目的:探讨囊型包虫病所致过敏反应对IL-17及抗体表达的影响。。方法:将120只雌性BALB/c小鼠按照随机数值大小分为3组：空白对照组（A组，45只）、囊型包虫感染模型组（B组，45只）、囊型包虫感染过敏反应组（C组，30只）。B组、C组建立包虫感染模型并观察3个月，模型建立成功后C组给予粗制囊液激发过敏反应，B组注射PBS。观察60 min后收集血清标本，使用流式细胞仪微珠阵列技术检测血清IL-17水平。使用ELISA试剂盒检测小鼠血清免疫球蛋白E （immunoglobulin E, IgE ）、免疫球蛋白G(immunoglobulin G, IgG）抗体水平。结果:致敏前：B组IL-17、IgE抗体及IgG抗体水平明显高于A组（ P<0.05 ）。致敏后：B组IL-17、IgE抗体及IgG抗体水平明显高于A组，C组IL-17、IgE抗体及IgG抗体水平明显高于B组（ P< 0.05 ）。 结论:包虫过敏反应中，IL-17作为炎症因子明显升高，IgE、IgG双抗体明显升高，提示IL-17、IgE、IgG在过敏性反应发生、发展中起重要作用。

目的:建立细粒棘球蚴过敏反应BALB/c小鼠模型，研究和探讨淋巴细胞亚群在细粒棘球蚴致敏反应中的作用。方法:从自然感染细粒棘球蚴的绵羊肝脏中提取原头蚴，培养40 d后，以50个微囊/鼠的剂量，通过腹腔注射接种BALB/c小鼠，对照组注射无菌生理盐水。感染6个月之后，每只小鼠按0.1 ml/10 g经腹腔注射羊源细粒棘球蚴粗制囊液致敏。对照组继续注射无菌生理盐水。激发过敏后1 h，根据评分将小鼠分为正常对照组、未致敏组、致敏组，每组各6只。取小鼠内眦静脉血，使用流式细胞仪检测B细胞、NK细胞、CD3 ＋/CD4 ＋/CD8 ＋T细胞，液相多重蛋白定量技术检测白细胞介素-4(interleukin-4，IL-4)、IL-6、IL-13的变化。 结果:与对照组比较，未致敏组的B细胞百分比显著升高( P<0.001)，致敏组的B细胞百分比上升，但差异无统计学意义。与未致敏组比较，致敏组的B细胞百分比显著下降( P<0.01)。与对照组比较，未致敏组和致敏组的NK细胞百分比显著下降( P<0.001和 P<0.01)。与未致敏组比较，致敏组的NK细胞百分比显著上升( P<0.05)。与对照组比较，未致敏组的CD3 ＋T细胞和CD4 ＋T细胞百分比显著降低( P<0.05)，CD8 ＋T细胞百分比显著升高( P<0.01)；致敏组的CD3 ＋T细胞和CD4 ＋T细胞百分比显著升高( P<0.05和 P<0.001)，CD8 ＋T细胞百分比无显著变化。与未致敏组比较，致敏组的CD3 ＋T细胞和CD4 ＋T细胞百分比显著升高( P<0.05)，CD8 ＋T细胞百分比显著降低( P<0.01)。与对照组比较，未致敏组IL-4、IL-6、IL-13含量都显著升高( P<0.001)；致敏组IL-4含量升高，但差异无统计学意义( P>0.05)，IL-6含量显著升高( P<0.01)，IL-13含量下降，但差异无统计学意义( P>0.05)。与未致敏组比较，致敏组IL-4、IL-6、IL-13含量都显著降低( P<0.001)。 结论:本研究成功建立了细粒棘球蚴过敏反应BALB/c小鼠模型，证明了Th2细胞引导的体液免疫应答在细粒棘球蚴囊液引起的过敏性休克中发挥着重要作用，为建立细粒棘球蚴囊液外溢所致过敏性休克患者的防治策略提供了重要的科学依据。

