在我国,商陆属植物商陆Phytolacca acinosa或垂序商陆P.americana的干燥根被列为中药商陆.商陆属植物含有三萜类、三萜皂苷类、多糖类、抗病毒蛋白类、黄酮类等多种化学成分,其中最主要的是三萜类及三萜皂苷类化合物.商陆属植物具有抗炎、抗肿瘤、抗细菌、抗真菌、抗疟、驱虫等活性.该文对近年来商陆属植物的化学成分、药理作用、毒性及重金属富集特性进行了归纳整理,以期为商陆属植物的活性成分研究和药物开发提供理论依据.

商陆是我国传统峻下逐水中药,收载于历版《中华人民共和国药典》,入药部位为根部,具有利尿泻下、抗炎、抗肿瘤、祛痰镇咳平喘等药理活性.临床多用于治疗肾炎、肝硬化腹水、乳腺增生、银屑病等疾病.通过对商陆提取物和化学成分药理作用进行总结,为今后商陆深入研究及合理开发利用提供支持和参考依据.

目的:探寻一种商陆多糖快速、简捷的测定方法.方法:利用紫外分光光度计,分别采用苯酚-硫酸法测定商陆总糖含量,DNS法测定还原糖含量,用二者的差值作为测得的商陆多糖含量,并从重复性、稳定性、加样回收率等方面进行方法学考察;通过对商陆多糖超声波辅助提取的单因素研究,以多糖提取率为响应值,采用四因素三水平的响应面试验设计进行工艺优化.结果:苯酚-硫酸法联合DNS法测定商陆多糖具有良好的适用性;最佳提取工艺为料液比1∶40(g∶mL)、超声时间30 min、超声温度60℃、超声功率350 W,在此这条件下得到商陆多糖提取率平均为(12.38％±0.59％).结论:本实验采用的样品处理方法简单,测定方法可靠,可用于商陆多糖的测定.

目的:观察7种商陆均一多糖对小鼠脾细胞增殖及细胞因子分泌的影响,探讨其对免疫调节的作用.方法:采用噻唑蓝(MTT)法检测7种商陆均一多糖对刀豆蛋白A(ConA)诱导的T淋巴细胞和脂多糖(LPS)诱导的B淋巴细胞增殖的影响;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞上清液中IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ 的含量.结果:商陆总多糖(PAP)在25μg/mL、125μg/mL的浓度下显著促进脾淋巴细胞增殖(P<0.05).七种商陆均一多糖中,PAP-2、PAP-4、PAP-5、PAP-6及PAP-7对小鼠脾淋巴细胞增殖产生显著的促进作用;PAP在25μg/mL、125μg/mL的浓度下显著促进细胞因子IL-2、IL-4、IL-6和IFN-γ 的分泌.七种商陆均一多糖中,PAP-2、PAP-4、PAP-5、PAP-6及PAP-7对小鼠脾细胞分泌细胞因子产生显著的增强作用.结论:商陆均一多糖PAP-2、PAP-4、PAP-5、PAP-6及PAP-7具有显著的免疫增强的作用.

凋亡蛋白(apoptin)因可特异性诱导肿瘤细胞和转化细胞凋亡而备受广大研究人员的关注.但由于凋亡蛋白质本身结构特性等方面的原因,导致通过原核表达的蛋白质不稳定,很容易聚集沉淀,并且凋亡蛋白质本身也不能自主跨膜进入胞内发挥其生物学作用.本文考察了一种野生型凋亡蛋白N-末端缺失突变体tApoptin(1～43氨基酸残基缺失)在大肠杆菌中以可溶性形式表达,并且通过荧光显微镜和共聚焦显微镜观察到,这种N-端缺失突变体tApoptin与绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,EGFP)的融合蛋白质具有自主进入A549、HeLa、H460和SK-OV-3等多种肿瘤细胞的能力,而且这种转运效率具有细胞特异性.与肝素钠共孵育可抑制tApoptin进入细胞的能力,推测tApoptin可能是通过与细胞表面硫酸乙酰肝素多糖结合后被内吞进入细胞.MTT的结果显示,突变体tApoptin依然保持了全长凋亡蛋白质的抗肿瘤特性,对所测试的多种肿瘤细胞生长都具有不同程度的抑制作用.与tApoptin给药组相比,tApoptin与传统中药材来源的商陆皂苷甲(esculentoside,EsA)联用的给药组,对测试的4种肿瘤细胞的药效提升约100倍以上.其中,对SK-OV-3细胞的提升效果最显著,提升463倍,半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)从27.37±2.25 μmol/L降低到0.059±0.003 μmol/L.流式细胞术分析表明,与tApoptin给药组相比,tApoptin与EsA联合的给药组细胞凋亡率显著增加(6.46±0.34％ vs.41.9±0.47％,P＜0.001).与溶酶体共定位的共聚焦结果表明,EsA可能通过破坏细胞中的溶酶体促使tApoptin释放到胞质内有效发挥其药理作用.

