎症反应，从而减轻一氧化碳中毒造成的脑组织损伤。

目的:探讨温压装药爆炸模拟气体对大鼠神经行为及海马神经发生的影响。方法:选取48只8~10周龄SPF级雄性SD大鼠，按照随机数字表法分为对照组、5 min暴露组、10 min暴露组和15 min暴露组，每组12只。吸入染毒后28 d，以高架十字迷宫评估大鼠焦虑样行为，双向主动回避实验评估学习、记忆功能；免疫荧光染色法检测海马齿状回神经干细胞(neural stem cells，NSCs)标志分子神经上皮细胞蛋白(SOX2)、成熟神经元标志分子神经元核抗原(neuronal nuclei，NeuN)的阳性表达情况；Western blot检测海马组织SOX2、NeuN蛋白表达量。采用GraphPad prism 8. 0进行数据分析与制图，重复测量设计资料的比较采用重复测量方差分析，其他数据多组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用Tukey法。利用Image J工具对海马神经细胞进行计数。结果:(1)高架十字迷宫实验结果显示，4组大鼠进入开臂次数百分比、开臂停留时间百分比均差异有统计学意义( F＝22.31，5.43，均 P<0.05)。5 min、10 min、15 min暴露组大鼠进入开臂次数百分比[(28.85±1.47)%，(15.04±4.69)%，(12.66±2.89)%]、开臂停留时间百分比[(12.12±2.64)%，(12.16±1.11)%，(8.73±3.52)%]均低于对照组[(65.40±1.86)%，(42.92±3.12)%](均 P<0.05)，各暴露组两两比较均差异无统计学意义(均 P>0.05)。(2)重复测量方差分析结果显示，主动回避获得期各组大鼠主动回避次数的分组与时间的交互作用、组别主效应与时间主效应均显著( F＝4.21，16.64，56.46，均 P<0.05)。4组大鼠第4天与第1天主动回避次数的差值差异有统计学意义( F＝68.63， P<0.05)。主动回避记忆再现期结果显示，4组大鼠主动回避次数、主动回避反应时间均差异有统计学意义( F＝8.17，8.28，均 P<0.05)。10 min、15 min暴露组主动回避次数[(2.50±0.26)次，(2.33±0.06)次]低于对照组[(8.33±3.72)次](均 P<0.05)，主动回避反应时间[(6.25±0.40)s]、[(6.61±1.63)s]高于对照组[(3.69±1.41)s](均 P<0.05)。10 min、15 min暴露组主动回避次数显著低于5 min暴露组(均 P<0.05)。(3)免疫荧光染色结果显示，4组大鼠SOX2阳性细胞数差异有统计学意义( F＝5.33， P<0.05)。15 min暴露组SOX2阳性细胞[(4.33±1.12)个]低于对照组[(7.67±1.52)个]( P<0.05)。4组大鼠NeuN阳性细胞数差异有统计学意义( F＝11.06， P<0.05)；10 min、15 min暴露组NeuN阳性细胞[(105.67±8.50)个，(88.33±9.50)个]低于对照组[(127.00±6.56)个]( P<0.05)。暴露组两两比较显示，15 min暴露组NeuN阳性细胞低于5 min暴露组[(110.67±8.32)个]( P<0.05)。(4)Western blot结果显示，4组大鼠海马组织SOX2、NeuN蛋白相对表达量差异有统计学意义( F＝11.560，7.035，均 P<0.05)。15 min暴露组SOX2、NeuN蛋白相对表达量低于对照组(均 P<0.05)。15 min暴露组SOX2蛋白相对表达量低于5 min暴露组( P<0.05)。 结论:温压装药爆炸模拟气体急性暴露可导致大鼠焦虑样行为、学习与记忆功能缺陷，并显著降低海马齿状回神经干细胞与成熟神经元标志分子SOX2与NeuN的表达水平。