目的 探讨茴香胶囊抗支气管哮喘作用及潜在机制.方法 采用环磷酰胺腹腔注射法建立小鼠免疫低下模型评价茴香胶囊免疫增强作用;采用浓氨水引咳法及酚红排泄法评价茴香胶囊止咳祛痰活性;采用卵清蛋白致敏和激发方式构建支气管哮喘小鼠模型,实验过程中观察并记录小鼠体重及行为学变化;检测小鼠肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞计数;ELISA法检测免疫球蛋白E(IgE)、γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-17A(IL-17A)、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平;HE和Masson染色观察肺组织病理学变化;RT-qPCR、Western blot检测TGF-β1/Smad2/3通路相关蛋白表达.结果 茴香胶囊可增强免疫低下小鼠的免疫功能,延长小鼠咳嗽潜伏期,减少小鼠咳嗽次数,增加小鼠气管酚红排泌量,降低支气管哮喘小鼠BALF中白细胞等炎性细胞数量,降低IgE、IL-4、IL-17A、TGF-β1水平,增加IFN-γ水平,减轻小鼠肺组织病理学变化;下调TGF-β1/Smad2/3通路相关蛋白表达.结论 茴香胶囊可能通过增强机体免疫力、止咳祛痰缓解支气管哮喘小鼠哮喘症状,调节Th1/Th2失衡、降低肺组织中炎症因子水平、下调TGF-β1/Smad2/3信号通路减少气道炎症及气道重塑.

目的 探究细粒棘球蚴囊液外溢致敏过程中白细胞介素-1β(IL-1β)受体阻滞剂对肺损伤的治疗作用机制.方法 细粒棘球蚴包囊采集自新疆乌鲁木齐华凌屠宰场感染细粒棘球蚴的新鲜羊肝,收集包囊囊液,消化沉淀获得原头节,上清经内毒素处理获得致敏囊液.将24只小鼠随机分为对照组、致敏组、阻滞剂治疗组和阻滞剂预防组,每组6只.致敏组、阻滞剂治疗组和阻滞剂预防组小鼠分别腹腔注射约2 000个细粒棘球蚴原头节,对照组小鼠腹腔注射等体积生理盐水(约1ml).3个月后致敏组小鼠腹腔注射致敏囊液(0.1 ml/g体质量),阻滞剂治疗组小鼠先腹腔注射致敏囊液、15 min后尾静脉注射IL-1β受体阻滞剂(4 μg/g体质量),阻滞剂预防组小鼠先尾静脉注射阻滞剂、15 min后腹腔注射致敏囊液,对照组小鼠腹腔注射等体积生理盐水.取小鼠肺组织,制备石蜡切片后苏木精-伊红(HE)染色,显微镜下观察肺组织的炎症损伤情况.提取小鼠肺组织总RNA,qRT-PCR检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8(caspase-8)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、核因子-κB(NF-κB)的mRNA相对转录水平.提取小鼠肺组织蛋白,以β肌动蛋白(β-actin)为内参,蛋白质免疫印迹(Western blotting)检测PI3K、Akt、NF-κB的蛋白相对表达水平.应用GraphPad Prism软件对数据进行统计学分析,组间比较采用单因子方差分析.结果 HE染色结果显示,致敏组小鼠肺组织局部充血,充血部位周围炎症细胞游出、淋巴细胞聚集;阻滞剂治疗组、阻滞剂预防组和对照组肺组织均未见明显炎症反应.qRT-PCR结果显示,对照组小鼠肺组织中IL-6、TNF-α、caspase-8、PI3K、Akt和NF-κB的 mRNA 相对转录水平分别为 1.057±0.363、1.020±0.217、1.004±0.097、1.000±0.031、1.035±0.312、1.029±0.304,致敏组分别为 2.013±0.514、2.189±0.194、6.433±0.340、1.594±0.117、2.902±0.181、1.342±0.146,阻滞剂治疗组分别为 1.243±0.279、1.268±0.225、0.869±0.172、1.103±0.180、1.371±0.199、1.008±0.202,阻滞剂预防组分别为 1.223±0.358、0.970±0.303、0.932±0.298、0.825±0.404、1.421±0.137、1.083±0.222;致敏组均高于对照组(t=3.481、2.759、37.640、2.237、12.670、2.274,均P＜0.05),阻滞剂治疗组和阻滞剂预防组均低于致敏组(t=3.221、7.593、35.240、5.610、13.920、3.287,3.088、8.299、28.610、4.475、15.930、2.390,均P＜0.05).Western blotting结果显示,对照组小鼠肺组织中PI3K、Akt和NF-κB的蛋白相对表达水平分别为0.516±0.075、0.638±0.103、0.198±0.086,致敏组分别为 0.831±0.061、0.917±0.069、0.784±0.120,阻滞剂治疗组分别为 0.535±0.108、0.612±0.206、0.247±0.145,阻滞剂预防组分别为 0.526±0.117、0.565±0.087、0.154±0.031;致敏组均高于对照组(t=5.650、3.901、6.871,均P＜0.05),阻滞剂治疗组和阻滞剂预防组均低于致敏组(t=4.142、2.434、4.945,4.013、5.477、8.821,均P＜0.05).结论 IL-1β受体阻滞剂在细粒棘球蚴囊液引起的过敏反应中能够通过抑制PI3K/Akt/NF-κB通路,降低肺部炎症反应,对肺损伤具有治疗作用.