目的 构建葛桑降糖胶囊的质量控制方法.方法 采用比色法测定葛桑降糖胶囊粗多糖、总皂苷和总黄酮含量;采用UPLC建立葛桑降糖胶囊的指纹图谱,测定了 10个批次产品;并利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版本)进行相似度评价,确定共有峰.结果 3批次葛桑降糖胶囊中粗多糖平均质量分数为 4.56％.总皂苷平均质量分数为 2.97％,总黄酮平均质量分数为 2.61％;建立了 10批次葛桑降糖胶囊的 UPLC指纹图谱,确立 15个共有峰,经对照品指认出 7个共有峰,分别是葛根素、芦丁、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、商陆苷、人参皂苷Rb1、商陆黄素,对应 1 、5 、8、10、12、14、15号峰.结论 此方法可用于葛桑降糖胶囊的质量控制.

目的:探究商陆皂苷对脂多糖诱导的小鼠乳腺炎的效果及作用机制.方法:将BALB/c雌性小鼠随机分成正常组、模型组、地塞米松组(DEX,5.0mg·kg-1)和商陆皂苷给药组(50,25,12.5 mg·kg-1),采用脂多糖(LPS)诱导产后雌小鼠(BALB/c)乳腺炎模型,分析小鼠乳腺组织的病理情况和中性粒细胞髓过氧化物酶(MPO)活性水平;测定乳腺组织中炎症因子的含量及氧化应激水平;通过蛋白免疫印迹法(Western blot)评估商陆皂苷对Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路蛋白的影响.结果:与正常组比较,模型组的乳腺组织中有充血和瘀血等典型的乳腺炎变化,MPO水平升高,肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(1L-1β)和白细胞介素-6(IL-6)的表达水平显著升高(P＜0.01);与LPS模型组比较,各商陆皂苷组能够显著改善小鼠乳腺组织的炎性损伤,降低嗜中性粒细胞的分泌,降低MPO的活性,促炎症因子TNF-α,IL-1β和IL-6的表达水平也明显下调,;升高超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)酶活力,同时降低丙二醛(MDA)的水平(P＜0.05,P＜0.01),降低TLR4/NF-κB信号通路蛋白的表达(P＜0.05,P＜0.01).结论:商陆皂苷对脂多糖诱导的小鼠乳腺炎损伤有保护作用,其可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路蛋白的表达有关.

商陆是中国传统的中药材,近年来,对商陆的研究逐渐深入,其有效成分及药理作用倍受关注,在治疗多种疾病方面具有广泛的应用前景.商陆主要含有的化学成分包括三萜皂苷、多糖、黄酮和酚酸等,现代药理学研究发现其具有利尿、调节免疫、祛痰等作用.在此研究基础上,根据中药质量标志物的定义,本文从传统功效、传统药性、临床新用途、可测成分、炮制前后成分变化及入血成分等几个方面对商陆的质量标志物进行预测分析,为商陆质量评价研究提供科学依据.

查阅本草和国内外相关文献,从商陆本草考证、真伪鉴定、炮制、成分与药理、临床研究及工农业资源开发等方面进行归纳总结.本草考证表明历代古籍有商陆或当陆或章陆等名称,其功效为外敷痈肿疮毒、内服利尿消肿,产地由西北向东南转移;商陆根具备同心环异常结构,有别于常见8种混伪品.商陆主要以醋制法进行减毒增效炮制.商陆主要有效成分为三萜皂苷、多糖和抗病毒蛋白(PAPs),具有利尿泻下、改善肾脏、肝脏、呼吸道炎症和神经性炎性疾病的作用,及抗菌、抗病毒、抗肿瘤等多种药理活性.临床主要用于组方治疗肝硬化腹水、肾病综合症等,外敷治疗便秘.商陆还在植物抗病、抗虫、环境修复等方面有重要应用价值,为该药用资源的合理开发和综合利用提供支持.

目的:观察商陆及其性味拆分组分对阿霉素肾病模型大鼠肾脏的保护作用.方法:采用尾静脉注射盐酸多柔比星(7.5 mg/100 g)的方法建立大鼠肾病综合征模型.造模成功后,给药两周.考察商陆低剂量组(0.10 g/kg)、商陆高剂量组(0.20 g/kg)、多糖低剂量组(0.15 g/kg)、多糖高剂量组(0.31 g/kg)、皂苷低剂量组(0.11 g/kg)、皂苷高剂量组(0.22 g/kg)、多糖与皂苷合用组(多糖0.31 g/kg+皂苷0.22 g/kg)血清中白蛋白、总蛋白、总甘油三酯、总胆固醇、肌酐、尿素氮、硫酸吲哚酚、血清内毒素脂多糖以及尿中蛋白含量的变化.观察各组肾脏、结肠组织病理改变.以16S rDNA对空白组、模型组、泼尼松组、商陆高剂量组、多糖高剂量组、皂苷高剂量组、多糖皂苷合用组粪便样品的肠道菌群进行分析.结果:商陆及其性味拆分组分降低了阿霉素肾病大鼠血清内异常升高的肌酐、尿素氮、总甘油三酯、总胆固醇、硫酸吲哚酚和内毒素脂多糖(P＜0.01),提高了总蛋白和白蛋白(P＜0.01).光镜检查结果表明,商陆及其性味拆分组分肾小管上皮肿胀明显减轻.商陆及其性味拆分组分显著提高了在模型组中减少的普雷沃菌属水平.结论:商陆及其性味拆分组分具有改善阿霉素诱导的肾损伤大鼠肠道菌群失调的作用,能够改善肾功能,缓解低蛋白血症与高脂血症,减少血清内肠道内源性毒素.