目的:探讨光气急性染毒对大鼠肾脏功能的影响及其机制。方法:于2019年5月，将36只健康成年雄性SD大鼠随机分为对照组和光气组（包括光气染毒后1、3、6、12和24 h各组），对照组和各时点各6只大鼠。动物置于染毒箱内，对照组动物吸入空气5 min，光气组大鼠吸入浓度为8.33 mg/L的光气5 min；在染毒后1、3、6、12、24 h，将大鼠腹腔麻醉处死后，采集血液样本和肾脏组织，进行血气分析、肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）检查，以及组织病理学检测，并采用免疫组织化学染色法观察大鼠肾脏组织中8-羟基脱氧鸟苷和髓过氧化物酶的表达情况。结果:光气组大鼠动脉血氧分压和氧合指数在染毒后3、6和12 h时明显低于对照组（ P<0.01），在6 h时达到最低点，分别为（58.67±7.89）mmHg和（202.30±27.20）mmHg。光气组大鼠Cr和BUN在3、6、12和24 h时明显高于对照组，肾脏脏器系数在3、6和12 h时明显高于对照组，差异均有统计学意义（ P<0.01）。HE染色显示，光气组大鼠肾小球内红细胞增多，肾小管上皮细胞体积增大，胞浆疏松淡染，6 h时损伤最明显。免疫组织化学染色结果显示，光气组大鼠肾组织内8-羟基脱氧鸟苷和髓过氧化物酶阳性表达增多。 结论:光气染毒导致的低氧血症和氧化应激反应可能是导致大鼠肾功能损伤的原因。

目的:评价多种药物对急性羰基镍中毒大鼠肾组织谷胱甘肽（GSH）和超氧化物歧化酶（SOD）活力的干预效果。方法:于2019年1月，选择250只SPF级SD雄性大鼠按随机数字表法随机分为正常对照组（10只）、染毒对照组（40只）及治疗组（200只），其中治疗组分为甲泼尼龙（20 mg/kg）组、二乙基二硫氨基甲酸钠（DDC）（100 mg/kg）组、亚硒酸钠（10 μmol/kg）组、回阳注射液（0.25 ml）组、甲泼尼龙（20 mg/kg）+DDC（100 mg/kg）组，每组各40只。除正常对照组外，其余各组大鼠静态吸入羰基镍250 mg/m 3染毒30 min，分别于染毒后4 h和30 h对各治疗组大鼠腹腔注射相应药物，连续给药3 d或7 d后取肾组织，每组各10只。采用酶联免疫吸附实验测定肾组织GSH和SOD活力，透射电镜观察大鼠肾组织超微结构变化。 结果:与正常对照组比较，染毒4 h或30 h后3 d或7 d染毒对照组肾组织GSH、SOD活力均明显降低，差异有统计学意义（ P=0.000、0.031、0.001、0.033），肾近曲小管上皮细胞核明显固缩，胞质内溶酶体增生；与染毒对照组比较，染毒4 h后给药7 d甲泼尼龙+DDC组大鼠肾组织GSH和SOD活力明显增高，差异有统计学意义（ P=0.022、0.000），甲泼尼龙组、甲泼尼龙+DDC组给药7 d大鼠肾组织的GSH和SOD活力明显高于给药3 d者，差异有统计学意义（ P=0.020、0.017、0.018、0.033），电镜结果显示该两组的肾近曲小管上皮细胞核及胞质细胞器结构基本恢复正常组织水平。 结论:甲泼尼龙、甲泼尼龙+DDC对急性羰基镍中毒大鼠肾组织酶活力水平有明显修复作用，且用药时间长的治疗效果更好。