目的:观察祛风止痉胶囊对支气管哮喘大鼠气道平滑肌瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)表达以及外周血白介素(IL)-4、IL-13、IL-15、IL-17水平的影响.方法:将60只健康雄性大鼠随机分为正常组、阳性对照组、模型组与低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组10只.除正常组外,其余各组大鼠于实验的第1、15天给予10％OVA腹腔注射1 ml以致敏,第15天将致敏的大鼠给予1％OVA溶液进行超声雾化建立哮喘模型.连续干预10 d.采用ELISA法测定大鼠外周血IL-4、IL-13、IL-5、IL-17水平,采用荧光定量PCR及Western blot测定大鼠肺组织TRPV1 mRNA和蛋白的表达.结果:低剂量、中剂量组、高剂量组IL-4、IL-13、IL-5、IL-17水平低于模型组(均P＜0.05),高剂量组IL-4、IL-13、IL-5、IL-17水平低于阳性对照组(均P＜0.05).模型组及阳性对照组的TRPV1 mRNA和蛋白表达高于正常组(均P＜0.05),模型组的TRPV1 mRNA和蛋白表达高于阳性对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组(均P＜0.05).结论:祛风止痉胶囊可降低哮喘大鼠气道炎症因子水平,抑制哮喘大鼠气道平滑肌TRPV1表达.

目的 探讨清窍胶囊对分泌性中耳炎HIF-VEGF信号通路的影响和临床疗效.方法 前瞻性纳入本院从2014年12月至2015年11月期间收治80例急性分泌性中耳炎患者并随机分为2组,组1给予头孢克洛胶囊;组2采用口服清窍胶囊治疗.比较两组患者电测听、声阻抗测试结果 、不良反应发生率.ELISA法检测清窍胶囊治疗前后病人中耳积液中HIF-1a、VEGF的表达水平的浓度并比较治疗前后的差异.同时将60只小鼠随机分为安慰剂组(生理盐水)、对照组(头孢克洛胶囊)和治疗组(清窍胶囊),均采用卵清蛋白致敏作用建立小鼠分泌性中耳炎的动物模型,建模成功后用ELISA法检测小鼠中耳积液中低氧诱导因子-1(HIF-1a)和血管内皮生长因(VEGF)的表达水平,比较3组之间的差异.对照组和治疗组分别给予适量的头孢克洛胶囊和清窍胶囊治疗,安慰剂采用等量的生理盐水治疗.采用ELISA法检测治疗前后3组小鼠中耳积液中HIF-1a、VEGF的表达水平.结果组2在电测听和声阻抗检测结果方面均优于组1(P<0.05);组2不良反应发生率显著低于组1(P<0.05).3组小鼠造模后中耳积液中HIF-1a、VEGF的表达水平的浓度明显高于造模组,差异具有统计学意义(P<0.01),经过治疗后,3组小鼠上述因子水平均显著降低,以治疗组降低程度最大.且组1和组2在治疗前后上述因子的水平变化同小鼠试验结果一致.结论 清窍胶囊可能通过影响HIF-VEGF信号通路来发挥治疗分泌性中耳炎的作用,且临床疗效优于头孢克洛胶囊,值得进一步临床推广.

