目的:探讨呼吸道合胞病毒（RSV）肺炎患儿血清嗜酸性粒细胞阳离子蛋白（ECP）表达水平及临床意义。方法:选取2017年1月至2019年10月南京医科大学附属苏州科技城医院收治的106例RSV肺炎患儿（RSV肺炎组）和70例体检健康儿童（对照组）。RSV肺炎患儿中，低危68例，中危25例，高危13例。采用酶联免疫吸附法检测两组血清ECP水平，并检测肺功能，包括第1秒用力呼气容积占预计值百分比（FEV 1%）、第1秒用力呼气容积（FEV 1）/用力肺活量（FVC）和呼出气一氧化氮（FeNO）。多因素Logistic回归分析影响RSV肺炎患儿病情严重程度的危险因素，相关性采用Pearson相关分析。绘制受试者工作特征（ROC）曲线，利用曲线下面积（AUC）评价血清ECP对RSV肺炎的诊断效能。 结果:RSV肺炎组FEV 1%和FEV 1/FVC明显低于对照组[（81.47 ± 14.08）%比（96.80 ± 17.10）%和（72.17 ± 21.63）%比（93.46 ± 26.57）%]，FeNO和ECP明显高于对照组[（17.88 ± 2.55）ppb比（9.79 ± 2.35）ppb和（64.00 ± 20.05）μg/L比（41.59 ± 16.99）μg/L]，差异有统计学意义（ P<0.01）。中危和高危RSV肺炎患儿血清ECP明显高于低危患儿[（70.82 ± 20.84）、（90.71 ± 19.75）μg/L比（58.05 ± 14.72）μg/L]，高危患儿明显高于中危患儿，差异均有统计学意义（ P<0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示，FEV 1%、FEV 1/FVC、FeNO、ECP是影响RSV肺炎患儿病情严重程度的独立危险因素（ OR=12.913、17.845、0.002和0.126，95% CI 2.641~63.139、2.972~107.139、0.000~0.017和0.028~0.566， P<0.01）。ROC曲线分析结果显示，血清ECP诊断RSV肺炎的最佳临界值为51.84 μg/L，AUC为0.809，敏感度和特异度分别为78.57%和75.47%；血清ECP诊断早期RSV肺炎的最佳临界值为43.17 μg/L，AUC为0.714，敏感度和特异度分别为58.57%和82.35%。Pearson相关分析结果显示，血清ECP与FEV 1%和FEV 1/FVC呈负相关（ r=- 0.632和- 0.604， P<0.01），与FeNO呈正相关（ r= 0.707， P<0.01）。 结论:RSV肺炎患儿血清ECP水平明显升高，与FEV 1%、FEV 1/FVC呈负相关，与FeNO呈正相关；血清ECP可作为RSV肺炎患儿诊断和病情严重程度评估的参考指标之一。

目的:探讨血清及疱液嗜酸性粒细胞阳离子蛋白（ECP）水平与大疱性类天疱疮（BP）的关系。方法:选择2012年1月至2019年10月在北京协和医院皮肤科就诊的初发BP患者40例、健康人40例进行血清ECP检测；选择同一时期就诊的33例初发BP患者、41例非免疫性疱病患者进行疱液ECP检测。用酶联免疫吸附实验检测血清和疱液ECP含量，同时对1例BP和1例接触性皮炎患者皮损部位病理切片进行ECP免疫组化染色。符合正态分布的两组间数据比较采用 t检验或 t′检验，计数资料的比较采用 χ2检验。采用Pearson相关系数分析BP患者血清ECP与外周血嗜酸性粒细胞之间的关系。 结果:BP组血清ECP含量为（116.9 ± 19.3）ng/L，健康对照组为（93.3 ± 15.9）ng/L，差异有统计学意义（ t = 5.96， P<0.001）。BP组疱液ECP含量为（665.8 ± 189.0）ng/L，非免疫性疱病组为（547.5 ± 240.6）ng/L，差异有统计学意义（ t = 2.31， P = 0.02）。免疫组化结果显示，BP患者ECP阳性细胞胞质棕黄色颗粒明显多于接触性皮炎患者。BP患者血清ECP与外周血嗜酸性粒细胞比例之间无统计学相关性（ r = -0.15， P = 0.35）。 结论:BP患者血液、疱液ECP水平明显升高，且疱液ECP水平远远高于血清ECP水平，提示ECP可能参与BP的发病过程。

目的 探究探针RAI1脱敏干预影响变应性鼻炎大鼠模型ECP表达和Th1-Th2分化的机制方法 卵白蛋白(OVA)诱导雌性Sprague-dawley大鼠构建过敏性鼻炎(AR)模型.并进行构建沉默RAI1 mRNA质粒载体,脑内注射至AR模型大鼠体内.通过蛋白质印迹法检测Th1-Th2相关因子的蛋白表达情况;通过qRT-PCR分析各组大鼠中维甲酸诱导蛋白RAI1的mRNA表达情况;通过记录大鼠鼻炎行为评估变应性鼻炎症状;通过酶联免疫吸附试验检测各组大鼠血清中ECP、IgE含量.结果 大鼠搔鼻挠嘴、打喷嚏行为AR模型组较对照组、RAI1干预组频繁(P<0.05),说明AR模型建立成功.RAI1干预组(1.02±0.01)较AR模型组(2.85±0.25)、对照组(2.69±0.11)相比,RAI1 mRNA表达降低(P<0.05),说明病毒载体构建成功,RAI1蛋白表达受到抑制.Th1相关因子IL-2、IFN-γ的蛋白表达AR模型组较对照组、RAI1干预组低(P<0.05).Th2相关因子IL-4、IL-5的蛋白表达AR模型组较对照组、RAI1干预组高(P<0.05).经酶联免疫吸附检测ECP、IgE含量,AR模型组(3.11±0.23、29.51±3.64)较对照组(1.62±0.18、13.72±2.68)、RAI1干预组(1.85±0.14、17.66±2.16)升高(P<0.05).结论 RAI1脱敏干预会降低ECP蛋白表达,平衡Th1-Th2生物功能,对变应性鼻炎具有治疗效果,减轻鼻炎症状.