目的:分析高压氧（HBO）治疗急性一氧化碳中毒后脑病（DEACMP）高迁移率族蛋白1（HMGB1）在大鼠脑组织的表达情况，探讨HBO通过调控HMGB1防治DEACMP病理过程的作用机制。方法:选取SD大鼠108只，按照随机数字表法分为空白对照组（NC组）、CO染毒组（CO组）、染毒后HBO治疗组（HBO组），各组36只。各组分为染毒前、1、3、7、14、21 d六个亚组，各亚组6只。CO组和HBO组应用静态吸入染毒法建立CO中毒模型，HBO组大鼠进行HBO治疗，1次/d。用水迷宫实验检测各组大鼠3、7、14、21 d的平均逃避潜伏期和空间位置记忆保持能力。用酶联免疫吸附（ELISA）检测各组大鼠1、3、7、14、21 d血清HMGB1、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）浓度。用免疫印迹法（Western blotting）检测各组大鼠脑组织3、7、14、21 d HMGB1、半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）表达改变情况。用海马组织原位末端标记法（TUNEL）检测各组大鼠3、7、14、21 d海马组织神经细胞凋亡情况。结果:与NC组比较，CO组和HBO组大鼠7、14、21 d平均逃避潜伏期均明显增加，差异有统计学意义（ P<0.05）；与CO组比较，HBO组大鼠平均逃避潜伏期在14、21 d均明显缩短、平台象限活动时间在14、21 d明显增加，差异有统计学意义（ P<0.05），与NC组比较，CO组大鼠血清HMGB1浓度在1、3、7、14、21 d均较高、血清TNF-α浓度在1、3、7 d均较高、血清IL-6浓度1、3 d均较高，差异均有统计学意义（ P<0.05）。与CO组比较，HBO组大鼠血清HMGB1浓度、脑组织HMGB1浓度、Caspase-3表达水平和海马神经细胞凋亡指数在3、7、14、21 d均较低、血清TNF-α浓度在3、7 d均较低、血清IL-6浓度在1、3 d均较低，差异均有统计学意义（ P<0.05）。与NC组比较，CO组大鼠脑组织HMGB1和Caspase-3表达水平在3、7、14 d均较高，海马神经细胞凋亡指数在3、7、14、21 d均明显升高，差异均有统计学意义（ P<0.05）。 结论:急性CO中毒可以诱发HMGB1、IL-6、TNF-α等炎症因子的释放，HBO通过下调HMGB1的表达，降低Caspase-3蛋白表达，抑制急性CO中毒后神经细胞的凋亡。

目的:探究过表达热休克蛋白60（HSP60）对骨髓间充质干细胞（MSCs）活性的影响及对光气急性肺损伤大鼠的疗效改变。方法:利用腺病毒为载体转染HSP60至MSCs。用免疫印迹试验（Western blot）测量细胞转染前后HSP60的表达。利用CCK-8实验检测MSCs活力变化，流式凋亡实验检测MSCs凋亡能力的改变，Transwell实验观察MSCs迁移能力的改变。将60只SPF级雄性SD大鼠随机分为对照组、光气染毒组（吸入光气5min）、MSCs组（光气染毒，MSCs治疗组）和转染MSCs组（光气染毒，过表达HSP60 MSCs治疗组），每组各15只。通过肺部病理切片观察大鼠肺部病理改变，肺湿干比观察肺部水肿程度改变，检测肺泡灌洗液总细胞计数、总蛋白量及肺泡灌洗液和血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）反映炎症变化。用Graphpad Prism 8.0软件对数据进行分析，两两比较采用非配对 t检验，组间比较采用单因素方差分析。 结果:转染HSP60后，与未转染HSP60的MSCs[ A=（0.27±0.02）]比较，转染HSP60的MSCs增殖能力[ A=（0.69±0.05）]提高，差异有统计学意义（ P<0.05）。与光气染毒组比较，MSCs组和转染后MSCs组大鼠肺组织水肿均有所减轻，炎症因子浸润减少。但转染后MSCs组较MSCs组肺部水肿减轻程度改善较为明显、IL-6、TNF-α下降程度更高，肺泡灌洗液总蛋白量及总细胞数更少，差异均有统计学意义（ P<0.05）。 结论:MSCs转染HSP60后，增强了增殖能力、抗凋亡能力、迁移能力及在光气急性肺损伤大鼠中的疗效。