目的 观察不同剂量益气固本胶囊对哮喘小鼠CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞数量及白细胞介素-33(IL-33)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平的影响.方法 将32只雄性SPF级Balb/c小鼠随机分成正常对照组、模型组、益气固本胶囊低剂量组和益气固本胶囊高剂量组,每组8只.除正常对照组外将其他组中小鼠应用卵白蛋白和氢氧化铝混合液腹腔致敏和激发复制哮喘模型,于第21天开始,在每次激发前1h分别对正常对照组和模型组小鼠给予生理盐水灌胃,用药各组小鼠给予药物灌胃,连续10d.应用ELISA双抗体夹心法测定血清中IL-33、TNF-α水平,流式细胞仪检测脾淋巴细胞中CD4+CD25+Foxp3 +Treg/CI4+T比例.结果 模型组小鼠血清中IL-33水平较正常对照组水平低(P＜0.05),而血清中TNF-α水平较正常对照组明显增高(P＜0.01).益气固本胶囊低剂量组和高剂量组血清中的IL-33水平高于模型组(P＜0.05),血清中的TNF-α水平低于模型组(P＜0.05).模型组脾淋巴细胞中的CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg/CD4+T细胞比例与正常组比较明显减少,而益气固本胶囊高剂量组明显高于模型组(P＜0.05).结论 CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg参与哮喘的发病过程,益气固本胶囊可能通过上调CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞数量及降低TNF-α水平及升高IL-33水平,调节免疫失衡,减轻哮喘炎症.

目的 探讨益气固本胶囊对哮喘小鼠模型ICAM-1、VCAM-1水平的影响.方法 将60只BALB/c小鼠随机分为对照组(10只)、模型组(14只)、益气固本胶囊组(12只)、地塞米松片组(12只)、童康片组(12只),分别将益气固本胶囊(55mg/ml)、地塞米松片(0.005mg/ml)、童康片(44mg/ml)给予各药物组灌胃,对照组、模型组给予等容积的纯净水灌胃,每日1次,连续30日.根据文献采用卵蛋白(OVA)致敏建立小鼠哮喘模型.给药后的第21天激发哮喘模型,每日激发1次,连续10日,激发前1小时药物组给予受试药.Olympus BX51显微镜下观察病理组织形态学变化;应用NIS-EL-EMNT BR图像分析测定支气管基底膜周径(Pbm)、上皮黏膜层面积(WAmuc)、平滑肌面积(WAm)、气管内壁面积(WAi),并用Pbm将测量值标准化;用酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定血清和肺泡灌洗液中ICAM-1、VCAM-1的含量.结果 与模型组相比较,益气固本胶囊组小鼠炎症细胞浸润程度明显降低(P＜0.05),上皮黏膜层、平滑肌层增厚及气道壁增厚情况明显改善(P＜0.05),血清及肺泡灌洗液中ICAM-1、VCAM-1的含量也明显降低(P＜0.05).结论 益气固本胶囊可以通过降低哮喘小鼠体内ICAM-1、VCAM-1的含量来抑制炎症细胞黏附迁移,减轻哮喘气道炎症,从而降低气道高反应性和抑制气道重塑.