人体中核糖核酸酶A(ribonuclease A,RNase A)家族包含8个典型成员(RNase 1至RNase 8).已有研究显示,除RNase 8外,该家族其它典型成员影响了胰腺癌、结直肠癌、膀胱癌、乳腺癌和皮肤癌等多种肿瘤的发生发展.在肿瘤发生过程中,特定RNase表达量及糖基化修饰会发生显著改变,是肿瘤诊断的潜在标志物;它们能以多种机制参与肿瘤发生、生长和转移等过程,有望成为肿瘤治疗的靶点;而部分成员则具有杀伤肿瘤细胞、抑制肿瘤发展的功能,存在临床开发成肿瘤治疗药物的可能.具体而言,RNase 1通过核糖核酸酶活性依赖的细胞毒性和细胞外RNA降解功能,发挥直接杀伤肿瘤细胞或降低局部炎症而抑制肿瘤生长的作用;RNase 1还能结合并激活促红细胞生成素,产生肝细胞癌受体相互作用蛋白A4(erythropoietin-producing hepatocellular carcinoma re-ceptor-interacting protein A4,EphA4)信号通路,促进乳腺癌的发生.RNase 2和RNase 3是嗜酸性粒细胞颗粒蛋白质的重要成分,依赖于阳离子性及核糖核酸酶活性在抗肿瘤免疫防御中发挥重要作用.RNase 4和RNase 5则通过诱导血管生成、加快肿瘤细胞增殖和抑制肿瘤细胞凋亡等方式,促进肿瘤发生发展.其中RNase 5发挥作用的分子机制包括促进47 S前体rRNA转录和激活促肿瘤生长的信号通路,以及产生tRNA衍生的应激诱导的RNA(tRNA-derived stress-induced RNA,tiR-NA)等.虽然RNase 6和RNase 7与肿瘤的发生存在相关性,但其具体作用及机制的研究仍较少.本文总结了 RNase A家族典型成员与肿瘤的相关性和作用机制,并对其临床应用前景进行了展望,以期为肿瘤治疗药物的开发提供新思路.

核糖核酸酶A超家族(ribonuclease A superfamily;RNase A superfamily),也称脊椎动物分泌型核糖核酸酶超家族(vertebrate secreted ribonucleases superfamily),是二十世纪蛋白质结构、酶学和分子进化领域研究最多最广泛的核糖核酸酶家族.自上世纪初期从牛胰腺中分离鉴定第一个成员以来,已从哺乳动物、两栖动物、爬行动物、鸟和鱼等几百种动物中鉴定了几千个成员.早期对该家族成员的研究不仅促进了蛋白质化学技术的发展,而且为现代生物学研究奠定了基础.目前已知人的核糖核酸酶A超家族成员包括8个典型成员(RNase 1～RNase 8)和5个非典型成员(RNase 9～RNase 13).功能方面,曾一度以为该家族成员只具有降解核糖核酸的能力.随着血管生成素(angiogenin;RNase 5)、嗜酸性粒细胞衍生神经毒素(eosinophils-derived neurotoxin,EDN;RNase 2)、嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(eosinophils cationic protein,ECP;RNase 3)的发现,人们意识到该家族成员除了消化核糖核酸外,还有依赖酶活性和不依赖酶活性的其他功能,包括宿主防御、免疫调节、血管生成和肿瘤抑制等,但仍了解不够全面.本文回顾了核糖核酸酶A超家族的研究历程,探讨了未来研究方向,特别呼吁要系统研究其除降解核糖核酸外的其他生理病理功能,希望能为该领域的研究提供思路.

目的:初步探究四臣止咳颗粒对咳嗽变异性哮喘(CVA)大鼠气道炎症的干预作用.方法:大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松(0.5 mg/kg)组、四臣止咳颗粒低、中、高(1.8、3.6、7.2 g生药/kg)剂量组.除正常组外,其余各组于实验第1、8天腹腔注射卵蛋白、氢氧化铝混合液;于第15天开始给予1％卵蛋白溶液雾化激发构建大鼠CVA模型,同时开始给药干预,持续2周.实验结束,检测大鼠肺功能;酶联免疫吸附试验法检测大鼠免疫球蛋白E(IgE)、大鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)含量及肺泡灌洗液白细胞介素(IL);肺组织切片苏木精-伊红(HE)染色;蛋白质免疫印迹法检测肺组织Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)p65表达水平.结果:与正常组比较,模型组大鼠阻力(RI)升高,动态肺顺应性(Cdyn)降低;血清免疫球蛋白E(IgE)和大鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)水平升高;肺泡灌洗液大鼠γ干扰素(IFN-γ)水平降低大鼠白细胞介素4(IL-4)和大鼠白细胞介素13(IL-13)水平升高;HE病理评分升高;肺组织TLR4、NF-κB p65蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(均P<0.05).与模型组比较,四臣止咳颗粒干预大鼠RI降低,Cdyn升高;血清IgE和ECP水平降低;肺泡灌洗液IFN-γ水平升高,IL-4和IL-13水平降低;HE病理评分降低;大鼠肺组织TLR4/NF-κB p65蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(均P<0.05).结论:四臣止咳颗粒能够改善咳嗽变异性哮喘大鼠气道高反应、抑制气道炎症反应发展,可能与调控TLR4/NF-κB相关.