目的:建立苯及其部分代谢物的气相色谱-串联质谱检测方法，为苯毒性机制研究提供方法支持和理论依据。方法:于2019年8月至2020年3月，用小鼠经呼吸道吸入染毒的方法建立苯高浓度接触的动物模型，取染毒后小鼠血液标本，采用HLB固相萃取的方法进行样品提取和净化，气相色谱质谱-串联法进行目标物质定性、定量分析，化合物经HP-17MS型毛细管柱分离后，EI离子源进行离子化，选择离子扫描法（SIM）进行质谱检测，采用外标标准曲线法定量。结果:该方法可实现血液中苯及其代谢物苯酚、邻苯二酚、对苯二酚、间苯三酚的有效分离和准确定性、定量。该方法检测苯及其代谢物回归方程分别是：苯： y=3 252.1 x+1 540， r=0.999 3；苯酚： y=2 046.5 x+1 423， r=0.999 1；邻苯二酚： y= 1 853.9 x+945， r=0.999 3；对苯二酚： y=1 891.5 x+840，r=0.999 2；间苯三酚： y=1 052.4 x+655， r=0.999 1。苯、苯酚、邻苯二酚、对苯二酚和间苯三酚的检出限分别为0.03、0.03、0.05、0.05和0.10 μg/g，定量下限分别为0.10、0.10、0.15、0.15和0.30 μg/g，该方法批内精密度为2.64%~10.06%，批间精密度为1.37%~10.17%，加标回收率为89.8%~102.3%。采用该方法可对苯染毒小鼠血液中苯、苯酚、邻苯二酚、对苯二酚和间苯三酚进行定量检测。 结论:固相萃取-气相色谱串联质谱法可对苯及其代谢物（苯酚、邻苯二酚、对苯二酚和间苯三酚）进行准确定性、定量检测。

目的:研究1，2-二氯乙烷（1，2-dichloroethane，1，2-DCE）染毒过程中不同脑区细胞色素P450 2E1（cytochrome P-450 2E1，CYP2E1）表达的变化，探讨CYP2E1对1，2-DCE中毒引起的脑水肿形成的影响和作用。方法:于2018年12月，选择雌性SPF级昆明种小鼠40只随机分为对照组、染毒1、2和3 d组共4组，每组10只。将染毒组小鼠置于100 L静式染毒柜中（5只/柜），以1.2 mg/L 1，2-DCE每天吸入染毒3.5 h，分别染毒1、2和3 d，对照组不进行染毒，其他处理方式与染毒组相同。分别于染毒结束后次日处死，取脑组织并分区，采用HE染色法对不同脑区进行组织病理学观察，检测不同脑区丙二醛（malondialdehyde，MDA）、还原型谷胱甘肽（glutathione，GSH）含量和过氧化氢酶（catalase，CAT）活力；同时以蛋白免疫印迹（Western blotting）法检测不同脑区中CYP2E1、occludin和claudin5蛋白含量，再以实时荧光定量PCR法检测CYP2E1、occludin和claudin5 mRNA表达水平。实验数据采用SPSS 20.0进行统计分析，多组组间比较采用单因素方差分析（one-way ANOVA），组间两两比较采用SNK（q检验）法分析。结果:与对照组比较，染毒2 d和3 d组小鼠小脑组织出现明显的脑水肿改变；与对照组比较，染毒3 d组小鼠小脑组织中MDA含量、CYP2E1蛋白和mRNA表达水平明显增高，差异均有统计学意义（P<0.05）；与对照组比较，各个染毒组小鼠小脑组织中GSH含量、CAT活力及occludin和claudin5蛋白表达水平明显降低，差异均有统计学意义（P<0.05）。各组小鼠额叶皮质组织中上述指标差异均无统计学意义（P>0.05）。结论:1，2-DCE染毒可以诱导小鼠小脑组织中CYP2E1的表达增强，引起脑组织氧化损伤和脑水肿，对小鼠额叶皮质组织中CYP2E1的表达无明显影响。