目的 观察双肾同补胶囊对小鼠免疫功能的影响.方法 ①将健康雄性昆明种小鼠70只按照随机数字表法分为7组,即对照组,迟发型超敏反应(DTH)模型组,双肾同补胶囊高、中、低剂量组,贞芪扶正胶囊组,盐酸左旋咪唑组,每组10只.除对照组外,其余各组采用2,4-二硝基氯苯(DNCB)颈部致敏、腹部激发的方法建立小鼠DTH模型.对照组、DTH模型组予等容积的0.9％氯化钠注射液灌胃,双肾同补胶囊高、中、低剂量组分别予双肾同补胶囊2.4、1.2、0.6 g/kg灌胃,贞芪扶正胶囊组予贞芪扶正胶囊6.3g/kg灌胃,盐酸左旋咪唑组予盐酸左旋咪唑25 mg/kg灌胃.各组均每日灌胃给药1次,连续10d.测定腹部蓝染皮肤的光密度(OD)值,观察各组对细胞免疫的影响.②将健康雄性昆明种小鼠60只按照随机数字表法分为6组,即对照组,双肾同补胶囊高、中、低剂量组,贞芪扶正胶囊组,盐酸左旋咪唑组,每组10只.对照组予等容积的0.9％氯化钠注射液灌胃,双肾同补胶囊高、中、低剂量组分别予双肾同补胶囊2.4、1.2、0.6g/kg灌胃,贞芪扶正胶囊组予贞芪扶正胶囊6.3 g/kg灌胃,盐酸左旋咪唑组予盐酸左旋咪唑25 mg/kg灌胃.各组均每日灌胃1次,连续10 d.除对照组腹腔注射0.9％氯化钠注射液外,其余各组制作绵羊红细胞(SRBC)免疫小鼠,测定血清半数溶血素值(HC50),观察各组对体液免疫的影响.③碳粒廓清实验分组与给药方法同②,连续给药9d,检测碳粒廓清指数K值和吞噬系数α值,观察对各组小鼠网状内皮系统吞噬廓清能力(非特异性免疫)的影响.结果 ①与对照组比较,其余各组小鼠腹部蓝染皮肤的OD值均升高(P＜0.01);与DTH模型组比较,双肾同补胶囊中、高剂量组,盐酸左旋咪唑组及贞芪扶正胶囊组蓝染皮肤OD值均降低(P ＜0.05,P＜0.01);与双肾同补胶囊低剂量组、盐酸左旋咪唑组及贞芪扶正胶囊组比较,双肾同补胶囊中剂量组蓝染皮肤OD值降低(P＜0.05).②与对照组比较,双肾同补胶囊高剂量组、盐酸左旋咪唑组和贞芪扶正胶囊组小鼠血清HC50均升高(P＜0.05);与双肾同补胶囊中剂量组比较,双肾同补胶囊高剂量组HC50升高(P＜0.01);与盐酸左旋咪唑组、贞芪扶正胶囊组比较,双肾同补胶囊中剂量组HC50均降低(P＜0.01).③与对照组比较,双肾同补胶囊低剂量组、盐酸左旋咪唑组小鼠廓清指数K和吞噬系数α均升高(P＜0.05),双肾同补胶囊高、中剂量组小鼠碳粒廓清指数K值和吞噬系数α值虽均升高,但与对照相比较差异均无统计学意义(P＞0.05);与双肾同补胶囊低剂量组、盐酸左旋咪唑组比较,双肾同补胶囊高、中剂量组碳粒廓清指数K值均降低(P＜0.01).与双肾同补胶囊低剂量组比较,贞芪扶正胶囊组碳粒廓清指数K值降低(P＜0.01).双肾同补胶囊高、中、低剂量组之间及分别与贞芪扶正胶囊组、盐酸左旋咪唑组小鼠吞噬系数α值比较差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 双肾同补胶囊有增强小鼠体液免疫和非特异性免疫功能的作用,但对正常小鼠细胞免疫有抑制作用.

目的 观察民族药五宝胶囊对卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)所致的哮喘小鼠肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluids,BALF)中Th1/Th2、Th17/Treg失衡及趋化因子Eotaxin、IL-8、MCP-1的影响.方法BALB/c小鼠随机分为5组(正常组、模型组、地塞米松组、五宝胶囊低、高剂量组),采用OVA致敏和激发的方法复制哮喘模型.HE、PAS染色观察小鼠肺组织病理学变化,快速瑞氏-吉姆萨染色法观察BALF中各类炎症细胞数目,ELISA测定小鼠BALF中IFN-γ、IL-4、IL-17A、IL-10、Eotaxin、IL-8、MCP-1的含量.结果五宝胶囊能够显著减轻哮喘小鼠肺组织炎症浸润和黏液的分泌,降低各类炎症细胞数目及BALF中IL-4、IL-17A、Eotaxin、IL-8、MCP-1的生成(P<0.01,P<0.05),并能明显升高IFN-γ、IL-10的含量(P<0.01,P<0.05).结论五宝胶囊可能通过调节BALF中Th1/Th2、Th17/Treg相关细胞因子平衡及抑制趋化因子Eotaxin、IL-8、MCP-1的生成来发挥防治哮喘的作用.